ELISA法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究

ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证董小曼;田博;杨冰;潘殊男;栗妍;沈淑琴;王晋【期刊名称】《现代仪器与医疗》【年(卷),期】2006(012)006【摘要】为验证ELISA法检测病毒性疫苗中残余牛血清蛋白方法的可靠性,由2个部门对12个样品进行4人连续3天的验证.结果表明:4人连续3天的12次检测结果均满足牛血清白蛋白ELISA法(BSP-ELISA法)标准曲线成立的条件,建立合格标准曲线的成功率为100%;对5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL浓度的牛血清白蛋白(BSP)标准品,不同实验人员间测定结果的变异系数在2.87%～6.33%之间,精密度较好;回收率在92.9%～103.1%之间,说明不同人的测定结果准确度高.分别采用该方法与已上市的牛血清白蛋白试剂盒对7种疫苗中100个样品的残余BSP含量进行检测,二者的检测结果合格符合率为100%,用该方法对已上市的检测BSA试剂盒中的4个标准品进行检测,回收率在90.0%～117.1%,检测灵敏度为2.5ng/mL,表明BSP-ELISA法可以敏感、准确地定量检测BSA,可用于目前我公司疫苗制品中残余牛血清白蛋白的质量控制.【总页数】5页(P21-25)【作者】董小曼;田博;杨冰;潘殊男;栗妍;沈淑琴;王晋【作者单位】北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.ELISA法检测干细胞溶液中残留牛血清白蛋白含量 [J], 宛莹;聂德志;贲亮;黄若洋2.ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量 [J], 方玉;冯晓明;奚廷斐;杜晓丹;陈震3.三种检测猪瘟疫苗中牛血清蛋白含量的ELISA试剂盒的性能对比 [J], 曹玉美;方茜;陆江;孙如水;孙龙4.应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白 [J], 李长贵;周铁群;王剑锋;邱平5.检测疫苗残余牛血清ELISA试剂的质量控制 [J], 潘殊男;刘保奎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

ELISA定量检测新生牛血清中乙脑抗体方法的初步验证摘要】目的：对定量检测新生牛血清中乙脑抗体的ELISA方法进行初步验证。

方法：对ELISA方法的灵敏度、精密性、特异性、线性和在新生牛血清中的适用性进行验证。

结果：该法的灵敏度为1:4096；板内和板间CV平均值分别为1.2%和2.0%；抑制率均>79%；线性较好，相关系数r均>0.993;在新生牛血清中的检测回收率均>90%。

结论：该法具有较高的灵敏度、精密性、特异性和线性，适用于检测新生牛血清中的乙脑抗体。

【关键词】乙脑抗体；ELISA；新生牛血清【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）10-0152-02Primary validation of quantitative ELISA for Japanese encephalitis antibody in new born bovine serum Yao Liang Qian Haozhou Zhang Jinghai .Shenyang Pharmaceutical University 10163,China【Abstract】Objective To Validate the quantitative ELISA for antibody against Japanese Encephalitis Virus (JEV) in newborn bovine serum. Methods The method was verified for sensitivity, precision, specificity, linearity and determined for Antibody against JEV in new born bovine serum. Results The sensitivity of the method was1:4096;The mean CVs of determination results of test samples in various wells and on various plates were 1.2% and 2.0% respectively; All inhibitions ratio were >79%;The linearity was good,all correlation coefficientsr were >0.993;Every recovery was>90% in new born bovine serum. Conclusion The method for detection of antibody against Japanese Encephalitis Virus (JEV) in newborn bovine serum was applicative, which showed high sensitivity, precision, specificity and linear.【Key words】Japanese encephalitis antibody; ELISA ; New born bovine serum新生牛血清是乙脑疫苗生产中重要的原辅料，新生牛血清中如含有乙脑抗体将影响乙脑疫苗的正常生产。

