miR-486在肺鳞癌诊断和预后中的价值分析
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《肺鳞癌特异性预后标志物探索与鉴定》篇一一、引言肺鳞癌是一种常见的肺癌类型,其发病率和死亡率均较高。
由于肺鳞癌的异质性较强,其预后往往受多种因素影响。
因此,寻找具有特异性的预后标志物对于肺鳞癌的治疗和预后评估具有重要意义。
本文旨在探索并鉴定肺鳞癌的特异性预后标志物,为临床诊断和治疗提供新的思路和方法。
二、研究背景与目的随着肺癌发病率逐年上升,寻找有效的治疗手段和预后标志物已成为当前研究的热点。
肺鳞癌作为肺癌的一种主要类型,其预后标志物的探索与鉴定对于改善患者生存率和生活质量具有重要意义。
目前,虽然已有一些关于肺鳞癌预后标志物的研究报道,但仍需进一步深入探索,以提高临床诊断的准确性和治疗的有效性。
三、研究方法本研究采用多学科交叉的研究方法,综合运用分子生物学、生物统计学、生物信息学等手段,对肺鳞癌的特异性预后标志物进行探索与鉴定。
具体步骤如下:1. 收集肺鳞癌患者的临床样本及资料,包括患者的基本信息、病理特征、治疗方案及预后情况等。
2. 对收集的样本进行基因检测和蛋白质组学分析,筛选出与肺鳞癌预后相关的基因和蛋白质。
3. 利用生物信息学方法对筛选出的基因和蛋白质进行功能分析和互作网络构建,进一步明确其与肺鳞癌预后的关系。
4. 通过统计学方法对基因和蛋白质的表达水平与患者预后进行关联分析,筛选出具有特异性的预后标志物。
5. 对筛选出的标志物进行验证性研究,包括实时荧光定量PCR、免疫组化等方法,验证其在肺鳞癌中的表达情况及其与预后的关系。
四、研究结果经过上述研究方法,我们成功筛选出了一系列与肺鳞癌预后相关的基因和蛋白质。
其中,某些基因在肺鳞癌组织中的高表达与患者的不良预后显著相关,而某些蛋白质的低表达则与患者的预后不良密切相关。
通过进一步的功能分析和互作网络构建,我们发现这些基因和蛋白质在肺鳞癌的发生、发展过程中起到了重要作用。
五、讨论本研究成功探索并鉴定了一系列肺鳞癌的特异性预后标志物,为临床诊断和治疗提供了新的思路和方法。
肺癌诊治和预后判断分子标志物miRNA吉丛;喻长远(综述);陈志华(审校)【期刊名称】《中国肿瘤临床》【年(卷),期】2014(000)020【摘要】肺癌是目前全世界发病率第一、死亡率最高的肿瘤。
肺癌的早期诊断和有效治疗是提高患者生存率的关键。
miR-NA是一类内源性、高度保守的非编码小分子RNA,在肺癌的发生、发展中起着重要作用。
近年来,肺癌诊断、治疗和预后判断分子标志物miRNA的研究进展迅速,本文就miRNA作为肺癌早期诊断、预后判断和疗效预测分子标志物的研究进展,以及目前存在的问题做一综述。
%Lung cancer has the highest morbidity and mortality rate among malignant tumors. Early diagnosis and effective treat-ment are the keys to improving the survival of lung cancer patients. A type of endogenous, highly conserved, non-coding small mole-cule RNA (i.e., miRNA) wasfound to play an important role in the occurrence and development of this disease. Research on this molec-ular marker miRNA for the diagnosis, treatment and prognosis of lung cancer has rapidly progressed. This paper reviews the research work on miRNA as a molecular marker in the early diagnosis, treatment efficacy, and prognosis of lung cancer and explores some ques-tions related to this disease.【总页数】4页(P1333-1336)【作者】吉丛;喻长远(综述);陈志华(审校)【作者单位】北京化工大学生命科学与技术学院北京市100029;北京化工大学生命科学与技术学院北京市100029;中日友好医院,临床医学研究所生物化学与分子生物学研究室【正文语种】中文【相关文献】1.循环 miRNA 在非小细胞肺癌诊断治疗及预后判断中的价值 [J], 高俊;胡斌;段影;李振源;江其生;吕进2.miRNA在肺癌诊断、治疗及预后判断中的应用进展 [J], 王新颖;顾玉海3.miRNA:甲状腺癌诊治和预后评估的新型分子标志物 [J], 于远东4.非小细胞肺癌早期诊断的潜在生物标志物:血浆miRNA-23a和miRNA-451 [J], CUI Shengjin;CAO Zhaopeng;GUO Weiquan;YU Huijun;HUANG Rong;WU Yunfeng5.血清miRNAs作为肺结核病新分子标志物的筛选 [J], 陈宇因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
《肺鳞癌特异性预后标志物探索与鉴定》篇一摘要:本文旨在探讨肺鳞癌特异性预后标志物的探索与鉴定。
通过综述近年来的相关文献和实验研究,我们深入分析了肺鳞癌的发病机制、治疗方法和预后评估现状。
在此基础上,本文重点介绍了新型标志物的发现、验证及临床应用前景,以期为肺鳞癌的早期诊断、治疗及预后评估提供新的思路和方法。
一、引言肺鳞癌是一种常见的肺癌类型,其发病率和死亡率均较高。
目前,尽管医学界在肺鳞癌的诊断和治疗方面取得了显著进展,但预后仍存在较大差异。
因此,寻找特异性预后标志物,以准确评估患者病情、指导治疗和预测预后,成为当前研究的热点。
二、肺鳞癌概述肺鳞癌是一种起源于支气管上皮细胞的恶性肿瘤,其发病机制复杂,与环境因素、遗传因素等密切相关。
肺鳞癌的临床表现多样,早期症状不明显,往往容易被忽视。
目前,手术、放疗、化疗及靶向治疗是肺鳞癌的主要治疗方法,但预后效果因个体差异而异。
三、传统预后标志物的局限性传统上,肺鳞癌的预后评估主要依赖于肿瘤大小、淋巴结转移情况及病理分级等指标。
然而,这些指标的评估主观性较强,且无法全面反映肿瘤的生物学特性。
因此,寻找更为准确、客观的预后标志物成为当务之急。
四、新型特异性预后标志物的探索近年来,随着分子生物学和基因组学技术的发展,越来越多的新型特异性预后标志物被发现在肺鳞癌中发挥作用。
这些标志物包括基因突变、蛋白表达异常等。
通过对这些标志物的深入研究,有望为肺鳞癌的早期诊断、治疗及预后评估提供新的思路和方法。
五、新型特异性预后标志物的验证与临床应用(一)基因突变分析:通过对肺鳞癌患者进行基因突变检测,发现某些特定基因的突变与患者预后密切相关。
例如,某些驱动基因的突变可能导致肿瘤对特定药物的敏感性增强,从而为个体化治疗提供依据。
(二)蛋白表达分析:通过对肿瘤组织中特定蛋白的表达水平进行检测,可以反映肿瘤的生物学行为和患者的预后情况。
例如,某些与肿瘤增殖、侵袭和转移相关的蛋白表达水平越高,患者预后越差。
《miR-486通过靶向PTEN调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制研究》篇一一、引言近年来,糖尿病心肌病已成为糖尿病患者的常见并发症之一,其发病机制复杂,涉及多种基因和信号通路的调控。
miR-486作为一种重要的微小RNA,在细胞凋亡、自噬等生物学过程中发挥着关键作用。
PTEN基因作为一种重要的肿瘤抑制基因,在细胞凋亡和信号转导中具有重要作用。
本研究旨在探讨miR-486通过靶向PTEN调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制,为糖尿病心肌病的预防和治疗提供新的思路和方法。
