研究凋亡素参与正常细胞核蛋白表达差异

百泰派克生物科技
质谱分析蛋白表达差异
质谱分析蛋白表达差异是利用质谱技术研究蛋白表达差异。

研究蛋白质表达差异，可以帮助我们认识生命活动的本质。

百泰派克生物科技提供基于质谱的蛋白表达差异分析服务。

蛋白表达差异
蛋白质是由基因转录后翻译形成的，是生物体中一类重要的生物大分子。

蛋白质除了参与生物体细胞和组织的组成，还可以在生物体中发挥广泛的功能，例如催化代谢反应、参与DNA复制、对刺激（如病原体）作出反应，以及将分子从一个位置运输到另一个位置等等。

蛋白表达差异，指的是蛋白质在表达水平上的变化，它可以发生在细胞在不同功能状态、不同细胞周期，或者是在不同条件或药物刺激等情况下。

研究蛋白质表达差异，可以帮助我们认识生命活动的本质，更有助于帮助我们研究疾病的早期诊断、疾病的病程，和检测药物对疾病的疗效等等。

质谱分析蛋白表达差异
质谱分析蛋白表达差异是利用质谱技术对蛋白表达差异进行研究。

质谱技术通过检测不同样品中蛋白质的差异表达，来实现样品中蛋白表达差异的分析。

借助生物信息学技术，还可以对有表达差异的蛋白进行分析，例如基于质谱数据可以对差异表达的蛋白质进行统计分析，如韦恩图和火山图，通过韦恩图可以看出两个差异样品之间的共有的和特有的差异表达蛋白数量，通过火山图（Volcano Plot）可以查看蛋白在两个不同样品中表达水平的差异，以及差异的统计学显著性。

细胞凋亡和细胞增殖的动态平衡研究细胞凋亡和细胞增殖是生命过程中的两个基本过程。

它们的平衡是维持生命健康的基础。

当细胞凋亡和细胞增殖的平衡被打破时，会导致许多疾病的发生。

因此，研究细胞凋亡和细胞增殖的动态平衡对于防治疾病具有重要意义。

细胞凋亡是一种程序性死亡，它有很多作用，如调节细胞数目、清除组织中的异常细胞和控制发育过程等。

细胞凋亡通过一系列的信号转导通路来实现，其中最重要的是线粒体途径和死受体途径。

线粒体途径主要是由Bcl-2家族的蛋白质控制的，Bcl-2家族的蛋白质可分为抑制凋亡型和促进凋亡型。

在正常情况下，这两种蛋白质的平衡维持细胞的生长和死亡的平衡。

但在某些情况下，如缺氧、细胞内环境酸化等，促进凋亡型蛋白质会越来越多地积累，导致细胞凋亡。

细胞增殖是细胞在一定的条件下不断地分裂生长，这是生物体发育、组织修复和免疫应答等过程中必须的。

细胞增殖依赖于一系列复杂的信号转导通路，并受许多因素的影响，如细胞凋亡、基因突变等。

其中最为重要的是细胞周期调节与紫杉醇敏感蛋白（Tubulin）相互作用。

细胞周期调节由多个蛋白激酶与磷酸酶组成，不同阶段有不同的调节作用。

而紫杉醇敏感蛋白是细胞的微管组成部分，组成了细胞骨架，是细胞不断分裂的基础。

细胞凋亡和细胞增殖的动态平衡在生命过程中是必须的，任一方发生偏离都会导致疾病的发生。

在肿瘤的发生和发展过程中，凋亡受抑制，增殖则无限制，细胞的生长和死亡的平衡被打破。

因此，治疗肿瘤的方法也围绕着细胞凋亡和细胞增殖的平衡展开。

近年来，科学家们开展了大量的科研工作来研究细胞凋亡和细胞增殖的动态平衡，以期为疾病治疗提供更好的方法。

例如，通过酶学方法来研究促进凋亡的蛋白质的稳定性和活性，为肿瘤治疗提供靶向药物；通过基因编辑技术来调节细胞周期调节蛋白的表达水平，来影响细胞的增殖。

此外，还有很多其他的方法，如基因治疗、化学治疗等。

细胞凋亡和细胞增殖的平衡是生命过程中的基础，对于不同的生命阶段和不同的生理状况都有不同的特点。

蛋白质表达与细胞凋亡的关联蛋白质是生物体中最为重要的分子之一，它们在细胞的结构和功能中起到关键的作用。

细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式，它在生物体的发育、免疫系统的调节以及肿瘤的发生中起到至关重要的作用。

