临床免疫学与检验重点
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概论+抗原抗体反应1 免疫学基本概念及其生物学功能;免疫:机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能免疫三大功能:免疫防御、免疫自稳、免疫监视中枢免疫器官(骨髓和胸腺)外周免疫器官(淋巴结、脾脏、扁桃体)免疫细胞:淋巴细胞(T,B,NK)、单核巨噬细胞、其他免疫应答细胞(中性粒、嗜酸性、嗜碱性和肥大细胞)免疫分子:免疫球蛋白(IgM,IgG,IgA,IgE,IgD),补体,细胞因子,细胞黏附分子,人类白细胞分化抗原免疫应答:机体免疫系统接受抗原刺激发生的一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
过程:抗原的识别、处理、信息传递(识别阶段),免疫细胞的激活、增殖、分化(活化阶段)以及产生一系列的免疫效应因子(效应阶段)。
临床免疫学检验:研究免疫学检测理论、技术、应用,免疫疾病发病机制、免疫诊断、及防治的一门医学领域的应用学科。
免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应,免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。
免疫检验:1)利用免疫检测原理和技术检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞黏附分子等免疫相关物质;2)体液中的微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素。
临床免疫学:利用免疫学理论和技术研究疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、疗效评价、预后判断和预防的多个分支学科的总称。
免疫性疾病:各种原因引起的机体免疫应答异常所致的疾病,包括超敏反应性疾病、自身免疫病、免疫缺陷病和免疫增生病。
感染免疫学:研究病原微生物与宿主相互关系从而控制感染的学科,传统免疫学核心。
肿瘤免疫学:研究肿瘤免疫原性、机体抗肿瘤的免疫效应及机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系以及肿瘤免疫诊断与防治的学科。
移植免疫学:研究移植物与宿主相互关系从而选择移植物和延长移植物存活的学科。
2 血清学反应的概念;抗体主要存在于血清中,体外的抗原抗体反应称为血清学反应。
抗原抗体反应:抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应,特异性取决于抗原表位和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,并通过静电引力、范德华引力、氢键结合力和疏水作用力等非共价键结合在一起。
临床免疫学检验知识点1.免疫系统的基本知识:了解免疫系统的组成、功能和调节机制是理解临床免疫学检验的基础。
免疫系统由免疫器官(如脾脏、淋巴结、骨髓等)和免疫细胞(如淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等)组成,其功能包括抵御病原体的入侵、清除异常细胞和产生抗体等。
2.免疫细胞的检测方法:常用的免疫细胞检测方法包括流式细胞术、免疫组化和染色技术等。
流式细胞术可用于检测和计数不同类型的免疫细胞,免疫组化和染色技术可用于检测细胞表面标记物和细胞内分子的表达水平。
3.免疫球蛋白的检测方法:免疫球蛋白是免疫系统中的重要成分,其浓度和种类的改变可以指示一些疾病的存在和进展。
测定免疫球蛋白的方法包括免疫电泳、免疫扩散和化学发光等技术。
4.免疫反应的检测方法:免疫反应的检测方法可以用于评估机体对病原体的免疫应答以及检测自身免疫疾病的存在。
常用的免疫反应检测方法包括抗体检测、细胞毒性测定和溶菌试验等。
5.自身抗体的检测方法:自身抗体是机体免疫系统对自身组织产生的免疫反应产物,其异常产生与自身免疫疾病的发生和进展密切相关。
常用的自身抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光和免疫印迹等。
6.免疫功能的评估方法:免疫功能的评估可以指导临床医生判断机体的免疫状况和预测疾病的发展趋势。
常用的免疫功能评估方法包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子水平检测和细胞增殖测定等。
7.临床应用:临床免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如,检测艾滋病病毒抗体可用于艾滋病的早期诊断和监测;自身抗体的检测可用于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎的诊断;细胞因子水平的检测可以评估炎症反应和肿瘤的进展等。
综上所述,临床免疫学检验涵盖了多个方面的知识点,包括免疫系统的基本知识、免疫细胞和免疫球蛋白的检测方法、免疫反应和自身抗体的检测方法、免疫功能的评估方法以及临床应用等。
这些知识点对于临床医生正确使用和解读免疫学检验结果具有重要的指导意义。
临床免疫学检验1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mlg表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19 CD20 CD21 CD22 (成熟B细胞的mlg主要为mlgM和mlgD)同时检测CD5分子,可分为B1 细胞和B2 细胞。
B 细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4杀伤T细胞的标志是CD8 T细胞受体=TCRT细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);CD3+ CD知CD8-= 辅助性T细胞(Th)CD3+ CD4 CD8+ =细胞毒性T细胞(Tc或CTL (T细胞介导的细胞毒试验)CD4+ CD2升=调节性T细胞(Tr或Treg )T细胞功能检测:植物血凝素(PHA刀豆素(CONA刺激T细胞增殖。
增殖试验有:形态法、核素法。
T 细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)表面标志:CD16(ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS表面标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。
(表达MHC[类分子)8、人成熟树突状细胞(DC (专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a CD11c和CD83,9、免疫球蛋白可分为分泌型(slg,主要存在于体液中,具有抗体功能)及膜型(mlg,作为抗原受体表达于B 细胞表面,称为膜表面免疫球蛋白)10、免疫球蛋白按含量多少排序:lgG> IgA > IgM > IgD > IgE五类(按重链恒定区抗原性(CH排序)免疫球蛋白含量测定:单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。
免疫学考试重点归纳(全面)1抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
2亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。
3亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
4抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。
