基因剪切仪CovarisM220-操作流程

剪切仪用户手册ShearTrac-II全自动直剪和残余剪切Geocomp欧美大地仪器设备中国有限公司Earth Products China Limited(EPC)目录1 概述1.1ShearTrac-II硬件1.2ShearTrac-II软件1.3操作原理2使用ShearTrac-II2.1手动垂直控制2.1.1显示器2.1.2位置2.1.3控制（仅用于单一系统）2.1.4设置2.2手动水平控制2.2.1显示器2.2.2位置2.2.3控制2.2.4设置2.3电脑控制附录A 安装A.1 准备测试站点A.2 开箱A.3 ShearTrac-II系统电气连接A.4 开机顺序附录B 故障解决附录C 维护1概述ShearTrac-II是一个智能加载系统，根据传感器的反馈实时控制加载架。

ShearTrac-II系统有2个力传感器（水平和垂直）和2个位移传感器（水平和垂直）。

电脑根据测试设定值对加载架进行加载和卸载。

加载机构通过步进电机与涡轮连接控制荷载增加或减小，使剪切盒左右移动。

水平和垂直方向的限位开关保证仪器的运行在其行程范围内。

标准ShearTrac-II单元使用一个16位的A/D卡，这就意味着仪器的原始数据读数在0—65536之间的整数范围内，每个读数称为一个数（count）。

这些数必须转换成工程单位，系统根据提供的标定系数将数转换为工程单位。

ShearTrac-II是一个智能加载系统，荷载架的操作都由电脑控制全自动完成，也可通过仪器前面板进行手动操作。

为了避免损坏仪器，电脑每秒钟会对所有传感器的读数进行数百次检查，任何模拟读数或数字读数超过允许的范围时对步进电机进行保护。

电脑和监视器可实时显示测量结果，编辑测试结果，测试完成后出报告。

通过按键和简单菜单可控制ShearTrac-II的垂直和水平运动，用软件操作时，输入相应的参数可以完成特殊的测试。

ShearTrac-II不需要特别熟练的人员来操作，也可以完成传统的固结测试。

Covaris S220高性能样品处理系统培训手册基因有限公司生命科学组二o一一 年 七 月目 录一、Covaris S220高性能样品处理系统技术特点二、系统安装条件三、培训所需试剂设备及样品四、安装及调试安排五、培训程序及时间安排六、仪器及试剂系统介绍七、实验操作流程八、仪器使用注意事项九、维护保养及常见问题处理十、附录一．Covaris高性能样品处理系统技术特点Covaris高性能样品处理系统是在专利技术——自动声波聚焦（AFA）技术的基础上建立起来的样品处理平台。

该技术整合了非线性、高强度、汇聚性声学冲击波和高级计算机控制系统，其圆盘状传感器可将声波能量聚焦在样品上，通过等温、非接触的方式对样品进行声学匀浆、分解和混匀。

而且，此系统的聚焦声能是可控，可根据应用范围和样品量选择波频率和波形，以控制聚焦带的尺寸和声波强度，且声学优化的样品容器也可根据声波聚焦带进行调整。

另外，系统处理的水浴环境可维持均一的处理温度，适用于对温度敏感的生物样本。

目前，Covaris高性能样品处理系统广泛地应用在组织破碎和匀浆、DNA/RNA/蛋白质的提取和复合物的混合与匀质中。

技术原理介于 20Hz～20kHz 的机械波振动在弹性介质中的传播就形成声波，介于 20kHz～500MHz 的称为超声波，超声波的传播速度就是声波的传播速度，而超声波具有波长短，易于定向发射和会聚等优点。

AFA技术利用几何聚焦声波能量，通过0.5MHz的球面固态超声传感器可将波长为1mm的声波能量聚焦在样品上，不仅可以控制波形，而且自动聚焦的能量无损失，且可直接作用于管内样品上。

系统特点：1.可处理体积为1,000µl-10ml，重量<1,000mg的样品，管子尺寸16×100 mm2.非接触式样品处理，无污染和交叉反应，且不用清洁探头3.等温处理，不会产生过热现象而破坏样本的生物活性4.可精确控制样本处理过程，重复性高5.自动聚焦的能量无损失，直接作用于管内样品上6.适用于多种水溶性和有机溶剂应用领域DNA、RNA和染色质剪切基因表达、基因组学、蛋白组学、药物筛选和临床诊断的生物组织和细胞培养物破碎和匀浆化学反应速度控制制药工业中难溶物的制备和溶解等二．系统安装条件1.位置要求：稳定水平的操作平台放置设备，远离热源，避免阳光直射2.空间及载重要求：操作平台尺寸（长×宽×高）：20 cm × 53 cm × 33 cm（平台下预留空间放置环路冷却/加热装置），仪器周围要留出至少3cm空隙，以方便散热。

Ion torrent微生物（细菌）全基因组重测序文库构建实验方案微生物（细菌）全基因组重测序文库构建实验方案一、重测序原理全基因组重测序是对已知基因组序列的物种进行不同个体的基因组测序，并在此基础上对个体或群体进行差异性分析。