品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。

合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病，提高畜禽养殖效益。

然而，如果兽药残留超过安全标准，可能对消费者健康造成潜在风险。

因此，兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。

兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。

本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法，并讨论其原理和应用。

高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。

该方法基于高效液相色谱（HPLC）和质谱联用仪（MS），通过对样品进行分离和定性分析，可以快速、准确地检测多种兽药残留物。

HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点，适用于不同类型的兽药残留物检测。

酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。

该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合，形成特异性抗原-抗体复合物，并通过酶作用产生颜色反应，从而定量检测兽药残留物的含量。

ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点，适用于大规模的兽药残留检测。

气相色谱-质谱联用法（GC-MS）也是常用的兽药残留检验方法之一。

该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析，可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。

GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点，适用于多种兽药残留物的分析。

快速液相色谱法（UPLC）也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。

与传统的液相色谱相比，UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。

因此，UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。

综上所述，兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。

通过合理选择和应用适当的检验方法，可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。

这有助于确保畜产品的质量安全，保护消费者的健康。

未来，随着科技的进步，兽药残留检验方法还会不断发展和完善，以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。

收稿日期:2006-01-23;修回日期:2006-04-06作者简介:潘殊男(1974-),男,硕士,助理研究员,主要从事检测方法研究。

E L I S A 法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究潘殊男,杨冰,刘保奎,董小曼(北京天坛生物制品股份有限公司,北京100024)摘　要:为了验证E L I S A 法对病毒性疫苗中残余牛血清蛋白检测的适用性,用牛血清蛋白E L I S A 测定法与牛血清白蛋白E L I S A 测定法、牛血清I g G -E L I S A 测定法对麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液、洗涤后病毒收获液以及多种成品疫苗中的残余牛血清蛋白含量进行了测定。

结果显示,麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液中牛血清白蛋白含量依次为I g G 含量的70.5倍、65倍、84.3倍,洗涤后病毒收获液中两者比值分别为4.2、1.8和8.1;牛血清白蛋白E L I S A 法和牛血清蛋白E L I S A 法均能检测出疫苗中牛血清白蛋白,但前者测不出牛血清I g G ,而后者可准确检测牛血清I g G 。

牛血清蛋白E L I S A 测定法可同时检测牛血清白蛋白和牛血清I g G ,更适用于疫苗残余牛血清蛋白含量的测定。

关键词:牛血清;E L I S A ;适用性中图分类号:R 446.61文献标识码:A文章编号:1005-5673(2006)03-0023-04I n v e s t i g a t i o no na p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o no f r e s i d u a l b o v i n e s e r u m c o n t e n t s i nv i r a l v a c c i n e s P A NS h u -n a n ,Y A N GB i n g ,L I UB a o -k u i ,e t a l .(B e i j i n gT i a n T a nB i o l o g i c a l P r o d u c t s C o .,L T D ,100024,C h i n a )A b s t r a c t :T o v a l i d a t e t h e a p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o n o f r e s i d u a l b o v i n e s e r u mc o n t e n t s i n s o m e v i r u s v a c c i n e s ,b y w h i c hi n c l u d e d m e a s u r e m e n t o f r e s i d u a l p r o t e i n s f r o m b o v i n e s e r u m i nc u l t u r e s b e f o r e w a s h i n g a n dh a r v e s t e d c u l t u r e s a f t e r w a s h i n g i n p r e p a r a t i o no f v a c c i n e s f o r m e a s l e s ,m u m p s a n d r u b e l l a .T h r e e k i n d s o f E L I S Am e t h o d s c o u l d b e u s e d i nd e t e c -t i o no f b o v i n e s e r u mp r o t e i n s ,b o v i n e s e r u ma l b u m i n a n d b o v i n e I g Gr e s p e c t i v e l y .T h e r e s i d u a l c o n t e n t s o f b o v i n e s e r u ma l -b u m i n a r e 70.5、65a n d 84.3f o l d s a s t h o s eo f b o v i n e I g Gi n v i r u s c u l t u r e s b e f o r ew a s h i n gi nm e a s l e s ,m u m p s a n dr u b e l l a v a c c i n e s ,w h e r e a s a f t e r w a s h i n g i nh a r v e s t e d c u l t u r e s t h e r a t i o s o f b o t ho f t h e ma r e r e d u c e d t o 4.2,1.8a n d 8.1f o l d s r e -s p e c t i v e l y .B o v i n e s e r u mp r o t e i n s -E L I S Ac a nb e u s e di nd e t e c t i o no f B S Aa n db o v i n eI g G i nah i g h l y s e n s i t i v ew a y ,b u t B S A -E L I S A i s o n l y c o n d u c t e d o n d e t e r m i n a t i o n o f B S A .T h e f o r m e r i s m o s t a p p l i c a b l e t h a n t h e o t h e r t w o o n d e t e c t i n g r e s i d -u a l b o v i n e s e r u m a l l e r g e n si nv i r u s v a c c i n e s ,b e c a u s eB S A a n db o v i n eI g G a r eb o t hp r i m a r yr e s i d u a l a l l e r g e n si nt h e s e p r e p a r a t i o n s .K e yw o r d s :B o v i n e s e r u m ;E L I S A ;A p p l i c a b i l i t y 《中国生物制品规程》2000年版规定,疫苗中残余的牛血清蛋白残留量不得超过50n g /m l 〔1〕。