5带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。
6免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
8半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
9载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
10载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。
11单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。
12多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~13基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
免疫应答主要分为哪几个阶段?1)识别阶段 2)活化与增值阶段 3)免疫效应中枢免疫器官与外周免疫器官有哪些器官组成?各有什么功能?1)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟得场所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫细胞产生应答得场所。
如脾脏,淋巴结,黏膜,扁桃体等。
T细胞、B细胞与NK细胞得主要功能分别就是什么?1)T细胞: 介导细胞免疫,辅助体液免疫。
2)B细胞: 产生体液免疫3)NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。
根据作用方式及其特点得不同,机体存在两类免疫简述各自得概念与特征?1)先天性免疫或固有性免疫,就是个体出生就是就具有得天然免疫,可通过遗传获得,就是机体在长期进化过程中逐渐建立起来得主要针对入侵病原体得天然防御功能。
其主要特征就是反应迅速,针对外来异物得范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。
2)适应性免疫,就是个体出生后,接触到生活环境中得多种异物抗原,并在不断刺激中逐渐建立起来得后天免疫,也称获得性免疫。
其主要特征就是针对某个特定得异物抗原而产生免疫应答,开始得应答过程比较缓慢,一旦建立清除该抗原得效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应得原理。
答:抗原与抗体能够特异性结合就是基于抗原表位与抗体超变区分子间得结构互补性与亲与性,这种特性就是由抗原、抗体分子空间构型所决定得,它们之间得结合就是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面得结合简述抗原抗体反应得类型。
答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生得凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生得沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致得细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致得中与反应;⑤免疫标记得抗原抗体反应等。
什么就是带现象?答:在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量(形成前带或后带),上清液中可测出游离得抗体或抗原,形成得沉淀物少,不出现可见反应,这种现象在做血清学试验时称为带现象。
免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答免疫应答过程:抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以与产生一系列的免疫效应分子免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段1、识别阶段:是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报与相关淋巴细胞的阶段2、活化阶段:是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增值、分化的阶段。
B细胞接受抗原信息分化为浆细胞,T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞3、效应阶段:是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子,T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另外有少量T、B细胞在增值分化后,不直接执行效应功能,而成为记忆细胞免疫应答效应多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成免疫器官按功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所,由骨髓和胸腺组成;外周免疫器官是免疫应答的场所,有淋巴结、脾与扁桃体等组成。
单核细胞核淋巴细胞经血液循环与淋巴循环进出于外周淋巴组织与淋巴器官,形成机体免疫系统的免疫网络。
(一)中枢免疫器官1、骨髓2、胸腺:是一级淋巴上皮组织,是T细胞发育的重要中枢器官,胸腺由胸腺基质细胞(TSC)和胸腺细胞组成。
(二)外周免疫器官与组织1、淋巴结:分为皮质区与髓质区。
皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。
淋巴结的中心是髓质区,由淋巴索和淋巴窦组成,淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞,包括B 细胞、浆细胞、T细胞与巨噬细胞淋巴结主要功能:是共淋巴细胞栖息和增值的场所;是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地;是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站2、脾:是富含血管的最大外周淋巴器官。
3、黏膜伴随的淋巴组织:有B细胞、T细胞、浆细胞与巨噬细胞,受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答,使B淋巴细胞活化分化为浆细胞,产多种Ig类别的看那个题,其中最主要的是IgA与分泌型IgA,执行体液免疫与局部特异免疫作用(三)淋巴细胞再循环与归巢三、免疫细胞(一)淋巴细胞:是免疫系统的主要细胞,包括T细胞、B细胞核NK细胞1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。
第三章免疫原和抗血清的制备第一节免疫原的制备免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞,并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
一、颗粒性抗原的制备细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。
细胞抗原(如绵羊红细胞)一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净,配制一定浓度即可。
细菌抗原多用液体或固体培养物,经集菌后处理。
颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法。