多年以来，科学家们对蛋白质表达与细胞凋亡之间的关联进行了广泛的研究。

本文将探讨蛋白质表达与细胞凋亡之间的关系，并介绍其中的机制和重要的蛋白质调控系统。

一、蛋白质表达是指细胞合成和调控蛋白质的过程。

细胞凋亡是一种程序性的细胞死亡过程，它通过一系列的信号传导和调节途径来实现。

在细胞凋亡过程中，蛋白质表达的变化是至关重要的。

大量的研究表明，一些蛋白质可以通过调节凋亡相关蛋白质的表达和活性来影响细胞的凋亡。

这些蛋白质可以分为促凋亡蛋白和抑制凋亡蛋白两类。

1. 促凋亡蛋白促凋亡蛋白是指能够直接或间接地促进细胞凋亡的蛋白质。

这些蛋白质可以通过多种途径介导细胞凋亡的发生，如激活半胱氨酸蛋白酶（caspase）家族成员、调节线粒体膜电位以及增强线粒体产生活性氧等。

其中，Bcl-2家族蛋白和caspase家族蛋白是促凋亡蛋白中的重要代表。

Bcl-2家族蛋白包括促凋亡蛋白（如Bax、Bid）和抑制凋亡蛋白（如Bcl-2、Bcl-xL）。

这些蛋白质在调节线粒体的膜电位和释放线粒体内的细胞凋亡相关蛋白（如细胞色素c）中起着重要的作用。

促凋亡蛋白Bax和抑制凋亡蛋白Bcl-2之间的平衡是细胞凋亡决定因素之一。

caspase家族蛋白是调控细胞凋亡过程中最为关键的蛋白质。

它们能够促进胶原酶、核糖核酸酶和蛋白酶等细胞凋亡相关蛋白的活性化。

细胞凋亡的执行者酶（executors of apoptosis）caspase-3和caspase-7是其中最重要的代表。

2. 抑制凋亡蛋白抑制凋亡蛋白是指能够抑制或延缓细胞凋亡的蛋白质。

它们能够通过调节细胞凋亡途径上的关键步骤来抵消细胞凋亡的促进作用。

抑制凋亡蛋白包括细胞凋亡抑制蛋白（IAPs）和抑制caspase活性的蛋白质。

检测两种蛋白质之间相互作用的实验方法比较1. 生化方法●免疫共沉淀免疫共沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。

改法的优点是蛋白处于天然状态，蛋白的相互作用可以在天然状态下进行，可以避免认为影响；可以分离得到天然状态下相互作用的蛋白复合体。

缺点：免疫共沉淀同样不能保证沉淀的蛋白复合物时候为直接相互作用的两种蛋白。

另外灵敏度不如亲和色谱高。

●Far-Western又叫做亲和印记。

将PAGE胶上分离好的凡百样品转移到硝酸纤维膜上，然后检测哪种蛋白能与标记了同位素的诱饵蛋白发生作用，最后显影。

缺点是转膜前需要将蛋白复性。

2. 等离子表面共振技术（Surface plasmonresonance）该技术是将诱饵蛋白结合于葡聚糖表面，葡聚糖层固定于几十纳米厚的技术膜表面。

当有蛋白质混合物经过时，如果有蛋白质同“诱饵”蛋白发生相互作用，那么两者的结合将使金属膜表面的折射率上升，从而导致共振角度的改变。

而共振角度的改变与该处的蛋白质浓度成线性关系，由此可以检测蛋白质之间的相互作用。

该技术不需要标记物和染料，安全灵敏快速，还可定量分析。

缺点：需要专门的等离子表面共振检测仪器。

3. 双杂交技术原理基于真核细胞转录因子的结构特殊性，这些转录因子通常需要两个或以上相互独立的结构域组成。

分别使结合域和激活域同诱饵蛋白和猎物蛋白形成融合蛋白，在真核细胞中表达，如果两种蛋白可以发生相互作用，则可使结合域和激活域在空间上充分接近，从而激活报告基因。

缺点：自身有转录功能的蛋白会造成假阳性。

融合蛋白会影响蛋白的真实结构和功能。

不利于核外蛋白研究，会导致假隐性。

5. 荧光共振能量转移技术指两个荧光法色基团在足够近（<100埃）时，它们之间可发生能量转移的现象。

荧光共振能量转移技术可以研究分子内部对某些刺激发生的构象变化，也能研究分子间的相互作用。

它可以在活体中检测，非常灵敏，分辩率高，能够检测大分子的构象变化，能够定性定量的检测相互作用的强度。

凋亡相关基因－Bax在不同细胞中表达产物差异检测江一舟06级临八1班063010101931 实验目的1.1 通过测定凋亡相关基因－Bax在不同细胞中表达产物差异检测，研究缺糖对细胞增殖抑制作用的机制（引起细胞凋亡或坏死）。

1.2 掌握免疫组织化学法的原理。

2 实验原理2.1 免疫细胞化学和亲和组织化学免疫细胞化学（免疫组化）将抗原、抗体间的免疫反应引入细胞标本，并通过对其所带有的特殊标记物的显示，从而对细胞内某抗原或抗体作定性、定位以及定量检测。