二、技术路线培养至对数期的单一菌落↓基因组DNA提取细菌DNA（纯化）↓超声波打断 DNA片段化↓ 文库构建↓Ion OneTouch 乳液PCR、ES↓Ion PGM、Ion Proton 上机测序↓生物信息学分析DNA片段化↓ 末端修复↓纯化接头连接、缺口修复↓纯化文库片段筛选（E-Gel 法）↓ 文库片段扩增↓纯化 Agilent Test、Qubit定量↓ Ion OneTouch System 重测序三、实验方案 1.细菌总DNA的提取液氮速冻、干冰保存的细菌菌液：若本实验室可以提供该细菌生长的条件，则对菌液进行活化，培养至对数期时，对该细菌进行DNA提取；若本实验室不能提供该细菌的生长条件，则应要求客户提供尽可能多的样本，以保证需要的DNA量。

细菌DNA采用试剂盒提取法（如TianGen细菌基因组提取试剂盒）。

取对数生长期的菌液，按照细菌DNA提取试剂盒操作步骤进行操作。

提取完成后，对基因组DNA进行纯度和浓度的检测。

通过测定OD260/280，范围在1.8-2.0之间则DNA较纯，使用Qubit对提取的DNA进行定量，确定提取的DNA浓度达到文库构建的量。

2.DNA片段化采用Covaris System超声波打断仪（Covaris M220），将待测DNA打断步骤：1）对待打断的DNA进行定量，将含量控制在100ng或者1μg2）打开Covaris M220安全盖，将Covaris AFA-grade Water充入水浴容器内，至液面到最高刻度线（约15mL），软件界面显示为绿色3）将待打断DNA装入Ep LoBind管中，其中DNA为100ng或1μg，加入Low TE至总体积为50mL4）将稀释的DNA转移至旋钮盖的Covaris管中（200bp规格），转移过程中不能将气泡带入，完成后旋紧盖子5）选择Ion_Torrent_200bp_50μL_ScrewCap_microTube，将对应的小管放入卡口，关上安全盖，点击软件界面“RUN”6）打断结束后，将混合液转移至一支新的1.5mL离心管中3.末端修复及接头连接 3.1 末端修复使用Ion Plus Fragment Kit进行，以100ng DNA量为例，各组分使用前瞬时离心2s 步骤：1）加入核酸酶free水至装有DNA片段的1.5mL离心管中，至总体积为79μL 2）向体系中加入20μL 5×末端修复buffer，1μL末端修复酶，总体积为100μL 3）室温放置20min3.2 片段纯化片段纯化使用Agencourt AMpure XP Kit进行步骤：1）加入180μL Agencourt AMpure XP Reagent beads于经过末端修复的1.5mL离心管中，充分混匀，室温放置5min2）瞬时离心后，将离心管放置于磁力架（如DynaMag-2磁力架）3min，至溶液澄清，小心去除上清，离心管保持放置在磁力架上3）离心管放置于磁力架上不移动，配置新的500μL 70%乙醇，加入，30s后，盖上盖子颠倒混匀2次，使磁珠悬浮，放回磁力架至溶液澄清后，小心除去上清 4）重复第三步5）用20μL墙头小心吸去多余的液体6）将离心管留在磁力架上，室温风干不超过5min7）取下离心管，加入25μL Low TE缓冲液，盖上盖子，上下颠倒混匀5次，旋窝震荡10s，充分混合8）瞬时离心后，将离心管放于磁力架上至少1min，溶液澄清后，将上清移入一支新的1.5mL EP管中（不可吸到磁珠） 9）纯化的DNA片段用于下一步的接头连接4.接头连接、缺口修复和纯化片段两端的接头分别为barcode接头和P1接头 4.1 接头连接在0.2mL体系中加入（以100ngDNA为例）DNA 25μL10×Ligase Buffer 10μL Ion P1 Adaptor 2μL Ion XpressBarc ode X+ 2μL dNTP Mix 2μL Nuclease-free water49μL DNA Ligase 2μL Nick pair polymerase 8μL Total 100μL将体系配置好后，放入PCR仪按照下面的温度进行1个循环扩增25℃ 15min72℃ 5min 4℃ hold 循环×1立即转移至一个新的1.5mL离心管中 4.2 纯化片段纯化使用Agencourt AMpure XP Kit进行步骤：1）加入140μL Agencourt AMpure XP Reagent beads于经过末端修复的1.5mL离心管中，充分混匀，室温放置5min2）瞬时离心后，将离心管放置于磁力架（如DynaMag-2磁力架）3min，至溶液澄清，小心去除上清，离心管保持放置在磁力架上3）离心管放置于磁力架上不移动，配置新的500μL 70%乙醇，加入，30s后，盖上盖子颠倒混匀2次，使磁珠悬浮，放回磁力架至溶液澄清后，小心除去上清 4）重复第三步5）瞬时离心，用20μL墙头小心吸去多余的液体 6）将离心管留在磁力架上，室温风干不超过5min7）取下离心管，加入20μL Low TE缓冲液，盖上盖子，上下颠倒混匀5次，旋窝震荡10s，充分混合8）瞬时离心后，将离心管放于磁力架上至少1min，溶液澄清后，将上清移入一支新的1.5mL EP管中（不可吸到磁珠）5.文库片段筛选方案1E-Gel Agarose System采用E-Gel SizeSelect 2% Agarose Gel，在E-Gel电泳、成像系统中按照操作说明进行。