二、可溶性抗原的制备和纯化(一)组织和可溶性抗原的粗提蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原。
1组.织匀浆的制备(1)高速组织捣碎机法;(2)研磨法:组织匀浆液要离心沉淀,沉淀物为组织和细胞碎片,上清液为提取可溶性抗原的材料。
2细.胞的破碎()反复冻融法:℃冷冻,〜7融化。
(2)超声破碎法(3)自溶法(4)酶处理法:胃蛋白酶或胰酶。
(5)表面活性剂处理法:十二烷基硫酸钠。
3免.疫球蛋白片段的制备()非共价键解离法:改变环境或用变性剂。
(2)共价键解离法:还原法或氧化法解离二硫键。
(3)溴化氰裂解法:溴化氰裂解蛋白质肽链。
(4)酶解法:木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶。
(二)可溶性抗原的提纯和纯化超速离心法:适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原,不适用于大多数中小分子抗原。
选择性沉淀法:(1)核酸去除法:核糖核酸降解法更简便。
(2)盐析法:常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。
(3)有机溶剂沉淀法:常采用乙醇或丙酮。
()聚合物沉淀法:常用非离子型聚合物,如聚乙二醇()G凝胶过滤法:根据分子大小进行分离纯化。
离子交换层析法:利用一些带电离子基团的凝胶或纤维素,吸附带有相反电荷的蛋白质抗原。
5亲.和层析法:与生物分子间不同的亲和性进行分离。
如抗原和抗体、酶和酶抑制物、酶蛋白和辅酶、激素和受体等。
电泳法:蛋白质在同一环境中,分子量和电荷不同,在电场中迁移速率不同进行分离。
(三)纯化抗原的鉴定蛋白质含量测定:常用的是紫外光吸收法,该法测定和的吸光度()值。
一:名词解释1免疫学(immunology):是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病,治病为目的的一门现代医学科学。
2免疫球蛋白(immunoglobulin):是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等液体中,约占血浆蛋白总量的20%,IgG能与相应抗原特异性结合,执行体液免疫功能。
3补体(complement):是存在于人和脊椎动物血清与组织液中一组经活代后有酶活性的蛋白质,包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白,故称为补体系统。
4细胞因子(cytokine):是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的总称。
大多数细胞因子是低分子量的蛋白或糖蛋白。
5临床免疫学(clinical immunology):是将免疫学基础理论,临床疾病与免疫学技术相结合,用于研究疾病的免疫病理机制,诊断与鉴别诊断,评价治疗效果和判断预后的多个分支学科的总称。
6亲和性(affinity):是指抗体分子上的一个抗原结合点与一个相应抗原表位之间的结合强度,抗原抗体的亲和性取决于两者空间构型的互补的程度。
7亲和力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,亲和力与亲和性,抗体的结合价,抗原的有效抗原表位数目有关。
8免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
9半抗原(hapten):是指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
10免疫佐剂(immunoadjuvant):预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型,简称佐剂。
11凝集反应(agglutination reaction):是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原的颗粒性载机与相应抗体特异性结合后,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象。
临床免疫和免疫检验实验指导(一)免疫血清的制备与鉴定实验一、免疫血清的制备机体的特异性免疫反应是指机体受抗原物质刺激后产生体液免疫(抗体)和细胞免疫(致敏的T淋巴细胞及其产物多种淋巴因子)的过程。
一种抗原能否引起免疫反应,一方面取决于抗原分子表面有无特异性的抗原决定簇。
另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。
上述条件具备时,抗原经合适途径,选择合适剂量及次数,进入机体内,经过一段潜伏期,抗体水平就逐渐升高,维持高峰,既高效价抗体。
利用此原理可制备血清学试验所需的抗血清、各种免疫球蛋白及溶血素等。
制备优质的免疫血清除需要纯化抗原外,还需注意选择合适的动物及注射的途径,抗原剂量、注射次数等有密切关系。
(一)抗原制备和动物的选择1.抗原的制备:为了制备特异性强、亲和力高和效价满意的抗血清,首先要选择合适的抗原。
抗原的特异性除与其分子量大小有关外,还与其分子表面上决定簇性质、位置、立体构型有密切的关系。
抗原种类可分为天然抗原、人工抗原及合成抗原。
在天然抗原中又可分为可溶性抗原(如血清、毒素、组织浸出液等)、颗粒性抗原(如细菌、红细胞等)及半抗原(本身无免疫原性,必须与载体结合才有免疫原性)。
2.动物的选择:实验室多选用家兔、豚鼠(或鸡),商品性生产多用马、羊,特殊情况选用猴。
在免疫前应预先测定体内有无存在低滴度交叉反应的天然抗体。
(二)抗原的注射途径和剂量1.注射抗原的途径:通常可采用静脉、腹腔或皮下途径,皮内或肌肉途径较少采用。
近期发展在局部淋巴结或足等部位注射抗原。
不同途径,抗原在体内代谢速度不同,因而产生抗体的水平不同。
在皮下组织中能长期贮留的抗原,特别是与佐剂相混合的抗原,可以从皮下组织内缓慢释放出来,有利于抗体的产生。
2.抗原剂量及注射次数:应随抗原的性质而异。
3.每次注射间隔时间:不同抗原和不同免疫方法,可从数日到数周,一般无佐剂抗原为2~4天。
加佐剂抗原为10~15天。
(三)佐剂的作用原理及种类:1.原理:佐剂又称免疫增强剂。
临床医学检验技师考试大纲-免疫学和检验【前言】以下是我为大家整理的临床医学检验技师考试大纲之免疫学和检验,仅供参考!科目:1-基本学问2-相关专业学问3-专业学问4-专业实践力量单元细目要点要求科目一、概论 1.免疫学简介(1)免疫学概念与免疫应答娴熟把握 1 (2)免疫组织与器官娴熟把握 1 (3)免疫细胞娴熟把握 1 (4)免疫分子娴熟把握 1 2.临床免疫学(1)免疫病理与免疫性疾病把握 1 (2)移植免疫把握 1 (3)肿瘤免疫把握 1 (4)感染免疫把握 13.临床免疫学与免疫检验(1)免疫学技术的进展了解1 (2)临床免疫学与免疫检验了解 1二、抗原抗体反应 1.抗原抗体反应原理(1)抗原抗体结合力了解 1 (2)抗原抗体亲和力和亲合力了解 1 (3)亲水胶体转化为疏水胶体了解 1 2.抗原抗体反应的特点(1)特异性娴熟把握 1 (2)可逆性娴熟把握 1 (3)比例性娴熟把握 1 (4)阶段性娴熟把握 1 3.影响抗原抗体反应的因素(1)反应物自身因素把握 1(2)环境因素把握 1 4.免疫学检测技术的类型基本类型把握 3 三、免疫原和抗血清制备1.免疫原的制备(1)颗粒性抗原的制备把握 3 (2)可溶性抗原的制备和纯化了解 3 (3)半抗原免疫原的制备把握 3 2.免疫佐剂(1)佐剂的种类了解 1 (2)佐剂的作用机制了解 1 3.抗血清的制备(1)免疫动物的选择了解 3 (2)免疫程序了解 3 (3)动物采血法了解 3 4.抗血清的鉴定和保存(1)抗血清的鉴定了解 3 (2)抗血清的保存了解 3 5.抗血清的纯化(1)特异性IgG 抗体了解 3 (2)单价特异性抗血清了解 3 四、单克隆抗体及基因工程抗体的制备1.