亲和组织化学则将一些具有双价或多价结合力的物质(生物素)，应用于免疫组化，使得抗原抗体的亲和力比免疫组化高出100万倍。

其更具高灵敏性和高特异性。

2.2 凋亡相关基因—BaxBax是Bcl-2家族成员。

凋亡信号能激活Bax，使Bax蛋白从胞浆移位到线粒体膜上。

随后其蛋白构象发生改变（寡聚化），使线粒体膜通透性增加，释放Cytc，引起细胞凋亡。

3.3Bax表达产物差异检测本次实验以Bax构象蛋白为抗原，用小鼠特异性抗体（一抗）与其结合，再用生物素标记的羊抗小鼠抗体（二抗）与前者结合，形成了生物素复合物。

此复合物与SABC作用，使得检测物被放大，最后在显色剂DAB的作用下，Bax构象蛋白显色（褐色）。

3 实验材料仪器：移液枪、枪头、滴管、显微镜。

材料：培养细胞。

试剂：甲醇、PBS、封闭液、一抗、二抗、SABC、DAB、0.3％H2O2-PBS。

4 实验步骤培养细胞（96孔板，每组3正常、3损伤、3损伤恢复）—PBS洗，5min X 3次(轻轻地洗涤) —甲醇固定10min —PBS洗，5min X 3次—加入封闭液（1:10）25µl，37℃，30min —加一抗（1:300）25µl，37℃，1h —PBS洗，5min X 3次—加二抗25µl，37℃，1h —PBS洗，5min X 3次—加0.3％H2O2-PBS，37℃，30min —PBS洗，5min X 3次—SABC工作液20-30µl，37℃，1h —PBS洗，5min X 3次—DAB显色，观察结果。