核酸检测仪器操作手册简介本操作手册旨在提供使用核酸检测仪器的详细指南，以帮助操作人员正确、高效地操作仪器。

仪器的正确操作对于获得准确和可靠的检测结果至关重要。

仪器准备在使用核酸检测仪器之前，请确保以下准备工作已经完成：1. 安装仪器：按照仪器使用手册的指引正确安装设备。

2. 检查供电：确保仪器连接到正确的电源，并检查电源处于正常工作状态。

3. 材料准备：准备好所需的核酸检测试剂和样本，并按照试剂说明书进行处理和储存。

仪器操作步骤1. 打开电源：将仪器连接到电源，并按下电源按钮打开仪器。

2. 设置实验参数：根据所需的检测项目，设置适当的实验参数，如温度、时间和检测方法。

参考仪器使用手册以获得更详细的操作说明。

3. 样本处理：按照试剂说明书的指导，准备和处理待测样本。

4. 加样：将处理好的样本加到仪器的样本孔中。

确保每个样本孔都正确标记。

5. 启动检测：按下开始按钮或根据仪器操作界面的指引启动检测程序。

6. 等待检测完成：根据所设定的实验参数，等待仪器完成检测过程。

期间请勿干扰仪器的运行。

7. 结果分析：仪器完成检测后，根据仪器显示的结果分析检测结果。

如果需要，可以导出结果以供进一步分析和存档。

8. 关闭仪器：检测完成后，按下关闭按钮关闭仪器，并拔掉电源插头。

维护与清洁为保持仪器的正常运行和延长使用寿命，以下操作建议应每天进行：1. 清洁：使用柔软的布轻轻擦拭仪器表面，确保仪器表面清洁无尘。

2. 维护：按照仪器使用手册的指引，定期进行维护操作，如更换试剂、校准仪器等。

3. 存储：在不使用仪器时，请将其存放在干燥、洁净的环境中，远离湿气和灰尘。

故障排除如果在使用仪器过程中遇到问题，请参考仪器使用手册中的故障排除部分。

如果问题无法解决，请联系售后技术支持。

安全注意事项1. 仪器操作时请戴好个人防护装备，如实验手套和护目镜。

2. 遵守使用试剂和样本的安全操作规范，避免直接接触试剂和样本。

3. 切勿在操作过程中随意更改实验参数或绕过仪器的安全设置。

基因编辑技术的实验操作指南基因编辑技术（Gene editing technology）是一种通过改变生物体的基因序列来实现特定基因的修饰或定向改变的技术。

它可以在基因组中插入、删除或修改特定基因，具有无限的潜力在医学、农业和环境领域产生革命性的进展。

本文将为您提供基因编辑技术常见的实验操作指南，帮助您更好地进行基因编辑实验。

一、常用的基因编辑技术1. CRISPR-Cas9CRISPR-Cas9是目前最常用的基因编辑技术。

它利用CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）序列和Cas9（CRISPR associated protein 9）蛋白质来实现基因组的修改。

具体操作步骤如下：- 选择适当的CRISPR目标序列，通常为20个碱基长度；- 合成CRISPR RNA（crRNA）和转录的转导RNA（tracrRNA）；- 将crRNA和tracrRNA以及Cas9蛋白质一起转染入目标细胞中；- 检测编辑结果，如通过PCR、限制性酶切或测序。

2. TALENTALEN（Transcription activator-like effector nuclease）是另一种常用的基因编辑技术，通过TALEN转录激活因子和核酸酶的融合来实现基因组的修改。

具体操作步骤如下：- 设计合成TALEN结构域，根据目标基因的序列选择合适的TALEN结构域；- 将TALEN融合基因导入表达载体中；- 用质粒转染靶细胞，使TALEN蛋白进入细胞；- 监测基因组修饰效果，例如通过PCR、限制性酶切或测序。

二、实验操作指南1. 实验前准备在进行基因编辑实验前，需要准备以下实验材料和设备：- 细胞培养基和细胞培养器具；- CRISPR-Cas9或TALEN相关质粒和实验试剂盒；- 转染试剂；- DNA测序仪或其他用于验证编辑结果的设备。

PCR仪操作指南步骤：1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单:准备执行程序。

2、放入样本管，关紧盖子。

3、一、如果要运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示:按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。

二、如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》，屏幕显示按《Proceed》，1）选择NEW,命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。

2）输入程序步骤：名字输入后，显示按《Proceed》则可以输入温度（0～100℃），按《Proceed》确认后，则可以输入孵育时间，用《Select》键移动光标，输入数字，完成后按《Proceed》确认，跳到下一步，输入方式同上。

3）选择GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达9999次）(为实际循环数－1)。

4)选择option,显示再选择increment,按《Proceed》确认，输入初始的温度，确认后输入时间，按《Proceed》确认，然后输入每个循环增加或减少的温度，增加用正值，减少用负值（－0.1℃～6℃），按《Proceed》确认。