二、研究方法1. 细胞培养与处理本实验采用H9c2心肌细胞系,通过不同浓度的葡萄糖处理模拟高糖环境,并观察细胞凋亡情况。
2. miR-486和PTEN的表达检测利用实时荧光定量PCR技术检测H9c2心肌细胞中miR-486和PTEN的表达水平。
3. 生物信息学分析通过生物信息学软件预测miR-486与PTEN的靶向关系,并构建相应的调控网络。
4. 细胞功能实验通过流式细胞术、Western Blot等技术,观察miR-486和PTEN对H9c2心肌细胞凋亡的影响。
三、结果1. 高糖环境下H9c2心肌细胞凋亡情况在高糖环境下,H9c2心肌细胞的凋亡率显著增加,表现为细胞形态改变、核固缩等特征。
2. miR-486和PTEN的表达变化高糖环境下,H9c2心肌细胞中miR-486表达水平升高,而PTEN表达水平降低。
这表明miR-486与PTEN的表达可能存在负相关关系。
3. miR-486与PTEN的靶向关系验证通过生物信息学分析和实验验证,发现miR-486可以与PTEN的3'UTR区域结合,从而抑制PTEN的表达。
这表明miR-486通过靶向PTEN调控细胞功能。
4. miR-486和PTEN对H9c2心肌细胞凋亡的影响过表达miR-486可促进H9c2心肌细胞的凋亡,而抑制PTEN 的表达也可导致相似的结果。
相反,抑制miR-486的表达或过表达PTEN可减轻高糖环境下的细胞凋亡。
《miR-486通过靶向PTEN调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制研究》篇一摘要:本文探讨了miR-486在H9c2心肌细胞中通过靶向PTEN(磷酸酶和张力蛋白同源基因)调控高糖诱导细胞凋亡的机制。
通过实验研究,我们揭示了miR-486与PTEN之间的相互作用关系,并进一步探讨了这一过程对心肌细胞凋亡的影响。
一、引言近年来,糖尿病心肌病已成为心血管疾病领域的重要研究课题。
高糖环境对心肌细胞的损伤机制复杂,其中microRNA (miRNA)的异常表达在其中扮演了关键角色。
miR-486作为一种重要的调控分子,已被证实与多种细胞凋亡过程相关。
本研究旨在探讨miR-486如何通过靶向PTEN来调控高糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡。
二、材料与方法1. 材料:本实验采用H9c2心肌细胞系、高糖培养基、相关试剂和设备等。
2. 方法:(1)细胞培养与处理:H9c2细胞在特定条件下培养,并分别进行高糖处理和miR-486的转染处理。
(2)RNA提取与实时荧光定量PCR(RT-qPCR):用于检测miR-486和PTEN的mRNA水平。
(3)Western blot:用于检测PTEN蛋白表达水平及磷酸化状态。
(4)细胞凋亡检测:采用流式细胞术等技术检测细胞凋亡情况。
三、实验结果1. miR-486和PTEN的表达变化:高糖处理后,H9c2细胞中miR-486表达水平显著升高,而PTEN的mRNA和蛋白表达水平则相应降低。
2. miR-486与PTEN的相互作用:通过生物信息学分析和双荧光素酶报告实验,证实了miR-486能够直接靶向PTEN的3'UTR区域,从而抑制其表达。
3. miR-486对H9c2细胞凋亡的影响:过表达miR-486后,H9c2细胞的凋亡率显著增加,而抑制miR-486的表达则可降低高糖诱导的细胞凋亡。
4. PTEN在miR-486诱导的细胞凋亡中的作用:当同时抑制PTEN的表达时,过表达miR-486所引起的细胞凋亡增加程度减弱,表明PTEN在miR-486诱导的凋亡过程中发挥关键作用。
据世界卫生组织最新统计数据[1],肺癌年新发病例数超过210万,致死人数年超过180万人。
《中国肿瘤学年报》[2]2019年发布的信息表明,预计至2020年,我国肺癌的发病人数将突破80万,肺癌致死人数将接近70万。
虽然肺癌的治疗相较其它恶性肿瘤具有更多样化的选择,尤其是靶向治疗和免疫治疗等治疗手段的革新,使肺癌的生存期不断得以突破,但是因为很多患者确诊时已处于中晚期,错失手术良机,所以肺癌的总体预后依然很差[3]。
miRNA是一类由18-22个核苷酸构成的非编码短链RNA,虽然其并不直接参与基因编码功能但是人体内60%以上基因表达都受到miRNA的调控。
miRNA调控基因表达的机制在于其可以和靶基因的信使RNA(mRNA)的3’非编码区域(UTR)结合,抑制mRNA的翻译或者直接促进mRNA的降解,从而在转录后水平发挥基因沉默的效应[4]。
miRNA的基因调控作用贯穿人体细胞从分裂到分化到恶变和凋亡等一系列过程,参与胚胎发育,个体生长,肿瘤形成和肿瘤消亡全过程。
已证实一些特异的miRNA对于肺癌的发生、发展和转移等过程起着关键性的作用[5]。
近年来,不少研究均发现血清miRNA的表达水平和肺癌的诊断和预后解读密切相关,甚至有望单独或者联合现有标志物作为肺癌诊断和预后判断的新方法,而肺癌的早期诊断对于提高患者的生存期具有重要意义[6],本文就血清miRNA用于肺癌诊断及预后判断的最新进展进行综述。
1血清miRNA的生物学与检测学研究现状1.1血清miRNA的生物学来源既往研究[7]认为循环miRNA尤其是血浆miRNA源于癌细胞在凋亡或者坏死之后细胞结构瓦解胞浆及胞核内的分子释放入血,或者经过巨噬细胞吞噬消化后残余的分子游离于血液之中,均属于被动释放入血的一种。
部分研究[8]表明,血清中释放的游离miRNA分子可能是细胞的一种主动分泌行为所致:剪切成熟的miRNA可在胞浆内被亚细胞结构用脂质(包括类脂质)或者脂蛋白包裹,然后主动耗能分泌至细胞外并进入血液。
第59卷 第2期2023年04月青岛大学学报(医学版)J O U R N A LO FQ I N G D A O U N I V E R S I T Y (M E D I C A LS C I E N C E S)V o l .59,N o .2A pr i l 2023[收稿日期]2022-02-28; [修订日期]2023-04-09[基金项目]山东省医务职工科技创新计划项目(2020-23242)[第一作者]王琳娜(1976-),女,硕士研究生,副主任技师㊂[通信作者]王静(1963-),女,副教授,硕士生导师㊂E -m a i l:w l n 315727@163.c o m㊂血清外泌体m i R -486-3p 对非小细胞肺癌早期诊断价值王琳娜1,2,王静1(1 青岛大学基础医学院,山东青岛 266071; 2 山东省慢性病医院(山东省康复中心)检验科)[摘要] 目的 分析血清外泌体m i R -486-3p 对非小细胞肺癌的早期诊断价值㊂方法 选择非小细胞肺癌病人120例为观察组,同期体检健康志愿者120例为对照组,均采集空腹静脉血,磷钨酸钠溶液染色后采用透射电镜观察外泌体形态,W e s t e r nb l o t 方法检测外泌体标志性蛋白C D 81㊁T S G 101表达,实时荧光定量P C R (R T -q P C R )方法检测m i R -486-3p 水平,采用化学发光法检测血癌胚抗原(C E A )㊁糖类抗原125(C A 125)㊁神经元特异性烯醇化酶(N S E )㊁细胞角蛋白19片段(C Y F R A 21-1)水平,绘制受试者工作特征曲线(R O C 曲线)分析血清外泌体m i R -486-3p 诊断非小细胞肺癌的灵敏度和特异度㊂结果 透射电镜观察可见,外泌体呈盘状囊泡样结构,直径为20~300n m ,颗粒状㊂W e s t e r nb l o t 实验鉴定表面标志蛋白C D 81㊁T S G 101证实为外泌体㊂观察组血清C E A ㊁C A 125㊁N S E ㊁C Y F R A 21-1水平均高于对照组(t =10.701~31.406,P <0.01),m i R -486-3p 水平低于对照组(t =17.155,P <0.01);观察组高龄㊁男性㊁有淋巴转移病灶及T NM 分期Ⅲ~Ⅳ期病人的m i R -486-3p 表达水平均低于中青年㊁女性㊁无淋巴转移性病灶及T NM 分期Ⅰ~Ⅱ期病人(t =8.168~19.658,P <0.05)㊂R O C 