蛋白质表达与细胞凋亡的关联分析细胞凋亡是一种向程序性死亡的细胞死亡方式。

细胞凋亡在发育、免疫和肿瘤等许多重要的生理和病理过程中发挥着关键的作用。

细胞凋亡的调控非常复杂，涉及到许多相关分子、信号通路和生物过程。

蛋白质表达在细胞凋亡中起着至关重要的作用。

本文将分析蛋白质表达与细胞凋亡之间的关联。

一、细胞凋亡与蛋白质表达的关系细胞凋亡涉及到许多信号通路和分子机制，其中一些是调节蛋白质表达的。

大量的研究表明，许多蛋白质在细胞凋亡中发挥着不同的作用。

这些蛋白质包括凋亡相关蛋白（APO）、凋亡诱导因子（AIF）等。

二、蛋白质表达对细胞凋亡的影响蛋白质表达对于细胞凋亡的生物学效应有着不同的影响。

例如，过量表达Bcl-2可以抑制细胞凋亡。

Bcl-2是一种重要的抗凋亡因子，它可以与其他Bcl-2家族成员相互作用并在细胞凋亡发生时发挥重要作用。

在某些情况下，蛋白质的表达也可以诱导细胞凋亡。

研究表明，在肿瘤细胞中，伴侣蛋白p53和mdm2的表达的改变也会使肿瘤细胞死亡。

三、蛋白质表达调控细胞凋亡的信号通路蛋白质表达在细胞凋亡中通过调控各种信号通路和分子机制来影响细胞凋亡。

例如，Bcl-2家族成员（Bcl-2、Bcl-XL等）可以形成静息型复合物来抵制细胞凋亡。

然而，BH3-only蛋白质（如Bim、Bid等）可以与Bcl-2家族的其他成员结合以解除复合物并诱导细胞凋亡。

四、蛋白质表达调控肿瘤细胞凋亡的应用很多研究都已经表明，蛋白质表达的调控在肿瘤治疗中具有很大的潜力。

肿瘤细胞具有许多特殊的生物学特征，例如失调的蛋白质表达。

因此，通过逆转蛋白质表达来诱导肿瘤细胞凋亡已经成为一种有前途的治疗手段。

结论细胞凋亡是一种重要的生物学过程，它在正常生物学过程和疾病（如癌症）中发挥着重要的作用。

蛋白质表达在细胞凋亡中起着极其重要的作用。

通过对蛋白质表达调控来调节细胞凋亡信号通路，对疾病的治疗具有重要的意义。

（ ＜ Ｏ０ ） 有 淋 巴结 转移 组 比无 淋 巴结 转移 组 明 显 降 低 （ Ｐ ．５ ， Ｐ一 ０ ０ ８ ； 维 型 和 其 他 类 型 组 比 软 骨 母 细 胞 型 组 明 ．４）纤
显降低（ Ｐ＝００ １ ； 肉 瘤 Ⅱ级 和 Ⅲ级 组 比 Ｉ级 组 明 显 降 低 （ ０ ０ ） ．３）骨 Ｐ＜ ． ５ 。骨 肉 瘤 中 Ｐ ６蛋 白和 Ａ 表 达 之 间存 在 １ Ｉ 正 相 关 （ —Ｏ ４ ５ Ｐ＝０ ０ ２ 。 结 论 ｒ ．２ ， ．０ ）
中标 准 阳性 片做 阳性 对 照 ， 进行 细胞凋 亡 的检测 。
１４ 判定标 准 ．
瘤标本 ５ ２例 ， 性 ３ 男 ４例 ， 性 １ 女 ８例 ， 中位 年 龄 ２ ３ 岁（ １ ６ ） 其 中侵袭 转移 ３ １ ～ ０岁 ， ７例 （ 依据 镜 下 是否
１４ １ 免 疫组 织化 学 染 色结 果 判 定标 准 观 察 每 ． ．
中 图 分类 号 ： Ｒ ４ ； ３ ． ６ ； ７ ８ １ ２ Ｒ３ ４ ２ 文 献 标识 码 ： Ａ ３ １ Ｒ７ ０ ２ ２ Ｒ ３ ． ０ ； ９ ． 文章 编 号 ： １ ７ － １ ４ ２ １ ） ６０ ２ — ４ ６ ２４ ９ （ ０ ０ ０ －４ ９０
骨 肉瘤是 运动 系 统 常见 的恶 性 肿瘤 ， 好发 于青
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江苏省百校联考高三年级第一次考试生物试卷注意事项考生在答题前请认真阅读本注意事项及各题答题要求1.本试卷共8页,包含单项选择题(第1题~第14题,共28分)、多项选择题(第15题~第19题,共15分)、非选择题(第20题~第24题,共57分)三部分,本次考试时间为75分钟,满分100分,考试结束后,请将答题卡交回。

2.答题前,请务必将自己的姓名、班级、学校、考试证号用书写黑色字迹的0.5毫米签字笔填写在答题卡的相应位置,并用2B铅笔将答题卡上考试证号相应的数字涂黑。

3.选择题每小题选出答案后,用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑,在其他位置作答一律无效。

如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案。

非选择题请用0.5毫米黑色字迹的签字笔在答题卡指定区域作答。

在试卷或草稿纸上作答一律无效。

4.如有作图需要,可用2B铅笔作答,并请加黑加粗,描写清楚。

一、单项选择题:本部分包括14题,每题2分,共计28分。

每题只有一个选项最符合题意。

1.下列关于元素和化合物的叙述,错误的是A.DNA和ADP中的氮元素都存在于碱基中B.人体血浆中含有的糖包括葡萄糖、果糖和半乳糖等C.碳链是淀粉、脂肪、氨基酸等有机物的基本骨架D.构成血红蛋白的某些氨基酸中含有硫、铁等元素2.右图为动、植物细胞亚显微结构模式图,下列有关该图的叙述正确的是A.所有植物细胞都不具有的结构是AB.胰岛A细胞合成胰高血糖素的场所是CC.植物细胞在清水中不会涨破,是因为有结构ID.图的下半部分可用来表示紫色洋葱鳞片叶表皮细胞的结构3.下列有关酶的叙述正确的是A.酶的催化效率比无机催化剂的高是因为酶能降低反应的活化能B.酶的组成成分中一定不含糖类C.在最适温度和最适pH的条件下,酶对细胞代谢的调节作用最强D.酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化学反应4.科研人员发现:经核辐射诱变后的节旋藻(一种原核生物)突变株在空气中生长到第四天时生物产量比未经诱变的藻株提高了176%。

