临床基因扩增PCR实验室质量手册的书写教学文案

附件2临床基因扩增（PCR）诊断实验室工作规范(试行）为使基因扩增诊断技术规范有效的用于临床，保证检测质量，更好地为临床疾病的诊疗服务,特制定本规范.1．临床基因扩增实验室的设置：和仪器设备临床PCR实验室应分为四个隔开的工作区域，每一区域都应有专用的仪器设备。

即1）试剂贮存和准备区；2)标本制备区;3）扩增反应混合物配制和扩增区和的扩增产物分析区.如使用扩增和产物检测同时完成的荧光定量PCR方法或全自动分析仪如Cobas－T(Anplicor)等，则3）和4)两个区可合并。

与上述特定实验区有关的各个房间必须有明确的标记，以避免不同工作区内的设备物品如加样器、试剂等的移出或不同的工作区间发生混淆。

进入各个工作区必须遵循一严格的）顺序，只能按单一方向进行，即从试剂贮存和准备区～标本制备区~扩增反应混合物配制和扩增区～扩增产物分析区。

不同的工作区必须使用不同的工作服，可以不同的颜色来区别.此外，当工作人员离开各工作区时，不得将各区特定的工作服带出。

1．l．试剂贮存和准备区本区用于贮存溶液的制条、溶液的分装和主反应混合液的制各。

本区仪器设备配置:（l) 4 冰箱和一20 冰柜；（2）混匀器；（3)微量加样器若干支（覆盖1～1000pl）；（5）专用工作服和工作鞋;（6）专用办公用品；（7）消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离.心管和加样器吸头(带滤心）；（8）可移动紫外灯（近工作台面）.1．2．标本制备区标本贮存、核酸提取及贮存均在本区内进行。

RNA测定时的单键。

cDNA合成也在本区进行。

本区仪器设备自己置：( l）4冰箱、－20 或-70 冰柜三( 2)高达台式冷冻离心机；（3)混匀器;（4）水浴箱或加热模块；（5）微量如排器若干支（覆盖l～1000μl）;(6）专用工作服和工作鞋;（7）专用办公用品；（8）消耗品：一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的部心管和加样器吸头(带滤心）;（9)可移动紫外灯(近工作台面）；（10)超净工作台；（11)超声波水浴（处理大分子DNA适用）.1．3．扩增反应混合物配制和扩增区模板材料（来自标本制备区）和主反应混合液（来自试剂贮存和准备区）的加入以及扩增反应等专门在本二．作区内近行。

临床基因扩增实验室质量手册编写人:审核人：批准人：启用日期：年月日XXXXXXXX 医院XXXXXX院PCR实验室质量手册目录授权书为确保检验科分子扩增实验室的运作符合《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》,现授权给本院检验科负责本院的分子扩增医学检验工作。

由此引起的法律责任由法人单位承担。

授权给检验科主任负责检验科分子扩增实验室的日常运作和质量管理体系的有效运行。

本院对检验结果的公正性、独立性不进行不恰当的干涉,同时要求院属各相关部门及科室对检验科的工作予以配合。

院长签字：年月日授权书为确保检验科分子扩增实验室的运作符合《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》，现授权给负责检验科分子扩增实验室的日常运作和质量管理体系的有效运行。

检验科主任签字：年月日批准页XXXXXXXX 院检验科临床基因扩增实验室质量管理体系文件经实际运行, 现定稿批准通过,并从即日起开始实施。

实验室名称：XXXXXXXXXXX院临床基因扩增实验室手册标题: 质量体系手册生效日期：年月日编号：持有人:XXXXXXXXXXX院检验科临床基因扩增实验室受控状态：受控批准人:年月日修改页制定日期：2020年5月10日PCR-ZLSC-05 质量体系概述修改日期：2020年6月19日质量体系概述1.1质量体系管理文件编写依据依据卫生部下发的《临床基因扩增实验室工作规范》、《临床基因扩增实验室基本设置标准》编制。

1.2质量体系管理文件架构组成《临床基因扩增检验实验室质量管理体系文件》由质量手册、程序文件、标准操作和记录等4个部分构成1.3质量体系管理文件编写目的勾通意图、统一行动,有利于质量体系的实施、保持和改进。

