中国实验血液学杂志Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２０１７；２５（１）：１１５—１１９
文章编号（Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ）：１００９—２１３７（２０１７）０１—０１１５—０５
ＢＩＯＭＥＤ－２标准化基因重排检测在非霍奇金
淋巴瘤诊断中的意义 ・论著・
张岩 ，徐宁 ，董宝军 ，宋鸽 ，李庆华 ，安刚 ，艾晓非
中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院（血液学研究所）病理中心，天津３０００２０； 。天津市天津医院检验科，天津３００２１１
摘要 目的：利用ＢＩＯＭＥＤ一２标准化免疫球蛋白（ ）／Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排检测非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ） 患者骨髓 或ＴＣＲ基因重排，探讨 ＴＣＲ基因重排在非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用意义。方法：从骨髓及石蜡 包埋组织（矸 Ｅ）标本中提取基因组ＤＮＡ，采用ＢＩＯＭＥＤ一２系统引物，进行多重ＰＣＲ扩增并利用ＰＣＲ片段分析法 进行 ／ＴＣＲ基因重排的克隆性分析。结果：在２３５例Ｔ细胞非霍奇金淋巴瘤（Ｔ—ＮＨＬ）中，ＴＣＲＴ和ＴＣｅ￣单克隆 重排阳性率分别为５７．９％和５０．２％，ＴＣＲｙ和卿的联合检出率为７１．９％。在５８３例Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤（Ｂ— ＮＨＬ）Ｉｇｎ和，ｇ 单克隆重排阳性率分别为７０．７％和６９．３％， Ｈ和喀 的联合检出率为８１．６％。套细胞淋巴瘤 与滤泡淋巴瘤、弥漫大Ｂ细胞淋巴瘤 日（８４．８％对３４．０％（Ｐ＜０．００１）；８４．８％对９．２％（Ｐ＝０．０２５）和腑 （７５．８％ｖｓ ５０．９％，Ｐ＜０．００１；７５．８％ｖｓ １６．１％（Ｐ＜０．００１）重排阳性率差异具有统计学意义。 基因重排阳性Ｂ— ＮＨＬ患者中，６５例（１３，７％）患者存在ＴＣＲ重排阳性。ＴＣＲ重排阳性Ｔ—ＮＨＬ患者中，未见 基因重排阳性。３０例 弥漫大Ｂ细胞淋巴瘤患者眦标本有２５例（８３．３％）检出 基因重排，与骨髓标本重排检出率相比较，差异具有 统计学意义（Ｐ＜０．００１）。结论：利用ＢＩＯＭＥＤ－２标准化Ｉｇ／ＴＣＲ基因重排检测对于淋巴瘤的诊断有辅助性作用， 并且利用序列分析法可提高重排检测的敏感性和特异性，对于淋巴瘤的早期诊断有很高的价值。 关键词 非霍奇金淋巴瘤；ＢＩＯＭＥＤ一２标准化基因重排；ＰＣＲ片段分析；Ｉｇ／ＴＣＲ基因重排 中图分类号Ｒ７３３．１ 文献标识码Ａ ｄｏｉ：１０．７５３４／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－２１３７．２０１７．０１．０２０
ｌｅｖｉａｔｅｓｃｅｃａｌｌｉｇａｔｉｏｎａｎｄｐｕｎｃｔｕｒｅ（ＣＬＰ）ｉｎｄｕｃｅｄｓｅｐｔｉｃｓｈｏｃｋ［Ｊ］．Ｓｈｏｃｋ，２０１６，４６（２）：１８３１９３．［２９］ＡｈｍａｄＡ，ＧｅｒＤ，ＯｌａｈＧ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｅｎｄｏｔｏｘｅｍｉａｉｎｍｉｃｅｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｄｅｆｉｃｉｅｎｔｉｎｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｉｎｅγｌｙａｓｅ，ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｉｎｅβｓｙｎｔｈａｓｅｏｒ３ｍｅｒｃａｐｔｏｐｙｒｕｖａｔｅｓｕｌｆｕｒｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ［Ｊ］．ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄ，２０１６，３８（６）：１６８３１６９２．［３０］ＧａｄｄａｍＲＲ，ＦｒａｓｅｒＲ，ＢａｄｉｅｉＡ，ｅｔａｌ．Ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｉｎｅｇａｍｍａｌｙａｓｅｇｅｎｅｄｅｌｅｔｉｏｎｐｒｏｔｅｃｔｓｍｉｃｅａｇａｉｎｓｔｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｎｄｌｉｖｅｒｓｉｅｖｅｉｎｊｕｒｙｆｏｌｌｏｗｉｎｇｐｏｌｙｍｉｃｒｏｂｉａｌｓｅｐｓｉｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１６，１１（８）：ｅ０１６０５２１．［３１］ＡｎｇＳＦ，ＳｉｏＳＷ，ＭｏｏｃｈｈａｌａＳＭ，ｅｔａｌ．Ｈｙｄｒｏｇｅｎｓｕｌｆｉｄｅｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｓｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ２ａｎｄｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｉｎｓｅｐｓｉｓｅｖｏｋｅｄａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｖｉａｔｒａｎｓｉｅｎｔｒｅｃｅｐｔｏｒｐｏｔｅｎｔｉａｌｖａｎｉｌｌｏｉｄｔｙｐｅ１ｃｈａｎｎｅｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＩｍｍｕｎｏｌ，２０１１，１８７（９）：４７７８４７８７．
肺腺癌中ＡＬＫ基因重排的检测
倪瑾瑶，陈晓湖，缪成锋，徐菲菲，陈国荣，蔡国平△
（温州医科大学附属第一医院病理科，浙江温州３２５０００）
【摘要】 目的：比较免疫组化（ＶｅｎｔａｎａＩＨＣ）和荧光原位杂交技术（ＦＩＳＨ）对肺腺癌ＡＬＫ基因的检出率。方法：收集２００例肺腺癌患者的临床及病理资料，光学显微镜下复阅其ＨＥ切片，标记肿瘤部位，评估蜡块保存情况，制成９张组织芯片，分别采用ＶｅｎｔａｎａＩＨＣ和ＦＩＳＨ检测ＡＬＫ基因。结果：２００例病例中，通过ＦＩＳＨ检测ＡＬＫ阳性有９例，通过ＶｅｎｔａｎａＩＨＣ检测ＡＬＫ阳性有１１例，其中有两例表现为ＶｅｎｔａｎａＩＨＣ（＋）、ＦＩＳＨ（），１例外院做过基因检测，为ＡＬＫ阴性，ＥＧＦＲ阳性，服用凯美钠，效果良好，另１例未做过基因检测，遂进一步予ＲＴＰＣＲ检验，结果为ＡＬＫ阴性。最终ＡＬＫ阳性为９例，ＶｅｎｔａｎａＩＨＣ的敏感性和特异性分别是１００％和９８．９５％。结论：ＶｅｎｔａｎａＩＨＣ在检测ＡＬＫ基因重排上表现出较高的敏感性和特异性，可用于ＦＩＳＨ检测前的筛选，以避免不必要的ＦＩＳＨ检测。【关键词】肺腺癌；免疫组化；荧光原位杂交；ＡＬＫ基因重排【ＫＥＹＷＯＲＤＳ】 ｌｕｎｇａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ； ＩＨＣ； ＦＩＳＨ； ＡＬＫｇｅｎｅｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ【中图分类号】Ｒ７３４．２ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１０００６８３４（２０１９）０２１１３００６【ＤＯＩ】１０．１２０４７／ｊ．ｃｊａｐ．５７７６．２０１９．０２５
B细胞非霍奇金淋巴瘤患者IgH基因重排检测分析及意义
吴书一1，秦亚溱2，刘文刚1，熊灵军3，刘艳荣2
1．郑州市第三人民医院干细胞与器官移植实验室，郑州450000；
2．北京大学人民医院血液病研究所，北京100044；3．郑州大学第二附属医院