细胞凋亡途径中的蛋白质相互作用研究细胞凋亡是一种生物学上的程序性死亡现象，它在不同的生理和病理条件下发挥着重要的作用。

与细胞坏死不同，细胞凋亡伴随着一系列准确的分子和细胞学事件，包括细胞膜破裂、核DNA片段化、色素体和内质网收缩等。

这些细胞学变化最终导致细胞的死亡和后续的吞噬。

在细胞凋亡过程中，研究发现了许多机制和通路，其中蛋白质相互作用起到了至关重要的作用，成为细胞凋亡途径研究的重点。

一、蛋白质相互作用在细胞凋亡途径中的作用蛋白质相互作用是指不同蛋白质分子之间的相互作用。

在细胞凋亡过程中，这些相互作用是通过蛋白质之间的结合和分离来发挥作用的。

这些蛋白质可以直接或间接地介导细胞凋亡的多个通路，包括和细胞凋亡相关的受体、诱导和执行途径相关的蛋白质等。

1. Caspase-3与Bcl-2的相互作用Caspase-3是细胞凋亡途径中最重要的执行酶，能够切割和激活其他的凋亡蛋白质，包括核蛋白、DNA修饰酶等。

在细胞凋亡的过程中，Caspase-3的激活与线粒体膜电位下降有关，因为它可以直接或间接地调节Bcl-2家族蛋白，从而调节线粒体膜电位。

实验证明，Bcl-2家族成员可以绑定Caspase-3，并调节其活性。

2. Bcl-2与Apaf-1的作用在细胞凋亡过程中，Bcl-2家族成员与Apaf-1的相互作用是非常重要的。

Apaf-1被视为是细胞凋亡途径的“主导”，能够激活执行酶Caspase-3。

在Bcl-2家族蛋白的存在下，Apaf-1的激活可以被抑制。

这种相互作用的动态平衡在肝癌细胞中得到了深入研究。

研究人员发现，在肝癌中，Bcl-2的过度表达抑制了细胞凋亡通路中Apaf-1和Caspase-3的活性，从而给细胞提供了长期的生存机会。

二、如何研究蛋白质相互作用蛋白质相互作用研究可以基于许多不同的方法，包括质谱分析、同分异构体分析等。

其中，量子点技术对于细胞凋亡途径相关蛋白质相互作用的研究十分有效。

量子点是一种金属半导体纳米材料，可以通过改变其表面的化学性质来检测特定的蛋白质。

。③ Ｅ ＬＰ Ｕ Ｃ —Ｌ Ｓ发 光 。③ 用 Ｔｐ ｏｎ ｙｈｏ ９０ ４０扫描仪 扫描 ， 得 图像 由 ＩａｅＱ ａｔ Ｌ软 件分 所 ｍ ｇ ｕｎ Ｔ 析 ， 灰度值分析条带 ， ｐａｔ 内参 。 采用 以 —ｃｎ为 ｉ １３ 统 计 学方 法 ． 采用 ＳＳ Ｉ ． Ｐ Ｓ６ ０统计 软件 ， 量 计
１２ 方法 ．
织 ； 级示 胶原纤维 轻度增 多 ；Ｉ 示胶原 纤维 中度 Ｉ Ｉ级
增多 ；Ｉ 示 胶 原 纤维 明显 增 多 。肺 泡炎 和 Ｐ １级 １ Ｆ评 分 为 ０级分 别计 ０分 ， 级 分别计 １ ， １ 分 ２级分别计 ２
分， ３级分别计 ３分 。
１ ２ ３ 末 端 细胞 凋 亡 原 位 标 记 检 测 ．． 按 照 Ｔｎｌ ｕｅ
弱， 毛发晦暗， 活动少 ； 实验第 １ 、Ｏ ２ 、６天各死 ４ ２ 、２２
亡 １只 。
２ ２ 肺 组织病 理变化 ． ２２ １ Ｈ ． ． Ｅ染色 对 照组第 ３ ７ １ 、８天肺 泡 结构 、 、４ ２
倍视野 ， 计数 ５ ０ ０ 个肺细胞中的凋亡细胞数， 计算细 胞凋亡 指数 （ Ｉ 。 Ａ ） １２４ １ 蛋白检测 ①取两组小鼠右肺组织 ， ．． ｐ６ 在液 氮中速冻 １ ｉ 保存 至 一７ ５ｍｎ后 ０℃冰箱 ； 取右肺 组织
ＰＧ Ａ Ｅ电泳 ， 电泳 完毕转膜 ， Ａ、５ｈ５ ９ ｍ １ ，％脱脂奶粉 ０ 封 闭 １ｈ ｐ６一抗 室温 ２ｈ 吐温 ２ ，１ ， ０的 Ｔｉ 碱缓 冲液 ｒ ｓ （ Ｂ Ｔ 洗 ３次 、 ＴＳ） 每次 ５ｍ ｎ 二 抗室 温 １ｈ Ｔ Ｓ ｉ， ，Ｂ Ｔ洗 ３
胞浸润 明显 ， 间质细胞增加 ， 肺间隔增 宽、 增厚 ； 第 ｌ ４天少 数肺 泡 融合 ， 出现 小 灶 或 多 灶 实 变 ， 间 隔 肺 显著 增宽 ； ２ 第 ８天肺泡炎 轻微 ， 肺组 织结 构破 坏 ， 部 分肺泡塌陷融合 ， 其间有炎性细胞浸润 ， 可见大量宽

细胞凋亡WB不成功？你必须知道文献中的这些案例细胞凋亡是一种在基因控制下的细胞主动死亡过程，通常表现为核浓缩，起皱，膜发泡以及 DNA 片段化。

WB 是研究细胞凋亡机理的基本方法之一，但是WB 也不是谁都能做成功的，因为有可能你的第一步就做错了！用WB 做细胞凋亡研究样品制备是第一步，样品制备方法至关重要否则会得到错误的结果和结论。

样品制备，看你是不是这样做的：自配裂解液或者购买RIPA，加上样品研磨啊研磨，孵育啊孵育，然后离心扔掉沉淀（RIPA 不可溶组分），取上清（RIPA 可溶组分）进行下游实验。

对对对！都是这么做啊，扔了取上清！且慢，我们扔掉了，扔掉了，扔掉了一些啥？要不要紧，影响细胞凋亡的实验结果不？1Zapata et al.,（1998）.Granzyme Release and Caspase Activation in Activated Human T-Lymphocytes. J Biol Chem 1998, 273:6916-6920.Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中caspase-3 为关键的执行分子，它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。

Caspase-3 正常以酶原（32KD）的形式存在于胞浆中，在凋亡的早期阶段，它被激活，活化的Caspase-3 由两个大亚基（17KD）和两个小亚基（12KD）组成，裂解相应的胞浆胞核底物，最终导致细胞凋亡。

但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞，caspase 的活性明显下降。

■ 研究方法1. 分别使用 RIPA 和 2%SDS+超声提取未激活 T 淋巴细胞（Lanes 1 和 5）和激活的 T 淋巴细胞（Lanes 2-4 和 6-8）裂解细胞提取总蛋白。