杂交瘤技术的基本原理(1)杂交瘤技术把握 3 (2)阳性杂交瘤细胞的克隆化培育与冻存了解 32.单克隆抗体的制备(1)单克隆抗体的产生了解3 (2)单克隆抗体的纯化了解 3(3)单克隆抗体的性质鉴定把握 3 (4)单克隆抗体的特性了解 3 3.基因工程抗体制备(1)人源化抗体了解 1 (2)小分子抗体了解 1 (3)抗体融合蛋白了解 1 (4)双特异性抗体了解 1 (5)噬菌体抗体库技术了解 2 4.单克隆抗体的应用(1)检验医学诊断试剂了解 2(2)蛋白质的提纯了解 2 (3)小分子抗体的应用了解 2 (4)抗体融合蛋白的应用了解 2 (5)双特异抗体的应用了解 2 (6)抗体库技术的应用和前景了解 2 五、凝集反应 1.凝集反应的特点概念娴熟把握 1 2.直接凝集反应(1)玻片凝集试验娴熟把握 3 (2)试管凝集试验娴熟把握 3 3.间接凝集反应(1)间接凝集反应的类型娴熟把握 4 (2)间接血凝试验娴熟把握 4 (3)胶乳凝集试验把握 4 (4)明胶凝集试验把握 4 (5)间接凝集反应的应用把握4 七、放射免疫技术 1.放射免疫技术(1)基本类型及原理把握 3(2)常用的放射性核素娴熟把握 3 (3)标记物制备及鉴定了解 3 (4)抗血清鉴定了解 2 (5)方法学评价了解2 2.放射免疫分析(1)基本原理了解3 (2)试验方法及测定方法了解 43.免疫放射分析(1)基本原理了解 3(2)IRMA与RIA的比较了解 4 4.放射免疫分析技术的应用实际应用把握 4八、荧光免疫技术 1.概述(1)荧光的基本学问了解 1 (2)荧光物质把握 12.荧光抗体技术(1)荧光抗体的制备把握 4 (2)标本的制作娴熟把握 4 (3)荧光抗体染色与结果推断娴熟把握 4 (4)荧光显微镜的基本结构把握 4 3.荧光免疫分析的类型(1)时间辨别荧光免疫测定娴熟把握4 (2)荧光偏振免疫测定了解 4(3)荧光酶免疫测定了解 4 4.荧光免疫技术在医学检验中的应用(1)荧光抗体技术的应用把握 2 (2)荧光免疫测定的应用把握2 九、酶免疫技术 1.酶免疫技术的特点(1)酶和酶作用底物把握 2 (2)酶标记抗体或抗原把握 2 (3)固相载体娴熟把握 2 2.酶免疫技术分类(1)均相酶免疫测定娴熟把握 4 (2)异相酶免疫测定娴熟把握 4 3.酶联免疫吸附试验(ELISA)(1)基本原理娴熟把握 3(2)方法类型及反应原理娴熟把握 4 4.酶免疫测定的应用把握 4 十、化学发光免疫分析技术 1.概述(1)化学发光把握 2 (2)化学发光效率了解 2 2.化学发光剂和标记技术(1)化学发光剂了解 2 (2)发光剂的标记技术了解 4 3.化学发光免疫分析的类型(1)直接化学发光免疫分析了解3 (2)化学发光酶免疫分析把握 3(3)电化学发光免疫分析娴熟把握 3 (4)临床应用把握 4 十一、生物素-亲和素放大技术 1.生物素的理化性质与标记(1)活化生物素了解 1 (2)生物素标记蛋自质了解1 2.亲和素、链霉亲和素理化性质与标记(1)亲和素及其活性了解 1 (2)链霉亲和素及其活性了解 1 (3)亲和素(或链霉亲和素)的标记了解2 3.生物素_亲合素系统的特点(1)灵敏度了解3 (2)特异性了解 3 (3)稳定性了解3 (4)适用性了解 3 (5)其他了解 3 (1)生物素-亲和素系统基本类型及原理了解 3 (2)生物素-亲和素系统在酶免疫测定中应用了解 44.生物素-亲和素系统的应用(3)生物素-亲和素系统在荧光免疫技术中的应用了解 4 (4)生物素-亲和素系统在放射免疫测定中的应用了解 4(5)生物素-亲和素系统在分子生物学中的应用了解 4 十二、固相膜免疫测定 1.概述(1)常用的固相膜了解 3 (2)固相膜的技术要求了解3 2.免疫金标记技术(1)胶体金的制备了解 3 (2)免疫金制备了解 3 3.膜载体免疫测定的种类与原理(1)免疫渗滤试验娴熟把握 4 (2)免疫层析试验娴熟把握4 (3)斑点酶免疫吸附试验了解 4 (4)酶联免疫斑点试验了解 4 (5)免疫印迹法把握 4 (6)放射免疫沉淀试验了解 4 (1)标本的处理了解 2 (2)抗原的保存与修复了解2 1.概述(3)抗体的处理与保存了解2 (4)免疫组化的结果推断了解3 (5)质量掌握了解 2 2.免疫荧光组织化学技术(1)组织处理了解4 (2)荧光抗体的标记及染色了解 4 十三、免疫组织化学技术 3.酶免疫组织化学技术(1)组织处理了解 4 (2)酶标记抗体免疫组化染色了解 4 (3)非标记抗体免疫酶组化染色了解 4 (4)酶免疫组化染色中常用的酶及显色底物了解 3 4.亲和组织化学染色(1)生物素-亲和素法了解 4 (2)葡萄球菌A蛋白法了解 4 (3)凝集素法了解 4 (4)链酶亲合素-生物素法了解4 5.免疫标记电镜技术(1)免疫标记电镜技术的原理了解 1 (2)免疫标记电镜技术标本制备的要求了解 2 (3)常用的免疫标记电镜技术了解 4 6.免疫组织化学技术的应用(1)免疫组织化学技术的临床应用把握 3 (2)免疫组织化学技术的拓展了解 2 十四、免疫细胞的分别及其表面标志检测技术 1.免疫细胞的分别(1)外周血单个核细胞分别把握 3 (2)淋巴细胞的分别娴熟把握 3 (3)T细胞和B细胞的分别了解 3 (4)T细胞亚群的分别了解 3 (5)不同细胞分别方法的综合评价了解 2 (6)分别细胞的保存及活力测定把握 3 2.淋巴细胞标志及亚群分类(1)T细胞表面标志及其亚群娴熟把握 4 (2)B细胞表面标志娴熟把握 4 (3)NK细胞表面标志把握 4 3.其他的免疫细胞(1)单核-吞噬细胞系统了解 2(2)树突状细胞了解 2 4.免疫细胞表面标志的检测及应用(1)免疫细胞表面标志的检测方法了解 4 (2)淋巴细胞表面标志检测的临床意义了解 3 十五、免疫细胞功能检测技术 1.淋巴细胞的功能检测(1)T细胞功能检测把握 4 (2)B细胞功能检测把握 4 (3)NK细胞活性测定了解 4 2.吞噬细胞功能检测技术(1)中性粒细胞功能检测了解 3(2)巨噬细胞功能检测了解 3 3.免疫细胞功能检测的临床应用把握 4十六、细胞因子与细胞粘附因子的测定 1.生物学测定方法(1)促进细胞增殖和抑制细胞增殖测定法了解 3(2)细胞毒活性测定法共同特性了解 3(3)抗病毒活性测定法了解 3 (4)趋化活性测定法了解 3 (5)生物学活性测定方法学评价了解 2 2.免疫测定方法(1)ELISA方法了解 4 (2)流式细胞分析法了解 4 (3)酶联免疫斑点试验了解 4 (4)免疫学测定方法学评价了解4 3.细胞因子与细胞粘附因子测定的临床应用(1)临床应用了解 4 (2)特定疾病诊断的帮助指标了解 4 (3)评估疾病的免疫状态、推断治疗效果及预后了解 4 十七、流式细胞仪分析技术及应用 1.概述(1)工作原理了解 1 (2)散射光的测定了解 2 (3)荧光测量了解 2 (4)细胞分选原理了解 1 2.数据的显示与分析(1)参数了解 2 (2)数据显示方法了解 2 (3)设门分析技术了解 2 3.流式细胞仪免疫分析的技术要求(1)免疫检测样品制备了解 4 (2)免疫分析中常用的荧光染料与标记染色了解 2 (3)免疫胶乳颗粒技术的应用了解 4 (4)流式细胞免疫学技术的质量掌握了解 2 4.流式细胞术在免疫学检查中的应用(1)淋巴细胞及其亚群的分析把握 4 (2)淋巴细胞功能分析了解 4 (3)淋巴造血系统分化抗原及白血病免疫分型了解 4(4)肿瘤耐药相关蛋白分析了解 4 (5)AIDS病检测中的应用娴熟把握 4 (6)自身免疫性疾病相关HLA抗原分析娴熟把握 4(7)移植免疫中的应用了解 4 十八、体液免疫球蛋白测定 1.血清IgG、IgA、IgM测定(1)血清IgG、IgA、IgM测定娴熟把握 4 (2)血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义娴熟把握 42.血清IgD和IgE测定(1)IgD测定及临床意义把握4 (2)IgE测定及临床意义把握 43.尿液及脑脊液Ig测定(1)尿液Ig测定及临床意义把握 4 (2)脑脊液Ig测定及临床意义把握 44.