选择extend, 按《Proceed》确认,输入每个循环增加或减少的时间（－60～60秒），按《Proceed》确认。

选择slop（指温度上升或下降的速率）,输入温度的改变值（－0.1～1.5℃）按《Proceed》确认，然后输入加热或致冷的速度，按《Proceed》确认。

4）选择End,输入结束步骤。

5、输入完成的程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。

6、其它：用《pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。

用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。

测核酸的仪器操作方法
操作核酸的仪器通常需要遵循以下步骤：
1. 准备样品：收集样品并净化，确保样品的纯度和浓度。

2. 准备工作台和设备：清洁工作台和使用的仪器，确保无污染。

3. 样品处理：根据实验目的选择适当的方法处理样品，如DNA或RNA提取。

4. 样品定量：使用紫外可见光谱仪或荧光分析仪测量样品的浓度。

5. PCR反应体系设置：根据实验需求准备PCR反应体系，包括DNA模板、引物、酶和缓冲液等。

6. PCR反应设置：按照实验方案设定PCR反应的温度、时间和环境条件。

7. PCR反应：将PCR反应体系加入PCR仪器，设置程序进行PCR扩增。

8. 凝胶电泳：将PCR产物与DNA或RNA分子量标准一起加入凝胶电泳孔中，使用凝胶电泳设备进行分离。

9. 凝胶电泳结果分析：观察凝胶电泳结果，根据PCR产物大小评估实验成果。

需要根据具体的仪器和实验目的进行具体操作，上述步骤给出了一般核酸仪器操作的大致流程。

荧光定量PCR仪操作规程1．开机程序（1）打开电脑，进入桌面。

（2）打开PCR仪器的电源开关（注：该仪器有两个电源开关，一个控制PCR 仪，一个控制光源系统）。

（3）双击桌面上的软件图标，点击“yes”,进入软件的主菜单。

(4)或打开开关，视窗上显示“SELF TEST”，显示10秒中后，显示RUN-ENTER 菜单：“RUN ENTER PROGRAM”准备执行程序。

2．关机程序(1) 保存数据，退出软件的主菜单。

(2) 关掉电脑，关闭PCR仪器的电源开关。

3.程序文件的设置及打开(1)实验程序已预先设定点击软件左方主目录中的“Library”，进入该界面后。

选择“ViewProtocol(查看协议)”页面，根据路径，找到预存的程序文件。

放入样本管，关紧盖子。

运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示：“-ENABLE DISABLE HEATED LID” 按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。

(2)创建新的程序文件点击软件左方主目录中的“Workshop”，进入该界面。

选择“Edit Prot ocol”页面，输入相应的温度、时间、重复的循环数（Repeats），增加或删除步骤（Cycle和Step），在“Select data collection step（s）”中选择需要进行荧光收集的步骤。

完成后，在“Protocol Filename”中输入程序的文件名，点击“Save this protocol”。

如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM，按《Proceed》，屏幕显示“ -NEW LIST EDIT DELET”，按《Proceed》，1）选择NEW，命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认。

输入程序步骤：名字输入后，显示“ STEP1TEMP GOTO OPITON END”，按《Proceed》则可以输入温度（0～100℃），按《Proceed》确认后，则可以输入孵育时间，用《Select》键移动光标，输入数字，完成后按《Proceed》确认，跳到下一步，输入方式同上。

剪切力测试仪操作规程1. 试验目的剪切力测试仪是用于测量材料的拉伸强度和剪切强度的重要设备。

本操作规程的目的是确保操作人员能正确、安全地使用剪切力测试仪进行试验。

2. 安全注意事项2.1 确保操作人员已经接受相关的安全培训，并具备相关的使用权限；2.2 在操作前检查设备是否正常运行，并确保所有的安全装置和保护设施处于良好状态；2.3 穿戴好个人防护装备，包括安全帽、防护眼镜、耳塞、防护手套等；2.4 在操作时，严禁戴手表、项链、长发等可能危及安全的物品；2.5 在操作前，确保试验台面上没有多余的杂物和其他工具。

3. 试验准备3.1 检查剪切力测试仪及各附件是否完好无损；3.2 检查试验样品是否符合要求，并严密按照标准规定的尺寸和形状进行切割；3.3 插入合适的试验刀具，并调整力传感器的位置以适应试验需求；3.4 确保试验样品已经放置在试验夹具上，并调整夹具的位置，使其能够准确地夹住样品；3.5 连接电源，并将剪切力测试仪开关调至开启状态。

4. 试验操作4.1 调节试验参数，包括试验速度、试验方式等，确保其符合标准要求；4.2 手动操作试验夹具，将试验样品夹住，并通过操作面板上的按钮开始试验；4.3 在试验过程中，观察试验数据的变化，并及时记录下来；4.4 当试验完成后，将试验样品从试验夹具中取出，并对样品进行必要的检查和测量；4.5 关闭剪切力测试仪的电源，并及时清理试验台面及设备附属物。

5. 数据处理5.1 将试验数据导入计算机，并运用相应的软件进行数据分析；5.2 根据标准要求，计算并记录试验结果；5.3 对试验结果进行比对和评估，并判定试验样品的强度等级。