2. WB 进行 caspase-3, caspase-7, PARP and GD1 检测。

■ 主要发现p24, p20 存在于 RIPA 提取的蛋白中，但 Laemmli 裂解液提取的蛋白中却不存在。

2022-2023学年甘肃省天水市武山第一高级中学等2校高一（上）期末生物试卷一、选择题（每小题只有一个选项正确，共30题，每小题1.5分．）A．C、H、O、N、P是ATP、密码子、光合膜共有的化学元素B．线粒体、核糖体、染色体、叶绿体等结构中都含有DNAC．糖蛋白、载体蛋白、抗体、限制性内切酶都是具有特异性识别的物质D．脂质中的磷脂是构成细胞膜的重要物质，所有细胞都含有磷脂1．（1.5分）下列关于细胞的分子组成和基本结构的阐述，错误的是（ ）A．水同糖类、油脂、蛋白质一样为人体提供能量B．核糖体中进行的化学反应有水生成C．当人体缺水时，血浆的浓度会降低D．构成生物膜的主要成分是蛋白质、磷脂和水2．（1.5分）水在生物体内是一种良好的溶剂，是各种化学反应的介质．下列有关水的说法正确的是（ ）A．B．C．D．3．（1.5分）如图所示最能正确表示细胞膜结构的是（ ）A．RNA具有生物催化作用B．酶是由RNA和蛋白质组成的C．酶的化学本质是蛋白质D．绝大多数的酶是蛋白质，少数是RNA4．（1.5分）20世纪80年代科学家发现了一种RNaseP酶，是由20%的蛋白质和80%的RNA组成，如果将这种酶中的蛋白质除去，并提高Mg 2+的浓度，发现留下来的RNA仍然具有与这种酶相同的催化活性，这一结果表明（ ）A．一项B．两项C．三项D．四项5．（1.5分）据报道：美国研究人员在莫诺湖首次发现细菌GFA J-1可以利用有毒的化学元素砷（As）生长、繁殖．这种细菌在其细胞成分中以砷取代磷．下列相关叙述正确的有（ ）①As是组成该细菌核酸的元素之一②该细菌无线粒体，细胞内ATP含量较多③若用同位素标记法进行实验，在该细菌的细胞膜上可能检测到As ④该细菌衰老时，呼吸速率减慢，核膜内折．A．脂溶性小分子物质不能通过方式a运输B．与方式a有关的载体蛋白覆盖于细胞膜表面C．方式b的最大转运速率与载体蛋白数量有关D．抑制细胞呼吸对方式a和b的转运速率均有影响6．（1.5分）图中，线a、b表示物质跨（穿）膜运输的两种方式，下列表述正确的是（ ）A．细胞停止分裂B．产生多核细胞C．正常分裂D．不能形成纺锤体7．（1.5分）通过显微技术破坏玉米根尖分生区细胞中的高尔基体，培养几天后再观察该根尖细胞，预测会有什么结果（ ）A．这一结构图要通过40×的物镜和16×的目镜组合才能观察到B．若这是人的大腿细胞，在长跑时大腿肌肉感到酸痛，在此细胞的⑧中产生使肌肉细胞疲劳的物质C．如果该细胞能产生抗体，则抗体从合成到分泌出细胞，经过的具膜细胞结构顺序是：⑩→⑦→③→②→①D．若以上所指为同一个生物体内3种细胞（肌细胞、肝细胞、产生抗体的细胞），其核内所含的DNA一样，但细胞内所含的RNA不同8．（1.5分）如图所示为一动物细胞结构示意图，请据图分析下列相关的叙述正确的是（ ）A．线粒体的数量B．自由水的比例C．核DNA的数量D．核糖体的数量9．（1.5分）代谢旺盛的细胞中，下列不会上升的是（ ）A．斯帕兰札尼将肉块放入金属笼内，然后让鹰吞下去，一段时间后，笼内肉块消失了，这个实验说明了胃具有物理性消化的作用B．在“比较过氧化氢酶和Fe 3+催化效率”实验中，可先用滴管滴加氯化铁溶液后，再用此滴管滴加肝脏研磨液，不影响实验结果C．在“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”实验中，可通过检测是否有还原性糖产生来说明酶的作用具有专一性D．在“温度对酶活性的影响”实验中，关键步骤是先将淀粉液在不同温度条件下保温5分钟，然后分别向其中加入等量的淀粉酶液10．（1.5分）下列是有关酶的实验，叙述正确的是（ ）A．质膜最基本的部分是脂双层B．神经递质的分泌依赖膜的功能特点C．唾液淀粉酶分泌过程需要细胞内膜结构的相互协调D．膜蛋白具有识别信息、运输物质和催化反应等作用11．（1.5分）生物膜对保证细胞生命活动正常进行具有重要的作用．下列有关叙述错误的是（ ）A．A B．B C．C D．D12．（1.5分）下表所列原核细胞与真核细胞的比较，正确的是（ ）比较项目原核细胞真核细胞A 遗传物质拟核为DNA；细胞质为RNA细胞核和细胞质均为DNAB 遗传规律遵循孟德尔遗传规律遵循孟德尔遗传规律C 遗传信息表达转录和翻译可以同时同地点进行转录主要在细胞核中，翻译主要在细胞质中D 变异类型基因突变和染色体变异基因突变、基因重组、染色体变异A．细胞膜向内凹陷B．着丝点一分为二C．中心体移向两极D．DNA正在进行复制，相关蛋白质合成13．（1.5分）处于有丝分裂过程中的动物细胞，某一时期细胞内的染色体、染色单体、核DNA分子三者的数量比是1：2：2，此时细胞内可能发生着（ ）A．洋葱根尖细胞内有12对同源染色体，但其分裂时无法形成四分体B．某小组进行“观察洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂”的实验，观察到分裂末期细胞内细胞板向四周扩展形成新的细胞壁C．“观察植物细胞的有丝分裂”实验，制作临时装片的操作步骤为解离、染色、制片D．减数第一次分裂，非同源染色体自由组合，所有非等位基因之间发生自由组合14．（1.5分）下列有关细胞分裂的叙述，正确的是（ ）A．凋亡素能加快癌细胞的分裂和分化B．凋亡素能激活细胞死亡基因可特异性杀死癌细胞C．蝌蚪尾部的自溶现象是细胞正常凋亡的具体体现D．蝌蚪发育过程中凋亡素能使其细胞的产生和凋亡始终保持动态平衡15．（1.5分）凋亡素是人体内固有的天然蛋白，将凋亡素注入癌症患者体内，凋亡癌细胞，控制肿瘤；将凋亡素注入发育正常的蝌蚪体内，能加速尾部的消失。