牛的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中类牛血清白蛋白残留检测的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛的牛血清白蛋白残留检测水平。

用纯化的牛的牛血清白蛋白残留检测抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入类牛血清白蛋白残留检测，再与HRP标记的类牛血清白蛋白残留检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的类牛血清白蛋白残留检测呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛的牛血清白蛋白残留检测浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

ELISA方法检测牛组织中的阿维菌素类药物残留杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2014(050)009【摘要】建立一种间接竞争ELISA方法,检测牛组织中的阿维菌素类药物(Avermectins,AVMs)残留.该方法可同时检测牛肝脏和肌肉中的阿维菌素、伊维菌素和埃普里诺菌素残留.标准曲线:y=-45.613x+ 81.191,R2=0.9951,IC50=4.8 ng/mL,线性范围为1.1 ng/mL～21.9 ng/mL.空白牛肝脏组织中以20、50ng/mL和100 ng/g浓度添加时,AVMs回收率为53.8％～80.4％,变异系数为3.4％～17.9％;空白牛肌肉组织中以5、10 ng/mL和20 ng/g浓度添加时,AVMs 回收率为70.9％～108.6％,变异系数为3.7％～17.1％.【总页数】3页(P70-72)【作者】杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫【作者单位】中国牧工商(集团)总公司,北京丰台100070;中国牧工商(集团)总公司,北京丰台100070;中牧实业股份有限公司,北京丰台100070;北京农学院,北京昌平102206;中国牧工商(集团)总公司,北京丰台100070;中牧实业股份有限公司,北京丰台100070【正文语种】中文【中图分类】S851.34+7【相关文献】1.ELISA方法检测含油食品中氟喹诺酮类药物残留 [J], 于金玲;宫小明;董静;丁葵英;王洪涛2.动物组织中苯并咪唑类药物多残留ELISA方法的建立 [J], 陈飞;万宇平;冯静;刘春雪3.猪肉组织中阿维菌素类药物残留的高效液相色谱-串联质谱法测定 [J], 赵东豪;贺利民;聂建荣;洪振涛;连槿;刘雅红;彭聪4.牛肌肉中阿维菌素类药物残留的免疫亲和色谱——高效液相色谱荧光检测方法的研究 [J], 杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫5.液相色谱法测定猪组织中阿维菌素类药物残留量 [J], 王海;刘素英;单吉浩;吴银良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

酶联免疫法在农产品质量安全检测中的应用研究进展酶联免疫法（enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA）是一种广泛应用于农产品质量安全检测中的生物技术方法，具有操作简单、高灵敏度和高特异性等优点。

