荧光定量分析仪
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荧光定量pcr仪原理
荧光定量PCR仪是一种用于测量PCR反应过程中荧光信号的仪器。
其原理基于PCR反应中的DNA扩增过程以及荧光染料的发射和检测。
PCR是一种通过使用DNA聚合酶酶和特定引物,在适当的温度下连续进行反复的DNA复制过程。
PCR反应通常包含三个基本步骤:变性(解旋DNA双链),退火(引物结合到模板DNA上),和延伸(DNA聚合酶沿引物扩增目标序列)。
此过程会导致目标DNA序列数量的指数性增加。
荧光定量PCR仪中,DNA的扩增过程通常伴随着一种荧光染料的加入。
这种荧光染料会在扩增过程中与新合成的DNA结合,产生荧光信号。
荧光定量PCR仪通过在PCR反应过程中记录荧光信号的强度来测量PCR反应的进程。
仪器中的光学系统会周期性地激发荧光信号,并通过检测器检测信号的强度。
荧光定量PCR仪可以记录每一个PCR循环的荧光信号,然后使用计算机软件分析这些信号的特征,例如峰值高度或面积。
通过与已知浓度的标准样品进行比较,可以利用荧光信号的强度来定量PCR反应中的目标DNA的初始浓度。
荧光定量仪操作指南1.准备工作在使用荧光定量仪之前,需要进行一些准备工作:-打开仪器电源,并接通仪器的电源线。
-启动仪器,并等待其自检完成。
-检查仪器所需的配件是否齐全,如荧光管、滤光片等。
2.校准仪器在进行荧光定量测量之前,需要对仪器进行校准,以确保测量结果的准确性。
校准通常包括两个步骤:-波长校准:使用标准荧光溶液,根据其发射波长设置仪器的激发和发射波长。
-亮度校准:使用标准荧光溶液,根据其知名的荧光强度设置仪器的亮度。
3.准备样品在测量样品之前,需要进行一些准备工作:-根据测定要求,选择合适的荧光染料,并将其溶解在适当的溶剂中。
-在样品舱中选择合适的载体,如荧光底板或石英反射板,并将样品涂覆在载体上。
4.进行测量在开始测量之前,需要进行一些操作:-打开样品舱盖,并将载体放置在样品舱中。
-选择适当的激发波长和发射波长,并将它们设置到仪器上。
-调节仪器上的曝光时间,以确保荧光强度在仪器的线性范围内。
5.数据分析测量完成后,需要对数据进行分析:-使用仪器上的软件导出数据,并存储到计算机中。
-对数据进行统计分析,如计算平均值、标准差等。
-通过比较样品间的荧光强度,得出相应的结论。
6.清洁和维护在使用荧光定量仪完成实验后,需要进行仪器的清洁和维护工作:-关闭仪器电源,并拔下电源线。
-将使用过的载体和滤光片取下,并进行清洗。
-清洁仪器的外壳和光学系统,可以使用干净的纸巾或专门的清洁剂。
注意事项:-避免直接接触荧光管,以免对其造成损坏。
-在测量荧光强度之前,应先调节仪器的对比度和亮度,以获得清晰的图像。
-在测量过程中,尽量避免光线干扰,可在实验室内提供充足的遮光条件。
总结:以上是荧光定量仪的操作指南。
正确操作荧光定量仪是确保实验结果准确的重要步骤,希望本文对您在实验中使用荧光定量仪时有所帮助。
实时荧光定量PCR仪介绍 | QPCR的国际标准---MIQE | 联系我们仪器名称实时荧光定量PCR仪英文名称Real-Time QPCR System国产/进口进口产地/品牌美国品牌,德国制造型号Mx3000P/Mx3005P实时荧光定量PCR仪【性能参数】美国安捷伦Stratagene公司实时荧光定量PCR仪Mx3000P/Mx3005PMx3000P系统性能指标:激发光源:石英卤钨灯检测器:扫描光电倍增管(PMT)多重检测:四个光学通道,并提供用户选择的滤光系统加热系统:Peltier的热循环加热模块内置芯片在断电或连接中断时自动保存数据样品量:96孔高通量平台,反应体系10-100ul外形尺寸:33cm(宽) x 46cm(长) x 43cm(高),重量:20kgMx3000P系统参数配置:动力学范围:10个数量级激发光范围:350—750nm发射光范围:350—700nm温度均一性:+/- 0.25℃温度精确性:+/- 0.25℃升降温速率:2.5℃/秒兼容所有常规荧光染料:FAM、SYBR Green I 、Texas Red、ROX、TET 、Cy3、Cy5、HEX、JOE、VIC 、TAMRA、ALEXA Fluor 