药物对离体豚鼠回肠的作用
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实验13 药物对离体豚鼠回肠的作用目的观察acetylcholine、histamine和BaCl2 等药物对离体豚鼠回肠平滑肌的作用,以atropine及chlorpheniramine两药为工具,初步分析上述三药作用原理。
材料豚鼠;小剪刀,小镊子,培养皿,麦氏浴槽,胶管,通气钩,气泵,棉线,木槌;气泵,张力换能器,超级恒温器,PcLab生物信号采集处理系统;台氏溶液,acetylcholine chloride溶液(1:10万),0.1% atropine sulfate溶液,histamine phosphate溶液(1:10万)(临用时新鲜配制)、chlorpheniramine溶液(1:100万)、1%BaCl2 溶液。
方法和步骤1.离体肠管描记装置的准备(见图10-13-1)。
(1)麦氏浴槽中充以台氏液至固定水平面,调节超级恒温器的温度至37℃,保证麦氏浴槽内37℃±0.5℃恒温。
(2)胶管的一端接气泵出口,胶管的另一端连接通气钩。
2.PcLab参数设置:(1)按图10-13-1连接装置。
将张力换能器固定于铁支柱上,换能器输出线接微机生物信号处理系统第二通道(亦可选择其它通道),选择直流耦合方式(DC)。
(2)微机生物信号处理系统参数设置:采样间隔2ms;连续记录显示模式,压缩比100:1,第二通道放大倍数200~500、高频滤波选择“无”。
3.取豚鼠一只,用木槌击其头部处死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于盛有充以空气的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(每小段1-1.5cm),用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,换以新鲜台氏液备用。
注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。
4.取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。
注意保持肠管通畅,勿使其封闭。
肠管一端连线系于通气钩钩上,然后放入37℃麦氏浴槽中。
药物对离体豚鼠回肠的作用摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱,炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体阻断剂扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的阻断作用。
方法以离体豚鼠回肠为材料,研究乙酰胆碱、组胺对肌张力的影响及阿托品、扑尔敏对其的阻断作用。
结果在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时(P<0.01);加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时(P<0.01);BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降结论阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。
关键词豚鼠回肠肌张力乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏BaCl21.材料和方法1.1实验动物Dunkin-Hartley 豚鼠1.2 药品0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液1g/L硫酸阿托品溶液0.01g/L磷酸组织胺溶液0.001g/L氯苯那敏溶液10g/L BaCl2溶液台氏液1.3 器材双层玻璃浴槽(20ml)张力换能器恒温水浴箱多通道生理信号采集处理系统RM6240生物信号采集处理系统1.4 制备豚鼠离体回肠标本取豚鼠一只,以木槌击打头部致昏死,立刻剖开腹腔,在离回盲部1cm处剪断,取长约10cm左右的回肠一段,置于氧饱和的台氏液中,沿肠壁去除肠系膜,将回肠剪成1-1.5cm左右的小段,用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。
1.5 仪器连接和参数清洗浴槽后,将台氏液装至刻度,调节水浴箱温度为37℃±0.5 ℃,通气管接95% O2+5%CO2混合气体,调节至浴槽中气泡一个个溢出为止。
将回肠标本一端固定在通气钩上置于浴槽中,另一端固定在换能器上与多通道生理信号采集处理系统连接。
连接RM6240生物信号采集处理系统,仪器参数:通道时间常数直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。
1.6 测定药物影响快速归零后调节前负荷为1g。
实验15 药物对离体豚鼠回肠的作用实验日期:3月8日时间:温度:组员:受试对象:豚鼠性别:离体器官:回肠【目的】了解胆碱能神经递质乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)和局部炎症介质组胺(histamine)对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品(atropine)和扑尔敏(chlorpheniramine)的阻断作用。
【原理】消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性.传导性和收缩性等。
但消化道平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。
给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。
胃肠道、膀胱等平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体,产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,兴奋胃肠道平滑肌。
Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合,从而产生抗胆碱作用。
Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。
Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂,能阻断histamine与H1受体的结合,从而产生抗histamine作用。
