实验室灭菌指南
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实验室的灭菌方法在实验室中,灭菌是非常重要的一个步骤,可以有效地消除实验过程中可能存在的各类微生物,确保实验结果的准确性和可靠性。
常用的灭菌方法包括物理灭菌和化学灭菌两种。
一、物理灭菌方法:1. 高温灭菌(烘箱法):将待灭菌的器具(如培养皿、试管等)放入预热至适当温度的烘箱中,通过高温作用杀灭其中的微生物。
常用的温度为160-180摄氏度,时间约为1-2小时。
此方法适用于不耐热的固体物品。
2. 压力蒸汽灭菌(高压灭菌法):将待灭菌的物品放入装有适量清水的高压灭菌锅中,加热至适当的温度(121-134摄氏度),经过一定时间的高压和高温作用,实现微生物的灭活。
常规操作时间为15-30分钟。
这种方法适用于实验器械、培养基、培养瓶等耐热器具。
3. 过滤法:通过微生物滤膜过滤器将待检测的液体或气体经过过滤,将其中的微生物截留下来,达到灭菌的效果。
该方法适用于不耐高温或无法承受高压的液体、气体样品。
4. 紫外线灭菌法:将待灭菌的物品放置在紫外线照射区域,经过一定时间的紫外线照射,使微生物的核酸发生损伤,从而达到杀灭微生物的目的。
该方法适用于表面较为平坦的培养皿、试管等小型器具。
5. 干热灭菌法:将待灭菌的物品置于常温下的烘箱中,在较高的温度(170-180摄氏度)下进行一定时间的干热处理。
该方法适用于不耐水或无法耐受湿热的物品。
二、化学灭菌方法:1. 乙醛灭菌法:将待灭菌的物品放入密闭的容器中,加入一定浓度的乙醛液并封闭容器,在一定时间内使乙醛蒸气作用于物品表面,达到杀菌的目的。
该方法易于操作,适用于对物品表面较干净的物品。
2. 酒精灭菌法:将待灭菌的物品浸泡在一定浓度的乙醇或异丙醇溶液中一段时间,使其达到杀菌的效果。
该方法适用于小型的器具或实验室台面的表面。
值得注意的是,不同的灭菌方法适用于不同类型的物品,我们在选择灭菌方法时要根据物品的性质、尺寸和特点来进行判断。
同时,灭菌操作过程要遵循一定的操作规范,确保操作的安全性和有效性。
实验室常见的灭菌消毒方法总结
一、消毒和灭菌的区别
1、消毒(disinfectioninhospital):杀灭或消除医院环境中媒介物上污染的病原微生物的过程.
2、灭菌(sterilization):杀灭或去除外环境中媒介物携带的一切微生物的过程.包括致病微生物和非致病微生物,也包括细菌芽胞和真菌孢子.灭菌是个绝对的概念,灭菌后物品必须是完全无菌的.即灭菌保证水平为106.
二、高温灭菌法
高温灭菌法是利用高温使微生物的蛋白质及酶发生凝固或变性而死亡,是应用最广泛且有效的灭菌方法。
主要用于器械、容器、试剂等灭菌。
(一)高压蒸气灭菌法
用高温加高压灭菌,不仅可杀死一般的细菌,对细菌芽胞也有杀灭效果,是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。
主要用于能耐高温的物品,如金属器械、玻璃、橡胶、耐高温塑料制品及试剂的灭菌。
高压蒸气灭菌器的类型和样式较多,如:①下排气式压力蒸气灭菌器是普遍应用的灭菌设备,压力升至102.9kPa,温度达121~126℃,维持20~30分钟,可达到灭菌目的。
②脉动真空压力蒸气灭菌器已成为目前最先进的灭菌设备。
灭菌条件要求:蒸气压力205.8kPa,温度达132℃以上并维持10分钟,即可杀死包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切微生物。
湿热灭菌是目前实验室使用最为广泛,灭菌效果最佳的方法。
目前湿热灭菌的仪器技术上也非常成熟,安全系数较高。
高压蒸气灭菌的注意事项:
包裹的物品不宜太大,一般应小于30cm×30cm×50cm,大于该尺寸需要酌情延长灭菌时间;
1.高压锅内的包裹不要排得太密,以免妨碍蒸气透入,影响灭菌效果;
2.对塑料制品不宜放置过于拥挤,以免发生形变;。
微生物实验室消毒灭菌管理程序
1.目的
规范消毒灭菌程序,保证实验室内的环境安全。
2.范围
适用于微生物实验室内环境日常消毒的操作。
3.职责
实验室负责人及检验人员、消毒人员执行本程序。
4.程序
4.1.每天工作前用消毒液消毒工作台,上班前、下班后开紫外灯(40分钟)进行空气消毒。
4.2.非必要品禁止带入实验室,必要资料和书籍带入后,应远离操作台。
4. 3使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用10g/L含氯消毒剂浸泡消毒液浸泡经煮沸后清洗或丢弃。
4.4试验后的血液标本用消毒液浸泡后煮沸消毒,所有用于试验的反应板、吸头等用10g/L含氯消毒剂浸泡消毒液浸泡(至少24小时以上)后清洗或丢弃。
