实验课药物对离体豚鼠回肠的作用

M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用【摘要】目的：观察胆碱能神经递质乙酰胆碱，炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。

观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和组胺H1受体拮抗扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。

方法：运用RM6240生理信号采集处理系统以及张力换能器记录不同药物作用下的回肠平滑肌肌张力变化。

结果：加入乙酰胆碱后肠肌张力为1.09±0.48g，再加入阿托品与A药肠肌张力减小到0.08±0.03g（p<0.001）；加入组胺后肌张力为2.12±0.80g，加入扑尔敏与肠肌张力减小到0.08±0.04g（p<0.001），加入氯化钡后肠肌大幅度收缩且呈不稳定性，再加阿托品后仅只略微降低其张力。

结论：乙酰胆碱为M胆碱受体激动药，组胺为H1受体激动药，氯化钡为肌肉兴奋剂，三者均可使肠道平滑肌收缩。

阿托品具有强抗胆碱作用；扑尔敏具有部分拮抗组胺作用；阿托品可通过拮抗胆碱能受的作用。

体部分减弱BaCl2【关键词】：平滑肌；张力曲线；拮抗剂；激动剂；M胆碱受体；H1受体1. 材料1.1 实验动物：豚鼠1.2 药品与试剂未标记的激动剂：A，B，C。

10-2g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride）溶液；10-2g/L磷酸组织胺（histamine phosphate）溶液；10g/L BaCl2溶液。

拮抗剂：1g/L硫酸阿托品（atropine sulfate）溶液；10-3g/L氯苯那敏（chlorpheniramine）溶液。

台氏液（Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2, NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。

1.3 仪器：离体装置：双层玻璃浴槽（20ml）、张力换能器、微距调节夹恒温水浴箱多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统2.实验方法2.1 准备：清洗浴槽：清洗后,将台氏液装至刻度；检查温度：37℃±0.5 ℃；检查通氧: 单个小泡溢出;打开电脑：选中桌面RM6240图标，选择“实验”---生理科学实验---肠肌2.2 实验步骤：清醒豚鼠轻击头部后股动脉放血打开腹腔取出回肠制作回肠标本一端固定在通气钩上置含有37℃台氏液的浴槽中通氧另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接连接RM6240生物信号采集处理系统选择“实验”---生理科学实验---肠肌归零调节换能器张力（1g）稳定20分钟2.3 制作回肠标本：找到回盲部，在离回盲部1cm处剪断回肠，取出回肠约15cm左右一段，置于盛有台氏液的培养皿中，将回肠剪成1-1.5cm的小段。

实验13 药物对离体豚鼠回肠的作用目的观察acetylcholine、histamine和BaCl2 等药物对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，以atropine及chlorpheniramine两药为工具，初步分析上述三药作用原理。

材料豚鼠；小剪刀，小镊子，培养皿，麦氏浴槽，胶管，通气钩，气泵，棉线，木槌；气泵，张力换能器，超级恒温器，PcLab生物信号采集处理系统；台氏溶液，acetylcholine chloride溶液(1:10万)，0.1% atropine sulfate溶液，histamine phosphate溶液(1:10万)(临用时新鲜配制)、chlorpheniramine溶液(1:100万)、1%BaCl2 溶液。

方法和步骤1．离体肠管描记装置的准备(见图10-13-1)。

（1）麦氏浴槽中充以台氏液至固定水平面，调节超级恒温器的温度至37℃，保证麦氏浴槽内37℃±0.5℃恒温。

（2）胶管的一端接气泵出口，胶管的另一端连接通气钩。

2．PcLab参数设置：（1）按图10-13-1连接装置。

将张力换能器固定于铁支柱上，换能器输出线接微机生物信号处理系统第二通道（亦可选择其它通道），选择直流耦合方式（DC）。

（2）微机生物信号处理系统参数设置：采样间隔2ms；连续记录显示模式，压缩比100:1，第二通道放大倍数200～500、高频滤波选择“无”。

3．取豚鼠一只，用木槌击其头部处死，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于盛有充以空气的台氏液培养皿中，沿肠壁除去肠系膜，然后将回肠剪成数小段（每小段1-1.5cm），用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，换以新鲜台氏液备用。

注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能。

4．取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线，并打结。

注意保持肠管通畅，勿使其封闭。

肠管一端连线系于通气钩钩上，然后放入37℃麦氏浴槽中。

药物对离体豚鼠回肠的作用摘要目的观察胆碱能神经递质乙酰胆碱，炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。

观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体阻断剂扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的阻断作用。

方法以离体豚鼠回肠为材料，研究乙酰胆碱、组胺对肌张力的影响及阿托品、扑尔敏对其的阻断作用。

结果在加入阿托品后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入乙酰胆碱时（P<0.01）；加入扑尔敏后豚鼠回肠肌张力明显小于仅加入组胺时（P<0.01）；BaCl2 处理后加入阿托品时回肠肌张力小幅下降结论阿托品具有强抗胆碱作用；扑尔敏具有部分拮抗组胺作用；阿托品可通过拮抗胆碱能受体部分减弱BaCl2的作用。