２ 结 果
色 ， 明凋亡素可通过线粒体途径诱导 细胞凋 亡。 说
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材料 ｐＤ Ａ—Ｖ ３质 粒 由本 实验室保 存 ； ． ｃＮ Ｐ 线粒 体膜 电位 检 测 试 剂 盒 购 于碧 云天 公 司 ； ｉｏ ｃ ｍｎ Ｌｐｆ ｔ ｉｅ ｅａ ２０ ０ ０购 自ｉｖ ｒ ｅ 公 司 。人肝 细胞 Ｌ一 ）、 ｎｉｏ ｎ ｔｇ （ 人肝癌 细 ２ 胞系 Ｈ ｐ ｅＧ一２由 暨南 大 学 生命 科 学 研 究 所 保存 ， 用 ｌ ％ 胎 牛 血 清 的 Ｐ Ｍ ６ ０（ 自 ＧＢ Ｃ 公 司 ） Ｏ Ｒ Ｉ１４ 购 ＩＩＯ ， ３ｏ ５ Ｃ ， ７Ｃ、％ Ｏ 条件下 培养 。
张 园，朱 惠 明 ， 李银 鹏 ，张娟 ，孙传涛
暨南大 学第 二临床 医学院、 广东省深圳 市人 民医院消化 内科（ １０ ０ ５ ８０ ）
【 摘要 】 目的
观察转 染的 ｐ Ｇ Ｐ—Ｖ ３融合基 因在人肝 细胞 Ｌ一 ２及肝癌细胞 Ｈ ｐ ＥＦ Ｆ ０ ｅＧ一２中的定位 表达及
构建 ｐ Ｇ Ｐ—Ｖ ３融合 基 因， 用人 源正常肝 细胞株 Ｌ一 ２及 肝癌 细胞 Ｅ Ｆ Ｐ 利 ０ ｐ Ｇ Ｐ—Ｖ ３融合基 因转 染后 ＥＦ Ｐ 凋 亡
其与线粒体膜 电位 关系的研 究。方 法
株 Ｈ ｐ ２ 经 Ｌｐｆ ｔｍｎ ００转染细胞 ， 激光共聚焦显微镜 下观察 ｐ Ｇ Ｐ—Ｖ ３融合基 因的表达 ， Ａ Ｉ ｅＧ一 ， ｉｏ ｃａ ｉｅ ０ ｅ ２ 在 ＥＦ Ｐ Ｄ Ｐ 染 色成功观测该蛋 白在 细胞 中的定位 ， 线粒体膜 电位 染色观察膜 电位 的变化 。结 果 可观 察到在人肝细胞 Ｌ—Ｏ ２及肝 癌细胞 Ｈ ｐ ２细胞核 中的 高表 达 ， 线粒体膜 电位 下降的改 变。结 论 ｅＧ一 及 素诱 导线粒体途径的 凋亡 ， 为后 期进 一步研究 Ｖ ３的凋亡机制及其抗肿瘤 治疗奠 定了基础 。 Ｐ