本文将对近年来国内外ELISA技术在农产品检测中的应用研究进展进行综述。

一、 ELISA技术原理ELISA技术原理是将目标物质固定于微孔板上，通过用特异性抗体与之结合，经过染色反应或荧光物质测定等方法来检测目标物质的存在。

ELISA方法的应用已经非常广泛，包括动物保健，医学诊断，环境检测等。

在农产品质量安全检测中，ELISA技术主要用于检测农药残留、食品添加剂、重金属、微生物等有害物质。

二、 ELISA技术在农产品质量安全检测中的应用1. 农药残留检测农药残留已成为影响农产品质量安全的主要问题之一。

传统的检测方法需要耗费大量的时间和精力，而ELISA技术则具有检测快速、准确度高的优点。

国内外已有研究利用ELISA技术检测多种农药残留，如三氯氰菊酯、苯妥英、吡虫啉等。

与其他检测方法相比，ELISA技术不但结构简单，操作灵活，并且有极高的检测敏感性和特异性，因此在农药残留检测方面已广泛应用。

2. 食品添加剂检测食品添加剂是指用于改善和增强食品颜色、香味、口感等特性的化学物质。

但是，食品添加剂的过度使用会对人体健康造成威胁。

因此，食品添加剂检测成为了食品安全的重要领域之一。

ELISA技术在食品添加剂检测中的应用已经被广泛研究。

例如，ELISA技术能够检测到食品中的亚硝酸盐、甜味剂、抗氧化剂等添加剂，为食品安全检测提供了一种快速、准确的检测手段。

3. 重金属检测重金属是指密度大于5g/cm³的金属元素，大部分重金属是具有毒性、致癌性和致畸性的。

在农产品质量安全检测中，ELISA技术也被广泛应用于重金属检测。

例如，ELISA技术可以检测植物中的镉、铅等重金属元素，为农产品的质量安全检测提供了一种新的检测手段。

10浅析ELISA试剂盒检测兽药残留操作技术要点作者：任艳娥来源：《现代畜牧科技》 2017年第1期食品安全问题已成为当今社会关注的焦点问题之一，尤其是2011年的河南双汇“瘦肉精”事件，2013年美国生禽肉导致海德堡型沙门氏菌暴发事件，2015年广东多批水产品检出隐性孑L雀石绿、氯霉素、呋喃唑酮代谢物等类似事件的发生，兽药残留问题已威胁到人们的健康和生存。

媒体在加大曝光此类事件频率的同时，政府机构也加大了监督及检测力度。

近几年ELISA试剂盒已成为辽宁省县级检测机构化验1 试剂盒酶标板的布板图1为96孑L板的布板情况，以8个样本为例，可根据待检样品的数量合理安排板条，拆下的多余板条立即封好放回冰箱冷藏以备下次使用。

阴性样品的选择须经检测后确为阴性的样本，切不可用未确认为阴性的样品充当，阳性添加样品由同一阴性空白样品通过添加得来。

标准品及样品都建议做2孔以上平行。

2试剂盒及样品的回温从冰箱内取出的试剂盒及待检样品需回温到25±2℃，由于每批试剂盒出厂时的技术参数是在25℃左右反应温度下确定的，试剂盒本身对温度的反应非常敏感，如回温不一致，将导致后面的显色效果不佳，检验数据的不准确，所以必须保证试剂盒内所有试剂、板条和处理后的样本温度都回温至25±2℃，这是保证检测结果准确的前提。