4.5.所有微生物培养物(细菌、支原体、真菌等培养物),不管标本阳性或阴性均用10g/L含氯消毒剂浸泡消毒液浸泡后,经煮沸消毒,才能清洗或丢弃。
4.6.取材、最好采用一次性工具,不能采用一次性工具者,每次取材前均应彻底消毒。
4.7.用于浸泡各种器械如刮菌刀、持物钳、镊子等的消毒液要定期更换。
4.8.不慎发生临床标本或培养物污染工作台,不要立即用水冲洗,应先用纸巾、布等敷料加上消毒液5g/L含氯消毒剂浸泡消毒30分钟以上,然后再清洗。
如污染工作服,应立即脱下,高压灭菌。
4.9.实验时手部污染,应立即用肥皂洗手并冲洗干净,再外用消毒药水,如误入内,应立即吐出,并用1:10高锰酸钾溶液或3%双氧水漱,必要时根据实际情况服用有关药物。
生物安全实验室常规消毒灭菌一、室内空气消毒具备排风净化功能的负压实验室,根据所操作的微生物因子不同,空气可以经高效过滤器过滤后排放,但应采取通风控制系统来防止实验室出现正压。
室内空气经高效过滤器过滤后排到建筑物以外并远离该建筑的进气口。
无排风净化功能的常压实验室,使用可汽化过氧化氢、气体二氧化氯对空间进行气体熏蒸或气溶胶喷雾等方法消毒,同时需做好个人防护与消毒后消毒剂残留的去除处理。
二、室内环境表面消毒若地面、实验台面等被明显污染,应立即用吸液布覆盖,喷洒消毒剂(从外向内)于吸液布上,使吸液布湿透,作用60min 后用清水擦拭干净。
实验台面、桌椅、门把手、生物安全柜和解剖柜台面、侧壁等可用消毒剂喷洒、擦拭。
表面消毒可使用含氯消毒剂,含有500~1 000mg/L有效氯溶液适于普通的环境表面消毒。
当处理高危环境时建议使用5 000mg/L有效氯溶液。
用于金属表面消毒处理时,消毒结束后应尽快使用清水清除表面残余消毒剂。
三、生物安全防护设备的消毒(一)生物安全柜消毒在每次使用前后清除生物安全柜内表面的污染,工作台面和内壁要用中高效消毒剂进行擦拭,不触及送风滤器的扩散板。
75%乙醇消毒后需及时擦净水痕。
采用含氯消毒剂处理后,须用水擦拭干净,防止对生物安全柜的腐蚀。
试剂溢漏或泼洒后,立即消毒污染物及污染的表面。
生物安全柜在移动或更换过滤器之前,要使用汽化过氧化氢、二氧化氯气体或甲醛蒸汽对生物安全柜进行终末消毒。
(二)高效过滤器的消毒采用汽化过氧化氢消毒法或甲醛熏蒸法进行消毒。
消毒器应与排风过滤器排风箱体的消毒接口连接,利用循环气流带动蒸汽循环实现原位消毒。
消毒后可将滤器卸载,装入医用废物塑料袋中,进行压力蒸汽灭菌。
操作时做好个人防护。
(三)个体防护装备的消毒一次性帽子、口罩、手套,使用后应放入废物袋内高压灭菌。
防护鞋、防护眼罩、防护面具(半面具)、防护面罩(含正压面罩)表面用消毒剂喷雾或擦拭消毒,作用到预定时间后清洗晾干备用。
消毒灭菌管理程序1、目的加强生物安全实验室管理,规范消毒灭菌流程,严格控制感染源,防止院内感染。
2、适用范围适用于各生物安全实验室的内环境、实验器材、废弃物品及相关人员的消毒。
3、职责3.1所有实验室工作人员应熟知并遵守本程序,清洁及其他辅助人员在实验室工作人员指导下执行本程序。
3.2 实验室生物安全监督员负责实验室日常消毒灭菌的监督工作。
3.3实验室负责人负责消毒灭菌工作的监督检查及对相关责任人员的奖惩。
4、消毒程序4.1实验室各区域消毒:根据可能被污染程度的不同分为清洁区、缓冲区和污染区。
4.1.1清洁区消毒:清洁区若无明显污染,应每天开窗通风数次,湿式清洁台面、地面1次。
必要时用含500mg/L有效氯溶液湿布巾擦拭一次,作用30min后,再用清水湿布巾擦拭干净。
4.1.2缓冲区消毒:用含500mg/L有效氯溶液湿布巾擦拭一次,作用30min后,再用清水湿布巾擦拭干净。
每日上午上班半小时前、下午下班半小时后各1次。
4.1.3污染区消毒:地面和台面用含500mg/L有效氯溶液湿布巾擦拭一次,作用30min 后,再用清水湿布巾擦拭干净。
每日上午上班半小时前、下午下班半小时后各1次。
实验中若存在被污染的情况要及时消毒。
4.1.4 空气消毒:检验实验室和微生物实验室每日晚上空闲时,开启室内所有紫外灯管消毒30分钟。
PCR实验室在工作结束后开启紫外灯消毒2小时,必要时选用空气消毒机消毒处理60分钟,每日下午下班后进行。
4.1.5清洁及消毒器材:拖把、抹布等要分区专用,不得混用。
使用后的拖把、抹布,用含500mg/L有效氯溶液浸泡30 分钟,再用清水洗净,悬挂晾干,最好在阳光下晒干后备用。
4.1.6当地面受到病原菌或致病性芽孢菌污染时,应立即用消毒液消毒,采用2000mg/L~5000mg/L有效氯的消毒液拖地或喷洒地面,并使消毒液浸过污染物表面,作用30min。
拖把用后浸于上述消毒液1h。
4.2 衣物的清毒、清洁:工作服、帽子、鞋套等放入专用的污物袋中,用70℃以上热水加洗涤剂洗涤;有明显病原微生物污染时,随时喷洒消毒液消毒或放入专用污物袋中,进行高压蒸汽灭菌处理。