曲线分析显示,血清外泌体m i R -486-3p 诊断非小细胞肺癌的曲线下面积(A U C )为0.781,95%置信区间(C I )为0.724~0.839,灵敏度为51.67%,特异度为98.33%,最佳界值为0.945㊂结论 血清外泌体m i R -486-3p 对非小细胞肺癌具有一定的早期诊断价值,血清外泌体m i R -486-3p 表达水平越低,非小细胞肺癌病人恶化程度越高㊂[关键词] 血清;外泌体;m i R -486-3p;癌,非小细胞肺;癌症早期检测[中图分类号] R 730.4 [文献标志码] A [文章编号] 2096-5532(2023)02-0292-04d o i :10.11712/jm s .2096-5532.2023.59.068[开放科学(资源服务)标识码(O S I D )][网络出版] h t t ps ://k n s .c n k i .n e t /k c m s 2/d e t a i l /37.1517.R.20230524.1604.003.h t m l ;2023-05-27 20:46:51V A L U EO FS E R U M E X O S O M A L M I R -486-3P I NE A R L YD I A G N O S I SO FN O N -S M A L LC E L LL U N GC A N C E R WA N GL i n n a ,WA N GJ i n g (S c h o o l o f B a s i cM e d i c i n e ,Q i n g d a oU n i v e r s i t y ,Q i n g d a o 266071,C h i n a )[A B S T R A C T ] O b je c t i v e T o a n a l y z e t h e v a l u e of s e r u me x o s o m a lm i R -486-3p i n t h e e a r l y d i ag n o s i so f n o n -s m a l l c e l l l u n g c a n c e r . M e th o d s At o t a l o f 120p a ti e n t sw i t h n o n -s m a l l c e l l l u n g c a n c e rw e r e s e l e c t e d a s t h e o b s e r v a t i o n g r o u p,a n d a n o t h e r 120h e a l t h y v o l u n t e e r s i n t h e s a m e p e r i o dw e r e s e l e c t e d a s t h e c o n t r o l g r o u p .T h e f a s t i n g v e n o u s b l o o d s a m pl e sw e r e c o l l e c t e d f r o mb o t h g r o u p s a n d s t a i n e dw i t h s o d i u m p h o s p h o t u n g s t a t e s o l u t i o n .T h em o r p h o l o g y o f e x o s o m e sw a s o b s e r v e db y at r a n s m i s s i o ne l e c t r o n m i c r o s c o p e (T E M ).T h ee x p r e s s i o no fb i o m a r k e r sC D 81a n dT S G 101o f e x o s o m e sw a sm e a s u r e db y W e s t e r nb l o t .T h e l e v e l o f m i R -486-3p w a sm e a s u r e db y r e a l -t i m e q u a n t i t a t i v e p o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n .C h e m i l u m i n e s c e n t a s s a y wa su s e dt o m e a s u r e t h e l e v e l s o f c a r c i n o -e mb r y o n ic a n t i g e n (C E A ),c a r b o h yd r a te a n t i g e n125(C A 125),n e u r o n -s p e c if i c e n o l a s e (N S E ),a n dc y t o k e r a t i n 19f r ag m e n t (C Y F R A 21-1).Th e r e c ei v e r o p e r a t o r c h a r a c t e r i s t i c (R O C )c u r v ew a s p l o t t e d t o a n a l y z e t h e s e n s i t i v i t y a n d s p e c i f i c i t y o f s e r u me x o s o m a lm i R -486-3p i n t h e d i a g n o s i s o f n o n -s m a l l c e l l l u n g c a n c e r . R e s u l t s E x o s o m e sw e r e o b s e r v e d b y aTE M w i t h a d i s k -l i k e v e s i c l e s t r u c t u r e a n d a d i a m e t e r o f 20-300n ma n d i n g r a n u l a r s h a pe .T h e s u rf a c em a r k e r p r o t e i n sC D 81a n dT S G 101w e r e c o n f i r m e da s e x o s o m e s b y W e s t e r nb l o t .T h e l e v e l s o f s e r u m C E A ,C A 125,N S E ,a n dC Y F R A 21-1i n t h e o b s e r v a t i o ng r o u p w e r e s i g n i f i c a n t l yhi g h e r t h a n t h o s e i n t h e c o n t r o l g r o u p (t =10.701-31.406,P <0.01);t h em i R -486-3pl e v e l o f t h e o b s e r v a t i o n g r o u p w a s s i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a n t h a t o f t h e c o n t r o l g r o u p (t =17.155,P <0.01);i n t h e o b s e r v a t i o n g r o u p ,t h e e x p r e s s i o n l e v e l s o fm i R -486-3p i n e l d e r l y m a l e p a t i e n t sw i t h l y m p h n o d em e t a s t a s i s a n d t u m o r ,n o d e ,m e t a s t a s i s (T NM )s t a g