规范临床基因检验工作行为,切实提高检验质量,更好地为临床诊疗和患着服务切实提高检验质量1.4公正性声明XXXXXXXXX院检验科临床基因扩增实验室接受每一份检验申请合同后, 秉承科学求实、公平公正的原则进行医学检验,签发的检验报告真实可信检测数据不受内在原因和外部压力的干扰。

目录实验室公正性说明修订页第一章质量方针分子生物实验室组织结构图分子生物实验室设置平面图第二章管理程序文件程序管理文件编码目录JS-LJ-SMP0000-000 实验室内务管理程序JS-LJ-SMP0001-000 实验室人员配置及培训程序JS-LJ-SMP0002-000 实验室质量控制管理程序JS-LJ-SMP0003-000 仪器设备管理程序JS-LJ-SMP0004-000 临床标本的管理程序JS-LJ-SMP0005-000 实验室生物防护与安全管理程序JS-LJ-SMP0006-000 实验室文件、记录的管理程序JS-LJ-SMP0007-000 实验耗材购买、验收、储放程序JS-LJ-SMP0008-000 抱怨处理程序JS-LJ-SMP0009-000 仪器设备校准程序JS-LJ-SMP0010-000 实验室检测结果报告程序JS-LJ-SMP0011-000 检验过程中发生故障时的应急处理程序JS-LJ-SMP0012-000 实验室清洁消毒程序JS-LJ-SMP0013-000 文件修改程序JS-LJ-SMP0014-000肿瘤分子检测实验室标准操作规程文件编码目录JS-LJ-SOP0000-000 石蜡包埋组织DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0001-000 石蜡包埋组织样本RNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0002-000 血液DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0003-000 口腔拭子/唾液DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0004-000 组织DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0005-000组织RNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0006-000 反转录标准操作流程JS-LJ-SOP0007-000 基因mRNA表达检测标准操作规程JS-LJ-SOP0008-000 EGFR基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0009-000 KRAS基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0010-000 BRAF基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0011-000 PDGFRA基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0012-000 叶酸基因多态性 Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0013-000 基因SNP Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0014-000 1p19q LOH 标准操作规程JS-LJ-SOP0015-000 MGMT甲基化标准操作规程JS-LJ-SOP0016-000JS-LJ-SOP0017-000 样本脱包、分类、编号、登录、发放标准操作规程临床标本采集、验收、拒收标准操作规程JS-LJ-SOP0018-000 临床标本保存标准操作规程JS-LJ-SOP0019-000 试剂质检标准操作规程JS-LJ-SOP0020-000 实验结果有效性判断标准操作规程JS-LJ-SOP0021-000 室内质量控制标准操作规程JS-LJ-SOP0022-000 室间质量评价标准操作规程JS-LJ-SOP0023-000 主要仪器使用、维护、校准操作规程JS-LJ-SOP0024-000 实验室废弃物处理程序JS-LJ-SOP0025-000 申请单必须信息JS-LJ-SOP0026-000 肿瘤个体化检测样本采集注意事项JS-LJ-SOP0027-000 叶酸基因检测样本采集注意事项JS-LJ-SOP0028-000 检测报告标准操作规程JS-LJ-SOP0029-000修订页修订序号修订的章节条款简要修订内容批准人批准日期第一章质量方针质量方针题目：质量方针起草：日期：审核：日期：编号：JS-LJ-ZLC0001-000 批准：日期：颁发部门：技术部生效日期：分发部门：技术部临床基因扩增检验实验室是严格按照卫生部、山东省临床基因扩增实验室规范化、标准化要求进行管理与操作，我中心的质量方针为：公正、科学、准确、高效我们的检验工作必须做到：行为公正—任何情况下，不被各种利益所驱动，客观公正、独立诚实地开展检验工作。