灭菌的操作规程《灭菌操作规程》一、目的为避免微生物的污染,保证产品的质量,同时保护操作人员和环境的安全,制定此规程。
二、范围本规程适用于所有需要进行灭菌操作的场合,包括但不限于医疗器械、药品、实验室用品等。
三、灭菌方法1. 热气灭菌:将物品置于高温下进行灭菌,常用于玻璃器皿、金属器械等。
2. 蒸汽灭菌:将物品置于高压蒸汽中进行灭菌,常用于医疗器械和实验室用品。
3. 过滤灭菌:将液体物品通过过滤器进行灭菌,常用于药品和生物制品。
4. 化学灭菌:使用化学物质进行灭菌,常用于一次性医疗器械和实验室耗材。
四、操作流程1. 预处理:将需要进行灭菌的物品清洗干净,去除污垢和残留物。
2. 包装:将物品包装在符合要求的灭菌包装材料中,保证灭菌效果。
3. 载入设备:将包装好的物品放入灭菌设备中,并按照设备要求设置灭菌参数。
4. 灭菌处理:启动设备进行灭菌处理,加热、压力等参数需符合规定。
5. 冷却:灭菌完成后,待设备冷却至安全温度后再取出物品。
6. 检验:对灭菌后的物品进行检验,确认灭菌效果符合要求。
五、注意事项1. 操作人员需接受专业培训,了解各种灭菌方法和设备的操作规程。
2. 对于不同种类的物品,需选择合适的灭菌方法和设备。
3. 检测设备的运行是否正常,确保灭菌参数的稳定和准确。
4. 灭菌后的物品要做好包装和标识,以免再次受到污染。
六、资料记录所有灭菌操作的相关记录应保存至少两年,包括设备运行记录、检测报告等。
七、审核与审批本规程由质控部门审核,并需经生产部门负责人审批后生效。
八、附则若有需要对本规程进行修订,需由质控部门负责人提出修订要求,经相关部门审定后方可修订。
微生物实验室培养教案:灭菌方法的选择与操作微生物培养实验是微生物学重要的实验之一,实验的成功与否与实验前,实验过程中所使用的培养基和器具的无菌程度有着极为密切的关系,因此在微生物实验室进行培养实验时需要严格的无菌操作。
灭菌方法是保障实验无菌的关键,选择合适的灭菌方法对于实验的开展有着至关重要的作用。
本文将介绍常见的灭菌方法的选择与操作。
一、灭菌方法的选择1.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法是微生物实验室常用并且效果较好的灭菌方法,因为高温高压的作用可以破坏细菌的细胞壁和膜,从而杀死大多数的微生物。
使用高压蒸汽灭菌法前需要注意的是,需要选购符合标准的高压蒸汽灭菌器,而且样品的装载位置要均匀分布,避免在装载时出现挤压或者拥挤的情况,从而影响了样品的灭菌效果。
2.紫外线灭菌法紫外线灭菌法是一种较为简单且可以迅速灭菌的方法,主要使用在实验室对于小型仪器设备,如实验箱、平板计数仪、干燥器等的无菌操作。
但是需要注意的是,这种灭菌方式只能强行破坏微生物DNA分子链,而除菌率较低,不能保证百分之百的无菌结果。
同时还需要注意安全防护,保障操作人员不会直接被紫外线辐射所伤害。
3.X射线灭菌法X射线灭菌法是一种相对较少使用的灭菌方法,因为操作较为复杂且需要特殊的设备。
X射线利用X射线线损伤细菌细胞结构和功能,从而达到细菌杀灭的目的。
这种灭菌方法可以对于各种样本进行无菌操作,但是常规实验室的实验并不需要使用这种高级的灭菌方式。
二、灭菌操作的技巧1.手套、口罩和实验服的使用在进行微生物实验之前,实验人员必须佩戴起手套、口罩和实验服,将自身和周围环境从细菌污染中完全隔离开来。
在实验操作过程中,要经常更换手套、口罩、实验服,并注意将手套的表面避免沾上任何未灭菌的物品。
2.器皿消毒与无菌操作所有器皿在使用前都必须进行消毒,常见的消毒方法有高压蒸汽、酒精或125倍的稀释高锰酸钾溶液。
消毒后,实验室的操作桌面需要喷洒酒精或其他消毒液来确保操作区域的无菌。
《消毒及灭菌技术操作指南》消毒和灭菌可是个重要的事儿,搞不好就会出大问题。
下面就给大家说说消毒及灭菌技术的操作指南。
首先,咱得搞清楚啥是消毒,啥是灭菌。
消毒呢,就是把那些致病的微生物给弄死或者弄少点,让它们不能害人。
灭菌就更厉害啦,直接把所有的微生物都给灭得干干净净,一点活路都不给。
这就好比打架,消毒是把坏人打跑,灭菌就是把坏人全给灭了,连个渣都不剩。
一、消毒技术操作1. 物理消毒法(1)高温消毒这可是个老办法了,就像咱煮饺子似的,把东西放在高温里煮一煮,那些细菌啥的就受不了啦。
像餐具啊、奶瓶啊这些,可以放在开水里煮个几分钟,保证干净。
不过可别把自己的手给煮了啊,哈哈。
(2)紫外线消毒这玩意儿就像个小太阳,能发出一种神奇的光,把细菌给杀死。
像医院啊、实验室啊这些地方经常用紫外线消毒。
不过用的时候可得注意,别盯着紫外线看,不然眼睛会受伤的。
到时候变成了“熊猫眼”可别怪我没提醒你。
