当前位置：文档之家 › TCR基因重排检测在T细胞淋巴瘤病理诊断中的作用

TCR基因重排检测在T细胞淋巴瘤病理诊断中的作用

  • 格式：pdf
  • 大小：3.09 MB
  • 文档页数：61

TCRGeneRearrangementinthePathologicDiagnosis

ofT-cellLymphoma

DissertationSubmittedto

NorthChinaUniversityofScienceandTechnology

inpartialfulfillmentoftherequirement

forthedegreeof

MasterofMedicine

by

JiaWen

(PathologyandPathophysiology)

Supervisor:Ph.DMaXiaobing

June,2015

独创性说明

本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究

工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的

地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含

为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材

料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了

明确的说明并表示了谢意。

论文作者签名：日期：2015年6月10

日

关于论文使用授权的说明

本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，

即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保

留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论

文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检

索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：

□

自授予学位之日起；

□

自年月日起。

作者签名：导师签名：

签字日期：2015年6月10日签字日期：2015年6月10日√

摘要

-I-摘要

目的探讨T细胞抗原受体（Tcellreceptor，TCR）基因重排在T细胞淋巴瘤中的

特异性及其在病理诊断中的价值。由于淋巴瘤在临床病理诊断中难度较大，仅凭

HE和免疫组织化学特点得出的结论易造成误诊和漏诊。在恶性淋巴瘤的分类中，

T细胞淋巴瘤是一种临床上相对少见且异质性较高的肿瘤，准确做出诊断给病人的

治疗和预后带来不可或缺的价值。近年来，随着分子生物学的发展和应用，抗原受

体基因（Antigenreceptorgene，ARG）的重排克隆性分析为淋巴瘤的诊断提供了有

效的手段，并日益成熟起来。机体中每个淋巴细胞都有其独特的重排形式，使得基

因重排形式多种多样。淋巴瘤是淋巴细胞的单克隆性增殖，故淋巴瘤细胞的ARG

是单克隆性重排。而良性淋巴组织增生性疾病与淋巴结反应性增生都是多克隆性重

排，这也是与淋巴瘤单克隆性相鉴别的分子病理学基础。目前，通过分子遗传学分

析判断是否存在细胞克隆性增殖，辅助诊断淋巴瘤，从而与良性病变相鉴别。

方法收集2011年1月～2014年1月唐山市人民医院病理科中，组织病理学诊断

为T细胞淋巴瘤的存档蜡块58例，其中男性39例，占67%，女性19例，占

33%，平均年龄58岁。复阅其组织病理形态学及免疫组织学特点并查阅患者临床

资料，全部病例均经10%中性缓冲福尔马林固定，石蜡包埋后对组织进行常规HE

染色和免疫标记，并根据WHO（2008版）造血和淋巴组织肿瘤进行分类。选取

58例T细胞淋巴瘤病例作为实验组，选取20例淋巴结反应性增生病例作为对照

组。使用DNA提取试剂盒对78例病例的石蜡包埋组织进行DNA提取，并采用多

重引物进行PCR扩增TCR基因重排片段，其扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后，利用

分子凝胶成像仪观察并对结果进行进一步的分析。

结果根据WHO（2008版）造血和淋巴组织肿瘤新分类标准，58例T细胞淋巴

瘤分类如下：结外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型20例、外周T细胞淋巴瘤，非特殊型

18例、T淋巴母细胞性淋巴瘤9例、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤8例、间变

大细胞淋巴瘤2例、肠病性T细胞淋巴瘤1例，筛除DNA提取失败的3例标本，

实验组55例T细胞淋巴瘤TCR基因重排检测阳性率为89.1%，其中肠病型T细胞

淋巴瘤100%、结外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型89.5%、非特殊型外周T细胞淋巴瘤