关键词豚鼠回肠肌张力乙酰胆碱阿托品组胺扑尔敏BaCl21.材料和方法1.1实验动物Dunkin-Hartley 豚鼠1.2 药品0.01g/L氯化乙酰胆碱溶液1g/L硫酸阿托品溶液0.01g/L磷酸组织胺溶液0.001g/L氯苯那敏溶液10g/L BaCl2溶液台氏液1.3 器材双层玻璃浴槽（20ml）张力换能器恒温水浴箱多通道生理信号采集处理系统RM6240生物信号采集处理系统1.4 制备豚鼠离体回肠标本取豚鼠一只，以木槌击打头部致昏死，立刻剖开腹腔，在离回盲部1cm处剪断，取长约10cm左右的回肠一段，置于氧饱和的台氏液中，沿肠壁去除肠系膜，将回肠剪成1-1.5cm左右的小段，用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。

1.5 仪器连接和参数清洗浴槽后,将台氏液装至刻度，调节水浴箱温度为37℃±0.5 ℃，通气管接95% O2+5%CO2混合气体，调节至浴槽中气泡一个个溢出为止。

将回肠标本一端固定在通气钩上置于浴槽中，另一端固定在换能器上与多通道生理信号采集处理系统连接。

连接RM6240生物信号采集处理系统，仪器参数：通道时间常数直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1s/div。

1.6 测定药物影响快速归零后调节前负荷为1g。

昆明医科大学机能学实验报告实验日期：2014年10月14日带教教师：云宇小组成员：专业班级：2012级麻醉班药物的量效关系曲线——组胺和抗组胺药对离体豚鼠回肠的作用一、实验目的学习绘制量效曲线，掌握量效关系，竞争性拮抗剂，非竞争性拮抗剂药等概念，熟悉实验装置二、实验原理消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性．传导性和收缩性等。

但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。

给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

量效关系曲线是指在一定范围内药理效应与剂量之间的正相关关系。

组胺能使豚鼠的平滑肌收缩，随着用药量增加，肠肌的收缩幅度也增加，而苯海拉明作为竞争性拮抗药使得豚鼠肠肌收缩所需的药的浓度增加。

罂粟碱作为非竞争性拮抗药使得豚鼠的肠肌的收缩幅度降低。

三、实验仪器设备Medlab生物信号采集处理系统，肌张力换能器，恒温平滑肌槽实验装置，注射器（1ml）,培养皿，烧杯等。

磷酸组胺（3×10—9——3×10—3g／ml系列浓度），盐酸苯海拉明，盐酸罂粟碱（3×10—3g／ml）台氏液1000ml四、实验方法与步骤1，肠肌的制备；2，观察各种药物对豚鼠肠肌收缩的影响：取已制备的肠肌，两端分别用细线穿过，一端固定于通气钩上，置入盛有30ml台氏液的浴管内，持续通入氧气；另一端线与拉力传感器相连，调节负荷至1g，待平衡后，进入Medlab生物信号采集处理系统，选择实验项目中的“药理肠肌实验”窗口，调节适当的实验参数，开始实验。

（实际做实验时，该过程由实验老师准备完成）。

按下列顺序加药：⑴分别用1ml注射器准确吸取磷酸组胺系列浓度的药液，从低到高累积加入麦氏浴管内，记录标本收缩情况，等达到最大值后，加入下一剂量，直至加入组胺液时标本不再继续收缩为止，记录整理加入不同药物浓度时肠肌标本收缩高度，以最大值计算收缩高度百分比，记录在表内。

实验15 药物对离体豚鼠回肠的作用实验日期：3月8日时间：温度：组员：受试对象：豚鼠性别：离体器官：回肠【目的】了解胆碱能神经递质乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）和局部炎症介质组胺（histamine）对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用，以及它们的受体拮抗剂阿托品（atropine）和扑尔敏（chlorpheniramine）的阻断作用。

【原理】消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性．传导性和收缩性等。

但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。

给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

胃肠道、膀胱等平滑肌以胆碱能神经占优势，小剂量或低浓度的ACh即能激动M胆碱受体，产生与兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用，兴奋胃肠道平滑肌。

Atropine与胆碱受体结合而本身不产生或较少产生拟胆碱作用，却能阻断胆碱能递质或拟胆碱药物与受体的结合，从而产生抗胆碱作用。

Histamine对多种动物的胃肠道和气道平滑肌H1受体有兴奋作用，豚鼠尤其敏感。

Chlorpheniramine为H1受体拮抗剂，能阻断histamine与H1受体的结合，从而产生抗histamine作用。

【材料】豚鼠；麦氏浴槽，超级恒温器，张力换能器，生物信号采集处理系统；台氏溶液，10-2g/L acetylcholine chloride溶液，1g/L atropine sulfate溶液，10-2 g/L histamine phosphate 溶液、10-3 g/L chlorpheniramine溶液、10g/L BaCl2 溶液。