目录实验室公正性说明修订页第一章质量方针分子生物实验室组织结构图分子生物实验室设置平面图第二章管理程序文件程序管理文件编码目录JS-LJ-SMP0000-000 实验室内务管理程序JS-LJ-SMP0001-000 实验室人员配置及培训程序JS-LJ-SMP0002-000 实验室质量控制管理程序JS-LJ-SMP0003-000 仪器设备管理程序JS-LJ-SMP0004-000 临床标本的管理程序JS-LJ-SMP0005-000 实验室生物防护与安全管理程序JS-LJ-SMP0006-000 实验室文件、记录的管理程序JS-LJ-SMP0007-000 实验耗材购买、验收、储放程序JS-LJ-SMP0008-000 抱怨处理程序JS-LJ-SMP0009-000 仪器设备校准程序JS-LJ-SMP0010-000 实验室检测结果报告程序JS-LJ-SMP0011-000 检验过程中发生故障时的应急处理程序JS-LJ-SMP0012-000 实验室清洁消毒程序JS-LJ-SMP0013-000 文件修改程序JS-LJ-SMP0014-000肿瘤分子检测实验室标准操作规程文件编码目录JS-LJ-SOP0000-000 石蜡包埋组织DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0001-000 石蜡包埋组织样本RNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0002-000 血液DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0003-000 口腔拭子/唾液DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0004-000 组织DNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0005-000组织RNA提取标准操作规程JS-LJ-SOP0006-000 反转录标准操作流程JS-LJ-SOP0007-000 基因mRNA表达检测标准操作规程JS-LJ-SOP0008-000 EGFR基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0009-000 KRAS基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0010-000 BRAF基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0011-000 PDGFRA基因突变Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0012-000 叶酸基因多态性 Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0013-000 基因SNP Q-PCR 标准操作规程JS-LJ-SOP0014-000 1p19q LOH 标准操作规程JS-LJ-SOP0015-000 MGMT甲基化标准操作规程JS-LJ-SOP0016-000JS-LJ-SOP0017-000 样本脱包、分类、编号、登录、发放标准操作规程临床标本采集、验收、拒收标准操作规程JS-LJ-SOP0018-000 临床标本保存标准操作规程JS-LJ-SOP0019-000 试剂质检标准操作规程JS-LJ-SOP0020-000 实验结果有效性判断标准操作规程JS-LJ-SOP0021-000 室内质量控制标准操作规程JS-LJ-SOP0022-000 室间质量评价标准操作规程JS-LJ-SOP0023-000 主要仪器使用、维护、校准操作规程JS-LJ-SOP0024-000 实验室废弃物处理程序JS-LJ-SOP0025-000 申请单必须信息JS-LJ-SOP0026-000 肿瘤个体化检测样本采集注意事项JS-LJ-SOP0027-000 叶酸基因检测样本采集注意事项JS-LJ-SOP0028-000 检测报告标准操作规程JS-LJ-SOP0029-000修订页修订序号修订的章节条款简要修订内容批准人批准日期第一章质量方针质量方针题目：质量方针起草：日期：审核：日期：编号：JS-LJ-ZLC0001-000 批准：日期：颁发部门：技术部生效日期：分发部门：技术部临床基因扩增检验实验室是严格按照卫生部、山东省临床基因扩增实验室规范化、标准化要求进行管理与操作，我中心的质量方针为：公正、科学、准确、高效我们的检验工作必须做到：行为公正—任何情况下，不被各种利益所驱动，客观公正、独立诚实地开展检验工作。

pcr实验室质量管理手册PCR实验室在生物医学和生物技术领域发挥着至关重要的作用。

作为PCR 实验室的基石，质量管理手册对实验室的运作和结果具有重要影响。

一个完善的质量管理手册能够确保实验室的准确性、可靠性和可追溯性。

同时，健全的质量管理手册也是提高实验室声誉、吸引赞助活动和获得认证所必不可少的。

PCR实验室质量管理手册的制定和实施既是实验室内部管理的需要，也是对外界展示实验室专业精神和质量水平的重要途径。

PCR laboratory plays a crucial role in the field of biomedical research and biotechnology. As the cornerstone of a PCR laboratory, the quality management manual has a significant impact on the operation and results of the laboratory. A well-established quality management manual can ensure the accuracy, reliability, and traceability of the laboratory. At the same time, a robust quality management manual is essential for enhancing the laboratory's reputation, attracting sponsorships, and obtaining certifications. The development and implementation of a PCR laboratory quality management manual are not only necessary for internal management of the laboratory but also an important way todemonstrate the professionalism and quality level of the laboratoryto the outside world.PCR实验室质量管理手册应当包括实验室的管理结构、质量政策、程序规范、质量记录和文件等内容。