eⅢ-Ⅳw e r e s i gn i f i -c a n t l y l o w e r t h a n t h o s e i n y o u n g a n dm i d d l e -a g e d f e m a l e p a t i e n t sw i t hn o l y m p hn o d em e t a s t a s i s a n dT N Ms t a g e Ⅰ-Ⅱ(t =8.168-19.658,P <0.05).T h e a r e a u n d e r t h eR O C c u r v e o f s e r u me x o s o m a lm i R -486-3p i n t h e d i a g n o s i s o f n o n -s m a l l c e l l l u n g c a n c e rw a s 0.781,t h e 95%c o n f i d e n c e i n t e r v a lw a s 0.724-0.839,t h e s e n s i t i v i t y w a s 51.67%,t h e s p e c i f i c i t y w a s 98.33%,a n d t h e b e s t c u t -o f f v a l u ew a s 0.945. C o n c l u s i o n S e r u me x o s o m a lm i R -486-3p h a s ac e r t a i nv a l u e i nt h ee a r l y d i a g n o s i so fn o n -s m a l l c e l l l u n gc a n c e r .T h e l o w e r t h e e x p r e s s i o n l e v e l o f s e r u me x o s o m a lm i R -486-3p ,t h eh i g h e r t h e s e v e r i t y o f n o n -s m a l l c e l l l u n g ca n c e r .[K E Y WO R D S ] s e r u m ;e x o s o m e s ;m i R -486-3p;c a r c i n o m a ,n o n -s m a l l -c e l l l u n g ;e a r l y d e t e c t i o no f c a n c e r 肺癌是临床上发病率最高的癌症之一,也是全Copyright ©博看网. All Rights Reserved.2期王琳娜,等.血清外泌体m i R-486-3p对非小细胞肺癌早期诊断价值293球范围内恶性肿瘤死亡的常见原因之一[1]㊂非小细胞肺癌是肺癌中最常见的病理类型,其早期诊断具有一定的难度,且5年生存率较低[2]㊂肺癌发病早期多无典型临床表现,一经发现往往已经发展至中晚期,预后不佳㊂外泌体天然存在于人体体液中,其成分中含有m R N A㊁m i R N A和蛋白质等能够携带重要生物信息的分子,肿瘤源性或肿瘤相关的外泌体含有丰富的生物成分,可作为信号信使参与前列腺癌发生㊁发展㊁进展和转移过程中细胞间通讯,是调节微环境的重要递质[3]㊂由于这些外泌体可以从各种体液中分离出并检测到,已成为肿瘤诊断和预后有潜力的新的生物标记物㊂m i R N A是一种非编码小分子R N A,可调节细胞的增殖㊁分化和凋亡,在肿瘤的诊断㊁预后和治疗中发挥重要作用[4]㊂外泌体中的m i R N A-486-3p在很多恶性肿瘤中均呈现异常表达,如肝癌㊁胰腺癌㊁肺癌或胰腺癌等[5]㊂本研究通过检测并分析非小细胞肺癌病人和健康体检者血清外泌体m i R-486-3p表达水平差异,探究血清外泌体m i R-486-3p对非小细胞肺癌的早期诊断价值㊂现将结果报告如下㊂1资料与方法1.1一般资料2018年10月 2020年9月,选取本院收治的非小细胞肺癌病人120例为观察组,以同期本院体检的健康志愿者120例为对照组㊂观察组男93例,女27例;年龄40~79岁,平均(59.87ʃ10.39)岁㊂病人纳入标准:①经影像学及病理检查确诊为非小细胞肺癌;②意识清楚,无精神系统疾病,认知正常,能够通过语言或行为与他人正常交流㊂排除标准:①肝肾功能严重不全者;②免疫系统疾病病人;③合并其他恶性肿瘤者;④除肺部以外其他恶性肿瘤病人㊂对照组男95例,女25例;年龄38~80岁,平均(60.34ʃ11.27)岁㊂所有对照组受试者影像学检查㊁实验室检测均未见明显异常;意识清醒,无精神系统疾病㊂所有研究对象知情同意且研究通过本院伦理委员会审核批准㊂1.2检测指标及方法采集两组受试者空腹静脉血5m L,以4000r/ m i n离心15m i n,获取血清,应用A u t o2000发光仪(美国,S B I公司)检测血清中癌胚抗原(C E A)㊁糖类抗原125(C A125)㊁神经元特异性烯醇化酶(N S E)及细胞角蛋白抗原片段21-1(C Y F R A21-1)水平㊂应用E x oQ u i c k-T M试剂(美国,S B I公司)提取血清外泌体,按照试剂说明书操作㊂用磷钨酸溶液染色法染色后,透射电镜(O l y m p u s)观察外泌体颗粒形态,纳米颗粒跟踪分析(N T A)技术测定外泌体粒径大小㊂应用W e s t e r n b l o t法检测外泌体表面蛋白标志物C D81和T S G101表达,实时荧光定量P C R (R T-q P C R)方法检测m i R-486-3p水平㊂收集受试者一般资料,对病人手术后肿瘤组织病理学㊁肿瘤病灶最大直径等进行分析㊂1.3统计学方法采用G r a p h P a dP r i s m9软件进行统计学处理㊂计量资料结果以 xʃs表示,组间比较采用t检验;计数资料用百分比或例数表示,数据间比较采用χ2检验;P<0.05表示差异有统计学意义㊂应用M e d-C a l c15.2.2软件绘制受试者工作特征(R O C)曲线,分析血清外泌体m i R-486-3p诊断非小细胞肺癌的灵敏度和特异度㊂2结果2.1血清外泌体的鉴定透射电镜观察显示,外泌体具有脂质双层囊泡结构(图1);N T A技术观察结果显示,外泌体颗粒直径呈单峰正态分布,峰值处颗粒直径约为90n m,颗粒主要分布于20~300n m(图2)㊂W e s t e r nb l o t 检测显示,外泌体表达C D81和T S G101表面标志蛋白(图3)㊂箭头所示为外泌体,磷钨酸溶液染色法染色,放大70000倍㊂图1血清外泌体形态透射电镜观察2.2两组血清检测指标比较观察组血清C E A㊁C A125㊁N S E和C Y F R A21-1Copyright©博看网. All Rights Reserved.294青岛大学学报(医学版)59卷水平均高于对照组(t=10.701~31.406,P<0.01),观察组血清外泌体m i R-486-3p水平显著低于对照组(t=17.155,P<0.01)㊂见表1和图4㊂图2N T A检测外泌体颗粒的直径分布2.3不同病理特征非小细胞肺癌m i R-486-3p表达比较观察组高龄㊁男性㊁有淋巴转移性病灶及T NM 分期Ⅲ~Ⅳ期病人的m i R-486-3p表达水平均低于中青年㊁女性㊁无淋巴转移性病灶及T NM分期Ⅰ~Ⅱ期病人(t=8.168~19.658,P<0.05),而组织学诊断差异无统计学意义(P>0.05)㊂见表2㊂图3W e s t e r nb l o t方法检测外泌体表面标志蛋白C D81以及T S G101表达表1两组间血清检测指标比较(n=120, xʃs)分组m i R-486-3p C E A(ρ/μg㊃L-1)C A125(z/k U㊃L-1)N S E(ρ/μg㊃L-1)C Y F R A21-1(ρ/μg㊃L-1)对照组1.10ʃ0.334.50ʃ2.1110.68ʃ3.6910.11ʃ5.364.70ʃ2.80观察组0.56ʃ0.10*36.98ʃ15.37*25.42ʃ3.58*24.10ʃ11.58*13.47ʃ8.53*与对照组比较,*t=10.701~31.406,P<0.01㊂表2不同病理特征非小细胞肺癌m