6. 设备维护6.1 定期对剪切力测试仪进行维护保养，包括清洁、润滑、调整等；6.2 及时更换磨损的零部件，确保设备的正常运行；6.3 定期对剪切力测试仪进行校准，确保测试结果的准确性；6.4 对剪切力测试仪的故障进行及时处理，确保设备的连续可用性。

基因枪基本操作步骤
（1）先用70%乙醇对基因枪表面及样品室进行消毒。

同时，用70%乙醇将阻挡网和可裂圆片，微弹载体及其固定器、固定工具浸泡15min后，放在超净台上晾干。

可裂圆片、固定盖、微弹载体发射装置用70%乙醇进行表面灭菌，吹干。

（2）将微粒载片嵌入固定环中，取DNA及金粉的混合物加于微粒载片中心，干燥1min左右。

（3）安装可裂膜于其脱坐上，顺时针拧到气体加速器上。

（4）将空间环、阻挡网、阻挡网托座、微粒载片及固定环安装好，旋紧盖子，插入基因枪。

（5）将样品放在轰击室中，关好门。

（6）打开氦气瓶的总阀，顺时针转氦气调解阀，是氦压表指针的示数高于可裂膜的压力200Psi。

（7）打开基因枪及变压器开关。

（8）按动真空键，待真空度至26~28英寸汞柱时，迅速按下Hold键，接着按住发射键，并保持不动，直到击发为止。

（9）按通气键待真空表回零后，取出样品。

（10）关机：A. 把氦气瓶总开关旋紧，打一次空枪，到氦气表指针回零后，在逆时针旋转氦压表调解阀；B. 关闭基因枪的总开关及变压器开关。

Mastercycler PersonalPCR 仪操作手册1 简介Eppendorf 的Mastercycler Personal 是适用于所有分子生物学和生化实验室研究的PCR仪。

样品温度在4-90 度间快速可调（最大速度每秒3 度）。

设计有特殊的¡离心管控制¡模式，从而对装有不同体积溶液的不同离心管中的样本进行温度控制。

加热槽为一通用模块，可适用5X5 的微孔板、25 个0.2ml 的Eppendorf PCR 管、16 个0.5ml 薄壁的Eppendorf PCR 管或其他相应的试管，而无须更换模块。

为避免样本蒸发浓缩，本仪器设计有可适应各种试管高度的热盖。

本仪器易于操作，有完整的八线显示，并可连接打印机。

Mastercycler Personal 是Perkin-Elmer 公司授权许可生产的PCR 仪。

2 安全警告3 安装3.1 包装一个包装内应含有以下物品：1 台小型PCR 仪1 条主电源线1 本操作指南1 张个人存储卡1 包0.2mlPCR 管（100 个）3.2 装机安装时请确保通气孔通畅，四周有足够的空间散热；并请确保仪器下部无其他异物。

搬动仪器时无须其他装置，可抓住仪器两侧将其提起。

所需空间：宽18cm深：35cm高：25cm电源连接：1 个防电击插座。

如需连接打印机，则需用另一电源连接。

3.3 启动仪器拆除热盖上的胶条并取出热盖下的泡沫塑料。

连接电源线。

启动仪器前请核对用户电源是否与铭牌要求相符。

连接和启动打印机的步骤见第9 部分。

4 技术说明4.1 仪器结构图1：前面观1 热盖2 热盖锁3 显示与控制面板4 个人存储卡读取器图2：侧面观图3：背面观1 热盖2 加热槽（此图中未显示）3 通气孔4 PC 连接插孔5 打印机连接插孔1 通气孔2 主电源开关3 保险丝4 主电源插孔5 铭牌图4：显示与控制面板1 编辑键2 光标键3 控制键4 小数点和顺序颠倒标志键5 显示屏4.2 按键1、编辑键Opt ¡在运行过程中按opt 键可显示程序运行的剩余时间¡编程时选择温度指令（ramp、梯度、增量）Del ¡删除程序条，数据字母或重新设定参数：按住此键可删除整条信息Sel ¡选择程序指令¡选择菜单信息¡可选择字母（用¡键决定正逆序）Ins ¡在程序编辑中插入程序条2、光标键▲►▼◄用于移动光标，显示为黑色方块。

Covaris M220高性能样品处理系统培训手册基因有限公司生命科学组二o一二年三月目录一、Covaris M220高性能样品处理系统技术特点二、系统安装条件三、培训所需试剂设备及样品四、安装及调试安排五、培训程序及时间安排六、仪器及试剂系统介绍七、实验操作流程八、仪器使用注意事项九、常见问题处理十、附录一．Covaris高性能样品处理系统技术特点Covaris高性能样品处理系统是在专利技术——自动声波聚焦（AFA）技术的基础上建立起来的样品处理平台。