3试剂盒内溶液配制试剂盒中如需提前配制的溶液必须用精密量具严格按照其说明书要求进行配制或稀释。

配制时应注意试剂盒中提供的试剂的实际量会与其标示的量有所差距，所以不能按标示量直接取用，否则会影响后面的数据。

同时检测试验中室检测兽药残留的主要手段之一。

ELISA试剂盒法属实验室快速检测兽药残留的方法之一，利用酶的高效催化性使抗原抗体之间发生特异性综合反应，根据颜色深浅来定量分析的一门技术。

可分为间接竞争抑制法和抗体／抗原包被直接竞争法。

现将从以下几个环节介绍ELISA试剂盒（以下简称试剂盒）检测兽药残留的操作要点。

抗微生物药物残留的免疫学检测技术探究随着抗微生物药物的广泛应用，药物残留问题逐渐凸显。

传统的检测方法如高效液相色谱法和气相色谱法，因为操作复杂、费用高昂、对设备和技术的要求高，不能满足现代兽药残留检测的要求，因此需要开发一种更加快速、灵敏、准确、易于操作的检测方法。

免疫学检测技术由于其快速、精确和可靠等优点已经成为药物残留检测的重要方法之一。

抗微生物药物残留的免疫学检测技术主要包括酶联免疫吸附测定法（ELISA法）、放射免疫测定法（RIAs）、荧光免疫测定法（FIA）和电化学免疫测定法（EIA）等。

其中ELISA法是应用最为广泛的方法之一。

该方法利用抗体对药物进行特异性识别和结合，通过酶标记的二抗或者配体来实现信号放大，最终以荧光或者颜色等形式进行检测。

它有高灵敏度、低成本、操作简便、快速等优点，并且可以进行大规模筛查。

但是，该方法也存在着一些问题，例如交叉反应较多，受样本复杂性影响，且不能精确地定量测定。

RIAs是利用放射性同位素对药物进行标记，然后与样品中抗体或者药物结合，通过放射活度测定来定量药物。

这种方法具有高度的特异性和灵敏度，并且可以定量测定，但是受到技术和安全问题的限制，使用较为受限。

FIA是利用荧光标记的药物或者抗体来对药物进行特异性检测。

该方法具有高灵敏度、高特异性和可扩展性，并且可以直接用于复杂样品的分析。

但是，该方法仍然需要荧光标记物，且可能存在背景荧光的干扰，影响检测结果。

EIA是利用电化学信号来检测药物，与FIA类似，不需要特殊标记物。

该方法具有高灵敏度和可重复性，且可以用于实时监测，但是也存在样品复杂性的限制，且对设备要求较高。

总的来说，抗微生物药物残留的免疫学检测技术在提高检测灵敏度和特异性等方面已经取得了显著的进展。

但是，在实际应用中还需要进一步加强不同方法之间的比较和验证，以确保检测结果的准确性和可靠性。

同时，还需要开发新的检测技术来提高药物残留的检测能力。

养殖与饲料2014年第3期ELISA 法检测动物血液、尿液及脏器中药物残留量丁丹1方友平2王有祥2杨勇敏2徐丹华11.湖北省十堰市动物产品质量监督检验测试中心，湖北十堰442000；2.湖北省十堰市动物卫生监督所，湖北十堰442000收稿日期：2014-01-20通讯作者：杨勇敏丁丹，女，1977年生，硕士，兽医师。

摘要为了探寻较为方便、有效的药物残留测定方法，十堰市动物卫生监督所和十堰市动物产品质量监督检验测试中心进行了利用动物血液来检测克伦特罗含量的技术尝试，分别采集动物血液、脏器和尿液进行克伦特罗含量检测，发现不同部位样品的克伦特罗含量有差异性、相关性和规律性。

关键词ELISA 法；血液；尿液；肝脏；药物残留酶联免疫法（ELISA ）基本原理是：把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，结合在固相载体上的酶量与标本中受体物质的量有一定的比例，加入酶反应的底物后，底物被酶催化水解或发生氧化还原反应而成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

ELISA 法具有灵敏性高等特点，广泛应用于动物体内药物残留测定。

然而，人们往往将动物尿液和脏器作为样品进行检测，但脏器只能屠宰后才可进行检测，尿液采集也因条件限制费工费时。

能否利用动物血液来检测克伦特罗（俗称“瘦肉精”）含量，十堰市动物卫生监督所和十堰市动物产品质量监督检验测试中心对此进行了技术尝试。

1材料与方法1.1试验仪器及试剂Sunrise 酶标仪（滤光片波长为450nm/630nm ）、离心机（3000～4000r/min ）、微量移液器（10～300μL ，单道、多道）。

