下载文档原格式
一、名词解释1.虾蟹的生殖蜕皮：在交配期，某些雌性个体在交尾前要先行蜕皮，此次蜕皮又称生殖蜕皮。
2.自切现象：虾蟹类动物在遭遇天敌或相互争斗中受困时常常会自行使被困的附肢脱落，以使个体摆脱天敌，迅速逃逸。
在附肢有机械损伤时亦会自行钳去残肢或使其脱落，这种现象称为自切。
3.虾蟹类的生殖、生长洄游：生长洄游是指虾蟹类在生长过程中的不同阶段变更栖息地的洄游；生殖洄游是指成熟个体向产卵场移动的洄游。
4. 虾蟹类的再生：虾蟹类自切后的附肢经过一段时间，大多可以重新生出，称为再生。
5.虾蟹的发育蜕皮：也称变态蜕皮，幼体阶段随着蜕皮动物形态结构不断变化，由简单到复杂，逐渐完善。
6.额角：头胸甲中央向前突出，形成发达的额角，以保护两眼和头胸部其它附肢，额角形状在种间变化很大，为分类的重要依据。
7.齿式：额角上缘和下缘具有小齿，齿的数目和有无是分类依据之一。
齿数一般用齿式表示。
如中国对虾齿式为7~9/3~5.8.纳精囊：雌性对虾头胸部腹面4~5步足之间的腹甲上有一交接器——纳精囊，用以储存交配后的精荚。
分封闭式和开放式两种。
9.颚舟片：虾类第二小颚的外肢发达，叶片状，称为颚舟片。
虾类生活时，借此片鼓动，使鳃腔中的水川流不息，以辅助呼吸。
10. 侧鳃：根据鳃的着生位置，把着生在胸部附肢的基部上方身体侧壁上的鳃称为侧鳃。
11. 关节鳃：根据鳃的着生位置，把着生于胸部附肢底节与体壁间的关节膜上的鳃称为侧鳃。
12.足鳃：根据鳃的着生位置，把着生在胸部附肢底节上具鳃轴的鳃称为足鳃。
13．侧板线：蟹类眼眶下线下方，斜向头胸甲前侧缘的颗粒隆起线。
14.内骨骼：甲壳的某些部分突入体内形成，主要作用为肌肉的附着点。
15.绿腺：位于第二触角基部，为虾蟹类的排泄器官，主要作用是调节渗透压及离子平衡。
16.X-器官：也称眼柄腺，由视端髓内一簇神经分泌细胞构成，细胞轴突一直延伸到血窦腺。
主要分泌物是性腺抑制激素和蜕皮抑制激素。
17.Y-器官：来源于外胚层，形状各异，位置也不同。
第３４卷第１期大连海洋大学学报Ｖｏｌ.３４Ｎｏ.１２０１９年２月ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＤＡＬＩＡＮＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＦｅｂ.２０１９ＤＯＩ:１０.１６５３５/ｊ.ｃｎｋｉ.ｄｌｈｙｘｂ.２０１９.０１.０２０文章编号:２０９５－１３８８(２０１９)０１－０１３９－０６利用眼柄微结构研究虾蟹类年龄和生长的进展倪震宇１ꎬ刘必林１㊁２㊁３㊁４㊁５ꎬ张健１㊁２㊁３ꎬ蒋瑞１ꎬ舒畅１(１ 上海海洋大学海洋科学学院ꎬ上海２０１３０６ꎻ２ 农业农村部大洋渔业开发重点实验室ꎬ上海２０１３０６ꎻ３ 国家远洋渔业工程技术研究中心ꎬ上海２０１３０６ꎻ４ 大洋渔业资源可持续开发教育部重点实验室ꎬ上海２０１３０６ꎻ５ 农业农村部大洋渔业资源环境科学观测实验站ꎬ上海２０１３０６)摘要:虾蟹类在生长过程中伴随着脱壳过程ꎬ能记录年龄生长的外骨骼周期性消失ꎬ使得其年龄直接鉴定一直比较困难ꎮ本研究中对眼柄预处理与制片方法㊁眼柄微结构观察及眼柄在虾蟹类年龄和生长中的研究与应用等进行了综述ꎮ国外学者发现ꎬ眼柄可作为虾蟹类年龄直接鉴定的材料ꎬ眼柄经过提取㊁清理和制片后ꎬ可在光学显微镜下观察到生长纹ꎬ使用化学方法清理眼柄中有机物效果较好ꎻ眼柄存在４层结构(表层㊁色素层㊁钙化层和膜层)ꎬ主要采用钙化层的生长纹来鉴定虾蟹类年龄ꎻ生长纹可分为宽带和细纹ꎬ宽带主要与年龄信息有关ꎬ细纹则与体长等因素有一定关系ꎮ但对于虾蟹类眼柄中生长纹与年龄和生长的关系还需进一步分析和周期性验证ꎮ本研究结果可为渔业生物学研究和渔业资源管理提供重要参考ꎮ关键词:虾蟹类ꎻ眼柄ꎻ年龄与生长ꎻ微结构中图分类号:Ｓ９１７ ４㊀㊀㊀㊀文献标志码:Ａ㊀㊀年龄鉴定是渔业生物学研究的重要内容ꎬ通过鉴定水生生物的年龄ꎬ有助于掌握其生活史和估算其种群数量ꎬ为渔业资源管理提供基础信息[１]ꎮ对于大部分野生水生生物而言ꎬ一般可通过硬组织中的生长纹直接获得其年龄信息ꎬ如鱼类的耳石[２]㊁鳍条[３－４]和脊椎骨[３]等ꎬ头足类的耳石[５－６]㊁角质颚[７]和内壳[１ꎬ８]等ꎮ但甲壳类动物是通过脱壳过程得以生长ꎬ其记录年龄信息的钙化结构周期性的消失ꎬ给直接鉴定其年龄带来一定困难ꎮ早期研究中ꎬ大部分学者使用饲养[９]㊁标记重捕[１０－１１]㊁体长频度[１２－１３]㊁脂褐素[１４－１５]和放射性同位素[１６－１７]分析等方法来鉴定甲壳类年龄ꎬ但这些方法均存在一些不足之处ꎬ饲养㊁标记重捕和放射性同位素分析法得出结果虽较为准确ꎬ但野生样本与养殖样本有所差异ꎬ故饲养法不适于实际野生环境ꎬ同时放射性同位素分析法成本花费较高ꎬ而脂褐素分析法得到的年龄结果需要使用生长环境进行校正ꎬ步骤较为烦琐ꎮＫｉｌａｄａ等[１８]首次发现ꎬ眼柄能够作为甲壳类年龄鉴定的钙化组织ꎬ并认为眼柄中钙化组织信息与年龄存在一定关系ꎬ这才使得甲壳类年龄直接鉴定的难题得以解决ꎮ本研究中ꎬ综述了国内外学者对虾蟹类眼柄提取和制片的方法和步骤ꎬ以及眼柄在虾蟹类年龄鉴定中的应用ꎬ旨在为渔业生物学研究和渔业资源管理提供参考ꎮ１㊀眼柄形态结构虾蟹类头胸甲前缘正中有一对向前突出的复眼ꎬ复眼基部有一对可活动的柄ꎬ称为眼柄ꎮ眼柄内部包含视网膜神经和肌肉组织等ꎬ连接着复眼和头胸甲内其他器官ꎮ眼柄分为基部和远端(图１)ꎬ基部中包含虾蟹类神经内分泌器官ꎬ远端连接着复眼ꎬ复眼中含视网膜细胞和色素细胞等[１９]ꎮ２㊀眼柄预处理与制片２ １㊀眼柄的提取与保存虾蟹类眼柄提取时ꎬ国内外多数学者使用解剖刀将眼柄与身体连接部分薄膜切断ꎬ再将整只眼柄取下ꎬ在切断眼柄与其他组织连接薄膜时应注意不要破坏眼柄ꎬ以保证取出眼柄的完整性ꎮ眼柄包埋㊀收稿日期:２０１８－０４－２５㊀基金项目:国家自然科学基金资助项目(４１３０６１２７)ꎻ上海市浦江人才计划项目(１８ＰＪ１４０４１００)ꎻ中国水产科学研究院东海水产研究所农业农村部远洋与极地渔业创新重点实验室开放基金资助项目(２０１８)ꎻ农业农村部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室开放基金资助项目(２０ＢＢＡＤ１３Ｂ０３)㊀作者简介:倪震宇(１９９３ )ꎬ男ꎬ硕士研究生ꎮＥ－ｍａｉｌ:１６８３８２３０５＠ｑｑ ｃｏｍ㊀通信作者:刘必林(１９８０ )ꎬ男ꎬ博士ꎬ教授ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｂｌ－ｌｉｕ＠ｓｈｏｕ ｅｄｕ ｃｎ图１㊀三疣梭子蟹(Ａ)和中国对虾(Ｂ)眼柄形态结构Ｆｉｇ １㊀Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｅｙｅｓｔａｌｋｓｉｎｓｗｉｍ￣ｍｉｎｇｃｒａｂＰｏｒｔｕｎｕｓｔｒｉｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓ(Ａ)ａｎｄＣｈｉｎｅｓｅｓｈｒｉｍｐＦｅｎｎｅｒｏｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ(Ｂ)前需要将其内部的有机组织去除ꎬ以减少之后在包埋及切片观察过程中对观察结果的影响ꎮ清理眼柄中有机物的方法一般分为直接处理[２０－２３]㊁化学处理[２４－２５]和高温处理[２６]３种方法:直接处理是将样本从保存溶液中取出ꎬ直接在解剖镜下使用解剖针将眼柄内部有机物剔除ꎻ化学处理一般将样本浸入二甲苯或碱性溶液中１ｈ以上ꎬ促使眼柄中有机物变性结块ꎬ之后在解剖镜下使用解剖针将内部有机物剔除ꎻ高温处理是将眼柄用水煮熟后再在解剖镜下使用解剖针剔除有机物ꎮ经过预处理后的眼柄样本可保存于７０％以上的酒精或比例为６ʒ３ʒ１的酒精㊁甘油和水混合物中ꎬ样本保存时间不应太长ꎬ以免影响观察结果ꎮ蒋瑞等[２７]对比采用３种处理方法处理后的三疣梭子蟹Ｐｏｒｔｕｎｕｓｔｒｉｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓ眼柄样本后发现(图２):直接处理对眼柄钙化层结构影响最小ꎬ但眼柄中有机物与钙化结构有所黏结ꎬ在处理时直接使用解剖针剔除较为麻烦㊁耗时ꎬ且在显微镜下观察眼柄切片时发现在眼柄周围有黑色未处理干净的杂质(图２－Ａ)ꎻ高温处理后的眼柄虽能较快剔除眼柄中有机物和其他杂质ꎬ但高温处理后会导致眼柄钙化层较黑ꎬ微结构不清晰ꎬ不利于生长纹的观察(图２－Ｂ)ꎻ相比较而言ꎬ对眼柄样本进行预处理时ꎬ使用化学处理是更为妥当的方法(图２－Ｃ)ꎮ图２㊀直接处理(Ａ)㊁高温处理(Ｂ)和化学处理(Ｃ)的三疣梭子蟹眼柄样本微结构观察对比[２７]Ｆｉｇ ２㊀ＭｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｅｙｅｓｔａｌｋｓｉｎｓｗｉｍｍｉｎｇｃｒａｂＰｏｒｔｕｎｕｓｔｒｉｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓｗｉｔｈｄｉｒｅｃｔｔｒｅａｔｍｅｎｔ(Ａ)ꎬｂｏｉｌｅｄｔｒｅａｔｍｅｎｔ(Ｂ)ａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔ(Ｃ)[２７]２ ２㊀眼柄的制片因为眼柄不能通过观察表面结构直接获取其年龄信息ꎬ故需要对眼柄做进一步切割和研磨处理ꎮ虾蟹类眼柄通常较小且为中空的圆柱体ꎬ需先进行包埋后再在机器上进行切割和打磨ꎮ归纳起来ꎬ眼柄的制片过程可为两类(表１):一是使用冷埋树脂包埋制片[１８ꎬ２１－２３]ꎬ该方法是将处理干净的眼柄样品从保存溶液中取出ꎬ包埋入冷埋树脂中ꎬ硬化后使用低速切割机切片或使用水磨砂纸打磨ꎻ二是使用石蜡包埋制片[２１ꎬ２４ꎬ２８]ꎬ该方法是将处理干净的眼柄样品从保存溶液中取出ꎬ在甲酸和柠檬酸钠混合溶液中脱钙后ꎬ包埋入熔融的石蜡中ꎬ待其冷却后使用石蜡切片机制片ꎮ两种方法相比ꎬ石蜡切片厚度(１０μｍ左右)要比树脂切片(５０~２００μｍ)薄ꎬ因此ꎬ若试验需要对眼柄样本进行进一步操作时(如染色)ꎬ通常会采用石蜡包埋制片ꎮ蒋瑞等[２９]在国外学者对虾蟹类眼柄使用冷埋树脂制片的基础之上ꎬ结合实验室条件对其方法进行改进ꎮ步骤如下:(１)将样本从保存溶液中取出ꎬ用吸水纸将眼柄样本上残留的保存液擦拭干净ꎬ如将蟹类眼柄样本竖直在塑料模具底部(图３－Ａ)ꎬ虾类眼柄剪开后平铺在模具底部(图４－Ａ)ꎻ(２)按１ʒ１的体积比将压克力粉和液体固化剂(黏度为６０ｍＰａｓ)配制成冷埋树脂溶液ꎬ倒入模具中ꎬ将注入冷埋树脂的模具放在阴凉通风处２４ｈ以上ꎬ待其硬化ꎻ(３)当模具完全硬化后ꎬ依次使用２００㊁６００㊁１２００㊁２５００目的水磨砂纸沿眼柄横截面打磨至样本中部ꎬ然后用氧化铝粉在水绒布上抛光(图３－Ｃ~Ｅꎬ图４－Ｃ~Ｅ)ꎬ将抛光的一面使用热熔胶黏于载玻片上(图３－Ｆꎬ图４－Ｆ)ꎻ(４)模具另外一面依次使用２００㊁６００㊁１２００㊁０４１大连海洋大学学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第３４卷２５００目的水磨砂纸沿眼柄横截面打磨(图３－Ｇ~Ｈꎬ图４－Ｇ~Ｈ)ꎻ(５)在步骤(４)中ꎬ当模具厚度变薄时ꎬ打磨时需不断在显微镜下观察ꎬ直到轮纹结构在显微镜下清晰可见ꎬ最后使用氧化铝粉在水绒布上抛光(图３－Ｉꎬ图４－Ｉ)ꎮ蒋瑞等[２９]在对虾蟹类眼柄的研究基础上ꎬ改进了虾蟹类眼柄的预处理㊁包埋和制片技术ꎮ在虾蟹类眼柄预处理时ꎬ先将眼柄浸入二甲苯溶液中４８ｈꎬ再使用解剖针等更容易剔除眼柄内有机物组织和其他杂质ꎮ在制作冷埋树脂包埋时将亚克力粉与固化剂体积比控制在１ʒ１时效果最好ꎮ比例过大会导致冷埋树脂整体泛白ꎬ在显微镜下不易观察ꎬ比例过小时则会使固化时间延长且在打磨时眼柄容易脱落ꎮ在显微镜下观察已处理好的眼柄样品切片时ꎬ无须使用盖玻片进行封片ꎬ只需在切片表面滴上甘油ꎬ有助于在显微镜下观察和计数ꎮ３㊀眼柄微结构３ １㊀眼柄微结构观察２０１２年ꎬＫｉｌａｄａ等[１８]首次在雪蟹Ｃｈｉｏｎｏｅｃｅｔｅｓｏｐｉｌｉｏ㊁褐雕虾Ｓｃｌｅｒｏｃｒａｎｇｏｎｂｏｒｅａｓ和北部虾Ｐａｎｄａ￣ｌｕｓｂｏｒｅａｌｉｓ眼柄中观察到生长纹结构ꎮ随后Ｃｌｏ￣ｒｅ[２４]和Ｋｒａｆｆｔ等[３０]分别对淡水小龙虾和南极磷虾的眼柄切片进行了直接观察(表１)ꎮ国内蒋瑞等[２７]对中华绒螯蟹㊁三疣梭子蟹和中国对虾的眼柄生长纹进行了观察(图５)ꎬ经过制片后的样本在光学显微镜下可以观察到同样的生长纹ꎮ为了增加眼柄切片的清晰度ꎬ往往会对制备好的切面进行染色ꎬ例如Ｋｉｌａｄａ等[３１]使用马松三色染色法对点虾Ｐａｎｄａｌｕｓｐｌａｔｙｃｅｒｏｓ的眼柄进行观察(表１)ꎮ马松三色染色法是在生物学上常用的一种染色方法ꎬ该方法根据各组织不同的渗透性能ꎬ选择分子大小不同的阴离子染料进行染色ꎬ便可把不同组织成分显示出来ꎬ经过染色后的眼柄样本要更容易观察ꎮ３ ２㊀眼柄微结构特征２０１６年ꎬＫｉｌａｄａ等[３１]在对点虾眼柄组织切片经马松三色染色后进行观察时发现ꎬ点虾眼柄中包含表层(Ｅｐｉｃｕｔｉｃｌｅ)㊁色素层(Ｅｘｏｃｕｔｉｃｌｅ)㊁钙化层(Ｅｎｄｏｃｕｔｉｃｌｅ)和膜层(Ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓｌａｙｅｒ)４层结构ꎮ染色后点虾眼柄结构是双边结构ꎬ即点虾眼柄中表层和膜层其组成成分类似ꎬ色素层和钙化层的组成成分类似ꎬ这种循环结构表明在眼柄中的轮纹结构可能与其生活周期相关(图６)ꎮ表１㊀眼柄的制片及观察方法Ｔａｂ １㊀Ｓｌｉｄｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆｅｙｅ￣ｓｔａｌｋｓ物种ｓｐｅｃｉｅｓ制片方法ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ观察方法ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ文献来源ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ北方小龙虾Ｏ ｐｒｏｐｉｎｑｕｕｓ石蜡包埋直接观察Ｃｌｏｒｅ[２４]克氏原螯虾Ｐ ｃｌａｒｋｉｉ石蜡包埋直接观察Ｃｌｏｒｅ[２４]南极磷虾Ｅ ｓｕｐｅｒｂａ冷埋树脂直接观察Ｋｒａｆｆｔ等[３０]尼龙虾Ｈ ｒｅｅｄｉ冷埋树脂直接观察Ｋｉｌａｄａ等[２２]雪蟹Ｃ ｏｐｉｌｉｏ冷埋树脂直接观察Ｋｉｌａｄａ等[１８]褐雕虾Ｓ ｂｏｒｅａｓ冷埋树脂直接观察Ｋｉｌａｄａ等[１８]点虾Ｐ ｐｌａｔｙｃｅｒｏｓ冷埋树脂马松三色染色后观察Ｋｉｌａｄａ等[２１ꎬ３１]㊀㊀２０１８年ꎬ蒋瑞等[２７]在光学显微镜下对三疣梭子蟹和中国对虾眼柄切片直接观察发现ꎬ眼柄由表层㊁色素层㊁钙化层和膜层４层结构构成(图７)ꎮ其中表层处于眼柄的最外层ꎬ在眼柄中的４层结构占比最小ꎬ质地较为均匀ꎻ色素层在钙化层和表层之间ꎬ是几丁质层ꎬ当样本厚度较厚时ꎬ色素层透光性较差ꎮ样本切片较薄时ꎬ色素层透光性变强ꎬ层内有圆柱形结构ꎻ钙化层在眼柄结构中占比最大ꎬ在使用马松三色染色法时ꎬ钙化层颜色最深ꎬ这表明该层钙化程度高ꎮ钙化层中色素较少ꎬ透光性高ꎬ在光学显微镜下观察ꎬ有明显的周期性生长纹ꎬ平行于眼柄表层排列ꎬ同时存在垂直于眼柄表层的细纹ꎮ有学者认为ꎬ在虾蟹类眼柄的钙化层中ꎬ周期性的轮纹结构可能与虾蟹类的生长㊁年龄和脱壳次数有关[２３－２４ꎬ３１]ꎮ膜层在眼柄最内部ꎬ是与视网膜神经和眼柄内其他有机物组织相连的部分ꎮ膜层在眼柄的４层结构中透明度最高ꎬ在光学显微镜下未观察到明显的轮纹结构ꎮ４㊀眼柄在虾蟹类年龄和生长中的研究与应用近年来ꎬ国内外学者发现ꎬ虾蟹类的眼柄通过清理㊁包埋和切片后能够在其钙化层中观察到明暗交替的生长纹ꎮ生长纹可分为宽带和细纹两种ꎮ最早Ｋｉｌａｄａ等[１８]首次探讨了美国龙虾㊁褐雕虾和雪蟹眼柄生长纹宽带数目与实际年龄的关系ꎬ结果发现ꎬ美国龙虾眼柄宽带与实际年龄相符ꎬ而褐雕虾和雪蟹的眼柄宽带与实际年龄不符ꎮ因此ꎬ对于眼柄中生长纹宽带与年龄或日龄的关系ꎬＫｉｌａｄａ等认为还需进一步地验证ꎮ为了验证用眼柄中生长纹数目研究虾蟹类年龄和生长的可行性ꎬＫｉｌａｄａ等[２２ꎬ３１]对４种北大西洋虾蟹类和３种阿拉斯加重要商业虾蟹类进行了探索试验ꎬ试验表明ꎬ眼柄中生长纹数１４１第１期倪震宇ꎬ等:利用眼柄微结构研究虾蟹类年龄和生长的进展图３㊀蟹类眼柄切片制作示意图[２９]Ｆｉｇ ３㊀Ｓｃｈｅｍａｔｉｃｄｉａｇｒａｍｏｆｃｒａｂｅｙｅｓｔａｌｋｓｅｃｔｉｏｎｐｒｅｐａｔａｔｉｏｎ[２９]图４㊀虾类眼柄切片制作示意图[２９]Ｆｉｇ ４㊀Ｓｃｈｅｍａｔｉｃｄｉａｇｒａｍｏｆｓｈｒｉｍｐｅｙｅｓｔａｌｋｓｅｃｔｉｏｎｐｒｅｐａｔａｔｉｏｎ[２９]图５㊀中国对虾(Ａ)㊁中华绒螯蟹(Ｂ)和三疣梭子蟹(Ｃ)眼柄生长纹[２７]Ｆｉｇ ５㊀ＧｒｏｗｔｈｂａｎｄｓｉｎＣｈｉｎｅｓｅｓｈｒｉｍｐＦｅｎｎｅｒｏｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ(Ａ)ꎬＣｈｉｎｅｓｅｍｉｔｔｅｎｈａｎｄｅｄｃｒａｂＥｒｉｏｃｈｅｉｒｓｉｎｅｎｓｉｓＨ Ｍｉｌｎｅ－Ｅｄｗａｒｄｓ(Ｂ)ａｎｄｓｗｉｍｍｉｎｇｃｒａｂＰｏｒｔｕｎｕｓｔｒｉｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓ(Ｃ)ｅｙｅｓｔａｌｋｓ[２７]图６㊀点虾眼柄经马松三色染色后的组织切片Ｆｉｇ ６㊀ＨｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｓｅｃｔｉｏｎｓｓｔａｉｎｅｄｗｉｔｈＭａｓｓｏｎ ｓｔｒｉ￣ｃｈｒｏｍｅｏｆｅｙｅｓｔａｌｋｓＰａｎｄａｌｕｓｐｌａｔｙｃｅｒｏｓ目可以作为鉴定虾蟹类年龄信息的材料ꎮ国内以往的研究认为ꎬ虾蟹类年龄与体长有着一定的联系[３２－３４]ꎮ２０１５年ꎬＫｉｌａｄａ等[２２]在对智利尼龙虾眼柄研究时发现ꎬ眼柄生长纹数目与体长的增长曲线和年龄与体长的增长曲线有着高度的相似ꎬ因此ꎬ对于眼柄中生长纹数目可以进一步和年龄建立关系ꎮ蒋瑞等[２７]在对中国对虾眼柄的研究中认为ꎬ中国对虾眼柄生长纹细纹数目与体长㊁体图７㊀三疣梭子蟹眼柄组织切片Ｆｉｇ ７㊀ＨｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｓｅｃｔｉｏｎｓｏｆｅｙｅｓｔａｌｋｉｎｓｗｉｍｍｉｎｇｃｒａｂＰｏｒｔｕｎｕｓｔｒｉｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓ质量的关系均适合用逻辑斯蒂生长方程曲线(Ｌｏ￣ｇｉｓｔｉｃｃｕｒｖｅ)来描述ꎮ侯朝伟等[３５]㊁徐炳庆等[３６]研究表明ꎬ中国对虾生长规律符合逻辑斯蒂生长方程曲线ꎬ这与对眼柄生长纹细纹数目与体长㊁体质量关系的研究结果一致ꎮ２０１４年ꎬＣｌｏｒｅ[２４]对淡水小龙虾眼柄进行试验ꎬ在试验中使用广义线性模型(ＧＬＭ)对小龙虾眼柄细纹数目和体长进行拟合ꎬ二者高度拟合２４１大连海洋大学学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第３４卷(Ｒ２＝０ ９４１)ꎮＫｉｌａｄａ等[３１]同样使用ＧＬＭ模型对南极磷虾眼柄中宽带和个体体长进行分析ꎬ结果表明ꎬ宽带与个体体长间也存在线性关系ꎮ但是多数学者表示ꎬ若要获得每条生长纹所代表的确切意义ꎬ还需要大量已知年龄信息(天数和脱壳次数)的样本ꎬ并进行大量的周期性验证试验ꎮ２０１７年Ｋｉｌａｄａ等[３７]对两种不同来源已知年龄的南极磷虾眼柄进行研究ꎬ发现眼柄中每一条宽纹对应着一龄ꎬ这是首次采用已知年龄的南极磷虾对使用眼柄微结构研究其年龄进行的验证性试验ꎮ５ 分析与展望在对眼柄生长纹计数中ꎬ现有的研究均采取人工计数ꎬ这往往会对后面的分析过程带来非系统性误差ꎮ在计数过程中对同一个眼柄制片的生长纹应至少３人分别独立计数ꎬ对其结果应当分析三者间的平均百分比误差(ＩｎｄｅｘｏｆａｖｅｒａｇｅｐｅｒｃｅｎｔｅｒｒｏｒꎬＩＡＰＥ)和变异系数(ＣｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆｖａｒｉａｔｉｏｎꎬＣＶ)ꎬ这两个指数表明了３组计数的结果是否具有一致性[３８]ꎮ当ＩＡＰＥ值大于５％或者ＣＶ值大于１０％时ꎬ则表明该组数据差异较大ꎬ应重新计数ꎮ运用统计学方法能够帮助弥补在试验中的人为误差ꎮ对虾蟹类眼柄中钙化结构的研究ꎬ主要是通过判读甲壳类动物在生长过程中钙化结构生成的生长纹来鉴定其年龄ꎬ这种方法是近年兴起的技术ꎮ相较早期鉴定甲壳类年龄的其他技术方法ꎬ使用虾蟹类眼柄中钙化结构鉴定其年龄组织提取方便ꎬ在试验中只需要提取眼柄即可ꎬ且预处理方法简单ꎬ不需要烦琐的提取过程ꎮ但虾蟹类眼柄不像其他鉴定年龄的材料(如耳石)ꎬ在对生长纹计数时有一个已知的起点(核心面)以计算其数目或者宽度ꎬ对于眼柄而言ꎬ在计算其生长纹数目时没有一个固定的起点ꎬ这会给验证或检查计数的准确性带来难度ꎮ在未来的试验中ꎬ利用眼柄微结构研究虾蟹类的年龄和生长ꎬ应进一步建立眼柄中轮纹结构(宽带和细纹)与体长㊁体质量和年龄的关系ꎬ并且使用大量已知年龄的个体进行可靠的验证试验ꎬ以进一步建立眼柄中生长纹和年龄间的关系ꎮ参考文献:[１]㊀刘必林ꎬ陈新军ꎬ李建华.内壳在头足类年龄与生长研究中的应用进展[Ｊ].海洋渔业ꎬ２０１５ꎬ３７(１):６８－７６.[２]㊀邓维德ꎬ赵亚辉ꎬ康斌ꎬ等.耳石在鱼类年龄与生长研究中的应用[Ｊ].动物学杂志ꎬ２０１０ꎬ４５(２):１７１－１８０.[３]㊀李冬静.利用鳍棘和脊椎骨研究印度洋中西部大眼金枪鱼的年龄与生长[Ｄ].上海:上海海洋大学ꎬ２０１４.[４]㊀魏朝军ꎬ申志新ꎬ贾银涛ꎬ等.花斑裸鲤年龄鉴定材料的比较与年龄判别[Ｊ].生态学杂志ꎬ２０１５ꎬ３４(９):２５３７－２５４１. [５]㊀江艳娥ꎬ陈作志ꎬ林昭进ꎬ等.南海中部海域鸢乌贼耳石形态特征分析[Ｊ].南方水产科学ꎬ２０１４ꎬ１０(４):８５－９０. [６]㊀马金ꎬ刘必林ꎬ陈新军ꎬ等.利用耳石鉴定头足类年龄与生长研究进展[Ｊ].海洋渔业ꎬ２００９ꎬ３１(３):３１６－３２４.[７]㊀刘必林ꎬ陈新军ꎬ方舟ꎬ等.利用角质颚研究头足类的年龄与生长[Ｊ].上海海洋大学学报ꎬ２０１４ꎬ２３(６):９３０－９３６. [８]㊀陈新军ꎬ刘必林ꎬ钟俊生.头足类年龄与生长特性的研究方法进展[Ｊ].大连水产学院学报ꎬ２００６ꎬ２１(４):３７１－３７７. [９]㊀ＨéｂｅｒｔＭꎬＢｅｎｈａｌｉｍａＫꎬＭｉｒｏｎＧꎬｅｔａｌ.ＭｏｕｌｔｉｎｇａｎｄｇｒｏｗｔｈｏｆｍａｌｅｓｎｏｗｃｒａｂꎬＣｈｉｏｎｏｅｃｅｔｅｓｏｐｉｌｉｏ(Ｏ.Ｆａｂｒｉｃｉｕｓꎬ１７８８)(Ｄｅｃａｐｏ￣ｄａꎬＭａｊｉｄａｅ)ꎬｉｎｔｈｅＳｏｕｔｈｅｒｎＧｕｌｆｏｆＳｔ.Ｌａｗｒｅｎｃｅ[Ｊ].Ｃｒｕｓｔａ￣ｃｅａｎａꎬ２００２ꎬ７５(５):６７１－７０２.[１０]㊀ＧｈｅｒａｒｄｉＦꎬＢａｒｂａｒｅｓｉＳꎬＳａｌｖｉＧ.ＳｐａｔｉａｌａｎｄｔｅｍｐｏｒａｌｐａｔｔｅｒｎｓｉｎｔｈｅｍｏｖｅｍｅｎｔｏｆＰｒｏｃａｍｂａｒｕｓｃｌａｒｋｉｉꎬａｎｉｎｖａｓｉｖｅｃｒａｙｆｉｓｈ[Ｊ].Ａ￣ｑｕａｔｉｃＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０００ꎬ６２(２):１７９－１９３.[１１]㊀ＳｃｈｍａｌｅｎｂａｃｈＩꎬＭｅｈｒｔｅｎｓＦꎬＪａｎｋｅＭꎬｅｔａｌ.Ａｍａｒｋ－ｒｅｃａｐｔｕｒｅｓｔｕｄｙｏｆｈａｔｃｈｅｒｙ－ｒｅａｒｅｄｊｕｖｅｎｉｌｅＥｕｒｏｐｅａｎｌｏｂｓｔｅｒｓꎬＨｏｍａｒｕｓｇａｍｍａｒｕｓꎬｒｅｌｅａｓｅｄａｔｔｈｅＲｏｃｋｙＩｓｌａｎｄｏｆＨｅｌｇｏｌａｎｄ(ＧｅｒｍａｎＢｉｇｈｔꎬＮｏｒｔｈＳｅａ)ｆｒｏｍ２０００ｔｏ２００９[Ｊ].ＦｉｓｈｅｒｉｅｓＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０１１ꎬ１０８(１):２２－３０.[１２]㊀Ｃｈáｚａｒｏ－ＯｌｖｅｒａＳ.ＧｒｏｗｔｈꎬｍｏｒｔａｌｉｔｙꎬａｎｄｆｅｃｕｎｄｉｔｙｏｆＰａｌａｅ￣ｍｏｎｅｔｅｓｐｕｇｉｏｆｒｏｍａｌａｇｏｏｎｓｙｓｔｅｍｉｎｌｅｔｉｎｔｈｅｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎＧｕｌｆｏｆＭｅｘｉｃｏ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｒｕｓｔａｃｅａｎＢｉｏｌｏｇｙꎬ２００９ꎬ２９(２):２０１－２０７.[１３]㊀Ｄｈａｏｕａｄｉ－ＨａｓｓｅｎＳꎬＢｏｕｍａｉｚａＭ.ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｓｏｆＡｔｙａｅｐｈｙｒａｄｅｓｍａｒｅｓｔｉｉ(ＤｅｃａｐｏｄａꎬＣａｒｉｄｅａ)ｆｒｏｍｔｈｅＳｉｄｉＳａｌｅｍＤａｍＬａｋｅ(ＮｏｒｔｈｅｒｎＴｕｎｉｓｉａ)[Ｊ].Ｃｒｕｓｔａｃｅａｎａꎬ２００９ꎬ８２(２):１２９－１３９.[１４]㊀ＭｅｄｉｎａＡꎬＶｉｌａＹꎬＭｅｇｉｎａＣꎬｅｔａｌ.Ａｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅａｇｅ－ｐｉｇｍｅｎｔꎬｌｉｐｏｆｕｓｃｉｎꎬｉｎｄｅｎｄｒｏｂｒａｎｃｈｉａｔｅｓｈｒｉｍｐｂｒａｉｎｓ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｒｕｓｔａｃｅａｎＢｉｏｌｏｇｙꎬ２０００ꎬ２０(３):４２３－４３０. [１５]㊀ＰｅｒｅｉｒａＣＲꎬＤ ＩｎｃａｏＦꎬＦｏｎｓｅｃａＤＢ.Ｂｉｌａｔｅｒａｌｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｉｎ￣ｓｉｔｕｎｅｕｒｏｌｉｐｏｆｕｓｃｉｎａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎＣａｌｌｉｎｅｃｔｅｓｓａｐｉｄｕｓｃａｕｇｈｔｉｎｔｈｅｗｉｌｄ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＭａｒｉｎｅＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＵ￣ｎｉｔｅｄＫｉｎｇｄｏｍꎬ２０１０ꎬ９０(３):５６３－５６７.[１６]㊀ＧａｒｄｎｅｒＣꎬＪｅｎｋｉｎｓｏｎＡꎬＨｅｉｊｎｉｓＨ.ＥｓｔｉｍａｔｉｎｇＩｎｔｅｒｍｏｌｔＤｕｒａｔｉｏｎｉｎＧｉａｎｔＣｒａｂｓ(Ｐｓｅｕｄｏｃａｒｃｉｎｕｓｇｉｇａｓ)[Ｍ]//ＰａｕｌＡＪꎬＤａｗｅＥＧꎬＥｌｎｅｒＲꎬｅｔａｌ.ＣｒａｂｓｉｎＣｏｌｄＷａｔｅｒＲｅｇｉｏｎｓ:ＢｉｏｌｏｇｙꎬＭａｎａｇｅ￣ｍｅｎｔꎬａｎｄＥｃｏｎｏｍｉｃｓ.ＦａｉｒｂａｎｋｓꎬＡｌａｓｋａ:ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＡｌａｓｋａＳｅａＧｒａｎｔꎬ２００２.[１７]㊀朱江峰ꎬ王洁ꎬ戴小杰.东太平洋大青鲨脊椎骨的稳定同位素比值研究[Ｊ].南方水产科学ꎬ２０１５ꎬ１１(４):４０－４５.[１８]㊀ＫｉｌａｄａＲꎬＳａｉｎｔｅ－ＭａｒｉｅＢꎬＲｏｃｈｅｔｔｅＲꎬｅｔａｌ.Ｄｉｒｅｃｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｇｅｉｎｓｈｒｉｍｐｓꎬｃｒａｂｓꎬａｎｄｌｏｂｓｔｅｒｓ[Ｊ].ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓａｎｄＡｑｕａｔｉｃＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０１２ꎬ６９(１１):１７２８－１７３３. [１９]㊀范晓锐.甲壳动物眼柄神经内分泌系统研究概述[Ｊ].天津水产ꎬ２０１０(１):１２－１８.[２０]㊀ＫｉｌａｄａＲꎬＡｃｕñａＥ.ＤｉｒｅｃｔａｇｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｂｙｇｒｏｗｔｈｂａｎｄｃｏｕｎｔｓｏｆｔｈｒｅｅｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｃｒｕｓｔａｃｅａｎｓｐｅｃｉｅｓｉｎＣｈｉｌｅ３４１第１期倪震宇ꎬ等:利用眼柄微结构研究虾蟹类年龄和生长的进展[Ｊ].ＦｉｓｈｅｒｉｅｓＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０１５ꎬ１７０:１３４－１４３.[２１]㊀ＫｉｌａｄａＲꎬＩｂｒａｈｉｍＮＫ.Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｄｉｒｅｃｔａｇｅｄｅ￣ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｕｓｉｎｇｂａｎｄｃｏｕｎｔｓｉｎｔｈｅｇａｓｔｒｉｃｍｉｌｌｏｆｔｈｅｂｌｕｅｓｗｉｍ￣ｍｅｒｃｒａｂ(Ｐｏｒｔｕｎｕｓｐｅｌａｇｉｃｕｓ)ｉｎｔｗｏｓａｌｔ－ｗａｔｅｒｌａｋｅｓｉｎｔｈｅｅａｓｔｅｒｎＭｅｄｉｔｅｒｒａｎｅａｎ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｒｕｓｔａｃｅａｎＢｉｏｌｏｇｙꎬ２０１６ꎬ３６(２):１１９－１２８.[２２]㊀ＫｉｌａｄａＲꎬＡｇｎａｌｔＡＬꎬＡｒｂｏｅＮＨꎬｅｔａｌ.ＦｅａｓｉｂｉｌｉｔｙｏｆｕｓｉｎｇｇｒｏｗｔｈｂａｎｄｃｏｕｎｔｓｉｎａｇｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｆｏｕｒｃｒｕｓｔａｃｅａｎｓｐｅｃｉｅｓｉｎｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＡｔｌａｎｔｉｃ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｒｕｓｔａｃｅａｎＢｉｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ３５(４):４９９－５０３.[２３]㊀ＬｅｌａｎｄＪＣꎬＢｕｃｈｅｒＤＪꎬＣｏｕｇｈｒａｎＪ.Ｄｉｒｅｃｔａｇｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｃｒａｙｆｉｓｈ(ＲｅｄｃｌａｗꎬＣｈｅｒａｘｑｕａｄｒｉｃａｒｉｎａｔｕｓ)ｕｓｉｎｇｏｓｓｉｃｕｌａｒｇｒｏｗｔｈｍａｒｋｓ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１５ꎬ１０(８):ｅ０１３４９６６.[２４]㊀ＣｌｏｒｅＪＬ.ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｄｅｆｉｎｉｔｉｖｅａｇｅｏｆｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｄｅｃａｐｏｄｃｒｕｓｔａｃｅａｎｓꎬＯｒｃｏｎｅｃｔｅｓｐｒｏｐｉｎｑｕｕｓａｎｄＰｒｏｃａｍｂａｒｕｓｃｌａｒｋｉｉꎬｖｉａｇｒｏｗｔｈｂａｎｄｓｉｎｔｈｅｃａｌｃｉｆｉｅｄｒｅｇｉｏｎｓｏｆｔｈｅｅｙｅｓｔａｌｋａｎｄｇａｓｔｒｉｃｍｉｌｌ[Ｄ].