88.2%、T淋巴母细胞性淋巴瘤87.5%、血管免疫母T细胞淋巴瘤87.5%、间变大

细胞淋巴瘤50%。2例外周T细胞淋巴瘤，非特殊型、2例NK/T细胞淋巴瘤、1

例血管免疫母性T细胞淋巴瘤和1例T淋巴母细胞性淋巴瘤均为阴性。华北理工大学硕士学位论文

-II-结论58例T细胞淋巴瘤中，发生于淋巴结外的淋巴瘤高于结内，以男性多见。

部位依次是皮肤/软组织、鼻咽部、颈部、口腔、生殖系统、消化系统、骨、纵

膈、扁桃体。55例T细胞淋巴瘤中有49例TCR基因重排为阳性，阳性率为

89.1%，由于淋巴瘤组织学较为复杂，加之淋巴瘤组织内亦往往伴有不同程度的反

应性淋巴细胞浸润，故临床上易误诊。因此TCR基因重排检测可用于辅助T细胞

淋巴瘤的诊断，在疑为恶性淋巴瘤或结外反应性增生时提供重要手段。为患者的诊

断、治疗和预后提供有效的依据。但由于部分标本时限较长致DNA降解或实验过

程中可能出现交叉污染等缺陷，导致其出现非特异性条带，因此只能作为有效的辅

助手段，确诊时必须结合组织病理形态学、免疫组织化学特点并联系临床。

图14幅；表18个；参111篇。

关键词：T细胞淋巴瘤；TCR基因重排；多重引物PCR

分类号：R365

摘要

-III-Abstract

ObjectivesToinvestigatethespecificityofTCRgenerearrangementinTcell

lymphomaanditsvalueinpathologicaldiagnosis.Duetothelymphomainclinical

pathologicaldiagnosisisdifficult,withHEandimmunohistochemicalresultseasyto

misdiagnosisandmisseddiagnosis.Tcelllymphomaisarelativelyrareclinicallyandhigh

heterogeneityoftumorsIntheclassificationofmalignantlymphoma.Tomakeanaccurate

diagnosishasindispensablevaluetothetreatmentandprognosisofthepatients.Inrecent

years,withthedevelopmentandapplicationofmolecularbiology,clonalARG

rearrangementanalysisprovidesaneffectivemeansforthediagnosisoflymphoma,and

increasinglymature.Thebodyofeachlymphocytegenerearrangementisunique,sothat

eachhasauniquerearrangementoflymphocytesform.Shouldthebodylosescontrolof

thecellofagenerearrangementincertaintumorigeniceffectfactors,thecellswillbeno

controlmonoclonalproliferation,ultimatelyleadingtotheformationoflymphoma.So

lymphomahasamonoclonalrearrangement.Therefore,bypolymerasechainreaction

technologyforTCRgenerearrangementanalysis,especiallywhenconventionalHE

morphologicalandimmunohistochemicalresultscouldnotbeconfirmed,itisparticularly

important.

MethodsCollectedfrom2011to2014TangshanMunicipalPeople'sHospital,58cases

ofspecimens,whichre-readhematoxylin-eosinandimmunohistochemicalandaccessto

clinicaldata,select58casesofT-celllymphomapatientsastheexperimentalgroup,and

theother20casesselectedcasesofreactivehyperplasialymphnodeasanegativecontrol

group.UsingDNAextractionkitin58casesofparaffin-embeddedtissueforDNA

extractionandamplificationbyPCRreactionsystemwhichTCRgenerearrangements

multiplexprimerfragmentsandAmplifiedproductwaspurifiedbyagarosegel

electrophoresis,thegelwasimagerutilizingtheresultsofobservationandfurtheranalysis.

ResultsThenewclassificationstandardscombinestissuemorphology,immune

phenotype,geneticsandclinicalfeatures.Itprovidesaneffectivebasisforlymphoma

accurateclassification,58casesofTcelllymphomaclassificationasfollows:20casesof

ENK/TL,18casesofU-PTL,9casesofT-LBL,8casesofAITL,2casesofALCL,1

casesofETCL.ScreeningDNAsamplesextractedthreecasesoffailure,theexperimental

group,55casesofT-celllymphomaTCRgenerearrangementpositiveratewas89.1%

(49/55).ThepositiverateofvariouslymphomawereETCL100%,U-PTL88.2%,T-LBL

87.5%、ENK/TL87.5%、AITL87.5%、ALCL50%。TwocasesofENK/TL、Two

casesofU-PTL,onecaseofAITLandonecasesofT-LBLwerenegative.