该技术整合了非线性、高强度、汇聚性声学冲击波和高级计算机控制系统，其圆盘状传感器可将声波能量聚焦在样品上，通过等温、非接触的方式对样品进行声学匀浆、分解和混匀。

而且，此系统的聚焦声能是可控，可根据应用范围和样品量选择波频率和波形，以控制聚焦带的尺寸和声波强度，且声学优化的样品容器也可根据声波聚焦带进行调整。

另外，系统处理的水浴环境可维持均一的处理温度，适用于对温度敏感的生物样本。

技术原理介于20Hz～20kHz 的机械波振动在弹性介质中的传播就形成声波，介于20kHz～500MHz 的称为超声波，超声波的传播速度就是声波的传播速度，而超声波具有波长短，易于定向发射和会聚等优点。

AFA技术利用几何聚焦声波能量，通过0.5MHz的球面固态超声传感器可将波长为1mm的声波能量聚焦在样品上，不仅可以控制波形，而且自动聚焦的能量无损失，且可直接作用于管内样品上。

系统特点：1.非接触式样品处理，无污染和交叉反应，且不用清洁探头2.等温处理，不会产生过热现象而破坏样本的生物活性3.可精确控制样本处理过程，重复性高4.自动聚焦的能量无损失，直接作用于管内样品上应用领域适用100bp-3kb 大小的DNA目的片段剪切二．系统安装条件1.位置要求：稳定水平的操作平台放置设备，远离热源，避免阳光直射2.空间及载重要求：操作平台尺寸（长×宽×高）：12” W x 17” D x 10” H (30cm x 43cm x 25cm)（平台下预留空间放置环路冷却/加热装置），仪器周围要留出至少3cm空隙，以方便散热。