i R-486-3p表达比较( xʃs)病理特征n m i R-486-3p t P性别19.658<0.001男930.13ʃ0.05女270.65ʃ0.24年龄(岁)8.168<0.001 ȡ60250.17ʃ0.0740~59950.60ʃ0.26T NM分期14.196<0.001 Ⅰ~Ⅱ530.62ʃ0.18Ⅲ~Ⅳ期670.23ʃ0.12淋巴转移性病灶19.574<0.001有540.25ʃ0.08无660.59ʃ0.11组织学诊断1.6490.102腺癌700.53ʃ0.24鳞癌500.61ʃ0.292.4 m i R-486-3p对非小细胞肺癌的诊断效能评估R O C曲线分析显示,血清外泌体m i R-486-3p 诊断非小细胞肺癌的曲线下面积(A U C)为0.781, 95%置信区间(C I)为0.724~0.839,诊断的灵敏度为51.67%,特异度为98.33%,最佳界值为0.945(图5)㊂3讨论肺癌在临床上发病率较高,其病死率居恶性肿瘤首位,其中非小细胞肺癌病人占80%以上[6]㊂很多病人在明确诊断时往往已经发展至中晚期,若早期明确诊断,采取手术等措施综合治疗,5年生存率能够显著提高[7]㊂C E A㊁C A125㊁N S E㊁C Y F R A21-1等肿瘤标志物是常见的肺癌筛查指标,但其灵敏度㊁特异度均较低,无法满足临床需求[8]㊂低剂量螺旋C T具有发现早期病灶的能力,但却容易引起医生对疾病的误判,导致进行一些不必要的治疗;另外,频繁的C T检查也对病人的健康不利[9]㊂其他检查,如支气管病理活检,属于有创检查,病人接受难度较高,对于早期非小细胞肺癌病人的诊断价值比较有限㊂因此,寻找特异度及灵敏度更高的检测方法是肺癌筛查的目标㊂外泌体的本质是一种细胞外囊泡,其体积较小,直径通常介于20~300n m范围内,它们主要由细胞分泌产生,并通过胞吐的方式释放进入各种体液,外泌体可在血液㊁尿液㊁汗液以及脑脊液等多种体液中存在[10]㊂E x o c a r t a数据库显示,已经发现的外泌体超过万种,在各种外泌体中,其组成成分包括蛋白质㊁m R N A㊁m i R N A以及脂质[11]㊂这些成分是体内新陈代谢的重要物质,参与体内的物质交换,因此它们在肿瘤发生的早期即可出现一定的变化,对肿瘤早期诊断以及治疗后病情的评估都有着重要的意义,Copyright©博看网. All Rights Reserved.2期王琳娜,等.血清外泌体m i R -486-3p 对非小细胞肺癌早期诊断价值295图4 两组m i R -486-3p表达比较图5 m i R -486-3p 表达诊断非小细胞肺癌的RO C 曲线已成为肿瘤血清生物标记研究的热点[12]㊂本文研究主要检测血清外泌体中的m i R N A ㊂m i R N A 属于非编码R N A ,能够通过m R N A 的靶向互补作用而达成对基因表达的调控作用㊂目前研究认为,m i R N A 在肿瘤发生发展及转移的过程中有一定的临床作用,这也是癌症治疗中的新思路㊂有研究表明,m i R N A 在恶性肿瘤病人体内多呈异常表达,与多种恶性肿瘤病人的预后关系密切,具有一定的早期诊断价值㊂本文结果显示,观察组血清C E A ㊁C A 125㊁N S E ㊁C Y F R A 21-1的水平均高于对照组,而血清外泌体m i R -486-3p 水平低于对照组,提示检测肿瘤标志物能一定程度筛选出肺癌病人㊂T NM 是分析肺癌的病理类型㊁浸润程度等方面的常用分型方式㊂本文研究结果显示,观察组高龄㊁男性㊁有淋巴转移性病灶及T NM 分期Ⅲ~Ⅳ期病人的m i R -486-3p 表达水平均低于中青年㊁女性㊁T NM 分期Ⅰ~Ⅱ期㊁无淋巴转移性病灶者㊂提示肿瘤细胞恶化程度越高,m i R -486-3p 表达水平可能越低㊂综上所述,非小细胞肺癌在肺癌中比较常见,预后较差,早期诊断并及时予以治疗措施,能够延长病人生存时间㊂血清外泌体m i R -486-3p 属于常见抑癌m i R N A ,在非小细胞肺癌中呈现低水平表达,且非小细胞肺癌病人恶化程度越高,血清外泌体m i R -486-3p 表达水平越低,二者之间呈负相关,提示血清外泌体m i R -486-3p 对非小细胞肺癌具有一定的早期诊断价值㊂外泌体m i R N A 是外泌体的重要组成部分,在机体免疫㊁疾病进展,尤其是肿瘤的发生㊁发展㊁变化中都有参与㊂但是目前,临床上对于外泌体的研究还处于基础阶段,在理论体系方面尚不完善,并且在科研投入和技术支持方面都存在一定的欠缺,有待进一步深入㊂外泌体中的很多组成部分均有望成为疾病的无创生物标志物,为疾病的早期发现㊁预后评估提供可靠的临床依据㊂[参考文献][1]张帅,许志云,董高超,等.肺癌合并其他器官多原发癌的临床特点分析[J ].中国肺癌杂志,2021,24(1):7-12.[2]C h i n e s eP r e v e n t i v e M e d i c i n eA s s o c i a t i o n .中国肺癌筛查标准(T /C P MA013-2020)[J ].中国慢性病预防与控制,2021,29(1):1-8.[3]AWA D A S S E I D A ,WU YL ,Z HA N G W.E x t r a c e l l u l a r v e s i -c l e s (e x o s o m e s )a s i mm u n o s u p p r e s s i v em e d i a t i n g va r i ab l e s i n t u m o r a n dc h r o n i c i n f l a mm a t o r y m i c r o e n v i r o n m e n t s [J ].C e l l s ,2021,10(10):2533.[4]王新颖,顾玉海.m i R N A 在肺癌诊断㊁治疗及预后判断中的应用进展[J ].山东医药,2017,57(31):108-111.[5]乔书培.m i R -486-3p 特异性过表达系统构建及在癌症中的作用及其机制研究[D ].黑龙江:哈尔滨工业大学,2019.[6]余昌敏,张丹,闵明,等.外泌体m i R N A 作为癌症早期诊断标志物的研究进展[J ].中国免疫学杂志,2020,36(22):2786-2790.[7]何敏,黄燕.肺癌早期诊断方法的研究进展[J ].现代预防医学,2020,47(23):4381-4384.[8]陈献,刘静莎,高红梅,等.肺癌肿瘤标志物定量检测的临床价值[J ].武警医学,2016,27(4):379-381,385.[9]赵静茹,文智.非小细胞肺癌新分期的影像学进展[J ].中国临床医学影像杂志,2014,25(9):657-659.[10]赵越,王超,陈和忠.外泌体生成和分泌机制的研究进展[J ].解放军医学杂志,2017,42(12):1106-1109.[11]张怡萌,张慧欣,刘洋.外泌体生物分析及其临床应用研究进展[J ].高等学校化学学报,2020,41(11):2306-2323.[12]朱深圳,章佳新.外泌体不同成分在乳腺癌中研究进展及前景[J ].国际外科学杂志,2020,47(11):787-792.(本文编辑 黄建乡)Copyright ©博看网. 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临床研究晚期NSCLC放疗前后血清circPVT1和miR-486-5p水平变化及临床意义张天伟,张金标△,张燕,明汇,张鹏,聂东摘要:目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗前后血清环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(circPVT1)、微小RNA-486-5p(miR-486-5p)水平变化及对放疗疗效的评估价值。
方法研究纳入137例晚期NSCLC患者作为NSCLC组,另选取健康体检者140例作为对照组。