Conclusions58casesofTcelllymphoma,thediseaseinthelymphnodelymphomais

higherthanoutsidetheknot,consistentwiththereportedintheliterature.Thereoccurred

合集下载

可治性罕见病—皮肤T细胞淋巴瘤

可治性罕见病—皮肤T细胞淋巴瘤

可治性罕见病—皮肤T细胞淋巴瘤

一、疾病描述

儿童皮肤T细胞淋巴瘤在儿童淋巴瘤中较为少见，约占2%～5%，在WHO淋巴瘤分类中皮肤受累为主的T细胞淋巴瘤并不是一个独立的类型，多种非淋巴母细胞型T细胞性病理亚型可以累及皮肤／皮下组织，并以皮肤／皮下组织浸润为主要临床特征[1、2]。主要包括：痘疱样淋巴瘤( hydroavacciniforme-like

lymphoma，HVL)、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤(subcutaneous panniculitis-likeT-cell

lymphoma，SPTL)、原发性皮肤CD30+T淋巴细胞增殖性疾病(primary cutaneous

CD30+T-ccll lymphoproliferative disorder)、淋巴瘤样丘疹病(lymphomatoid

papulosis)、原发性皮肤间变型大细胞淋巴瘤(primary cutaneous anaplastic

large-cell lymphoma)、原发性皮肤侵袭性嗜表皮CD8+细胞毒性原发性皮肤T细胞淋巴瘤(primary cutaneous aggressive epidermotropic CD8+ cytotoxicT-cell

lymphoma)，原发性皮肤帖T-细胞淋巴瘤(primary cutaneous gamma-delta

T-celllymphoma)、原发性皮肤小／中T细胞淋巴瘤(primary cutaneous small／，medium CD4+T-cell lymphoma)、外周T细胞性淋巴瘤一非特指(peripheral T-cell

lymphoma，not otherwise specified)。

上述亚类中痘疱样淋巴瘤、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤、原发性皮肤间变型大细胞淋巴瘤是相对较为常见的儿童皮肤T细胞淋巴瘤亚型，其他亚型更为罕见。本类疾病在儿童中至今尚无标准治疗方案。

基因重排技术在皮肤淋巴增生性疾病中的应用

基因重排技术在皮肤淋巴增生性疾病中的应用

２０８　・综述・　皮肤病与性病２０１２年８月第３４卷第４期Ｊ　Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｖｅｎｅｒｅｏｌｏｇｙ，Ａｕｇ　２０１２，Ｖｏ１．３４，ＮＯ．４　

基因重排技术在皮肤淋巴增生性疾病中的应用　

吴秀娟，靳　颖，石　岩，普雄明　

（新疆维吾尔自治区人民医院皮肤性病科，新疆乌鲁木齐８３０００１）　

【摘　要】　目前关于皮肤淋巴瘤的分类标准主要有３种：ＲＥＡＬ、ＥＯＲＴＣ和ＷＨＯ。由于在分类和所用术语方面存在差异，引起　了不小的争议和混乱。２００５年美国Ｂｌｏｏｄ杂志正式发表了世界卫生组织（ＷＨＯ）和欧洲癌症研究与治疗组织（ＥＯＲＴＣ）共同确　定的皮肤淋巴瘤分类，正式名称为“ＷＨＯ—ＥＯＲＴＣ”皮肤淋巴瘤分类，明确指出淋巴瘤确诊要依据临床表现、细胞形态学、免疫表　型特征和受体基因重排方式。受体基因重排克隆性分析技术为解决这些问题提供了一条途径，成为辅助诊断的重要手段　【关键词】　淋巴瘤；受体；基因；重排　

中图分类号：Ｒ３６３．２　１：Ｒ５５７　．４　文献标识码：Ａ　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２—１３１０．２０１２．０４．００８　

Ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎｅ　ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ　ｉｎ　ｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ（Ｒｅｖｉｅｗ）　