剪切试验机操作流程剪切试验机是一种常用的实验仪器，用于测试材料的抗剪强度和剪切性能。

正确的操作流程对于获得准确的测试结果至关重要。

本文将介绍剪切试验机的操作流程，帮助您正确地操作和使用该设备。

1. 确认实验条件在进行剪切试验前，首先要确认实验所需的条件，包括试验温度、湿度以及加载速率等。

这些条件将直接影响试验结果，因此要准确设定，并确保设备能够满足这些条件。

2. 准备样品根据试验要求，选择适当尺寸的样品进行剪切试验。

确保样品表面平整，无明显瑕疵，并根据需要进行预处理或者预应力处理。

3. 安装样品将样品放置在剪切试验机的夹持装置中，并确保样品与装置接触良好。

根据试验需求，调整夹持装置的夹持力，以保持样品的稳定性和一致性。

4. 调试设备在进行正式试验前，需要对剪切试验机进行一些调试。

首先，确保传感器的准确性和灵敏度，校准加载系统以及位移测量系统。

调试完毕后，进行零位校准，将试验机的读数归零，以获得准确的试验结果。

5. 设定试验参数根据试验的要求，设置剪切试验机的参数。

包括加载速率、采样频率、加载方式（单向或往返加载）等。

这些参数的准确设定将直接影响试验结果，要根据实际需求进行调整。

6. 进行试验在所有准备工作完成后，开始进行剪切试验。

根据设定的试验参数，启动试验机，进行加载，并时刻观察试验过程中的数据变化。

记录试验数据，并确保试验过程中的安全和稳定。

7. 数据处理和分析完成试验后，对试验数据进行处理和分析。

根据试验目的，计算并评估样品的抗剪强度、剪切模量等指标。

同时，绘制相应的试验曲线和图表，以便更直观地进行数据分析和比较。

8. 清理和保养在试验结束后，对剪切试验机进行清理和保养。

清除残留的样品和杂物，保持设备的整洁和正常运转。

定期检查和维护设备，确保其性能和准确性。

总结：剪切试验机操作流程包括确认实验条件、准备样品、安装样品、调试设备、设定试验参数、进行试验、数据处理和分析，以及清理和保养。

通过遵循正确的操作流程，您可以获得准确可靠的剪切性能测试结果，并确保剪切试验机的正常工作和寿命延长。

二代测序仪器操作方法二代测序仪器是目前广泛应用于基因组学、转录组学和蛋白质组学等领域的高通量测序技术。

下面将详细介绍二代测序仪器的操作方法。

首先，操作人员应该熟悉二代测序仪器的基本构造。

二代测序仪器主要由测序平台、读取头、荧光探针、电泳卡和数据分析软件等组成。

操作人员应该了解各个组件的功能和使用方法。

其次，进行二代测序之前需要准备样品。

样品可以是DNA、RNA或蛋白质，可以通过提取、纯化等方法获取。

样品的质量和纯度对测序结果有很大影响，因此在进行测序之前，需要对样品进行质量检测和纯化处理。

接下来，将准备好的样品加载到二代测序仪器中。

首先，将样品和测序试剂混合，形成测序反应混合液。

然后，将混合液加入到读取头中，并且按照仪器要求进行装载。

装载完成后，需要对读取头进行校准和调整，确保各个通道的信号均匀且正常。

完成样品加载后，启动二代测序仪器，开始测序过程。

在测序过程中，读取头将会通过电泳卡进行读取，获取样品中的碱基序列信息。

读取过程中，测序仪器会发出荧光信号，标记每个碱基的类型。

这些荧光信号会被读取头接收并转换成电信号，然后通过数据线传输给电脑进行分析。

在测序过程中，需要保持实验环境的稳定和干净。

确保温度、湿度等参数符合要求，避免仪器故障和误差的产生。

此外，操作人员需要定期检查仪器状态，确保各个组件正常工作，以免影响测序结果的准确性和可靠性。

测序过程完成后，需要进行数据分析和结果解读。

首先，将测序得到的原始数据导入到数据分析软件中。

然后，对数据进行质量控制和预处理，包括去除低质量序列、修剪接头序列等。

接着，将处理后的数据与参考序列进行比对，得到样品的序列信息。

最后，根据序列信息对样品进行进一步的分析和解读，如基因注释、变异检测等。

总结而言，二代测序仪器的操作方法包括准备样品、加载样品、启动仪器、稳定环境、数据分析和结果解读等步骤。

操作人员需要掌握仪器的基本构造和功能，同时严格按照操作规程进行操作，以确保测序结果的准确性和可靠性。

剪切力测试仪操作规程1. 前言剪切力测试仪是一种用于测试材料剪切强度的仪器。

本操作规程旨在规范剪切力测试仪的操作方法，确保测试结果的准确性和可靠性。

2. 仪器准备2.1 确保剪切力测试仪处于正常工作状态，并接通电源。

2.2 根据测试需要，选择合适的剪切力传感器，并将其正确连接到测试仪上。

2.3 预热剪切力测试仪，使其达到稳定工作温度。

3. 样品准备3.1 根据测试需求，选择合适的样品，并确保样品的尺寸和形状符合测试要求。

3.2 对于柔性材料，如纸张和塑料薄膜，应根据相关标准或测试方法对样品进行切割，以确保其尺寸和形状的一致性。

3.3 对于刚性材料，如金属板材，应使用适当的工具将样品切割成所需的尺寸和形状。

4. 进行测试4.1 将样品放置在测试仪的夹持装置中，并确保样品处于水平和稳定的位置。

4.2 根据需要，调整剪切刀具的位置和角度，以确保其与样品的接触点正确。

4.3 设置剪切力测试仪的测试参数，包括测试速度、测试力范围等。

根据需要，可以设置多个测试点或多个测试参数。

4.4 开始测试，观察和记录测试仪显示的剪切力数值，并确保记录准确。

4.5 在每次测试后，应清洁测试仪的刀具和夹持装置，以去除样品残留物，以免影响下一次测试的结果。

5. 数据处理和分析5.1 根据测试结果，计算并记录剪切强度的数值。

5.2 对测试结果进行统计分析，包括计算平均值、标准偏差等。

5.3 分析测试结果，评估样品的剪切性能，并根据需要进行进一步的测试或研究。

6. 仪器维护6.1 定期对剪切力测试仪进行校准，以确保测试结果的准确性和可靠性。

6.2 定期对测试仪进行维护，包括清洁、润滑、更换磨损部件等。

6.3 对于故障或异常情况，应及时进行修复或更换部件。

在进行维修或更换时，应按照相关规定或要求进行操作。

7. 安全注意事项7.1 在操作剪切力测试仪时，应戴上适当的个人防护装备，如手套和护目镜。

7.2 在进行测试时，严禁将手指或其他物体放入剪切刀具的接触区域。

基因编辑技术的操作步骤和注意事项基因编辑技术是一种能够直接修改生物体基因组的工具，它能够精确地对基因进行改造、删除或添加，以实现个性化定制的目的。

在不久的将来，基因编辑技术将为医学领域、农业领域以及环境保护等领域带来革命性的变化。

然而，尽管基因编辑技术具有巨大的潜力，但其操作步骤和注意事项仍然需要严格遵守和处理。

操作步骤如下：1. 选择适当的基因编辑工具：目前广泛采用的基因编辑工具包括CRISPR-Cas9系统、TALENs（转录活化性核酸酶打靶编辑酶）以及锌指核酸酶（ZFNs）。