2. 化学消毒法(1)酒精消毒酒精这东西大家都熟悉吧,消毒效果那是杠杠的。
可以用酒精棉球擦一擦手啊、手机啊这些经常接触的东西。
但是可别用太多了,不然会变成“酒鬼”哦。
而且酒精易燃,可别在旁边玩火,不然一把火下去,你就变成“烤乳猪”了。
(2)含氯消毒剂消毒像 84 消毒液就是含氯消毒剂,能杀死很多细菌和病毒。
用的时候要按照说明书上的比例来稀释,不然浓度太高会把东西给烧坏的。
而且这玩意儿味道有点大,用的时候最好戴个口罩,不然会被熏得晕头转向。
二、灭菌技术操作1. 高压蒸汽灭菌这可是个厉害的家伙,把东西放在高压锅里,用高温高压的蒸汽来灭菌。
像医院的手术器械啊、培养基啊这些都要用高压蒸汽灭菌。
不过这玩意儿操作起来有点麻烦,得注意安全,别被蒸汽给烫伤了。
要是不小心被烫了,那可就成了“红烧猪蹄”啦。
2. 环氧乙烷灭菌这个方法一般用在一些不能用高温高压灭菌的东西上,比如塑料制品啊、电子设备啊这些。
但是环氧乙烷是有毒的,用的时候要特别小心,别让自己中毒了。
实验室的灭菌方法
实验室常用的灭菌方法主要有以下几种:
1. 热灭菌:使用高温蒸汽或高温烘箱进行灭菌,可有效消除常见的细菌、病毒和真菌。
热灭菌常用于灭菌培养皿、培养基、试剂和玻璃器皿等。
2. 化学灭菌:使用化学消毒剂进行灭菌,常见的消毒剂包括酒精、漂白粉、过氧化氢等。
化学灭菌适用于一些敏感材料,如塑料器皿、塑料管道、橡胶塞和一次性注射器等。
3. 紫外线灭菌:利用紫外线的辐射杀死细菌和病毒,常用于空气和表面的灭菌。
然而紫外线灭菌对于有障碍物遮挡或遮蔽的区域效果有限,且需要较长时间的照射。
4. 过滤灭菌:通过微孔滤膜将细菌和病毒过滤掉。
常用的滤膜材料有聚酯、聚碳酸酯、聚醚砜等。
过滤灭菌适用于渗透性好的溶液、生物液和气体。
5. 辐射灭菌:使用离子化辐射、γ射线或X射线进行灭菌。
辐射灭菌适用于灭菌一次性物品、一次性注射器和药品等。
需要根据实验需要和具体材料的特性选择合适的灭菌方法。
同时在进行灭菌操作时,要遵守操作规范和消毒程序,确保灭菌效果和安全性。
真菌学实验室灭菌方法灭菌方法是真菌学实验室中非常重要的一部分,其目的是杀灭或去除实验室中的各种微生物,特别是真菌。
灭菌的重要性在于确保实验结果的准确性和可靠性,同时也保护实验人员的安全。
本文将介绍几种常用的真菌学实验室灭菌方法。
一、物理方法1. 热灭菌:热灭菌是最常见和最简单的灭菌方法之一。
它通过高温杀灭或去除真菌。
常用的热灭菌设备有高压蒸汽灭菌器和烘箱。
高压蒸汽灭菌器可以在高温高压下迅速灭菌,而烘箱则通过将物品置于高温下进行长时间加热来实现灭菌。
2. 紫外线灭菌:紫外线灭菌是一种常见的物理灭菌方法,它通过紫外线照射来杀灭或去除真菌。
紫外线具有很强的杀菌能力,可以有效地灭活真菌。
在实验室中,常用的紫外线灭菌器可以对实验器皿、培养皿等进行灭菌处理。
二、化学方法1. 酒精灭菌:酒精是一种常见的化学灭菌剂,具有广谱杀菌作用。
在真菌学实验室中,常用的酒精灭菌方法是将实验器皿和培养器械浸泡在70%酒精中,然后晾干。
酒精可以迅速杀灭或去除真菌,但需注意,酒精对某些真菌可能不敏感。
2. 漂白剂灭菌:漂白剂是一种常用的强力氧化剂,可以有效杀灭或去除真菌。
在实验室中,可以将实验器皿、培养器械等浸泡在含有适量漂白剂的水溶液中,然后用清水冲洗干净。
漂白剂可以迅速氧化并破坏真菌细胞,从而实现灭菌的目的。
三、气体灭菌气体灭菌是一种常用的特殊灭菌方法,可以对一些灭菌困难的物品进行灭菌处理。
常用的气体灭菌剂有乙烯氧化物和过氧化氢。
这些气体灭菌剂具有很强的渗透能力和杀菌效果,可以在密闭的环境中对实验器皿、培养器械等进行全面的灭菌处理。
四、过滤灭菌过滤灭菌是一种常用的灭菌方法,特别适用于液体培养基和生物制品的灭菌。
通过将液体培养基或生物制品通过0.22微米的过滤器,可以去除其中的真菌和其他微生物。
这种方法通常用于对灭菌困难的物品进行处理。
总结起来,真菌学实验室中的灭菌方法有物理方法、化学方法、气体灭菌和过滤灭菌等。
选择合适的灭菌方法取决于实验的具体要求和物品的特性。
实验室常用消毒灭菌整体方案实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等,每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要,直接影响着整个实验能否顺利进行。
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、生物抑菌)两大类。
01干热灭菌法02湿热灭菌法细菌的繁殖体在干燥状态下,80ºC-100ºC 1小时可被杀死;芽胞需要加热至160ºC-170ºC 2小时才杀灭。