ＷＵＸｉｕ　ｊｕａｎ．ＪＩＮ　Ｙｔｎｇ　ＳＨ１　Ｙａｎ　ＰＵＸｉｏｎｇ－ｍｉｎｇ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＤｅｒｍｔｏｌｏｇｙ，　ｅ　Ｐｅｏｐｌｅ　ＳＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＸｉｎｊｉａｎｇ　ＵｙｇｕｒＡｕｔｏｎｏｍｏｕｓ　Ｒｅｇｉｏｎ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３０００１，Ｃｈｉｎａ）　

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　ｔｈｒｅｅ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｌｙｍｐｈｏｍａ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ＲＥＡＬ，ＥＯＲＴＣ　ａｎｄ　ＷＨＯ．Ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉ　ｎ　ｔｈｅ　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｓｔａｎｄａｒｄｓ　ａｎｄ　ｔｅｒｍｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ　ｈａｖｅ　ｌｅａｄ　ｔｏ　ｃｏｎｔｒｏｖｅｒｓｙ　ａｎｄ　ｃｏｎｆｕｓｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｌｙｍｐｈｏ—　ｍａｓ　ｈａｖｅ　ｂｅｅｎ　ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ｉｎ　Ｂｌｏｏｄ　ｍａｇａｚｉｎｅ　ｉｎ　２００５．Ｔｈｅ　ｆｏｒｍａｌ　ｎａｍｅ　ｏｆ“ＷＨＯ－ＥＯＲＴＣ”ｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｌｙｍｐｈｏｍａ　ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｌ—　ｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＷＨＯ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ（ＥＯＲＴＣ），ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ，ｃｅｌｌ　ｍｏｒ—　ｐｈｏｌｏｇｙ，ｉｍｎｍｎｏｌｏｇｉｅａｌ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ　ａｎｄ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｉｓ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｅｌｏｎａｌｉｔｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｗｏｕｌｄ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ａ　ｗａｙ　ａｎｄ　ｂｅｃｏｍｅ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｌｙｒｅ—　ｐｈｏｍａ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｌｙｍｐｈｏｍａ；Ｒｅｃｅｐｔｏｒ；Ｇｅｎｅ；Ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ　

t细胞大颗粒淋巴细胞白血病指南

t细胞大颗粒淋巴细胞白血病指南

《T 细胞大颗粒淋巴细胞白血病指南》

一、概述

T 细胞大颗粒淋巴细胞白血病（T-cell large granular lymphocyte

leukemia，T-LGL）是一种罕见的慢性淋巴细胞增殖性疾病，其特征为外周血中成熟 T 淋巴细胞持续性增多，并伴有大颗粒淋巴细胞（LGL）的克隆性扩增。该疾病的临床表现多样，包括贫血、反复感染、脾肿大、肝肿大等，病情进展较为缓慢，但部分患者可转化为侵袭性淋巴瘤。由于 T-LGL 的临床表现不典型，且缺乏特异性的诊断标志物，因此早期诊断和治疗对于改善患者预后至关重要。本指南旨在为 T-LGL 的诊断、治疗和管理提供参考依据，以提高临床医生对该疾病的认识和诊治水平。

二、流行病学

T-LGL 是一种相对罕见的血液系统恶性肿瘤，其发病率在不同地区和人裙中存在一定差异。据文献报道，全球范围内 T-LGL 的年发病率约为 0.5-2.0/10 万人口，男性略多于女性。该疾病多见于中老年人，发病高峰芳龄为 50-70 岁。然而，近年来随着对该疾病认识的不断提高和诊断技术的不断改进，其发病率可能存在一定的上升趋势。