蛋白质表达与细胞凋亡揭示蛋白质表达如何参与细胞凋亡的调控随着科技的迅速发展，人类探索生命的奥秘也越来越深入。

其中，蛋白质表达与细胞凋亡成为了不可或缺的研究领域。

蛋白质表达作为细胞活动的核心，参与了细胞的多种生命活动，其中包括细胞凋亡的调控。

本文将深入探讨蛋白质表达与细胞凋亡之间的关系，揭示蛋白质表达如何参与细胞凋亡的调控。

一、蛋白质表达的调控机制要想了解蛋白质表达与细胞凋亡的关系，首先需要了解蛋白质表达的调控机制。

蛋白质表达的调控在细胞生命活动中起着至关重要的作用。

在细胞内，蛋白质表达的调控是通过基因转录、mRNA稳定和翻译控制这三个步骤来实现的。

基因转录是指将DNA上的基因信息转录为RNA分子，从而提供蛋白质表达所需的信息。

mRNA的稳定性是蛋白质表达调控的第二个重要步骤，它通过影响RNA降解速率实现对蛋白质表达的调控。

最后，翻译是指将mRNA翻译成蛋白质，从而实现蛋白质表达。

因此，这三个步骤的调控都将直接或间接地影响蛋白质的表达水平，从而影响细胞的活动和生命周期。

二、蛋白质表达与细胞凋亡的关系细胞凋亡是一种令细胞自我死亡的程序化死亡过程。

在正常的生理状态下，细胞凋亡是维持生态平衡的重要方式。

然而，在癌症、神经退行性疾病等疾病中，细胞凋亡失调会导致疾病的发生和发展。

近年来，越来越多的研究揭示了蛋白质表达与细胞凋亡之间的关系。

蛋白质表达与细胞凋亡之间的关系可以从三个角度来解释：1）蛋白质表达可以影响凋亡信号转导通路的传递；2）蛋白质表达可以通过影响凋亡相关基因的表达来调节细胞凋亡；3）细胞凋亡可以通过控制蛋白质表达来实现。

三、蛋白质表达影响细胞凋亡信号转导通路正常的细胞凋亡通路主要包括凋亡受体、肿瘤坏死因子、Bcl-2家族、caspase家族等多个因子的参与。

这些因子共同构成了复杂的信号转导通路，从而实现了细胞凋亡的调控。

在这个通路中，蛋白质表达参与了多个调节环节。

例如，调控细胞凋亡的Bcl-2家族包括多个蛋白质，如Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1等，它们是细胞内抑制性调控机制的重要组分。

凋亡蛋白趋势相反的是凋亡蛋白（apoptotic proteins）是一类调节细胞凋亡（apoptosis）的蛋白质，包括促凋亡蛋白和抑制凋亡蛋白。

通过调控细胞凋亡的过程，它们在维持机体内部的平衡和生物发育中起到重要作用。

然而，存在一些反向调节凋亡蛋白的蛋白质，使凋亡过程的趋势相反。

首先，要了解凋亡蛋白趋势相反的蛋白质，我们需要先理解凋亡的基本过程。

细胞凋亡是一种规律和程序化的细胞死亡过程，可以通过活检和荧光染色等技术观察到细胞形态和核酸降解的特征。

细胞凋亡的调控涉及一系列蛋白质和信号通路，其中包括促进凋亡的蛋白质以及抑制凋亡的蛋白质。

促凋亡蛋白包括细胞色素c、细胞色素c释放因子（Apaf-1）、活化卡斯腺苷酸鹰嘌呤编码酶（caspases）等。

抑制凋亡的蛋白质则主要有细胞凋亡抗凋亡蛋白（cell apoptosisanti-apoptotic proteins）如Bcl-2、Bcl-xL等。

在凋亡信号通路中，细胞内外环境因素（如DNA损伤、细胞因子等）可以激活促凋亡蛋白，从而引发凋亡。

促凋亡蛋白继而调控下游的效应蛋白，如caspases，最终导致细胞凋亡。

而抑制凋亡的蛋白质则具有抗凋亡的作用，通过与促凋亡蛋白相互作用，抑制细胞凋亡的发生。

这种相互作用的失衡，即促凋亡蛋白趋势相反的蛋白质出现，会导致凋亡过程的变化。

许多研究表明，凋亡蛋白趋势相反的蛋白质在癌症的发生、进展和治疗中起到重要的作用。

例如，在某些类型的癌症中，观察到抑制凋亡的蛋白质Bcl-2过度表达，而促凋亡的蛋白质被抑制，导致肿瘤细胞的无限增殖和抗细胞死亡的能力增强。

因此，许多抗癌药物的设计和开发都是基于研究这些凋亡蛋白相互作用的机制，旨在恢复细胞凋亡的正常调节。

然而，除了癌症研究之外，凋亡蛋白趋势相反的蛋白质也与其他疾病和生物过程有关。

例如，一些神经退行性疾病如阿尔茨海默病和帕金森病都与细胞凋亡过程的失调有关。

在这些疾病中，促凋亡蛋白被过度活化，而抑制凋亡的蛋白质被抑制，导致神经细胞的死亡。

【精品】PPT课件 凋亡相关基因-Bax 在不同细胞中表达产物差异检测
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