测定食品中的维生素A、维生素E的基本测定方法
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第 1 页 共 2 页 测定食品中的维生素A、维生素E的基本测定方法
一、案例 乳粉是人们认识的养分品，它除了提供丰盛的蛋白质、脂肪等养分物质外，还含有大量的维生素。维生素A又名视黄醇，只存在于动物组织中，在植物体内则以胡萝卜素的形式存在。维生素A为条状淡黄色晶体，熔点62～64℃，不溶于水，能溶于乙醇、甲醇、氯仿、乙醚和苯等有机溶剂，易被氧化破坏，对酸不稳定。维生素E又称生育酚，属于酚类物质，为黄色油状液体，溶于脂溶性溶剂，对热稳定，在酸性环境比碱性环境稳定，在无氧条件下，对热与光以及对碱性环境也相对较为稳定。 二、选用的国家标准 GB／T 5009．82 2003食品中维生素A和维生素E的测定。 三、测定办法 1．皂化 称取适量样品1.0～10.0g(含维生素A约3μg，维生素E各异构体约40μg于皂化瓶中，加30mL无水乙醇，振摇使样品簇拥；加入5mL 100g／L抗坏血酸溶液和2.00mL苯并[e]芘溶液(5μg／L，内标用)，混匀，加10mL 50％氢氧化钾溶液，混匀，于沸水浴上回流30min，使皂化彻低，皂化后立刻放入冰水中冷却。 2．提取 将皂化后的样品移入分液漏斗中，用50mL水分2～3次洗皂化瓶，洗液并人分液漏斗中；用100mL无水乙醚分2次洗皂化瓶及残渣，乙醚液并入分液漏斗中；轻轻振摇分液漏斗2min，静置分层，弃去水层；每次用约50mL水将乙醚液洗至中性，约4～5次。 3．浓缩 将乙醚提取液经无水硫酸钠(约5g)滤入与旋转蒸发器配套的250～300mL球形蒸发瓶内，用约100mL乙醚冲洗分液漏斗及无水硫酸钠3次，并入蒸发瓶内，于55℃水浴中减压蒸馏并回收乙醚，待瓶中乙醚剩下约2mL时，取下蒸发瓶，用氮气吹于乙醚，随即加入2mL乙醇，充分混合、溶解提取物；将乙醇液移人塑料离心管中，于3000r／min下离心5min，上清液供色谱分析用。 4．液相色谱分析 色谱推举条件如下。 预柱：ODS 10μm，4mm×4．5cm 分析柱：ODS 5μm，4．6mm×25cm。 流淌相：甲醇：水= 98：2，混匀，临用前脱气。
紫外检测器波长：300nm，量程0.02。 进样量：20μL。流速：1．65～1．70mL／min。 5．计算 式中 X——某种维生素的含量，mg／100g； 第 2 页 共 2 页 p——由标准曲线上查到某种维生素的含量，μg／mL； γ——样品浓缩定容体积，mL； m——样品质量，g。 6．试剂 （1）无水乙醚：不含有过氧化物。 （2）无水乙醇：不得含有醛类物质。 检查办法：取2mL银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。 脱醛办法：取2g硝酸银溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(时常摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50mL。当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增强。 （3）无水硫酸钠。 （4）甲醇：重蒸后用法。 （5）重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。 （6）抗坏血酸溶液(100g／L)：临用前配制。 （7）氢氧化钾溶液(1+1)。 （8）氢氧化钠溶液(100g／L)。 （9）硝酸银溶液(50g／L)。 （10）银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(50g／L)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液(100g／L)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。 （11）维生素A标准液：视黄醇(纯度85％)或视黄醇乙酸酯(纯度90 %)经皂化处理后用法。用脱醛乙醇溶解维生素A标准品，使其浓度大约为1mL相当于1mg视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其精确 浓度。
（12）维生素E标准液：α-生育酚(纯度95％)，γ-生育酚(纯度95％)，δ-生育酚(纯度95％)。用脱醛乙醇分离溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1mL相当于1mg。临用前用紫外分光光度法分离标定此三种维生素E的精确 浓度。 （13）内标溶液：称取苯并[e]芘(纯度98％)，用脱醛乙醇配制成每1mL相当于10μg苯并[e]芘的内标溶液。 （14）pH= 1～14试纸。【关键词】维生素A，维生素E，测定办法 上一篇： 下一篇：