三、病因和发病机制

目前，T-LGL 的病因和发病机制尚不十分清楚。研究表明，多种因素可能与该疾病的发生发展相关，包括遗传因素、免疫因素和环境因素等。

遗传因素方面，一些研究发现 T-LGL 患者中存在特定的基因突变或染色体异常，如 T-cell receptor γ（TCRγ）基因重排、TCRβ基因重排、NOTCH1 基因突变等，这些突变可能导致 T 细胞克隆性增殖和异常功能。免疫因素方面，机体免疫系统的异常调节可能在 T-LGL 的发病中起重要作用。免疫细胞功能失调、细胞因子失衡以及自身免疫反应等都可能参与了疾病的发生发展。环境因素如病毒感染、化学物质暴露等也可能对 T-LGL 的发病产生一定影响，但具体机制尚需进一步研究证实。

四、临床表现

T-LGL 的临床表现多样，缺乏特异性，主要取决于疾病的进展程度和累及的器官系统。常见的临床表现包括：

皮肤假性淋巴瘤组织病理与基因重排特点

皮肤假性淋巴瘤组织病理与基因重排特点

第３１卷第！期　

ＶｏＩ．３１．Ｎ０，２　济　宁　医　学　院　学　报　

ＪＯＵＩ｛　．Ｕ　ＯＦ　ＪＩ　ＩＮＧ　１ＥＩ　ＩＣＡＬ　ＣＯＬＬＥ（　Ｅ　２００８年６月　

Ｊ１３１１．２００８　

皮肤假性淋巴瘤组织病理与基因重排特点　

刘志超　刘建刚　马香玲：　邓　莉！　崔　文　

（‘济宁医学院　济宁医学院附属第一人民医院）　

提　要　目的　分析研究皮肤假性淋巴瘤（ＣＰＬ）的组织病理、基因重排特点？方法　对ｌ３例皮肤假性　

淋巴瘤的石蜡包埋组织，采用苏木精一伊红染色（ＦＩＥ染色法）、免疫组化ＳＰ法进行组织病理学检查，应用　

ＰＣＲ行　ＦＣＲ—Ｂ和ＩｇＨ基因重排检测。结果　ｌ　３例皮肤假性淋巴瘤组织病理示：真皮内淋巴样细胞大致呈　

带状浸润，无明显异形性，主要位于真皮浅层，细胞浸润与表皮之间有正常胶原带分隔。免疫组化显示浸润　

淋巴细胞呈混合型（ＣＤ２０、ＣＤ３、ＣＤ４５Ｒ０阳性）　１　３例ＣＩ　Ｌ中，进行ＴＣＲ～Ｂ基因重排时：ｌ０例出现Ｓｌ￣３．ｅａｒ　

带（７６．９％），２例重排阳性（１５．４％）；ＩｇＨ基因重排时：２例出现ｓｎ１ｅａｒ带（１５．４　ｏ６），无ｌ例重排阳性（０％）。　

结论　皮肤假性淋巴瘤的临床及组织病理表现形式多样；ＴＣＲ—Ｂ和ＩｇＨ基因重排检测，在诊断ＣＰＬ方面　

具有重要价值。　

关键词　皮肤假性淋巴瘤；组织病理学；免疫组化；基因重排；聚合酶链式反应　

皮肤假性淋巴瘤是一组由多种因素刺激引起的ＤＮＡ。ＰＣＲ扩增：ＴＣＲ一口基因引物序列为ＴＣＲ一　

皮肤良性淋巴组织增生性疾病，其临床和组织病理　ｉ？Ｆｏｒ：５’一　ＦＣＡ　Ｉ＇ＧＧ　ＴＧＴ　ＡＡＣ　ＡＴＴ　ＧＴＧ　ＧＧＧ　

表现为各种不同的形态。通常无唯一可靠的ｆ，示准足　ＡＣ一３’；ＴＣＲ—ｔ？Ｒｅｖ：５’一ＡＧＣ　ＡＣＣ　ＧＴＧ　ＡＧＣ　

以区分皮肤假性淋巴瘤和皮肤恶性淋巴瘤，常需综　ＣｒｒＧ　ＧＴＧ　ＣＣ一３’。¨，预期ＤＮＡ片段为６０—７０ｂｐ。　

合临床、组织病理、免疫组化和（或）基因重排与长期　ＩｇＨ基因引物序列为Ｆ３ＲＡ：５’一ＡＣＡ　Ｃ（；Ｇ　ＣＣＧ