血清IgG亚类测定及临床意义了解 4 5.M蛋白测定及临床意义娴熟把握 4 6.轻链测定及临床意义把握 4 7.冷球蛋白的检测把握4 十九、补体检测及应用 1.概述(1)补体成分的含量与理化特性娴熟把握 1 (2)补体的活化途径娴熟把握 1 2.补体总活性测定把握 2 3.单个补体成分的测定(1)免疫溶血法了解 3 (2)免疫化学法把握 3 4.补体结合试验(1)试验原理了解 4 (2)试验方法了解 4 (3)方法评价了解 3二十、免疫检验自动化仪器分析 1.自动化免疫浊度分析系统(1)免疫透射比浊法把握 3 (2)免疫胶乳比浊法了解 3 (3)免疫散射比浊法娴熟把握 3 (4)免疫比浊分析的影响因素和临床应用把握 4 2.自动化发光免疫分析系统(1)吖啶酯标记化学发光免疫分析仪把握 3 (2)酶联发光免疫分析仪了解 3 (3)电化学发光免疫分析仪把握 3 (4)在临床免疫检测中的应用娴熟把握 4 3.自动化荧光免疫分析系统(1)时间辨别荧光免疫分析仪把握 3 (2)荧光偏振免疫分析仪了解3 4.自动化酶联免疫分析系统把握3 1.概述(1)与质量保证相关的定义娴熟把握 1 (2)试验方法诊断效率评价娴熟把握 3 2.免疫检验的质量掌握原则(1)标本的正确收集及处理娴熟把握 3(2)标准化操作及流程了解 3 (3)标准品和质控品的应用娴熟把握 3 二十一、临床免疫检验的质量保证(4)试验室的环境、设施和设备了解 3 3.质量保证、室内质控和室间质评之间的关系了解 3 4.常用免疫检验的质量掌握(1)免疫检验质量掌握中常用统计学方法的选择娴熟把握 3 (2)定性免疫检验把握3 (3)定量免疫检验把握 3(4)半定量免疫检验把握 3 5.免疫检验室内质量掌握的数据处理(1)室内质控数据的评价和管理了解 3 (2)室内质控的局限性了解3 (3)免疫检验质量保证的意义了解 3 二十二、感染性疾病与感染免疫检测 1.细菌感染性疾病的免疫检测(1)链球菌感染娴熟把握 3(2)伤寒沙门菌感染把握 3 (3)结核分枝杆菌感染娴熟把握 3 2.真菌感染性疾病的免疫检测(1)深部真菌感染把握 3(2)类真菌感染了解 3 3.病毒感染性疾病的免疫检测(1)流感病毒感染把握 3(2)轮状病毒感染把握 3 (3)肝炎病毒感染娴熟把握 3 (4)冠状病毒感染把握 3 4.先天性感染的免疫检测(1)弓形虫感染把握 3 (2)风疹病毒感染把握 3 (3)巨细胞病毒感染把握 3 (4)单纯疱疹病毒感染把握 3 5.寄生虫感染的免疫检测(1)疟原虫感染把握 3(2)血吸虫感染了解 3 (3)丝虫感染了解 3 (4)华支睾吸虫感染了解 3 (5)猪囊尾蚴感染了解 3 1.I型超敏反应(1)I型超敏反应发生气制把握 1 (2)常见I型超敏反应性疾病把握 3 (3)I型超敏反应免疫学检测娴熟把握 4 2.Ⅱ型超敏反应(1)Ⅱ型超敏反应发生气制把握 1 (2)常见Ⅱ型超敏反应性疾病把握 3 (3)Ⅱ型超敏反应免疫学检测娴熟把握 4 二十三、超敏反应 3.Ⅱ型超敏反应(1)Ⅱ型超敏反应发生气制把握 1 性疾病及其免疫检(2)常见Ⅱ型超敏反应性疾病把握 3 测(3)Ⅱ型超敏反应免疫学检测娴熟把握 44.Ⅱ型超敏反应(1)Ⅱ型超敏反应发生气制把握 1 (2)常见Ⅱ型超敏反应性疾病把握 3 (3)Ⅱ型超敏反应免疫学检测娴熟把握 4 二十四、自身免疫性疾病及其免疫检测 1.概述自身免疫性疾病的共同特征把握 3 2.自身免疫性疾病与免疫损伤(1)自身抗原把握 1(2)免疫调整特别了解 1 (3)遗传因素了解l 3.常见的自身免疫性疾病(1)由Ⅱ型超敏反应引起的自身免疫性疾病了解 3 (2)自身抗体-免疫复合物引起的自身免疫性疾病了解3 (3)T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病了解 3 4.常见自身免疫性疾病的自身抗体检测(1)自身抗体的特性把握 3 (2)抗核抗体的检测与应用娴熟把握 4 (3)抗ENA抗体谱的检测与应用娴熟把握 4(4)与小血管炎相关的自身抗体检测与应用了解 4 (5)与RA相关自身抗体的检测与应用把握 4(6)与自身免疫性肝病相关自身抗体的检测与应用把握4 (7)与桥本甲状腺炎相关自身抗体的检测与应用了解 4 (8)与神经系统自身免疫性相关自身抗体的检测与应用了解 4 5.自身抗体检测的临床应用(1)自身抗体检测的一般原则了解 2 (2)试验室方法的选择及结果的确认了解 26.自身免疫性疾病的相关试验检测(1)免疫球蛋白和补体检测及临床意义把握 3 (2)淋巴细胞检测及临床意义了解 3 (3)细胞因子检测及临床意义了解 3 (4)循环免疫复合物检测及临床意义把握 3 二十五、免疫增殖性疾病及其免疫检测 1.概念及分类了解2 2.免疫球蛋白特别增殖性疾病的免疫损伤机制(1)浆细胞特别增殖了解 2 (2)正常体液免疫抑制了解 2 (3)特别免疫球蛋白增生造成的病理损伤了解 2 (4)溶骨性病变了懈 2 3.常见免疫球蛋白增殖病(1)多发性骨髓瘤把握 3 (2)巨球蛋白血症把握 3 (3)重链病了解3 (4)轻链病了解 3 (5)良性单克隆丙种球蛋白血症了解 3 4.免疫球蛋白特别增殖常用的免疫检测(1)血清区带电泳娴熟把握 4 (2)免疫电泳娴熟把握 4 (3)免疫固定电泳娴熟把握 4 (4)血清免疫球蛋白定量娴熟把握 4 5.特别免疫球蛋白的测定(1)M蛋白的检测娴熟把握 4 (2)尿液轻链蛋白的检测把握 4(3)特别免疫球蛋白检测的应用原则把握 4二十六、免疫缺陷病的分类和特点 1.免疫缺陷病的分类和特点(1)免疫缺陷病分类把握 3 (2)免疫缺陷病特点把握 2 2.原发性免疫缺陷病(1)原发性B细胞缺陷了解 3 (2)原发性T细胞缺陷 3 (3)重症联合免疫缺陷3 (4)原发性补体系统缺陷 3 3.继发性免疫缺陷病(1)继发性免疫缺陷的常见缘由把握 3 (2)获得性免疫缺陷综合征把握3 4.免疫缺陷病检验(1)B细胞缺陷的检测把握 4 (2)T细胞缺陷的检测把握4 (3)吞噬细胞缺陷的检测了解 4 (4)补体系统缺陷的检测了解 4 (5)获得性免疫缺陷的检测娴熟把握 4 二十七、肿瘤免疫与免疫学检验1.肿瘤抗原(1)依据肿瘤抗原的特异性分类了解 2 (2)依据肿瘤抗原产生气制分类了解 22.机体抗肿瘤的免疫学效应机制(1)抗肿瘤的细胞免疫机制了解 1 (2)抗肿瘤的体液免疫机制了解 13.肿瘤免疫学检验(1)肿瘤标志物娴熟把握 3让知识带有温度。
临床医学检验技术(师):临床免疫学检验必看考点真题1、单选不适于做半抗原载体的物质为()A.血清白蛋白B.甲状腺球蛋白C.多聚赖氨酸D.活性炭E.内毒素正确答案:E2、单选人巨噬细胞的获取来源一般不包括()(江南博哥)A.外周血B.斑蝥敷贴形成的皮泡液C.肺泡漂洗液D.患者腹膜透析液E.肝组织正确答案:E3、单选体外抗原抗体反应可以表现为()A.变态反应B.通过胎盘C.细胞移动抑制D.沉淀反应E.吞噬反应正确答案:D4、单选结肠癌和直肠癌相关的标志物是()A.AFPB.CEAC.PSAD.CA125E.CA19-9正确答案:B5、单选能使小鼠产生抗DNP抗体的抗原是()A.DNPB.多聚L-赖氨酸C.DNP-牛血清蛋白D.小剂量牛血清蛋白E.大剂量牛血清蛋白正确答案:C6、单选在补体替代激活途径中C3转换酶是()A.D因子C.C3bBbD.C3bBbPE.C1S正确答案:D7、单选免疫比浊测定中造成高剂量钩状效应的因素是()A.抗原分子量小B.抗体效价低C.抗原过量D.抗体过量E.抗原抗体亲和力低正确答案:C参考解析:免疫比浊测定过程中,当抗原过量时,形成的IC分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,光散射亦减少,形成高剂量钩状效应。
8、单选具有黏附玻璃或塑料表面特性的细胞是()A.T细胞B.B细胞C.粒细胞D.单核细胞E.血小板正确答案:D参考解析:单核细胞具有黏附玻璃或塑料表面的特性。