基因扩增实验室室内质控SOP背景介绍基因扩增实验室是进行分子生物学实验的关键部门之一，实验的成功与否直接取决于实验环节的各项操作。

其中，室内质控是非常重要的一步，可以通过它来保证实验结果的准确性和可靠性。

实验器材和试剂实验器材•PCR仪•冰箱•显微镜•离心机•电泳仪试剂•模板DNA•Taq DNA聚合酶•反应缓冲液•MgCl2•引物A和B•去离子水• 1.5%琼脂糖凝胶•TAE缓冲液实验操作1. 来源验证将样品的来源进行验证，确认样品的纯度和完整性，确保样品可以满足实验的要求。

2. 模板DNA提取从样品中提取模板DNA，并利用浓度计进行测量。

3. PCR反应体系制备按照以下比例准备PCR反应液：•模板DNA：1 μL•引物A和B：各0.5 μL•反应缓冲液：5 μL•MgCl2：2.5 mM•Taq DNA聚合酶：0.25 μL•去离子水：剩余将上述液体混合，并轻轻摇晃混匀，最终PCR反应液体积为10 μL。

4. PCR条件设定操作实验室的PCR仪将其集中温度设定为95°C，保温10分钟，在每个循环中，依照以下程序进行操作：•94°C，30秒•55°C，30秒•72°C，1分钟程序持续30个循环后，将PCR反应停止。

5. PCR产物检测将反应棒插入PCR反应液中，将其放在冰箱中静止降温，待其停止运行之后，检查PCR反应的扩增效果，观察PCR产物的大小和明显程度。

6. PCR产物凝胶电泳制备1.5%琼脂糖凝胶，使用TAE缓冲液将琼脂糖凝胶浸泡。

将PCR产物和分子量标准物放入琼脂糖凝胶槽中，然后进行电泳检测。

7. 结果分析在电泳图上，观察PCR产物的长度和亮度，对PCR反应的结果进行初步分析。

本实验主要介绍了基因扩增实验室内的PCR反应操作，以及PCR反应结果的检测和分析，以确保实验结果的准确性和可靠性。

通过完整的操作流程，可以在实验中质量控制得到保障，最终获取准确、可靠的实验数据。

PCR实验室质量体系文件的编写湖南省临床检验中心罗识奇一、质量体系文件的含义：质量体系文件是实验室检验工作的依据，是描述实验室质量保障工作的一整套文件，而且它应满足质量体系有效运行的需要。

1、质量体系文件具有以下特点：1.1 法规性：经批准实施的质量体系文件具有法规性，必须执行；1.2 适应性：所有文件规定都以最实际，最有效的要求加以确定，以达到适用的目的；1.3 唯一性：一个机构只有唯一的质量体系文件系统，一项质量活动只能规定唯一的程序；1.4 见证性：质量体系文件是质量体系运行的见证。

2、质量体系文件的编写原则：2.1 系统协调原则：文件上下层之间应相互衔接，相互协调，不应互相矛盾，要构成一个有机整体；2.2 科学合理原则：文件不是对质量体系的简单描述，而是要依据卫生部关于《临床基因扩增检验实验室管理办法》（以下简称《办法》）及中华人民共和国国家标准《检测和校准实验室能力通用要求》（ISO导则1 7025－1999）的有关规定，结合本实验室工作特点和管理现状，作到科学、合理、有效指导临床基因扩增检验工作；2.3 可操作实施原则：编写质量体系文件的目的在于贯彻实施，指导实验室检验工作，所有编写的质量体系文件始终要考虑到可操作性，便于实施、检查、记录、追溯；2.4 文件的装订应是活页的：质量体系是动态的，以便发现问题，便于修改；2.5 文件应为实验室人员方便地得到，并有效地使用。