在干热状态下,由于热穿透力较差,微生物的耐热性较强,必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。
因此,干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。
为了保证灭菌效果,一般规定:135-140摄氏度灭菌3-5h;160-170摄氏度灭菌2-4h;180-200摄氏度灭菌0.5-1h。
干热灭菌法适用于耐高温的玻璃和金属制品,以及不允许湿热气体穿透的油脂(如油性软膏机制、注射用油等)和耐高温的粉末化学药品的灭菌。
注意事项:待灭菌的物品干热灭菌前,应洗净,防止造成灭菌失败或污物炭化,玻璃器皿灭菌前应洗净并干燥,灭菌时勿与烤箱底部及四壁接触,灭菌后要使温度降到40℃以下再开箱,防止炸裂。
西冲推荐yamto 干热灭菌器:按美国FDA 标准设计,最高工作温度260ºC ,温度控制精确箱体外壳低于50ºC无风密闭型设计,可以避免细菌扩散到室内。
压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
加热器将罐体内的水加热直至沸腾,蒸气被密封在罐体内,积聚而产生压力。
蒸气的压力增高,温度也随之增高。
用蒸气压力104.0-137.3kPa 时,温度可达121-126℃,维持30分钟,即能杀死包括具有顽强抵抗力的细菌芽胞在内的一切细菌,达到灭菌目的。
微生物实验室灭菌管理规程1目的建立一个规范的灭菌管理规程,保证灭菌质量,保证检测结果。
2范围适用于本公司的微生物实验室灭菌管理。
3职责3.1文件起草人员:负责确保按照相关规程所规定的格式进行文件的编写,并根据审核人员及批准人员的意见进行修改,直至文件得到批准。
3.2审核人:负责对本部门及与本部门有关的文件进行格式审核,并提出相应的意见。
4含义及定义4.1灭菌系指物理或化学等方法杀灭或去除所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。
5 内容5.1灭菌操作过程5.1.1使用准备5.1.1.1检测水位,水平面高于水位器2—3毫米即可5.1.1.2将要准备好要灭菌的物品放入锅内,张贴灭菌指示条。
5.1.1.3将容器盖闭合,密封圈贴合,旋紧六个环头螺栓。
5.1.1.4看压力阀是否在关闭状态,如果不在请将其关闭。
5.1.1.5将泄气管放在一个容器里,防止蒸汽乱喷,误伤到人员。
5.1.2接通电源,打开开关。
5.1.3设定参数5.1.3.1按设定键1 次,显示温度代码(SP)设定灭菌温度。
5.1.3.2按设定键2,次,显示时间代码(ST)设定灭菌时间5.1.3.3按设定键3次,显示干燥时间代码(GST)设定干燥时间5.1.3.4按设定键4次,显示灭菌种类代码(JSHS)0为液体类,1为非液体类。
5.1.3.5根据自己所灭菌物品,设定好程序,等待返回主界面(既显示实时温度),按动启动按键开始灭菌工作。
5.2程序的选择5.2.1液体类:根据液体培养基121℃,15分钟,有其他特殊培养基,根据培养基说明,进行修改程序。
5.2.1非液体类:121℃,30分钟,有特殊情况,根据要求进行修改程序。
5.3注意事项5.3.1灭菌结束后,关闭电源,等待压力变指针归零,及时打开容器盖取出灭菌物品。
5.3.2灭菌物品从灭菌器中取出后,应仔细观察包装的完整性,若有破损不可作为无菌使用。
5.3.3检查灭菌指示条颜色是否有变化,诺无变化需要重新灭菌,将以灭好菌的物品和未灭菌的物品单独放置,防止二次污染。
实验室消毒灭菌的方法
1. 物理方法,物理方法包括热力消毒和辐射消毒。
热力消毒通
常使用高温蒸汽或干热来杀灭细菌和病毒。
辐射消毒则利用紫外线
或离子辐射来破坏微生物的DNA和RNA,从而杀灭它们。
2. 化学方法,化学方法包括使用化学消毒剂,如乙醛、过氧化
氢和醇类。
这些消毒剂能够杀灭细菌、真菌和病毒,从而保持实验
室设备和表面的清洁。
3. 生物方法,生物方法主要指利用生物灭菌剂,如孢子悬浊液
或孢子粉末,来杀灭细菌和真菌。
这些生物灭菌剂通常会释放出孢子,通过破坏微生物的细胞壁来达到消毒的效果。
4. 气体灭菌,气体灭菌是一种常用的实验室消毒方法,它利用
一氧化氯或二氧化硫等气体来杀灭微生物,特别适用于对设备和材
料进行消毒。
除了以上方法外,实验室还可以采取一些其他措施来确保实验
室的清洁和安全,比如定期清洁和消毒工作台、实验室器皿和设备,以及加强实验室员工的个人卫生意识和操作规范。
综上所述,实验
室消毒灭菌的方法是多种多样的,选择合适的方法取决于实验室的具体情况和需求。
希望以上信息能够帮助你更好地了解实验室消毒灭菌的方法。
实验室常用灭菌方法实验室是一个进行科学研究和试验的地方,其中可能存在各种微生物,包括细菌、病毒和真菌等。
为了确保实验的准确性和安全性,实验室必须采取适当的灭菌方法来杀灭这些微生物。