9、单选关于挑刺试验以下说法不正确的是()A.将试验抗原与对照液分别滴于试验部位皮肤上B.用针夹透过液滴在皮肤上轻轻挑刺一下,以刺破皮肤但以不出血为度C.1分钟后吸去抗原溶液D.同时试验多种抗原,不要将不同的抗原液交叉混合E.主要用于Ⅰ型超敏反应,比皮内试验法敏感度高正确答案:E10、单选抗体对具有相同或相似抗原决定基的不同抗原的反应称为()A.交叉反应B.非特异性反应C.特异性反应D.过敏反应E.异物性正确答案:A11、单选仅对B细胞具有刺激作用的有丝分裂原是()A.PHAC.PWMD.ConAE.PPD正确答案:B12、单选关于间接血凝试验正确的是()A.红细胞呈片层状为不凝集B.红细胞呈片层状凝集为判定终点C.根据凝集程度判断阳性反应的强弱D.以+++凝集的标本稀释度报告试验结果E.红细胞沉积于管底集中呈圆点为凝集正确答案:B13、单选免疫比浊试验用于()A.血清蛋白组分分析B.抗原蛋白定量C.抗原或抗体的效价测定D.鉴别免疫球蛋白的类和型E.蛋白质纯化正确答案:B参考解析:免疫比浊试验是在定量抗体加入递增量的抗原,测定反应液体浊度,用于推算抗原蛋白含量。
临床免疫学检验重点整理(下)混合,在补体参与下,使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空斑,每一个空斑中央含一个抗体形成细胞,空斑数目即为抗体形成细胞数目。
细胞因子(CK):是由机体活化的免疫细胞及某些基质细胞分泌的小分子蛋白质,通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学效应(有旁分泌、自分泌、内分泌)。
细胞粘附分子(CAM):是由细胞产生、介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的分子。
酶联免疫斑点实验(ELISPOT):在包被有待测CK抗体的微孔板上,加入可分泌相应细胞因子的待测细胞,在有或无刺激物存在的条件下培养后,待测细胞向其周围分泌细胞因子,并被板上的特异性抗体捕获。
洗去细胞后用酶标抗体为一抗或二抗,分别做直接法和间接法。
所选底物应在酶促反应后形成不溶性产物。
一个斑点代表一个细胞因子分泌细胞,斑点的颜色深浅程度与细胞因子量相关。
目前在细胞因子检测方面应用较多的是IFN-γ的测定。
免疫球蛋白(Ig):是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。
可分为分泌型和膜型两类。
(现在认为,Ig与Ab没有什么区别)临床上常用速率散射免疫比浊法检测Ig。
免疫球蛋白测定的临床意义(一)年龄,年龄不同其血液中的Ig含量有一定变化,新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG,故血液中含量较高,接近成人水平。
婴幼儿体液免疫功能尚不成熟,Ig含量低于成人,各年龄段的正常参考区间见教材。
需要注意的是,血液Ig随年龄、性别、血型、种族及测定方法不同而有差别,各实验室需要建立自己的参考值范围。
(二)多克隆高Ig血症肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化等患者的血清中,三种免疫球蛋白均可升高。
慢性细菌性感染如结核、麻风、慢性支气管炎等血中IgG可升高。
宫内感染时脐带血或出生后的新生儿血清中IgM含量可增高。
自身免疫性疾病时三种Ig均可升高,如SLE患者以IgG/A升高较为多见,类风湿性性关节炎患者以IgM升高为主。
《临床免疫学检验》教学大纲一、前言本大纲教材为《临床免疫学与检验》(王兰兰主编,人民卫生出版社,第5版),适用于医学检验专业。
本门课的教学基本要求是要求学生掌握免疫学技术和临床免疫学理论。
教学基本要求1.通过免疫检验学的学习,掌握各项免疫学检验技术的原理,试剂组成,基本操作,注意事项,影响因素及临床应用。
2.通过临床免疫学及免疫病理的学习,掌握免疫学疾病的概念,发病机理及其检验。
3.了解临床免疫学与免疫检验的最新进展。
4.本教学大纲的教学内容分三级:详细介绍,重点介绍,一般介绍。
本课程面授学时数为38学时。
教学内容及学时分配二、教学内容第一章概论(一)详细介绍:免疫、免疫学、免疫应答反应、免疫细胞、免疫分子的概念。
(二)重点介绍:免疫应答反应、免疫组织与器官、免疫细胞的分类、表面标志;淋巴细胞再循环与归巢;免疫球蛋白结构与分类。
(三)一般介绍:临床免疫学、免疫检验以及临床应用第二章抗原抗体反应(一)详细介绍:抗原抗体反应的原理和特点以及影响因素。
(二)一般介绍:抗原抗体反应主要类型和临床应用。
第三章免疫原和抗血清的制备(一)详细介绍:抗血清制备,抗血清的鉴定和保存。
免疫佐剂的概念和种类以及作用机制。
(二)重点介绍:抗血清中抗体的纯化。
(三)一般介绍:免疫原的制备。
第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备技术(一)详细介绍:单克隆抗体的概念,杂交瘤技术的基本原理。
(二)重点介绍:制备单克隆抗体的基本技术。
(三)一般介绍:基因工程抗体技术,主要在噬菌体抗体库技术---基本原理和程序;特点。
第五章凝集反应和沉淀反应(一)详细介绍:凝集反应的特点,抗球蛋白参与的血凝试验(二)重点介绍:直接凝集反应,间接凝集反应、沉淀反应的概念和特点、凝胶内沉淀反应。
(三)一般介绍:自身红细胞凝集试验、絮状沉淀试验、沉淀反应的应用。
第六章放射免疫技术(一)详细介绍:常用放射性核素、125I标记抗体(抗原)的制备和鉴定、放射免疫技术中常用的分离方法,放射免疫技术的方法学评价。
第二十一章临床免疫检验的质量保证第一节概述一、定义1.质量保证(QA):为一产品或服务满足特定的质量要求提供充分可信性所要求的有计划的和系统的措施。
2.室内质量控制(IQC):由实验室工作人员采取一定的方法和步骤,连续评价本实验室工作的可靠性程度,旨在监测和控制本室常规工作的精密度,提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性,并确定当批的测定结果是否可靠,可否发出检验报告。
3.室间质量评价(EQA):采取一定的方法,连续、客观地评价实验室测定结果与靶值的差异,发现误差并校正结果,使各实验室之间的结果具有可比性。
这是对实验室操作和实验方法的回顾性评价,而不是用来决定实时的测定结果的可接受性。
当EQA用来为实验室执业许可或实验室认证的目的而评价实验室操作时,常描述为实验室能力验证(PT)。
4.准确度:待测物的测定值与其真值的一致性程度。
准确度不以数值表示,通常以不准确度来间接衡量。
对一分析物重复多次测定,所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏倚即为测定的不准确度。
5.偏倚:待测物的测定值与一可接受参考值之间的差异。
偏倚又分批内偏倚和批间偏倚,批内偏倚反映的是系统误差,如校准不准、非特异显色等。
批间偏倚问题要更大,如试剂或校准物变质所致的误差。
6.精密度:在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。
以不精密度来间接表示。
测定不精密度的主要来源是随机误差,以标准差(SD)和(或)变异系数(CV)具体表示。
SD或CV越大,表示重复测定的离散度越大,精密度越差,反之则越好。
准确度好的实验,其精密度不一定好;准确度差的实验,其精密度则不一定差;反之亦然。
7.重复性条件:是指在短的间隔时间内,在同一实验室对相同的测定项目使用同一方法和同一仪器设备,由相同的操作者获得独立的测定结果的条件。
8.批:在相同条件下所获得的一组测定。
9.均值:一组测定值中所有值的平均值,亦称均数。
均值为计算值,在实际测定数据中可能会出现该数值,也可能没有。