3、质量体系文件的内容：3.1 质量手册：按评审准则描述的质量体系；3.2 程序文件：描述质量体系所涉及到的各个部门的职能活动，管理和各项具体检测程序；3.3 质量计划：质量目标、计划修订和完成的规定；3.4 质量记录：表格、报告、各类记录。

二、基因诊断实验室质量手册书写的基本格式：基因诊断实验室质量体系文件可按基因诊断实验室质量手册形式命名。

1、封面：实验室名称和标志，质量手册的标题、编号、发行版次、密级及发放登记号；2、批准页：批准人签名、生效日期、持有人或部门（分受控和不受控两类）。

临床基因扩增实验室标准操作程序编写人：审核人：批准人：启用日期：年月日XXX医院前言为使基因扩增检验技术有效地应用于临床，更好地为疾病的预防、诊断和治疗服务，保证检验质量，严格按照《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号文)附件《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》要求，制定本实验室管理文件，本实验室任何实验均需遵循本管理文件中规定执行。

临床基因扩增检验技术指以临床诊断治疗为目的，以扩增检测DNA或RNA 为方法的检测技术，快速、可靠、准确、安全、收费合理方式下，以规范的操作对临床标本进行分析。

本室采用经国家药品监督管理局批准的试剂盒。

开展的检测项目：1、乙型肝炎病毒（HBV）核酸定量检测2、人巨细胞病毒（HCMV）核酸定量检测标准操作程序文件1.目的：为了分子实验室的规范管理，特制订本程序。

2.范围：分子实验室。

3.职责：3.1临床PCR检验实验室工作人员共同遵守、相互督促。

3.2因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、样本准备区、PCR扩增区）的非本室人员需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行。

4.实验室设置：4.1实验室设计为：专用走廊、试剂准备区、样本制备区、PCR扩增区组成。

三个区域各有一个缓冲间。

（见设置图）4.2三个工作区各配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。

试剂准备区—白色、样品处理区—兰色、基因扩增区—红色。

4.3工作区的配置、功能、内务管理制度见各工作区文件。

4.4 实验室须严格遵守试剂区→样本区→扩增区的流向制度，严禁误入和逆进入各工作区。

4.5实验室流程：1）PCR室工作人员上班后，由过道走廊→试剂区→样本区→扩增区流向，打开排风、光源、温控装置。

2）标本接收区接收标本、验收登记后离心（不开盖），由内走廊入口将标本送入标本制备区缓冲间（标本制备区内门关闭）。

3）PCR工作人员按从试剂区→样本区→扩增区更衣开始流水操作。

临床基因扩增PCR实验室质量手册的书写许斌（江苏省临床检验中心）1 质量管理的历史1950年代临床实验室开始质量控制（Quality Control,QC）;1980年代参照工业的GMP管理思路建立良好实验室实践准则（Good Laboratory Practice,GLP）；进入质量保证（Quality assurance,QA）；1990年代实验室引入质量体系认证及实验室认可制度，实现全面质量管理（TQM，Total Quality Management）。

质量体系认证——ISO9000（2000版）；实验室认可——ISO/IEC标准17025-2000《校准和检测实验室资格的通用要求》；ISO/DIS标准15189-1999“医学实验室的质量管理。

”2 美国临床实验室认证•发证机构：HCFA（Health Gare Financing Administrations）,卫生保健署•认证依据，CLOA38，行业认可，强制，体系+能力•认证中介机构：*JCAHO（Joint Commission on Accreditation of Healthcare Organizations）卫生机构认可联合委员会*CAP(College of American Pathologist)美国病理家学会*COLA（Commission on Office Laboratory Accred-itation）医生实验室认可委员会3 我国实验室合格评定•认可*依据：ISO/IEC 17025，15189*国家评审，自愿，体系+能力•认证*依据：ISO 9000：2000版*中介机构，自愿，体系•行业技术验收*《临床实验室管理办法》，《江苏省医院检验科建设与管理规范》*省、市临床检验中心，强制，体系+能力4 PCR验收意义及验收依据2002年开始的PCR实验室验收工作开创临床检验技术准入的先河、推动临床实验室标准化建设、规范检测市场、建立医疗事故预防机制。