物理灭菌方法包括:1.高温灭菌:高温灭菌是最常用的物理灭菌方法之一、常见的高温灭菌设备有高压灭菌器和烘箱。
在高温条件下,可以杀灭包括细菌、病毒和真菌在内的微生物。
高压灭菌器通常使用蒸汽,在121℃下灭菌物品20分钟,而烘箱通常在160℃下灭菌物品2小时。
2.紫外线灭菌:紫外线灭菌利用紫外线的辐射杀灭微生物。
紫外线具有破坏微生物DNA的能力,从而对微生物的细胞分裂和繁殖产生抑制作用。
实验室常用的紫外线灭菌设备有紫外线灯箱和紫外线传感器。
化学灭菌方法包括:1.酒精消毒:酒精消毒是一种常见的化学灭菌方法。
酒精对细菌、病毒和真菌具有广谱杀菌作用。
常见的酒精消毒剂有乙醇和异丙醇。
酒精消毒可以直接喷洒或浸泡实验器材和工作台面等表面。
2.其他化学消毒剂:实验室还可以使用其他化学消毒剂,如过氧化氢、次氯酸钠和氯化钠等。
这些消毒剂可以杀灭微生物,并且对环境和人体较为安全。
除了以上的物理和化学灭菌方法,实验室还有其他一些灭菌方法,如微生物过滤和辐照灭菌。
1.微生物过滤:微生物过滤是一种通过过滤器将微生物从液体或气体中去除的灭菌方法。
过滤器可以选择不同的孔径,可以选择将不同大小的微生物滤除。
2.辐照灭菌:辐照灭菌是一种使用电离辐射来杀灭微生物的方法。
常用的辐射灭菌方法是γ射线灭菌和电子束灭菌。
这些方法可以杀灭各种微生物,但需要特殊的设备和条件。
在实验室中,根据需要可选择不同的灭菌方法。
一般来说,物理灭菌方法更适用于固体和耐高温的试剂器材,而化学灭菌方法更适用于液体和易燃物品。
同时,实验室中要做好灭菌前的准备和灭菌后的处理工作,包括清洗和消毒工作台、分装媒体和试剂等。
总之,在实验室中,合适的灭菌方法选择与正确的操作是确保实验的准确性和安全性的重要环节,它可以有效地杀灭和控制微生物的生长,防止污染和感染的发生。
实验室常用灭菌方法1.高压蒸汽灭菌为湿热灭菌方法的一种。
是微生物培养中最重要的灭菌方法。
这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密闭的情况下,随着水的煮沸,蒸汽压力升高,温度也相应增高.(PV=nRT)高压蒸汽是最有效的灭菌法,能迅速地达到完全彻底灭菌.一般在15磅/英寸2压力下(121.6℃),15~30分钟,所有微生物包括芽孢在内都可杀死.它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌.进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。
高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅,有立式与卧式两种.可以用电热、煤气、蒸汽等.锅上装有压力表,有的还装有温度计,能及时了解锅内压力及温度。
锅上还设有排气口,其作用是在密闭之前,利用蒸汽将锅内的冷空气排净,另外还装有安全活门,如果压力超过一定限度,活门即可自动打开,放出过多的蒸汽。
2.干热灭菌微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。
一般在电烘箱中进行。
干热灭菌所需温度较湿热灭菌高,时间也较湿热灭菌长。
这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。
一般须在160℃左右保持恒温3~4小时,方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进行干热灭菌.3。
间歇灭菌各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。
而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。
间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体,然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时,使芽孢和孢子萌发成为营养体。
这时再以100℃处理半小时,再放置24小时.如此连续灭菌3次,即可达到完全灭菌的目的。
间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行,也可用普通铝锅代替。
这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌,这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间,会被破坏,而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用,又使被处理的物质免遭破坏.4。