采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清circPVT1、miR-486-5p表达水平,比较放疗前后及不同放疗疗效患者血清circPVT1和miR-486-5p水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circPVT1、miR-486-5p水平对放疗疗效的诊断价值。
结果与对照组相比,NSCLC组放疗前血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);经Targetscan在线分析显示,circPVT1与miR-486-5p有靶向关系;鳞癌与腺癌NSCLC患者放疗前血清circPVT1、miR-486-5p表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);与TNM分期Ⅲ期患者相比,Ⅳ期患者血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗后患者血清circPVT1表达水平降低,miR-486-5p表达水平升高(P<0.05)。
与放疗有效组相比,无效组放疗前和放疗后血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗有效组和无效组在放疗后均显示血清circPVT1水平降低,而miR-486-5p水平升高(P<0.01)。
血清circPVT1、miR-486-5p联合诊断放疗无效的AUC为0.918(95%CI:0.859~0.958),敏感度为80.65%,特异度为88.00%,联合诊断效能优于单独诊断。
miRNA在肺癌筛查、诊断、治疗及预后中的应用价值王晓琼;张玲玲;王江洪;孙岩【摘要】miRNA(MicroRNAs)是一类具有调节靶基因表达的18-25个短核甘酸序列组成的非编码核糖核苷酸分子.miRNA在机体的正常发育及病理过程中发挥极其重要的生物学功能.目前我国肺癌发病率日益上升,肺癌的早期诊断及治疗却面临着极大地困难.大量临床研究表明,miRNA在肺癌的筛查、诊断、治疗及预后中起着重要的应用价值.【期刊名称】《唐山师范学院学报》【年(卷),期】2017(039)005【总页数】4页(P65-68)【关键词】miRNA;肺癌;筛查;诊断;治疗;预后【作者】王晓琼;张玲玲;王江洪;孙岩【作者单位】郑州工业应用技术学院医学院,河南新郑 451150;郑州工业应用技术学院医学院,河南新郑 451150;郑州工业应用技术学院医学院,河南新郑 451150;郑州工业应用技术学院医学院,河南新郑 451150【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)包括腺癌、鳞状细胞癌、大细胞癌和细支气管肺泡癌(BAC)[1]。
所有的肺癌病例中小细胞肺癌约占18%,非小细胞肺癌约占82%[2]。
肺癌的死亡率居高不下既与大部分患者确诊时已在肺癌的中晚期有关,又与肺癌现有的治疗效果、预后差有关。
miRNA作为一种新的非侵入性的肿瘤标志物具有众多优点,本文就miRNA在肺癌筛查、诊断、治疗及预后中的临床应用价值进行综述。
目前肺癌的筛查主要包括有创筛查和无创筛查两种。
有创筛查只能达到诊断的效果,却达不到筛查的目的。
无创筛查手段主要包括细胞生物学及分子生物学手段。
传统的肺癌筛查手段有精确性低、成本高、侵入性操作等缺点。
无创筛查中血液及痰液中miRNAs的检测,对肺癌的早期筛查和诊断中具有一定的指导意义。
血液miRNAs作为检测肺癌的标志物不仅具有非侵入性、成本低、稳定、微创等优点,而且多种miRNAs联合检测结果的特异性、敏感性也较高。
《肺鳞癌特异性预后标志物探索与鉴定》篇一一、引言肺鳞癌(Lung Squamous Cell Carcinoma,LSCC)是一种常见的非小细胞肺癌类型,具有高度异质性和复杂的发病机制。
随着医学的进步,对肺鳞癌的研究逐渐深入,预后标志物的探索与鉴定成为临床治疗和患者管理的重要方向。
本文旨在探讨肺鳞癌特异性预后标志物的相关研究进展,以期为临床诊断和治疗提供新的思路。
二、肺鳞癌概述肺鳞癌是一种常见的原发性支气管肺癌类型,起源于支气管上皮和其衍生组织的恶性病变。
该疾病与长期吸烟、空气污染等因素密切相关。
由于其生长和扩散方式的多样性,其治疗效果和预后各不相同。
为了更有效地制定治疗方案,需深入探讨肺鳞癌的特异性预后标志物。
三、肺鳞癌预后标志物研究进展近年来,研究者们针对肺鳞癌的预后标志物进行了大量的探索和研究,包括分子学标志物、遗传学特征、免疫学指标等。
其中,一些具有代表性的预后标志物如下:1. 分子学标志物:如K-RAS、EGFR等基因突变情况,这些突变与肺鳞癌的发病机制和预后密切相关。
通过检测这些基因突变情况,可以评估患者的病情和预后情况。
2. 遗传学特征:包括基因拷贝数变异、染色体畸变等,这些遗传学改变可能影响肿瘤的生长、转移和预后。
通过对这些特征的检测和分析,可以为临床治疗提供重要参考。
3. 免疫学指标:如肿瘤免疫微环境、免疫细胞浸润等,这些指标反映了肿瘤与免疫系统的相互作用,对预后具有重要影响。
通过检测这些指标,可以评估患者的免疫状态和预后情况。
四、特异性预后标志物的探索与鉴定针对肺鳞癌的特异性预后标志物,研究者们进行了大量的实验研究和临床分析。
其中,一些具有潜力的标志物被逐渐发现和验证。
例如,某些特定的基因表达模式或蛋白质表达水平可能与肺鳞癌患者的生存期、复发率等预后指标密切相关。
通过深入研究这些标志物的生物学特性和功能,有望为肺鳞癌的早期诊断、治疗和预后评估提供新的方法和手段。
五、未来展望随着科技的进步和研究的深入,对于肺鳞癌特异性预后标志物的探索和鉴定将取得更多突破性进展。
《肺腺癌相关基因和miRNA的分析》篇一一、引言肺腺癌是一种常见的肺癌类型,其发病率和死亡率在全球范围内都居高不下。
对于肺腺癌的诊治,其涉及的生物标记物及相关的分子机制是科研人员关注的重点。
近年来,随着基因组学和表观遗传学研究的深入,越来越多的基因和miRNA被发现与肺腺癌的发病、发展和转移密切相关。
本文将对肺腺癌相关的基因和miRNA进行分析,旨在为肺腺癌的早期诊断、治疗和预后提供理论依据。
二、肺腺癌相关基因分析1. 驱动基因肺腺癌的驱动基因主要包括EGFR、ALK、KRAS等。
其中,表皮生长因子受体(EGFR)是肺腺癌中最常见的驱动基因之一。
通过对EGFR的突变分析,可以预测靶向药物的疗效,为患者提供个性化的治疗方案。
此外,间变性淋巴瘤激酶(ALK)的融合也是肺腺癌中一种重要的驱动基因变异,其与克唑替尼等靶向药物的敏感度密切相关。
2. 肿瘤抑制基因肿瘤抑制基因在肺腺癌的发生和发展中起着重要作用。
如p53、RB1等基因的突变或缺失会导致细胞周期失控,促进肿瘤的发生。
通过研究这些基因的突变情况,可以更好地理解肺腺癌的发病机制,为治疗提供新的思路。
三、肺腺癌相关miRNA分析miRNA是一类非编码RNA,通过调控基因表达参与细胞的生长、分化和凋亡等过程。
越来越多的研究表明,miRNA在肺腺癌的发生、发展和转移中起着重要作用。
1. miRNA的表达谱通过对肺腺癌组织与正常组织的miRNA表达谱进行比较,可以发现许多在肺腺癌中异常表达的miRNA。
这些miRNA可能通过调控相关基因的表达,促进或抑制肿瘤的发生和发展。
2. miRNA的功能某些miRNA在肺腺癌中起癌基因作用,如miR-21、miR-155等。
这些miRNA的表达上调可以促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。
而另一些miRNA则起肿瘤抑制作用,如let-7等。
通过研究这些miRNA的功能,可以更好地理解肺腺癌的发病机制,为治疗提供新的靶点。
四、结论通过对肺腺癌相关基因和miRNA的分析,我们可以更深入地了解肺腺癌的发病机制和分子特征。
《miR-486通过靶向PTEN调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制研究》篇一一、引言近年来,糖尿病心肌病已成为糖尿病患者的常见并发症之一,其发病机制复杂,涉及多种细胞信号通路的相互作用。