350等标准配置的滤光片组为:Cy5,HEX,FAM,ROX具有快速QPCR功能(反应时间在50分钟内)Mx3000P软件功能:•分析功能强大:通过一台计算机可连接和控制6台QPCR仪;可同时分析12个独立的96孔板;也可以在同一块板上进行和分析不同的实验•设置和运行简单:根据实验目的和方法不同,可选择多种实验设置:(多重)绝对定量PCR、相对定量PCR、Sybr Green定量及熔解曲线分析、SNP分析、Molecular Beacon熔解曲线分析等使用简便:实验条件设置、反应过程监控、数据显示分析三大功能模块从同一界面链接,直观简便•实时观测和数据分析:反应过程中可实时监测和收集荧光信号,在实验还未结束的情况下便可对现有数据进行分析提供多种数据显示模式:用户可根据自己需要选择:扩增曲线模式、熔解曲线模式、标准曲线模式、原始荧光信号模式、最终定量结果模式等•多种数据传输格式:所有结果可以原始数据的形式显示,也可输出到Excel 中作进一步分析,曲线和表格等结果可直接用于PowerPoint、Text等文档中。
荧光定量pcr仪的组成
荧光定量PCR仪主要由两部分组成:PCR系统和荧光检测系统。
1.PCR系统:主要由基因扩增热循环组件、微量荧光监测光学系统、
为电路控制系统、计算机及应用软件组成。
定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的,对于定量PCR系统来说,重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等,更重要的还在于样品孔之间的均一性,以避免微小的差别被指数级放大。
2.荧光检测系统:多色多通道检测是当今的主流趋势,仪器的激发
通道越多,仪器适用的荧光素种类越多。
荧光检测系统可以弥补背景荧光的差异,并设定域值水平,这是分析荧光数据的水平。
此外,实时荧光定量PCR仪还包括光路系统、检测器、热循环模块和分析软件等部分。
总之,荧光定量PCR仪是用于监测循环过程的荧光仪器,能够进行实时分析和数据处理,是生物学和医学研究的重要工具。
常见荧光定量PCR仪汇总常见的荧光定量PCR仪(Fluorescence Quantitative PCR Instrument)主要有以下几种:1. Applied Biosystems 7500 Fast System:该系统是ABI公司旗下产品之一,具有优秀的性能和稳定性。
其特点包括快速准确的PCR结果、高通量PCR样品处理能力以及灵活的试剂和探针选择。
该系统可应用于基因表达分析、SNP检测、病毒定量等多个领域。
2. Bio-Rad CFX96 Touch System:这个PCR仪是Bio-Rad公司的产品之一,具有高精度的温控技术和可靠的荧光检测系统。
它支持多种共轭染料和探针,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、蛋白质分析和病毒检测等多个应用领域。
3. Roche LightCycler 480 System:这是一款高通量的PCR仪,可同时处理多达384个孔的样品,适用于高通量基因表达分析和蛋白质研究。
该系统具有高分辨率荧光检测和精确的温度控制能力,可提供更准确和一致的PCR结果。
4. Thermo Fisher QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System:该PCR仪具有灵活多样的探针和染料选择,可以满足不同的研究需求。
它具有宽广的检测动态范围和高灵敏度,适用于基因表达分析、SNP分型和病毒定量等多个应用领域。
5. Qiagen Rotor-Gene Q:这是一款高通量PCR仪,可同时处理多达72个样品。
它具有快速高效的PCR扩增速度和精确的荧光检测能力,适用于基因表达分析、基因突变检测和染色体融合分析等多个研究领域。
6. Stratagene Mx3000P/QPCR System:这是Agilent Technologies旗下的产品,具有高精度和稳定性的特点。
它支持多种探针和染料,可以同时检测多个靶序列,适用于基因表达分析、非编码RNA研究和表观遗传学研究等多个领域。
全自动荧光免疫定量分析仪及配套试剂技术要求
一、全自动荧光免疫分析仪技术要求
1、检测方法:荧光免疫层析法
2、检测时间:≤15min
★3、检测项目:N末端-B型钠尿肽原(NT-PrOBNP)、降钙素原(PCT)。
4、样本类型:全血,血清,血浆
5、样本最小用血量W75u1.