实验室常用的消毒灭菌方法一、消毒技术(一)明确消毒的主要对象应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类,有针对性地使用消毒剂。
(二)采取适当的消毒方法根据消毒对象选择简便一、消毒技术(一)明确消毒的主要对象应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类,有针对性地使用消毒剂。
(二)采取适当的消毒方法根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。
医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类:1。
高度危险的器材穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部,或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材,如手术器械、注射器、心脏起搏器等。
必须选用高效消毒法(灭菌)。
2. 中度危险的器材仅与皮肤、粘膜密切接触,而不进入无菌组织内,如内窥镜、体温计、氧气管、呼吸机及所属器械、麻醉器械等。
应选用中效消毒法,杀灭除芽胞以外的各种微生物。
3. 低度危险器材和物品不进入人体组织,不接触粘膜,仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触,如果没有足够数量的病原微生物污染,一般并无危害,如口罩、衣被、药杯等,应选用低效消毒法或只作一般卫生处理。
只要求去除一般细菌繁殖体和亲脂病毒。
(三)控制影响消毒效果的因素许多因素会影响消毒剂的作用,而且各种消毒剂对这些因素的敏感性差异很大。
1。
微生物的种类不同类型的病原微生物对消毒剂抵抗力不同,因此,进行消毒时必须区别对待。
1)细菌繁殖体易被消毒剂消灭,一般革蓝氏阳性细菌对消毒剂较敏感,革蓝氏阴性杆菌则常有较强的抵抗力。
繁殖体对热敏感,消毒方法以热力消毒为主。
(2)细菌芽胞芽胞对消毒因子耐力最强,杀灭细菌芽胞最可靠的方法是热力灭菌,电离辐射和环氧乙烷熏蒸法。
在化学消毒剂中,戊二醛、过氧乙酸能杀灭芽胞,但可靠性不如热力灭菌法.(3)病毒对消毒因子的耐力因种类不同而有很大差异,亲水病毒的耐力较亲脂病毒强。
(4)真菌对干燥、日光、紫外线以及多数化学药物耐力较强,但不耐热(60℃1小时杀灭). 2。
实验室灭菌指南
消毒灭菌方法
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1干热灭菌法
是利用恒温干燥箱内120ºC~150ºC的高热,并保持90~120分钟,杀死细菌和芽孢,达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌,且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥,易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一,在进行动物细胞体外培养工作时,常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2湿热灭菌法
压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力,使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0~1.1kg/cm2,维持20~30min即可达到灭菌效果。
3射线灭菌法
利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射,可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。
灭菌时间为30min。
用紫外线杀菌时应注意,不能边照射边进行实验操作,因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害,而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。
4过滤除菌法
是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤,使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留,从而达到除菌的方法。
过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。