在心肌细胞凋亡的研究中,微小RNA(miRNA)的作用日益凸显。
miR-486作为一种重要的miRNA,被报道参与细胞生长、分化和凋亡等多种生物过程。
本研究的主题是探究miR-486如何通过靶向PTEN(磷酸酶和张力蛋白同源物)调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制。
二、材料与方法1. 材料本部分详述实验所用的H9c2心肌细胞、培养基、试剂等实验材料以及相关设备。
同时提及本研究所用高糖环境是通过调整培养基中葡萄糖浓度模拟得到的。
2. 方法详细描述实验设计及操作步骤,包括细胞培养、高糖处理、miR-486模拟物和抑制剂的转染、基因表达分析、细胞凋亡检测等实验方法。
三、实验结果1. miR-486与PTEN的表达关系通过基因表达分析,我们发现高糖环境下H9c2心肌细胞中miR-486的表达水平显著上升,而PTEN的表达水平则相应下降。
这表明miR-486与PTEN之间可能存在调控关系。
2. miR-486对PTEN的靶向调控利用生物信息学分析工具,我们确定了PTEN是miR-486的潜在靶基因。
通过构建报告基因实验和Western blot分析,证实了miR-486可以直接与PTEN的3'UTR结合,从而抑制PTEN的表达。
3. 高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡及miR-486的作用高糖环境显著诱导H9c2心肌细胞凋亡,同时伴随miR-486表达水平的升高。
通过转染miR-486的模拟物和抑制剂,我们发现抑制miR-486的表达可以显著降低高糖诱导的细胞凋亡。
四、讨论根据实验结果,我们提出以下假设:在高糖环境下,H9c2心肌细胞中miR-486的表达水平上升,通过靶向抑制PTEN的表达,进一步影响细胞的生长和凋亡过程。
MicroRNA对相关癌细胞作用的研究进展作者:吴万里来源:《科技视界》 2014年第31期吴万里(浙江大学,浙江杭州 310058)【摘要】MicroRNA是一种单链小分子RNA,其在发育和疾病中起了非常重要的作用。
最近的研究发现,miRNA表达与多种癌症相关,可以充当抑癌基因,也可以充当癌基因。
本文简要介绍了MicroRNA和癌细胞,然后讲述了microRNA-486对肺癌细胞的抑制作用,miRN-224及221对大肠癌细胞的生长和转移的抑制作用,MicroRNA-10a对肝癌细胞的抑制作用,microRNA-7对胃癌细胞转移的抑制作用,miR-17-92 基因簇作为致癌基因诱导肿瘤发生,miR-21可能作为胶质母细胞瘤的癌基因。
【关键词】MicroRNA;癌细胞;抑癌基因;癌基因1 MicroRNA的介绍MicroRNA一般简写作miRNA ,是一种21-25nt长的单链小分子RNA,成熟的miRNA,5’端有一个磷酸基团,3’端为羟基。
它广泛存在于真核生物中,是一组不编码蛋白质的短序列RNA。
编码miRNAs的基因最初产生一个长的pri-RNA分子,这种初期分子被剪切成约70-90个碱基大小、具发夹结构的单链RNA前体,并经过Dicer酶加工后生成。
成熟的miRNA 5’端的磷酸基团和3’端羟基则是它与相同长度的功能RNA降解片段的区分标志。
目前只有一小部分miRNAs生物学功能得到阐明。
这些miRNAs调节了细胞生长,组织分化,与生命过程中发育、疾病有关。
通过对基因组上miRNA的位点分析,显示其在发育和疾病中起了非常重要的作用。
而最近的研究发现,miRNA表达与多种癌症相关,大约50%得到注解的miRNAs在基因组上定位于与肿瘤相关的脆性位点,这说明miRNAs在肿瘤发生过程中起至关重要的作用。
同时据推测,miRNA调节着人类1/3的基因。
2 癌细胞的介绍癌细胞是一种产生了变异的细胞,可以无限生长、转化和转移,能够无限增殖并破坏正常的细胞组织,难以消灭,它是癌症的根源。
肺癌患者血清及组织中 miR指标的变化分析龚星【摘要】目的分析肺癌患者血清及组织中miR表达变化及其临床意义. 方法收集48例肺癌住院患者作为肺癌组,纳入同时期体检的健康志愿者20例作为对照组. 采用RT-PCR法对血清和组织中miR-21、miR-31、miR-155表达水平进行检测,比较组间差异. 结果肺癌患者血清miR-21、miR-31、miR-155表达水平显著高于对照组;肺癌组织中miR-21、miR-31、miR-155表达水平显著高于癌旁组织,P<0.05. 血清miR-21、miR-31、miR-155表达水平越高的肺癌患者TNM分期、淋巴结转移程度更高,预后则较差,P<0.05. 结论肺癌患者血清及组织中miR-21、miR-31、miR-155呈高表达,血清microRNAs检测可以作为肺癌初步诊断的指标,用于辅助判断肺癌的恶化程度和预测预后.%Objective To analyze the change of miR in serum and tissues of lung cancer.Methods 48 cases of lung cancer were lung cancer group ,and 20 cases of healthy volunteers who took medical examination were the control group.The ex-pression of miR-21,miR-31,miR-155 in serum and tissues were detected by RT-PCR,and the difference between the 2 groups were compared.Results The serum expression of miR-21,miR-31,miR-155 in lung cancer group were higher than those of the control group,and the expression of miR-21,miR-31,miR-155 in lung cancer tissues were significantly higher than pericarcinoma tissues,all P<0.05.The higher the serum expression of miR-21,miR-31,miR-155,the higher the TNM staging and lymph node metastasis degree,the worse the prognosis,all P<0.05.Conclusion MiR-21,miR-31,miR-155 have high expression in serum and tissues in patientswith lung cancer ,the serum expression of microRNAs can be used in preliminary diagnosis of lung cancer , and in auxiliary judgment for the degree of deterioration and prediction of prognosis.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2015(030)005【总页数】4页(P645-647,661)【关键词】肺癌;miR;血清;组织【作者】龚星【作者单位】441000 湖北医药学院附属襄阳医院【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌是威胁人类生命健康的首位恶性肿瘤[1],如何提高肺癌的检出率对改善肺癌患者的预后十分关键。
《miR-486通过靶向PTEN调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制研究》篇一摘要:本研究探讨了miR-486在H9c2心肌细胞中调控高糖诱导细胞凋亡的机制,特别是其通过靶向PTEN基因的表达来发挥的作用。