酶联免疫试剂盒Ⅲ、Ⅳ型（由北京维德维康生物技术公司生产）：克伦特罗酶标板、标准品工作液（浓度分别为0.0、0.1、0.3、0.9、 2.7、8.1μg/L ）、高浓度（100μg/L ）标准品、克伦特罗酶标记物浓缩液及稀释液、洗涤液、底物A 液及B 液、终止液、组织提取液等。

抗微生物药物残留的免疫学检测技术探究抗微生物药物残留的免疫学检测技术是目前常用的一种检测方法，用于监测药物残留在食品、环境或动物组织中的水平。

该技术基于免疫学原理，通过与药物特异性抗原或抗体的结合反应来实现对药物残留的定量测定。

在抗微生物药物残留的免疫学检测技术中，常用的方法包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）、流式细胞术和光学显微镜检测法等。

ELISA是最常用的一种方法。

ELISA的原理是利用酶标记的抗体与待测样品中的微生物药物残留结合，再用底物进行发色反应，通过测定反应产物的光吸收值来定量测定待测物的含量。

ELISA具有灵敏度高、检测速度快、操作简便等优点，已广泛应用于食品安全监测和临床诊断等方面。

流式细胞术是一种基于细胞在流体传输中特定的免疫染色技术，它可以实现对微生物药物残留的高通量定量检测。

在该技术中，待测样品中的细胞或组织首先被标记上特异性抗体，然后通过流式细胞仪分析系统进行检测。

流式细胞术具有高通量、高灵敏度、多参数检测等优点，能够实现对微生物药物残留的快速筛查和定量分析。

光学显微镜检测法是一种基于光学放大原理的荧光显微镜技术，用于对微生物药物残留的定性和定量检测。

该方法将待测样品中的微生物药物残留与荧光探针结合，通过光学显微镜观察样品中的荧光信号来判断样品中的药物残留情况。

光学显微镜检测法具有高分辨率、高灵敏度、定性定量一体化等优点，适用于微米级尺度的药物残留的检测。

抗微生物药物残留的免疫学检测技术是一种重要的检测手段，对保障食品安全和动物健康具有重要意义。

随着科技的发展，该技术将不断改进和完善，为药物残留的检测提供更加可靠、快速和高效的解决方案。

残余牛血清蛋白ELISA检测方法的建立及其初步应用李华;俞建昆;洪超;龙润乡;翟友刚;徐琼芳;崔萍芳;丁雪凤;谢忠平【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2005(012)002【摘要】建立检测疫苗中残余牛血清蛋白(CSP)含量的ELISA检测法.将混合的小牛血清分别免疫鸡和家兔,然后分别提取、纯化鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)和兔抗小牛血清抗体IgG.IgY用作包被抗体,IgG用作酶标抗体,四甲基联苯胺(TMB)显色检测残余CSP含量.结果:包被用IgY的最适浓度为25-30μg/mL,用含0.4%明胶的0.01mol/LPBS(pH7.4)溶液作为包被缓冲液,HRP-IgG的最适稀释度为1:2000-1:3000.该方法的检测灵敏度为2.5ng/mL,变异系数为6.3%-9.4%,回收率为90.4%-112.8%,与猪、猴、豚鼠血清皆无交叉反应.10批不含Al(OH)3的疫苗ELISA法与RPHA法(反相间接血凝法)检测结果无显著性差异(P＞0.05);而10批含Al(OH)3的疫苗,两种方法检测结果相差很大(P<0.05).建立的ELISA检测法不受Al(OH)3的影响,简便、特异和灵敏,更适用于检测生物制品中的残余CSP.【总页数】3页(P107-109)【作者】李华;俞建昆;洪超;龙润乡;翟友刚;徐琼芳;崔萍芳;丁雪凤;谢忠平【作者单位】中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118;中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所质量检定室,云南,昆明,650118【正文语种】中文【中图分类】R446.61【相关文献】1.禽白血病病毒ELISA检测方法的建立与初步应用 [J], 曹利利; 董航; 郭衍冰; 姜旭; 姚新华; 苑淑贤; 邵洪泽; 宋建臣; 贾立军2.羊流产衣原体间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用 [J], 郭锐; 田永祥; 刘威; 周丹娜; 段正赢; 杨克礼; 刘泽文; 袁芳艳; 高婷3.基于NS4蛋白的蓝舌病病毒间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用 [J], 易华山;姚婷;高丽旭;张金阳;杨发挥;魏晓蓉;李前勇;谢远兵;赵瑶;马鲜平;李欢;夏宇;朱文青;刘倩如;陈思倩;曹慧贞4.基于禽偏肺病毒N蛋白的间接ELISA检测方法的建立和初步应用 [J], 唐金文;陈基明;吕迪;何怡宁;雍璐;林丽婷;韦平;磨美兰5.基于非洲猪瘟病毒p72蛋白的阻断ELISA检测方法的建立及初步应用 [J], 王彩霞;冯春燕;肖颖;于浩洋;宋晓晖;刘晓飞;仇松寅;林祥梅;吴绍强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