目前,常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌,或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。
滤膜孔径应在0.22~0.45μm范围内或用更小的细菌滤膜,溶液通过滤膜后,细菌和孢子等因大于滤膜孔径而被阻,并利用滤膜的吸附作用,阻制小于滤膜孔径的细菌透过。
5化学消毒剂消毒法
用于那些不能利用物理方法进行灭菌的物品、空气、工作面、操作者皮肤、某些实验器皿等。
常用的化学消毒剂包括甲醛、高锰酸钾、70%~75%乙醇、过氧乙酸、来苏尔水、0.1%新洁尔灭、环氧乙烷、碘伏或碘酊等。
其中利用70%~75%乙醇、0.1%~0.2%氯化汞、10%次氯酸钠、饱和漂白粉等进行实验材料的灭菌;利用甲醛加高锰酸钾[(2mL甲醛+1g高锰酸钾)/m3]或乙二醇(6mL/m3)等加热熏蒸法进行无菌室和培养室的消毒。
在使用时应注意安全,特别是用在皮肤或实验材料上的消毒剂,须选用合适的药剂种类、浓度和处理时间,才能达到安全和灭菌的目的。
6抗生素抑菌法
主要用于培养液,是培养过程中预防微生物污染的重要手段以及作为微生物污染不严重时的“急救”措施。
常用的抗生素有青霉素、链霉素和新霉素等。
不同种类物品及培养物的消毒灭菌方法1
无菌操作室灭菌
培养材料进行培养、观察或更换培养液时,必须从各方面防止任何污染物进入培养液或容器,所以无菌操作室的灭菌是至关重要的。
由于无菌操作室的污染来源主要是空气中的细菌和真菌孢子,因此长期停用后的无菌操作室应进行熏蒸灭菌,熏蒸是用高锰酸钾+甲醛[(2ml甲醛+1g高锰酸钾)/m3]进行无菌室的灭菌。
经常使用的无菌操作室,在每次使用前都应进行地面卫生清洁,并用紫外线灯照射30 min,进行空气灭菌。
对超净工作台,每次操作前用紫外灯照射30min,然后用70%~75%酒精擦拭。
2培养液灭菌
培养液在制备过程中带有各种杂菌,分装后应立即灭菌,或在24小时内完成灭菌工序。
目前常用过滤除菌法除去培养物操作液和培养液中的细菌。
或对培养液中耐热组分先进行高压蒸汽灭菌,然后在无菌室加入经过过滤除菌的不耐热溶液,混匀后分装备用。
使用高压蒸汽灭菌器灭菌时,将分装好的培养液放入底部有一定量(淹没加热管)凉水的高压蒸汽灭菌器内,增压至0.35~0.4kg/cm2时排净灭菌器内冷空气,以便使蒸汽能到达各个消毒部位,保证消毒灭菌彻底。
然后继续加压加热,当压力表读数达到1.0~1.1kg/cm2为121
ºC,保持15~20 min即可。
由于消毒灭菌效果取决于温度而不是压力,所以在一定压力下保持较长的消毒灭菌时间是必须的。
在121ºC的蒸汽温度下可以很快杀死各种细菌及高度耐热的芽孢杆菌,因此许多培养液的消毒灭菌压力、温度一般保持在1.0~1.1 kg/cm2、121ºC。
消毒灭菌时间与需要消毒灭菌的培养液量密切相关(表2-3),时间不足达不到灭菌效果,时间过长培养液内的一些化学物质遭到破坏,影响培养液成分。
消毒灭菌结束后,关闭热源,只有当灭菌器内压力降为零时才能打开放气阀,排除剩余蒸汽,取出培养液。
不可在压力较高时打开放气阀,引起减压沸腾,使容器中液体溢出。
培养液组成中如含有遇热易分解的物质,则需用过滤方法消毒灭菌。
首先对培养液中耐热组分进行高压蒸汽灭菌后放置在无菌场所,固体培养液在40ºC左右琼脂即将凝结前,加入经过过滤除菌的不耐热溶液,混匀后冷却备用。
液体培养液在冷却到室温后再加入过滤除菌溶液。
过滤除菌时,使用孔径为0.22~0.45μm 或更小的细菌滤膜。
过滤除菌可利用抽滤装置或注射过滤器进行,所用器皿均应进行高压消毒灭菌,温度不应超过121ºC。
3玻璃器皿、塑料器皿和器械灭菌
玻璃器皿可进行干热灭菌或高压蒸汽灭菌,但在蒸汽灭菌后最好及时烘干水分。
对不能进行高压蒸汽灭菌的塑料器皿可用75%酒精浸泡,使用前在无菌操作台面上晾干的同时,用紫外线重复杀菌。
实验室还可以用环氧乙烷灭菌袋对塑料器皿进行消毒,消毒后的器皿要充分散气2~4小时后才可使用。
无菌操作所用的各种器械,一般采用干热或高压蒸汽灭菌,或用75%酒精浸泡,然后在无菌操作台面上晾干的同时再用紫外线重复杀菌;在使用期间可多次对其进行酒精灯火焰灼烧灭菌。
4培养材料的消毒灭菌
采自动物机体的实验材料,携带着微生物及杂质,接种前须进行表面消毒灭菌,对内部已受微生物侵染的材料应予以淘汰。
从动物机体采集的某些组织块,须用消毒剂进行浸泡处理,进行表面消毒。
常用消毒剂有过氧化氢(10~12%,浸泡5~15min)、过氧乙酸(0.05%,浸泡30s~1min)、酒精(70~75%,浸泡2min)。
灭菌程序验证内容
1.撰写验证方案及制定评估标准。