摘要：目的探讨外周血和骨髓免疫球蛋白重链（Immunoglobulinheavychain，IgH）基因重排检测方法及其在监测B细胞非霍奇金淋巴瘤（B－NHL）患者微小残留病（Minimalresidualdisease，MRD）中的临床意义。方法应用PCR－SSP方法对B－NHL患者进行IgH基因重排检测，回顾性分析39例B－NHL患者IgH基因重排动态检测结果来了解其与临床MRD的关系。结果39例B－NHL初诊未经治疗患者IgH基因重排检测34例阳性，阳性率87.1%（34/39）。34例初诊阳性患者，治疗后19例达到临床完全缓解的患者中16例IgH基因重排转阴，3例持续阳性；15例临床部分缓解者，IgH基因重排持续阳性。分析发现13例患者骨髓和外周血标本IgH基因重排均呈阳性。结论IgH基因重排检测可以作为B－NHL的辅助诊断及其微小残留病的监测。关键词：免疫球蛋白重链；基因重排；B细胞非霍奇金淋巴瘤中图分类号：R733.1文献标识码：A文章编号：1672-3422（2011）03-0072-03
Clinicalsignificanceofimmunoglobulinheavychain
generearrangementinpatientswithB－Cell
non－Hodgkin’slymphoma
WUShu－yi，QINYa－zhen，LIUWen－gang，XIONGLing－jun，LIUYan－rong
LaboratoryofStemCellandOrganTransplantation，Zhengzhou
theThirdPeople’sHospital，Zhengzhou450000，China
北京大学学报 （ 医学版 ） ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＰＥＫＩＮＧ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＨＥＡＬＴＨ ＳＣＩＥＮＣＥＳ）
抗原受体基因重排克隆性分析淋巴瘤
辅助诊断技术的发展和应用现状 ・专家笔谈・
李挺 ，祖幼立
（１．北京大学第一医院病理科，北京１０００３４；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ Ｍｅｔｈｏｄｉｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｗｅｉｌｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ
Ｃｏｒｎｅｌｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＵＳＡ）
［关键词］淋巴瘤；基因重排，Ｔ淋巴细胞；基因重排，Ｂ淋巴细胞
［中图分类号］Ｒ７３３．４ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１６７１－１６７Ｘ（２００８）０４－０３４３－０４
恶性淋巴瘤诊断最基本和重要的依据至今虽然仍是组织和细胞学特征，但近二十多年来研究发现有些
组织学上相似的淋巴瘤，其免疫表型、分子异常、临床预后和治疗反应等方面却是异质性的。免疫表型分析
（包括流式细胞术和免疫组化法）是淋巴瘤诊断最好的辅助工具，对于淋巴瘤亚型分析起决定作用，对淋巴
细胞克隆性增生也有辅助判断作用。但免疫表型分析方法本身存在局限性（如敏感和特异性），而且许多淋
巴瘤至今仍缺乏克隆性增生标志，大约有５％～１０％的淋巴瘤病例在应用多种表型分析后仍难以达到最终
诊断，此时需要依赖分子遗传学分析。分子遗传学分析方法在淋巴瘤诊断方面的应用主要包括３方面，即染 色体易位、癌基因和抑癌基因突变缺失以及抗原受体基因（ａｎｔｉｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｇｅｎｅ，ＡＲＧ）重排克隆性分析¨ 。
ＡＲＧ重排克隆性分析应用于恶性淋巴瘤的诊断已有二十多年的历史，但由于方法和技术上的不成熟，
其应用曾受到局限。近年来技术上的突破使其检测敏感性和特异性大大提高，现已广泛应用于淋巴瘤的诊
断。目前国际上，以下情况常规行ＡＲＧ重排克隆性分析：（１）怀疑Ｂ细胞淋巴瘤，但形态和免疫表型分析不
能确定；（２）所有疑为Ｔ细胞增生性病变的病例；（３）免疫缺陷患者的淋巴组织增生性疾病，包括移植后患