★6、检测通道,20通道,各通道能同时开展项目检测。
★7、试剂仓位:24个。
★8、加样方式:原始采血管穿刺取样(无需拔帽,无需TIP头)。
9、检测通量2100测试/小时。
10、检测参数的升级:可通过外部U盘或联网升级软件,使用新的测试卡即可完成,无需增加模块
11、内置计算机:仪器自带彩色电容式液晶触摸屏
12、连接管理:支持USB接口、RS232、RJ45接口
13、结果存储:主机存储检测数据数量,IOoOo条
二、配套试剂
三、售后服务要求:。
荧光定量pcr仪实验报告近年来,在不断的学习和实践中,我们有了自己的实验经验。
荧光定量 pcr仪是根据 PTI (Principle Time Agent Imaging)理论设计开发的一种测量方法,它利用荧光探针在光化学发光条件下产生具有荧光特性的光束,然后通过软件自动调整光强以计算出浓度。
荧光定量 pcr仪有很大的应用潜力,目前在许多研究领域都有广泛需求。
例如:农业科学、材料科学、环境生态、食品工业、化学、物理和化学工程等领域都有着广泛的应用空间。
本文将介绍荧光定量 pcr仪的工作原理和光化学发光法测水平之间的关系,分析使用荧光定量 pcr仪进行分析方法的适用性和局限性。
同时利用这一特性可以确定不同检测对象中不同浓度水平上相应分子量所对应关系,为研究不同分子及各分域之间分子量关系提供了重要工具。
一、荧光定量 pcr仪的工作原理荧光定量 pcr仪工作原理是将荧光探针在特定波长和光谱范围内(1-100 nm)发光,利用紫外光泵浦发光二极管产生一定波长的光,然后通过软件自动调节光强来计算出荧光值。
通过比较不同波长下的荧光强度,可得到样品中特定物质浓度的变化趋势,从而得出样品中特定物质的浓度。
它能有效地分析样品中各种物质的含量,但因波长不同,测得的数据精度也不相同。
这种方法在分子分析方面特别适用于生物样品,可以用来测定微生物以及其代谢产物或毒性物质的生物浓度;也可以用来测定某些物质中特定分子或生物受体、基因表达、蛋白质组成以及分子量的变化。
荧光定量 pcr仪可以通过监测荧光激发物发出的光来反映未知物质存在或不存在以及各种化合物在某一特定波长范围内在该特定波长范围内具有的发光强度,然后计算出各浓度水平上这些化合物各自不同的量值。
它采用一种较简单和容易操作的方法而被广泛用于检测样品中各个常见化合物到其浓度变化曲线之间关系,它不仅能精确测量样品中特定物质浓度,而且可以通过计算机软件自动计算出各组分分子量。
荧光定量pcr仪用途
荧光定量PCR仪是一种基于荧光探针技术的PCR仪器,用于测定PCR
反应体系中特定DNA序列的相对数量。
其用途广泛,包括:
1.基因表达分析:荧光定量PCR仪可以测定目标基因的表达水平。
通
过与内参基因比较,可以对不同样本中目标基因的表达差异进行定量分析。
这在生物医学研究中特别重要,可以揭示基因在不同组织或条件下的表达
调控情况。
2.病原体检测:荧光定量PCR仪可以用于鉴定和定量检测病原体,如
病毒、细菌等。
通过特异性引物和探针,可以在样品中检测到非常低浓度
的病原体,并判断其感染水平。
3.基因突变分析:荧光定量PCR仪可以检测和分析DNA序列中的突变。
通过引物和探针的设计,可以特异性地扩增和检测目标突变位点,从而快
速鉴定突变类型和频率。
4.染色体异常检测:荧光定量PCR仪可以用于染色体异常的检测和定量。
通过引物和探针的选择,可以对染色体的数目和结构异常进行快速检测,如常见的三体综合征、染色体重排等。
5.基因型分析:荧光定量PCR仪可以进行基因型分析,如单核苷酸多
态性(SNP)检测。
通过特异性引物和探针的设计,可以准确地分辨和定
量某个基因位点上的不同等位基因,为个体遗传特征的研究提供有力的工具。
6.反应监控:荧光定量PCR仪提供实时荧光监测,可以记录PCR反应
过程中的荧光信号强度,实时监控扩增曲线的形成。
这可以帮助判断PCR
反应的效果,如可靠性、特异性和灵敏度等。
总之,荧光定量PCR仪广泛应用于科研、医学诊断、基因检测等领域,为快速、准确、高通量的PCR定量分析提供技术支持。