临床医学检验技术(师):临床免疫学和免疫学检验学习资料1、单选TC在抗感染中主要抵御的细菌是()A.布氏杆菌B.肺炎球菌C.破伤风杆菌D.乙型链球菌E.金黄色葡萄球菌正确答案:A2、配伍题在酶免(江南博哥)疫组化技术中,常用的HRP底物为()显色后测定波长为450nm的供氢体底物为()辣根过氧化物酶(HRP)的受氢体底物为()A.OPDB.TMBC.DABD.H2O2E.Eu正确答案:C,B,D3、单选T细胞活化的第二信号是指()A.IL-1与相应受体间的相互作用B.IL-2与相应受体间的相互作用C.协同刺激分子与相应受体间的相互作用D.CD4与MHC-Ⅱ类分子间的相互作用E.CD8与MHC-Ⅰ类分子间的相互作用正确答案:C4、单选由于使用化妆品引起面部水肿,渗出,痒痛,此类炎症反应应属于()A.Ⅰ型超敏反应B.Ⅱ型超敏反应C.Ⅲ型超敏反应D.Ⅳ型超敏反应E.以上都不是正确答案:D5、单选血清电泳时,Ig主要分布于()A.α1区B.α2区C.β区D.γ区E.α区正确答案:D参考解析:Ig分子量较大,电泳时迁移缓慢,主要位于γ区。
6、单选T淋巴细胞表面识别抗原的受体是()A.CD3B.TCRC.CD3-TCRD.CD4E.CD8正确答案:C参考解析:T淋巴细胞识别抗原受体包括:主要受体(TCR-CD3)和辅助受体(CD4或CD8),C为最佳答案。
7、单选判定被中性粒细胞吞噬的白色念珠菌是否被杀死的染液为()A.苏丹Ⅲ染液B.复红染液C.刚果红染液D.美蓝溶液E.沙黄染液正确答案:D参考解析:检测细胞内杀菌功能时,加美蓝溶液作活体染色,如胞内白色念珠菌呈蓝色,表示该菌已被杀死。
8、单选下列关于HLA的叙述,错误的是()A.强直性脊柱炎患者中,90%以上具有HLA-B27抗原B.在多次输血时病人发生的非溶血性输血反应与其体内抗HLA抗体有关C.通常细胞癌变时HLA-Ⅰ类抗原表达增加D.1型糖尿病患者胰岛素β细胞可表达HLA-Ⅱ类抗原E.同种异体间器官移植物的存活取决于供者与受者之间HLA型别的相配程度正确答案:C9、单选免疫系统对病原体过强的免疫应答会导致()A.感染加重B.局部感染扩散至全身C.迅速清除病原体D.传染性超敏反应E.发生自身免疫性疾病正确答案:D参考解析:对病原体过强的免疫应答会导致超敏反应,属于Ⅳ型超敏反应,称为传染性超敏反应。
2024年检验师大纲
2024年检验师考试大纲包括临床血液学检验、临床化学、临床免疫学和免疫检验、微生物检验、基础检验等方面的内容。
具体来说,临床血液学检验的考试重点包括血液学检验基础、红细胞疾病、白细胞疾病、血栓与止血、血液检验技术等方面的知识。
临床化学的考试重点包括肝胆疾病的实验室诊断、肾脏疾病的实验室诊断、心血管疾病的实验室诊断、糖尿病与内分泌疾病的实验室诊断等方面的知识。
临床免疫学和免疫检验的考试重点包括免疫学基础、临床免疫学检验的基本技术、自身免疫性疾病的诊断与治疗等方面的知识。
微生物检验的考试重点包括细菌学检验、病毒学检验、其他微生物的检验等方面的知识。
基础检验的考试重点包括采血技术及临床意义、尿液生成及标本采集、粪便检查及临床意义等方面的知识。
总体来说,2024年检验师考试大纲对检验师的考试内容进行了详细的说明,包括考试形式、考试时间、考试科目和各科目的考试内容等。
考生可以通过学习大纲来了解考试要求和考试难度,从而有针对性地进行复习备考。
同时,大纲还要求考生具备一定的临床知识和技能,能够根据患者的具体情况进行实验室诊断和鉴别诊断,为临床提供准确的检验结果和可靠的参考依据。
免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答免疫应答过程:抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以及产生一系列的免疫效应分子免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段1、识别阶段:是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报及相关淋巴细胞的阶段2、活化阶段:是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增值、分化的阶段。
B细胞接受抗原信息分化为浆细胞,T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞3、效应阶段:是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子,T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另外有少量T、B细胞在增值分化后,不直接执行效应功能,而成为记忆细胞免疫应答效应多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成免疫器官按功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所,由骨髓和胸腺组成;外周免疫器官是免疫应答的场所,有淋巴结、脾及扁桃体等组成。
单核细胞核淋巴细胞经血液循环及淋巴循环进出于外周淋巴组织及淋巴器官,形成机体免疫系统的免疫网络。
(一)中枢免疫器官1、骨髓2、胸腺:是一级淋巴上皮组织,是T细胞发育的重要中枢器官,胸腺由胸腺基质细胞(TSC)和胸腺细胞组成。
(二)外周免疫器官及组织1、淋巴结:分为皮质区及髓质区。
皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。
淋巴结的中心是髓质区,由淋巴索和淋巴窦组成,淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞,包括B 细胞、浆细胞、T细胞及巨噬细胞淋巴结主要功能:是共淋巴细胞栖息和增值的场所;是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地;是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站2、脾:是富含血管的最大外周淋巴器官。
3、黏膜伴随的淋巴组织:有B细胞、T细胞、浆细胞及巨噬细胞,受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答,使B淋巴细胞活化分化为浆细胞,产多种Ig类别的看那个题,其中最主要的是IgA及分泌型IgA,执行体液免疫及局部特异免疫作用(三)淋巴细胞再循环与归巢三、免疫细胞(一)淋巴细胞:是免疫系统的主要细胞,包括T细胞、B细胞核NK细胞1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。
(1)、T细胞受体(TCR):是T细胞特有的表面标志,可表达于所有的成熟T细胞表面。
T细胞识别抗原和转导信号是由TCR特异识别MHC分子递呈的抗原肽,CD3分子转导T 细胞活化的第一信号,TCR与CD3分子通过盐桥结合形成稳定的复合物,TCR识别抗原的这一特点构成MHC限制性的基础(2)簇分化抗原(CD):是区分T淋巴细胞的重要标志,T细胞发育不同阶段的亚群存在不同的分化抗原2、B细胞:B淋巴细胞是在骨髓内发育成熟的细胞,是免疫系统中的一种主要细胞,主要功能是:产生抗体;呈递抗原;分泌细胞因子参与免疫调节。
人外周血液中B淋巴细胞约占5%-25%3、自然杀伤细胞:自然杀伤细胞(NK)来源于骨髓造血干细胞,其发育成熟依赖于骨髓及胸腺微环境。
NK细胞无须抗原刺激,可非特异性直接杀伤肿瘤和病毒感染的靶细胞。
活化的NK细胞可分泌IFNγ和TNFɑ等细胞因子,参与免疫调节作用(二)免疫辅助细胞凡能够通过一系列辅助淋巴细胞活化的细胞称为辅佐细胞。
辅佐细胞主要包括单核-吞噬细胞系统、树突状细胞俩类。
吞噬细胞包括单核-吞噬细胞系统(包括血液中的单核细胞和组织中的巨噬细胞)和中性粒粒细胞,其共同特征是表达MHCⅡ类分子及具有吞噬作用树突状细胞不具有吞噬能力,但具有很强的抗原递呈能力,称专职性抗原递呈细胞四、免疫分子免疫分子指的是由一些免疫活性细胞或相关细胞分泌的参与机体免疫反应或免疫调节的蛋白质及多肽物质。
通常指免疫球蛋白、补体、细胞因子、细胞黏附分子、人类白细胞分化抗原等(一)免疫球蛋白免疫球蛋白(Ig)是B细胞经抗原刺激后增值分化为浆细胞后产生的,存在于血液和体液中能与相应抗原特异性结合、执行体液免疫功能的一组球蛋白。