ELISA法检测干细胞溶液中残留牛血清白蛋白含量宛莹;聂德志;贲亮;黄若洋【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2013(017)010【摘要】目的检测胎牛血清白蛋白(Fetal bovine serum albumin,BSA)在脐带源间充质干细胞溶液的含量以代表异源蛋白在脐带源间充质干细胞溶液中的残留情况的适用性,并通过改进培养条件和增加清洗次数以进一步减少BSA等异源蛋白在脐带源间充质干细胞溶液内的残留.方法运用定量ELISA方法检测了脐带源间充质干细胞溶液中BSA的含量,并探讨改进培养方式与增加清洗次数等方法对干细胞溶液中残留的BSA含量的影响.结果对细胞清洗次数的增加能够有效减少BSA等异源蛋白的残留,并且采用无血清培养基进行干细胞培养是减少BSA等异源蛋白在干细胞溶液内残留量的最有效方法.结论通过检测BSA以代表异源蛋白在脐带源间充质干细胞溶液中残留情况具有适用性；并且增加清洗次数能有效地降低BSA的残留量；采用无血清培养基进行干细胞培养是减少BSA等异源蛋白在干细胞溶液内残留量的最有效方法.【总页数】3页(P1764-1766)【作者】宛莹;聂德志;贲亮;黄若洋【作者单位】四平中心人民医院中心实验室,吉林四平136000;吉林省拓华生物科技有限公司,吉林四平136000;四平中心人民医院中心实验室,吉林四平136000;吉林省拓华生物科技有限公司,吉林四平136000;四平中心人民医院中心实验室,吉林四平136000;吉林省拓华生物科技有限公司,吉林四平136000;四平中心人民医院中心实验室,吉林四平136000;吉林省拓华生物科技有限公司,吉林四平136000【正文语种】中文【中图分类】R446.61【相关文献】1.直接竞争ELISA法检测蜂蜜中氯霉素残留 [J], 刘姚;韦倩妮;王弘;杨金易;孙远明;徐振林;沈兴;李向梅;雷红涛2.ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量 [J], 方玉;冯晓明;奚廷斐;杜晓丹;陈震3.猪尿液中盐酸克伦特罗残留的ELISA法和GC-MS法检测 [J], 杨艳艳;王选年;魏红;邢广旭;赵东;柴书军;张改平4.直接竞争ELISA法检测动物源食品中利巴韦林残留 [J], 刘卫华;沙芳芳;李润磊;王鑫伟;王向红5.应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白 [J], 李长贵;周铁群;王剑锋;邱平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