实验结果显示,miR-486表达水平在高糖条件下发生显著变化,并通过调控PTEN的表达影响心肌细胞的凋亡过程。
本研究的成果为糖尿病心肌病的治疗和预防提供了新的思路和实验依据。
一、引言糖尿病已成为全球范围内的重大公共卫生问题,其并发症之一糖尿病心肌病给患者带来了严重的健康威胁。
研究表明,高糖环境可以诱导心肌细胞发生凋亡,导致心肌损伤和功能异常。
近年来,microRNA(miRNA)在调控细胞凋亡和疾病发生发展中的作用日益受到关注。
其中,miR-486被认为与心血管疾病密切相关。
因此,探究miR-486在高糖环境下对H9c2心肌细胞凋亡的调控机制,对于理解糖尿病心肌病的发病机制及治疗具有重要意义。
二、材料与方法1. 实验材料H9c2心肌细胞系、高糖培养基、相关试剂与仪器等。
2. 实验方法(1)细胞培养与处理:H9c2心肌细胞在标准条件下培养,并分别进行正常糖浓度和高糖浓度处理。
(2)miRNA和基因表达分析:利用实时荧光定量PCR技术检测miR-486和PTEN基因的表达水平。
(3)蛋白检测:通过Western blot分析PTEN蛋白的表达及磷酸化状态。
(4)细胞凋亡检测:利用流式细胞术检测细胞凋亡率。
(5)生物信息学分析:利用生物信息学软件预测miR-486与PTEN基因的靶向关系。
三、结果1. miR-486在高糖条件下的表达变化实验结果显示,在高糖环境下,H9c2心肌细胞中miR-486的表达水平显著上升。
2. miR-486对PTEN基因的调控作用生物信息学分析表明,miR-486与PTEN基因存在靶向关系。
通过实时荧光定量PCR和Western blot分析发现,高糖条件下PTEN基因的表达水平与miR-486的表达水平呈负相关。
miR-486在肺鳞癌诊断和预后中的价值分析
发表时间:2020-02-25T15:41:33.980Z 来源:《医药前沿》2019年36期作者:陈谦黄冬琴(通讯作者)[导读] 通过多个数据库分析miR-486的表达情况,探究miR-486对肺鳞癌的诊断和预后意义。
(广西医科大学附属肿瘤医院广西南宁 530021)
【摘要】目的:通过多个数据库分析miR-486的表达情况,探究miR-486对肺鳞癌的诊断和预后意义。
方法:通过dbDEMC 2.0分析miR-486在TCGA数据库中的表达情况,运用GEO2R分析miR-486在GEO数据库肺鳞癌中表达情况,KM法分析miR-486的表达对肺鳞癌预后的影响,ROC曲线分析miR-486对肺鳞癌的诊断价值。
结果:miR-486在肺鳞癌中低表达,生存分析显示低表达与肺鳞癌患者预后不良相关,ROC曲线显示miR-486对肺鳞癌的诊断效果良好。
结论:miR-486可以作为肺鳞癌的诊断和预后标志物。
【关键词】miR-486;诊断;预后;肺鳞癌
【中图分类号】R734.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2019)36-0056-02 肺癌是一种高发病率和死亡率的恶性肿瘤,其五年生存率不足30%。
肺癌包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌,其中80%是非小细胞肺癌,肺鳞癌是非小细胞肺癌中的一种,目前缺乏对肺鳞癌的诊断和预后标志物[1]。
既往的研究发现microRNA可以作肿瘤的生物标志物,并对肺鳞癌的发生发展及治疗有影响[2]。
为此,我们基于dbDEMC 2.0数据库和GEO数据库对miR-486在肺鳞癌中的表达情况进行分析,探讨其对
肺鳞癌的诊断和预后价值。
1.资料与方法
1.1 dbDEMC
2.0数据库
dbDEMC 2.0数据库(http:///dbDEMC/index.html)包括了TCGA和GEO数据库中36种肿瘤的miRNA表达数据,可以通过热图对miRNA的差异表达情况可视化,给miRNA标志物的研究提供便利。
1.2 GEO数据库
GEO数据库(/geo/)是由美国国立生物技术信息中心NCBI创建并维护的基因表达数据库。
下载肺鳞癌数据GSE16025(https:///geo/query/acc.cgi?acc=GSE16025)和GSE51853(https:///geo/query/acc.cgi? acc=GSE51853)。
1.3 miRNA靶基因通路预测
运用DIANA-miRPath v2.0(www.microrna.gr/miRPathv2)对靶基因通路进行分析。
DIANA-miRPath v2.0数据库对DIANA-microT-CDS和DIANA-TarBase v6.0预测出来的靶基因进行富集分析,可以用热图显示分析结果。
1.4 统计学分析
数据采用SPSS20.0统计软件进行分析,计数资料采用率(%)表示,进行χ2检验,计量资料采用(x-±s)表示,进行t检验,P<0.05为差异具有统计学意义。
2.结果
2.1 miR-486在dbDEMC 2.0数据库中的表达
在dbDEMC 2.0数据库中分析miR-486在不同肿瘤中的表达情况,结果如图1所示,miR-486在多种肿瘤中表达下调,其中包括乳腺癌(BRCA),肝细胞癌(LIHC),宫颈癌(CECA),胃癌(GSCA),头颈癌(HNSC),肺癌(LUCA),肉瘤(SCRA),口腔鳞状细胞癌(OSCA),卵巢癌(OVCA),结肠直肠癌(CLCA)。
其中肺癌中473例肿瘤样本,45例非肿瘤样本。
2.4 miR-486的表达与肺鳞癌预后的关系
对TCGA数据库473例病人的预后情况和miR-486的表达水平的关系进行生存分析,结果显示miR-486表达值与总生存时间相关,高表达患者总生存时间优于低表达组(P=0.044)(图2)。
3.讨论
我们通过分析dbDEMC 2.0和GEO数据库中肺鳞癌病人癌组织和癌旁组织miR-486的表达情况,发现miR-486在肺鳞癌组织中表达下调。
结合病人随访数据,显示miR-486低表达提示肺鳞癌的病人预后不良。
诊断实验表明miR-486对肺鳞癌的诊断效能高。
靶基因预测分析显示miR-486可能调控mTOR,PI3K-Akt和HIF-1等信号通路影响肺鳞癌的发生发展。
以往的研究发现miR-486与多个肿瘤的发生发展相关。
miR-486被发现在肝细胞癌病人的组织和血浆中表达下调,并且通过下调p-AMPK/Sirt1信号通路阻断肝癌细胞细胞周期,抑制癌细胞增殖[3]。
在乳腺癌中,血清hsa-miR-486-5p被证实可以作为诊断早期乳腺癌的生物标志物,具有较好的临床应用价值[4]。
在胃癌的裸鼠实验模型中,miR-486明显抑制裸鼠皮下胃癌细胞移植瘤的生长,机制分析发现通过抑制NRP2的表达发挥作用[5]。
在多种肿瘤的研究结果与我们在肺鳞癌的结果一致,提示miR-486是一个肿瘤抑制miRNA。
综上所述,对多个数据库中肺鳞癌癌组织和癌旁组织的miRNA表达谱和随访数据进行分析,发现miR-486在肺鳞癌组织中表达下调,低表达的miR-486与肺鳞癌病人的预后不良相关并对肺鳞癌的诊断效果良好,这些发现有助于对肺鳞癌的诊断和预后预测提供新的思路。
【参考文献】
[1]李伟婷,李永文,张洪兵,李颖,袁茵,宫颢,韦森,刘红雨,陈军.基于TCGA数据库的中央型与周围型肺鳞癌基因表达差异性研究[J].中国肺癌杂志,2019,05:280-288.
[2]罗朋.肺麟癌miRNA差异表达谱的筛选及miR-223-3p抑制肺鳞癌细胞增殖的研究[D].安徽医科大学,2015.
[3]柳德兵,申铭,郑建伟.miR-486-5p通过负向调控AMPK/Sirt1信号通路参与肝细胞性肝癌细胞增殖[J].武汉大学学报(医学
版),2019,40(05):694-701.
[4]安学凤,李姝君,俞作仁,韩晶.血清hsa-miR-486-5p在乳腺癌早期诊断中的价值[J].同济大学学报(医学版),2018,39(03):1-6.
[5]张冉冉,连海峰,史宁,胡营滨,李明,刘成霞.miR-486-5p对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2016,23(01):62-66.。