【方法】1．实验装置准备和仪器参数设置（1）离体肠管描记装置的准备见图7-15-1，麦氏浴槽中加固定量的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。

药物对离体豚鼠回肠的作用消化道平滑肌除具有肌肉的共性,如兴奋性、传导性和收缩性以外，尚具有自动节律性收缩（其特点是收缩缓慢而不规则）、伸展性较大、具有紧张性收缩以及对化学刺激、温度改变和牵张刺激敏感等特性。

本实验采用离体小肠平滑肌灌流的方法，观察acetylcholine (乙酰胆碱），histamine (组胺）对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，以atropine (阿托品)、chlorpheniramine (氯苯那敏、扑尔敏）为工具药，初步分析以上二药的作用原理。

1 材料和方法1．1 材料豚鼠，改良式离体组织灌流装置、生物信号采集处理系统、张力传感器（量程为10克）、铁支架、微调固定器、温度计、1ml注射器、腰穿长针头、烧杯、台氏溶液、10-2 g/L乙酰胆碱、1 g/L硫酸阿托品、10-2 g/L组胺磷酸盐， 10-3 g/L扑尔敏溶液等。

1．2 方法1．2．1 改良式离体组织灌流装置的准备在改良式离体组织灌流装置（图9.3-1）中事先向中心管内加台氏液10ml。

开启恒温槽，使其温度保持于37℃。

灌流槽内通以5%CO2和95%O2，使逸出的气泡细小而均匀。

图9.3-1 改良式离体组织灌流装置1．2．2 制备标本将豚鼠执于手中倒悬，用木槌猛击后脑部，使其昏迷，立即剖开腹腔，找出胃幽门与十二指肠交界处，以此处为起点取长20～30cm的肠管。

用台氏液冲洗肠段内容物，置于低温（4～6℃）的台氏液内。

实验时剪取一段长约2cm的肠段，用细丝线于其两端各扎一结，一端系于固定钩上，另一端与张力传感器相连。

适当调节传感器高度，使其与标本之间松紧度合适。

并且注意连线垂直，不得与浴槽的管壁接触，以避免磨擦。

1．2．3 连接实验装置将张力传感器的输入插头与生物信号采集处理系统的信号放大器输入通道相连，并设置好放大器、采样和刺激器参数。

1．2．4 实验观察（1）待离体回肠稳定20~30 min后，记录一段正常收缩曲线，依次向麦氏浴槽内加下列药物。

药物对豚鼠离体回肠的作用讨论：1，从受体学说角度，讨论分析实验结果。

（1）1）消化道平滑肌的一般特性有，兴奋性较骨骼肌低，不规则的节律性、紧张性、伸展性，对刺激的特异敏感性即对牵张、温度和化学刺激敏感而对切割、电刺激等不敏感。

当施加1g的力时牵张刺激使平滑肌反射性收缩。

2）豚鼠消化道平滑肌上有H1受体，是组织胺受体的一种。

组织胺是组织胺受体H1的激动剂，与细胞上的组织胺受体结合可以引起平滑肌收缩。

因此加入0.2ml磷酸组织胺后豚鼠消化道平滑肌强烈收缩，描计曲线上升。

拮抗剂能与受体结合，具有较强亲和力而无内在活性。

H1受体阻断药苯海拉明对组织胺具有竞争性拮抗作用，可以竞争性地拮抗组织胺对豚鼠消化道平滑肌的收缩作用，使消化道平滑肌松弛，曲线下降到正常状况。

（2）肠肌稳定后，再加入0.2ml的磷酸组织胺，则消化道平滑肌收缩作用小于“（1）”中加入组织胺的结果。

这可能是因为在“（1）”中细胞内的储备受体已经被苯海拉明占领，再次加入组织胺后组织胺结合的受体数量很少，故收缩作用远不如第一次强。

也可能是再次加入激动剂后消化道平滑肌的反应性降低所致。

（3）胆碱能受体广泛分布与中枢和周围神经系统，分为M受体和N受体。

豚鼠消化道平滑肌上存在M受体，M受体激活后可产生一系列自主神经反应，包括平滑肌收缩。

加入0.2ml乙酰胆碱，乙酰胆碱是一种完全拟胆碱药，作用于M受体产生M样作用，兴奋平滑肌，使回肠肌收缩，描笔曲线呈现上升。

给阿托品后，阿托品的作用机制为竞争性拮抗乙酰胆碱或胆碱受体激动药对M 胆碱受体的激动作用。

阿托品与M胆碱受体结合，因内在活性很小，一般不产生激动作用，却能阻断乙酰胆碱或胆碱受体激动药与受体结合，结果拮抗了它们的作用。

对内脏平滑肌有松弛作用，因此给阿托品后曲线下降到正常状况。

（4）肠肌稳定后，再加入0.2ml的乙酰胆碱，消化道平滑肌收缩作用小于“（3）”中加入乙酰胆碱的结果。

这可能是因为在“（3）”中细胞内储备的M受体已经被阿托品占领，再次加入乙酰胆碱可以结合的M受体数量减少，故收缩作用远不如第一次强。