附录VIII F 牛血清白蛋白残留量测定法
本法系用酶联免疫法测定供试品中牛血清白蛋白（BSA）含量量，以判断供试品中BSA残残留量是否符合规定的检测方法。

以牛血清白蛋白标准品为标准，采用直线回归方法计算供试品中牛血清白蛋白含量。

供试品溶液的制备供试品如为冻干剂型，检测前应按标示量复溶后震荡混匀，室温静置30分钟，检测前应再次震荡混匀。

供试品如为液体剂型可直接用于检测。

采用试剂盒提供的供试品稀释液稀释供试品，供试品应至少进行两个稀释度测定，每个稀释度做双孔平行测定。

测定BSA含量的容器具应专用，防止实验室中BSA污染。

干扰试验制备溶液A（供试品溶液倍比稀释）、B（供试品溶液和30ng/ml 的内控标准品等量混合）和C（30ng/ml的内控标准品倍比稀释）。

其中，供试品溶液BSA含量高于试剂盒测定范围中点时，两倍稀释后制备溶液A和B。

溶液A、B可倍比稀释测定，溶液C应多孔测定，并在试验间均匀添加。

测定法按试剂盒说明书进行。

试剂盒标准品的吸光度值（A值）、内控参考品测定值、标准品线性相关系数、双孔测定吸光度值（A值）均应在试剂盒要求范围内，试验有效。

以试剂盒提供的标准品吸光度值（A值）和浓度制定标准曲线，根据供试品的A值计算供试品中BSA含量，按试剂盒说明书要求判定最终结果。

供试品测定时，低稀释度A值明显低于高稀释度A值时可能存在HOOK效应或操作失误，需重试或调整稀释倍数进行检测。

首次应用该试剂盒的供试品应进行干扰试验。

干扰试验中B－A值应在C值测定的95％可信区间内。

检测疫苗中小牛血清残存量ELISA试剂盒的研制刘颖;牟忠梅;童军;吴迪平;王冬倩;李勇【期刊名称】《中国生物制品学杂志》【年(卷),期】2004(17)1【摘要】目的建立一种简便、灵敏、特异、准确的疫苗中小牛血清残存量检测方法。

方法采用ELISA双抗体“夹心法” ,即固相载体上包被特异性抗小牛血清抗体 ,加入待测样品 ,反应后再加入酶标记抗小牛血清抗体 ,经显色后测定。

结果固相载体最适包被抗体的量为1μg/孔 ,反应体系的pH为6 .8～ 7.2 ,两步反应的最佳时间各为 1h ,最适温度为37℃。

检测的最适抗原 (小牛血清 )范围为 2 0～ 10 0ng/ml,该试剂盒的灵敏度为 3ng/ml ,变异系数CV(n =2 8孔 /次 )平均为 5 .7%。

经检测 6批疫苗的结果与放免结果相符合。

结论该法特异性强 ,灵敏度高。

【总页数】2页(P45-46)【关键词】疫苗;小牛血清残存量;ELISA;试剂盒;细胞培养;生产工艺【作者】刘颖;牟忠梅;童军;吴迪平;王冬倩;李勇【作者单位】长春博德生物技术有限责任公司【正文语种】中文【中图分类】R392-33【相关文献】1.快速检测人血清可溶性CD40配体ELISA试剂盒的研制及评价 [J], 包品红;徐邦牢;贝春花;马为;王蓉;雷秀霞2.研制的间接N-ELISA试剂盒对血清样品IBV抗体的检测和分析 [J], 孙新宽;莫秀娟;何怡宁;宋丽丽;吴翠兰;磨美兰;韦平3.两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对疫苗免疫猪血清抗体检测的比较试验 [J], 张东东;宁宜宝;刘灿;龚文芝;徐璐;张玉杰;范学政4.ELISA定量检测疫苗中小牛血清残余量 [J], 张艳;李忠云5.三种检测猪瘟疫苗中牛血清蛋白含量的ELISA试剂盒的性能对比 [J], 曹玉美;方茜;陆江;孙如水;孙龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。