分为分泌型(sIg)及模型(mIg),前者主要存在于体液中,具有抗体的各种功能,后者作为抗原受体表达于B细胞表面,称为膜表面免疫球蛋白抗体是机体在抗原刺激下,由浆细胞合成分泌产生的具有免疫功能的球蛋白。
所有的抗体军事免疫球蛋白,但并非所有的免疫球蛋白都是抗体。
免疫球蛋白的化学结构:由4条肽链借链间二硫键连接组成,即2条相同的重链(H)和2条相同的轻链(L)以及几对二硫键连接成四肽结构,构成Ig一个基本单位,称为单体。
免疫球蛋白重链恒定区,按重链抗原性将免疫球蛋白分为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE5类。
Ig轻链分为κ型或λ型,一个天然Ig分子的俩条轻链型相同,每类Ig中都有κ型或λ型。
IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白,是再次免疫应答的主要抗体,也是唯一能通过胎盘的抗体。
IgA分为血清型及分泌型。
分泌型IgA(sIgA)为二聚体,每一sIgA分子含有一个J链和一个分泌片。
主要存在胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液、泪液中,局部浓度高,是参与黏膜局部免疫的主要抗体。
IgM为五聚体,主要存在于血液中,是Ig中分子量最大的。
分子结构呈环形,是个体发育最早合成的抗体,也是抗原刺激后体液免疫应答中最先产生的抗体,感染过程中血清IgM 水平升高,说明近期感染;新生儿脐带中若IgM升高,提示有宫内感染IgE 为单体结构,正常人血清中IgE水平在五类Ig中最低,仅为(0.1-0.9)mg/L。
IgE为亲细胞抗体,介导Ⅰ型超敏反应,在特异性过敏反应和寄生虫早期感染患者血清中可升高。
IgD血清中含量低作用不清楚,但B细胞膜上的IgD可作为B细胞分化成熟的标志(二)补体系统补体的激活途径主要有三种:经典途径、替代途径、MBL途径经典途径:以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂,补体C1-C9共11种成分全部参与了激活途径替代途径:又称旁路途径,有病原微生物等细胞壁成分提供接触面直接激活补体C3,然后完成C5-C9的激活过程。
替代途径的激活物主要为细胞壁成分如脂多糖、肽糖苷及酵母多糖等MBL途径由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素(MBL)与病原体结合后启动激活。
补体的大多数组分都是糖蛋白,多属于β球蛋白,正常血清中含量最高的补体成分为C3、C4。
补体性质不稳定,0-10℃火星只保持3-4天,加热56℃30min灭活。
(三)细胞因子细胞因子是由免疫细胞分泌的一大类具有生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称,介导多种免疫细胞间相互作用。
生物活性常表现为多效性、重叠性、拮抗效应和协同效应。
细胞因子按其生物学功能可分为白细胞介素、干扰素、生长因子、趋化因子家族、肿瘤坏死因子、集落刺激因子六大类;大部分细胞因子主要存在于血液及组织液中(四)黏附因子(五)CD抗原采用单克隆抗体鉴定识别的白细胞分化抗原称CD抗原。
检测CD抗原是实验室识别细胞及不同分化阶段细胞或细胞亚群最主要的方法。
抗原抗体反应抗原抗体反应的原理一、抗原抗体结合力:静电引力、范德华引力、氢键结合力、疏水作用力二、抗原抗体的亲和性于亲和力三、亲水胶体转化为疏水胶体抗原抗体反应的特点一、特异性二、可逆性三、比例性:若抗原或抗体嫉妒过剩则无沉淀形成,称为带现象。
抗体过量时称为前带,抗原过量时称为后带四、阶段性:第一阶段为抗原于抗体发生特异性结合的阶段,不出现可见反应。
第二阶段为可见反应阶段,此阶段反应慢,往往需要数分钟至数小时。
影响抗原抗体反应的因素一、反应物自身因素:抗体的浓度、特异性和亲和性都影响抗原抗体,为了提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作为诊断试剂;抗原的理化性状、分子量、抗原表位的种类及数目均可影响反应结果。
颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应,单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀二、环境因素1、电解质抗原与抗体发生特异性结合后,由亲水胶体变为疏水胶体,此过程需要电解质参加,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液2、酸碱度抗原抗体必须在合适的PH环境下进行,蛋白质具有俩性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。
抗原抗体反应一般在PH6-9之间进行,PH过高或过低都将影响抗原抗体反应3、温度在一定的范围内温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速。
一般以15-40℃为宜,常用抗原抗体反应温度为37℃,温度高于56℃,可能导致已结合的抗原抗体再解离,甚至变性或者破坏。
三、免疫学检测技术的类型标记免疫技术具有具有灵敏度高、快速、可定性、定量、定位等优点,是目前应用最广泛的免疫学检测技术。
标记免疫技术按实际用途分为定位测定组织或细胞中固定成分的免疫组织化学技术和检测液体标本中抗原或抗体含量的免疫测定按测定反应体系的物理状态分为均相免疫测定和非均相免疫测定;按检测现象不同分为放射免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、化学发光免疫技术和金免疫技术免疫原和抗血清的制备免疫原是指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞,并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质一、颗粒型抗原的制备颗粒型抗原如各种细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒型抗原细胞抗原(如绵羊红细胞)一般情况下井生理盐水或其他溶液洗净,配置一定浓度即可细菌抗原多用液体或固体培养物,经集菌后处理颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法,较少加佐剂进行皮内注射。
二、半抗原免疫原的制备半抗原始终物质独立存在时只具有抗原性而无免疫原性,这些物质称为半抗原。
半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才具有免疫原性(一)载体1、蛋白质类:以牛血白蛋白最常用。
蛋白质与半抗原结合基于游离氨基、羧基、酚基、巯基、吲哚基、咪唑基、胍基等活性基团的缩合2、多肽聚合物:常用多聚赖氨酸3、大分子聚合物和某些颗粒:聚乙烯吡格烷酮、活性炭、羧甲基纤维素等皆常用(二)半抗原与载体的连接方法物理方法:通过电荷和微孔吸附半抗原,吸附的载体有淀粉、聚乙烯吡格烷酮、硫酸葡聚糖、羧甲基纤维素等化学方法是利用某些功能基团将半抗原连接到载体上。
(三)半抗原性免疫原的鉴定一般认为至少要有20个以上的半抗原分子连接到一个载体分子上,才能有效的刺激免疫动物产生抗体。
因此在半抗原与载体连接后,应测定半抗原与载体的比例,方法有吸收光谱分析法和放射性核素标记半抗原渗入法单克隆抗体与基因工程抗体的制备一、杂交瘤技术原理:利用聚乙二醇(PEG)为细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体,再HAT选择性培养基的作用下,只让融合成功的杂交瘤细胞生长,经过反复的免疫学检测,筛选和单个细胞培养(克隆化),最终获得技能产生所需单克隆抗体,又能长期繁殖的杂交瘤细胞系。