【材料】豚鼠;麦氏浴槽,超级恒温器,张力换能器,生物信号采集处理系统;台氏溶液,10-2g/L acetylcholine chloride溶液,1g/L atropine sulfate溶液,10-2 g/L histamine phosphate 溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、10g/L BaCl2 溶液。
【方法】1.实验装置准备和仪器参数设置(1)离体肠管描记装置的准备见图7-15-1,麦氏浴槽中加固定量的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。
药物对离体豚鼠回肠的作用
摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱,炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体阻断剂扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的阻断作用。
方法以离体豚鼠回肠为材料,研究乙酰胆碱、组胺对肌张力的影响及阿托品、扑尔敏对其的阻断作用。
结果在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时(P<0.01);加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时(P<0.01);BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降结论阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。
关键词豚鼠回肠肌张力乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏BaCl2
1.材料和方法
1.1实验动物Dunkin-Hartley 豚鼠
1.2 药品0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液1g/L硫酸阿托品溶液0.01g/L磷酸组织胺溶液
0.001g/L氯苯那敏溶液10g/L BaCl2溶液台氏液
1.3 器材双层玻璃浴槽(20ml)张力换能器恒温水浴箱多通道生理信号采集处理系统
RM6240生物信号采集处理系统
1.4 制备豚鼠离体回肠标本取豚鼠一只,以木槌击打头部致昏死,立刻剖开腹腔,在离回盲部1cm处剪断,取长约10cm左右的回肠一段,置于氧饱和的台氏液中,沿肠壁去除肠系膜,将回肠剪成1-1.5cm左右的小段,用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。
1.5 仪器连接和参数清洗浴槽后,将台氏液装至刻度,调节水浴箱温度为37℃±0.5 ℃,通气管接95% O2+5%CO2混合气体,调节至浴槽中气泡一个个溢出为止。
将回肠标本一端固定在通气钩上置于浴槽中,另一端固定在换能器上与多通道生理信号采集处理系统连接。
连接RM6240生物信号采集处理系统,仪器参数:通道时间常数直流,滤波频率10Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。
1.6 测定药物影响快速归零后调节前负荷为1g。
向浴槽中加入相应药物,记录肌张力曲线。
2.观察项目
2.1待离体回肠稳定10min后,加入0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液0.2ml,观察并记录收缩曲线2.2 2-3min后换液,重复以上剂量,待收缩达最高点后加入1g/L硫酸阿托品溶液0.2ml,观察并记录收缩曲线。
不换液,待曲线下降基本稳定后,再加入相同浓度的氯化乙酰胆碱,观察并记录收缩曲线
2.3 加入0.01g/L磷酸组织胺溶液0.3ml,待作用明显时迅速换液,使肠肌张力恢复正常
2.4 加入0.001g/L氯苯那敏溶液0.2ml,5min后加入同量组胺,观察并记录收缩曲线
2.5 加入10g/L BaCl2溶液1ml,当作用达最高点肠段处于痉挛收缩状态时加入1g/L硫酸阿托品溶液0.2ml,观察并记录收缩曲线
3.结果
3.1药物对离体豚鼠回肠作用曲线图
图1药物对离体豚鼠回肠作用曲线图
3.2 在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时(P<0.01);加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时(P<0.01)。
见表1、表2
表1. 离体豚鼠回肠实验9个小组的原始数据列表
Ach收缩幅度(g)His收缩幅度(g)实验小组
Ach Atr+Ach His Chl+His
1 1.7500.059 1.0290.073
2 3.0900.081 1.1430.066
3 1.4220.066 1.6120.066
4 1.6490.2710.7550.125
5 2.820.06
6 1.1280.147
6 1.8250.103 2.660.205
7 2.4000.073 1.9200.220
8 1.4800.176 2.370.161
9 3.110.139 3.450.095
表2. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响
4.结论
阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。
5.讨论
5.1 胃肠道等平滑肌以胆碱能神经占优势,小剂量或低浓度的乙酰胆碱即可激动M胆碱受体,产生类似于兴奋胆碱能神经节后纤维的作用,兴奋胃肠道平滑肌。
阿托品与胆碱受体结合而不产生或较少产生类胆碱作用,却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合从而起到抗胆碱作用。
[1]如图1、表1所示,加入阿托品后肠肌张力显著下降至基线,再加入乙酰胆碱也不产生收缩,完全阻断了乙酰胆碱的作用,证明阿托品具有强抗胆碱作用。
5.2组胺对多种动物的胃肠道平滑肌H1受体有兴奋作用,豚鼠尤其敏感。
扑尔敏为H1受体拮抗剂,能阻断组胺与H1受体的结合从而产生抗组胺作用。
[2]如图1、表1所示,扑尔敏处理后再加入组胺所引起的收缩强度显著低于组胺直接作用时,证明扑尔敏具有部分拮抗组胺作用。
5.3氯化钡是一种肌肉兴奋剂。
B a2+经钙通道进入胞浆,使肌浆内钙离子浓度上升,平滑肌收缩幅度增高,另一方面BaCl2兴奋胆碱能N受体,改变Na+、K+、Ca2+通道的电生理学特性,使肌肉收缩。
[3]在肠肌痉挛收缩时加入阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用,但无法阻断钙离子浓度上升导致的收缩,故肌张力依然维持在较高水平。
6.参考文献
[1]陆源,夏强等,生理科学实验教程.浙江:浙江大学出版社.2004.245.
[2]陆源,夏强等,生理科学实验教程.浙江:浙江大学出版社.2004.245.
[3]唐法娣,药物对离体豚鼠回肠的作用(课件).。