根据实验需求和目标基因的特性，选择合适的基因编辑工具。

2. 设计合理的基因编辑寡核苷酸（sgRNA）或引物：根据目标基因序列，设计出具有高特异性和高效率的sgRNA或引物。

确保sgRNA或引物与目标基因序列的配对较好，并避免对其他基因的不必要的影响。

3. 载体构建与转染：将sgRNA或引物插入到合适的载体中，将其转入目标细胞。

选择适当的转染方法，如化学法、电穿孔法或病毒载体法，确保基因编辑工具的高效转染。

4. 检测基因编辑效率：利用PCR扩增、DNA序列分析或者检测基因表达等方法，验证基因编辑工具的编辑效果。

确保编辑效果准确、高效。

5. 选择合适的基因编辑后续处理：根据实验需求，选择合适的后续处理方法。

如将编辑细胞克隆化、使其产生稳定的基因改造后代等。

注意事项如下：1. 遵守伦理规范：在进行基因编辑实验时，必须遵守伦理委员会的规定和道德标准。

确保实验过程和目的符合伦理要求，不涉及未经人类同意的基因改造。

2. 安全操作：基因编辑实验需要在适当的实验室条件下进行，遵循相应的安全操作规程。

确保实验人员的人身安全和实验物质的安全。

3. 验证编辑效果：对于编辑后的细胞或生物体，应进行确认实验，验证编辑效果是否达到预期。

通过相关技术手段进行验证，确保编辑结果的准确性和可重复性。

4. 避免非特异修饰：在进行基因编辑时，必须注意避免对非目标基因的不必要修改。

凯普医用核酸快速杂交仪标准操作程序1 目的保证凯普快速杂交仪的工作正常，并规范仪器操作。

2 适用范围用于快速检测 HPV DNA21 种分型的存在。

3 职责规范仪器操作、检测过程、保养要求和校准要求等。

4 程序4.1 仪器简介人乳头状瘤病毒（HPV）是迄今已被肯定的少数 DNA 肿瘤病毒之一，HPV 的存在就预示着疾病的存在。

世界范围研究表明 HPV 可以在 99.8％的宫颈癌患者中发现。

HPV 的感染使宫颈癌的相对危险性增加 250 倍。

凯普医用核酸分子快速杂交仪是 HPV（人乳头状瘤病毒核酸）DNA 检测的平台，是子宫颈癌超早期筛查及基因检测技术的新贡献。

它具有国际领先技术，获得二项美国技术专利和一项中国专利，获得欧盟 CE 认证。

4.2 仪器工作原理其主要工作原理是主动地将目标分子 DNA 导向固定在薄膜纤维上抓取探针，再跟捕捉的分子进行杂交产生复合物，其余不受限制的分子穿过薄膜后被清除，既省时又节约反应物，该技术远优于传统杂交法。

4.3 仪器的基本资料温度显示分辨率：0.1℃~反应室工作温度：20℃~80℃可任意设定反应室温度控制精度：≤±0.5℃工作升温速度：（3~7）℃/S（max）工作降温速度：（1~5）℃/S（max）蠕动泵抽液速度：：（60~80）ml/min操作模式手动模式直接输入所需温度程式模式最多可设定 9 个程序，并对程序有保存、读取、显示（修改）、运行等功能。

仪器最大工作噪声：≤62dB配套电源：输入：220V/50Hz 输出：DC24V损耗功率：≤300VA4.4 试剂组成人乳头瘤病毒（HPV）检测试剂盒由凯普公司提供，主要包括如下试剂：杂交液，封阻液，酶标液，溶液 A、溶液 B 及 NBT/BCIP 溶液。

4.5 授权操作人4.6 仪器常规操作4.6.1 杂交仪使用前准备a 打开杂交仪的电源；b 在杂交仪后面的废液出口处安装好废液缸；c 根据控制面板指示，选定【manual mode】，按【enter】健进入温度设定界面，输入温度为 45℃，再按【enter】健确认进行升温；d 用蒸馏水充满反应室，放置好金属多孔板并打开水泵，排除多孔板上面的蒸馏水后关闭水泵；e 将与实验样品数相对应孔数的塑料薄膜放置在金属多孔板上；f 用镊子将杂交膜放置在塑料薄膜对应开孔上，如有多余开孔则用 parafilm 封口膜覆盖，这一步要确保杂交膜湿润且没有气泡；g 在杂交膜上面放置硅胶封圈和分隔室；固定好压扣盖；h 开泵泵出残留在膜上的水珠后关泵。

基因剪切仪CovarisM220-操作流程一、开机检查（a）检查电脑与仪器线路是否连接妥当，检查电脑和仪器电源线是否连接妥当（b）支架中心下方放置水盘，避免加水时洒落至实验台面上（c）水槽中插入操作管支架（Tube Holder）二、水浴设置：将操作支架顶部的滑行砝码拉起并旋转90度，在支架中心加注约15ml的蒸馏水或去离子水。

若加注的水量合适，water level前面的状态显示为“√”，水量不合适则显示为“╳”三、样品放置（a）将操作支架顶部的滑行砝码拉起并旋转90度（b）支架上放入样品垫片，有2种规格：microTube 50µl，编号500488，其上只能放置50µl规格的microTube管；microTube 130µl，编号500489，其上只能放置130µl规格的microTube管。

依据样品DNA量的多少旋转不同规格的垫片和micro Tube管（c）DNA样品加入到样品管中后，样品管透明凸出端朝下放入垫片小孔中，另一端朝上。

旋转并放下滑行砝码，使之压住样品管，然后关闭安全门四、开机顺序：先开仪器主机，再开显示器和电脑主机，最后双击桌面“CovarisSnol Lab 7”仪器控制软件五、软件主界面主菜单Run/History/Setup/Maintenance/About：Run编辑和选择运行方法；History查看系统操作历史；Setup用户系统设置；Maintenance厂家或维修人员的仪器参数设置；Help用户操作指南；About系统配置信息点击“Run”按钮，运行设定的程序；点击“Pause”按钮，暂时中止运行设定的程序；“Instrument Status”仪器状态，显示water temperature/water level/door/light几种参数，前3种参数符合运行条件，则status显示“√”号，不符合运行条件，则status显示“╳”号；点击“Light”图标，打开和关闭仪器灯光；“Temp”和“Power”表示在运行过程中，样品水浴温度及运行时仪器使用功率六、“Run”界面参数设置（1）点击“Method”，下拉菜单显示编辑过的Method信息，可进行Method选择、新建和编辑。