ＳｔａｔｅｏｆＭｉｃｈｉｇａｎ:ＧｒａｎｄＶａｌｌｅｙＳｔａｔｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ２０１４. [２５]㊀ＳｈｅｒｉｄａｎＭꎬＯ ＣｏｎｎｏｒＩꎬＨｅｎｄｅｒｓｏｎＡＣ.ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｍｏｌｔｉｎｇｏｎｇａｓｔｒｉｃｍｉｌｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｉｎＮｏｒｗａｙｌｏｂｓｔｅｒ(Ｎｅｐｈｒｏｐｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ)ａｎｄｉｔｓｐｏｔｅｎｔｉａｌａｓａｄｉｒｅｃｔａｇｅｉｎｇｔｏｏｌ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭａｒｉｎｅＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＥｃｏｌｏｇｙꎬ２０１６ꎬ４８４:１６－２２. [２６]㊀ＳｈｅｒｉｄａｎＭꎬＯ ＣｏｎｎｏｒＩꎬＬｏｒｄａｎＣ.ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇｔｈｅｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙｏｆｕｓｉｎｇｇｒｏｗｔｈｉｎｃｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒａｇｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＮｏｒｗａｙｌｏｂｓｔｅｒ(Ｎｅｐｈｒｏｐｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ)ａｎｄｂｒｏｗｎｃｒａｂ(Ｃａｎｃｅｒｐａｇｕｒｕｓ)[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｒｕｓｔａｃｅａｎＢｉｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ３５(４):４９５－４９８. [２７]㊀蒋瑞ꎬ刘必林ꎬ刘华雪ꎬ等.三种常见经济虾蟹类眼柄微结构分析[Ｊ].海洋与湖沼ꎬ２０１８ꎬ４９(１):９９－１０５.[２８]㊀ＶａｔｃｈｅｒＨＥꎬＲｏｅｒＲＤꎬＤｉｌｌａｍａｎＲＭ.ＳｔｒｕｃｔｕｒｅꎬｍｏｌｔｉｎｇꎬａｎｄｍｉｎｅｒａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｄｏｒｓａｌｏｓｓｉｃｌｅｃｏｍｐｌｅｘｉｎｔｈｅｇａｓｔｒｉｃｍｉｌｌｏｆｔｈｅｂｌｕｅｃｒａｂꎬＣａｌｌｉｎｅｃｔｅｓｓａｐｉｄｕｓ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｒｐｈｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ２７６(１１):１３５８－１３６７.[２９]㊀蒋瑞ꎬ刘必林ꎬ张健ꎬ等.甲壳类年龄鉴定方法研究进展[Ｊ].海洋渔业ꎬ２０１７ꎬ３９(４):４７１－４８０.[３０]㊀ＫｒａｆｆｔＢＡꎬＫｖａｌｓｕｎｄＭꎬＳøｖｉｋＧꎬｅｔａｌ.ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｇｒｏｗｔｈｚｏｎｅｓｉｎｔｈｅｅｙｅｓｔａｌｋｏｆｔｈｅＡｎｔａｒｃｔｉｃｋｒｉｌｌＥｕｐｈａｕｓｉａｓｕｐｅｒｂａ(Ｄａｎａꎬ１８５２)(Ｅｕｐｈａｕｓｉａｃｅａ)[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｒｕｓｔａｃｅａｎＢｉｏｌｏｇｙꎬ２０１６ꎬ３６(３):２６７－２７３.[３１]㊀ＫｉｌａｄａＲꎬＷｅｂｂＪＢꎬＭｃＮｅｅｌＫＷꎬｅｔａｌ.Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆａｄｉｒｅｃｔａｇｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒ３ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｌｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｃｒｕｓｔａｃｅａｎｓｆｒｏｍＡｌａｓｋａ[Ｊ].ＦｉｓｈｅｒｙＢｕｌｌｅｔｉｎꎬ２０１６ꎬ１１５:４２－４９. [３２]㊀高天龙ꎬ王燕飞ꎬ鲍雪宁ꎬ等.单体筐养三疣梭子蟹的蜕壳与生长规律研究[Ｊ].生物学杂志ꎬ２０１６ꎬ３３(３):４１－４６.[３３]㊀李玉虎ꎬ宋芹芹ꎬ张志怀ꎬ等.凡纳滨对虾生长发育规律及生长曲线拟合研究[Ｊ].南方水产科学ꎬ２０１５ꎬ１１(１):８９－９５. [３４]㊀刘海映ꎬ崔帆ꎬ闫红伟ꎬ等.皮口海域中国对虾生长特性的初步研究[Ｊ].大连海洋大学学报ꎬ２０１６ꎬ３１(５):４８８－４９６. [３５]㊀侯朝伟ꎬ顾侨侨ꎬ潘广臣ꎬ等.山东半岛南部中国明对虾大㊁小规格增殖苗种生长特性对比分析[Ｊ].烟台大学学报:自然科学与工程版ꎬ２０１５ꎬ２８(３):１９３－１９８.[３６]㊀徐炳庆ꎬ吕振波ꎬ李战军ꎬ等.莱州湾中国对虾生长特性及其空间分布[Ｊ].生态学报ꎬ２０１６ꎬ３６(３):８０３－８１０.[３７]㊀ＫｉｌａｄａＲꎬＲｅｉｓｓＣＳꎬＫａｗａｇｕｃｈｉＳꎬｅｔａｌ.ＶａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆｂａｎｄｃｏｕｎｔｓｉｎｅｙｅｓｔａｌｋｓｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｇｅｏｆＡｎｔａｒｃｔｉｃｋｒｉｌｌꎬＥｕ￣ｐｈａｕｓｉａｓｕｐｅｒｂａ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１７ꎬ１２(２):ｅ０１７１７７３. [３８]㊀ＢｅａｍｉｓｈＲＪꎬＦｏｕｒｎｉｅｒＤＡ.Ａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｃｏｍｐａｒｉｎｇｔｈｅｐｒｅｃｉｓｉｏｎｏｆａｓｅｔｏｆａｇｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓ[Ｊ].ＣａｎａｄｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓａｎｄＡｑｕａｔｉｃＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ１９８１ꎬ３８:９８２－９８３.Ｃｕｒｒｅｎｔｐｒｏｇｒｅｓｓｅｓｄｉｒｅｃｔａｇｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄｇｒｏｗｔｈｏｆｓｈｒｉｍｐｓａｎｄｃｒａｂｓｕｓｉｎｇｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｅｙｅｓｔａｌｋｓ:ａｒｅｖｉｅｗＮＩＺｈｅｎ－ｙｕ１ꎬＬＩＵＢｉ－ｌｉｎ１ꎬ２ꎬ３ꎬ４ꎬ５ꎬＺＨＡＮＧＪｉａｎ１ꎬ２ꎬ３ꎬＪＩＡＮＧＲｕｉ１ꎬＳＨＵＣｈａｎｇ１(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭａｒｉｎｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＳｈａｎｇｈａｉＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＯｃｅａｎｉｃＦｉｓｈｅｒｉｅｓＥｘｐｌｏｒａｔｉｏｎꎬＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＲｕｒａｌＡｆｆａｉｒｓꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＮａｔｉｏｎａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｆｏｒＯｃｅａｎｉｃＦｉｓｈｅｒｉｅｓꎬＳｈａｎｇｈａｉＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎬＣｈｉｎａꎻ４.ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＳｕｓｔａｉｎａｂｌｅＥｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎｏｆＯｃｅａｎｉｃＦｉｓｈｅｒｉｅｓＲｅｓｏｕｒｃｅｓꎬＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎꎬＳｈａｎｇｈａｉＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒ￣ｓｉｔｙꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎬＣｈｉｎａꎻ５.ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＯｂｓｅｒｖｉｎｇａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔａｔｉｏｎｏｆＯｃｅａｎｉｃＦｉｓｈｅｒｙＲｅｓｏｕｒｃｅｓꎬＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＲｕｒａｌＡｆ￣ｆａｉｒｓꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｓｈｒｉｍｐｓａｎｄｃｒａｂｓｇｒｏｗａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄｂｙｍｏｌｔꎬｄｕｒｉｎｇｗｈｉｃｈａｇｅｒｅｃｏｒｄｉｎｇｏｆｅｘｏｓｋｅｌｅｔｏｎｉｓｄｉｓａｐ￣ｐｅａｒｅｄꎬｒｅｓｕｌｔｉｎｇｉｎｄｉｆｆｉｃｕｌｔｙｉｎａｇｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ.Ｓｉｎｃｅｅｙｅｓｔａｌｋｓａｒｅｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓａｍａｔｅｒｉａｌｆｏｒｄｉｒｅｃｔａｇｅｄｅｔｅｒ￣ｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｈｒｉｍｐｓａｎｄｃｒａｂｓꎬｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅꎬｓａｍｐｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｅｙｅｓｔａｌｋｓｉｎａｇｅｄｅｔｅｒ￣ｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｈｒｉｍｐｓａｎｄｃｒａｂｓａｒｅｒｅｖｉｅｗｅｄ.Ｔｈｅｒｅａｒｅｆｏｕｒ－ｌａｙｅｒｓ(ｅｐｉｃｕｔｉｃｌｅꎬｅｘｏｃｕｔｉｃｌｅꎬｅｎｄｏｃｕｔｉｃｌｅａｎｄｍｅｍ￣ｂｒａｎｏｕｓｌａｙｅｒ)ｉｎｔｈｅｅｙｅｓｔａｌｋｓꎬｉｎｗｈｉｃｈｇｒｏｗｔｈｂａｎｄｓａｒｅｃａｌｃｉｆｉｅｄｉｎｔｈｅｅｎｄｏｃｕｔｉｃｌｅｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅａｇｅ.Ｔｈｅｇｒｏｗｔｈｂａｎｄｓａｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｂｒｏａｄｂａｎｄꎬｗｈｉｃｈｉｓｐｒｉｍａｒｉｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏａｇｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎꎬａｎｄｆｉｎｅｌｉｎｅｓꎬｗｈｉｃｈｉｓｒｅ￣ｌａｔｅｄｔｏｂｏｄｙｌｅｎｇｔｈａｎｄｏｔｈｅｒｆａｃｔｏｒｓ.Ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｇｒｏｗｔｈｂａｎｄｓｗｉｔｈａｇｅａｎｄｇｒｏｗｔｈｉｎｓｈｒｉｍｐｓａｎｄｃｒａｂｓｉｓａｌｓｏｎｅｅｄｅｄｆｕｒｔｈｅｒａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｆｉｎｄｉｎｇｓｐｒｏｖｉｄｅａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｗｉｔｈｆｉｓｈｅｒｙｂｉｏｌ￣ｏｇｙａｎｄｆｉｓｈｅｒｉｅｓｒｅｓｏｕｒｃｅｓｍａｎａｇｅｍｅｎｔ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｓｈｒｉｍｐａｎｄｃｒａｂꎻｅｙｅｓｔａｌｋꎻｇｒｏｗｔｈｂａｎｄꎻｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅ４４１大连海洋大学学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第３４卷。
克氏原螯虾卵巢相关研究综述摘要本文就克氏原螯虾卵巢发育时相的划分，外界环境对卵巢发育的影响，内分泌系统与卵巢发育的关系，卵巢中营养物质的作用等进行了总结。
克氏原螯虾卵巢研究的前沿方向及研究技术方法和发展趋势。
关键词克氏原螯虾；卵巢发育；克氏原螯虾(Proczalbams clarkii)，又称克氏螯虾，属节肢动物门(Arthropoda)、甲壳纲(crustacea]、十足(Deopoda)、螯虾科(cabaridae)，俗名“淡水小龙虾”。
20世纪30年代由日本传人中国，现在在中国很多省市都有分布，并已成为一种重要的经济水产养殖对象。
但是目前在大规模人工养殖过程中，对于其生长发育、繁殖、营养需求相互作用关系等方面的问题，认识不够，从而导致性腺发育欠佳，虾苗供应不足。
个体较小。
本文就雌性螫虾卵巢生长发育的一些方面进行总结，为卵巢发育研究提供理论参考，同时也对亲虾培育作为一种理论指导。
1卵巢和卵母细胞发育的时期及时相划分卵巢发育和卵子发生的研究首先涉及卵巢和卵母细胞的发育分期问题，长期以来卵母细胞的时相划分颇具争议，目前尚无统一标准，主要有以下几种观点：Adiyodi根据卵巢颜色将克氏原螫虾卵巢发育分为五阶段：未发育阶段；白色发育准备阶段；黄色初步发育阶段；橙色基本成熟卵巢；褐色发育成熟阶段。
李胜等以卵巢颜色、卵子大小为依据，将克氏原螫虾的卵巢发育分成七个时期：未发育期，白色透明，尚不见卵粒；发育早期，白色半透明的细小卵粒；卵黄发生前期，均匀的淡黄色至黄色卵粒。
卵径10－300urn；卵黄发生期，又分为初级卵黄发生期和次级卵黄发生期，在初级卵黄发生期阶段，黄色至深黄色卵粒，卵径250－500 um，在次级卵黄发生期阶段，以黄褐色至深黄褐色卵粒为主，卵径大小是450urn-1.6mm；成熟期，深褐色卵粒，卵径1.5mm；产卵后期，包括抱幼虾期和抱仔虾期，特征分别是产卵后卵巢内残存有粉红至黄褐色的卵粒与卵巢白色透明；恢复期12j。
切除对虾眼柄可诱发对虾产卵
李硕玲
【期刊名称】《浙江畜牧兽医》
【年(卷),期】1989(000)004
【摘要】一般在自然界对虾性成熟时要迁移到深海产卵,孵出来的无节幼体再漂浮到近海生长发育到幼虾,再被人们采集来放在海边池塘内饲养到出售。
但现在国外用控制激素的办法,人工繁殖对虾。
对虾产卵受存在于眼柄内的卵巢抑制素控制。
当环境条件有利于生殖时,分泌卵巢抑制素减少,虾体内卵黄开始发育并逐渐成熟,对虾就开始产卵。
故国外采用人工切除对虾眼柄的方法来减少卵巢抑制素的分泌,强制对虾提早产卵。
切除眼柄的方法有:挟住眼柄;挤出眼柄内物质;压碎眼柄;用剃【总页数】1页(P46-46)
【作者】李硕玲
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S8
【相关文献】
1.摘除眼柄诱导斑节对虾成熟产卵的研究 [J], 王红勇
2.切除单侧眼柄对不同体质量养殖斑节对虾卵巢发育及产卵的影响 [J], 杨其彬;邱丽华;黄建华;周发林;温为庚
3.东南亚渔业发展中心采用切除眼柄的方法诱导5月令斑节对虾产卵 [J],
4.英国用切除对虾眼柄方法研究诱导产卵 [J],
5.在循环实验室水池中诱导做单边眼柄剜出术的东方巨对虾（Penaeus plebejus）的卵巢发育和产卵 [J], JohnA．Kelemec;IanR．Smith;许波涛;罗建权
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
用切除眼柄来加速螯虾生长
杨人伟
【期刊名称】《海洋渔业》
【年(卷),期】1979(000)002
【摘要】加拿大渔业环境部渔业海洋中心进行切除螯虾(Homarus americanlls)眼柄的试验，以观察能否加速螯虾的生产率(试验螯虾壳长为6．3～8．1cm)，并观察眼柄的切除对蜕壳的影响。
试验同时还进行了如下比较试验：单个容器与群养的比较；用15℃与用0～10℃的饲养比较；雌虾与雄虾的生长和成活比较；二种饵料配方饲养比较。
【总页数】1页(P31)
【作者】杨人伟
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S945
【相关文献】
1.眼柄切除对中华绒螯蟹肝胰腺和生殖腺蛋白质含量及其种类的影响 [J], 张宽;王贤淼
2.切除单侧眼柄对中华绒螯蟹肝胰腺谷丙转氨酶活力的影响 [J], 张宽
3.眼柄切除及注射黄体酮对中华绒螯蟹幼蟹卵巢发育的影响 [J], 崔青曼;袁春营;吴婷婷
4.切除单侧眼柄对中华绒螯蟹蜕壳,生长,成熟的影响 [J], 顾志敏;何林岗
5.眼柄摘除对红螯光壳螯虾生长、性腺发育及体色的影响 [J], 黄智伟;石耀华;王爱民;潘志;刘春胜;顾志峰
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
光照度、去单侧眼柄、盐度对克氏原螯虾繁殖效果的影响宋光同;丁凤琴;武松;陈静;汪翔;佘磊【期刊名称】《水产科学》【年(卷),期】2013(32)8【摘要】Red swamp crayfish Procambarus clarkii was induced to spawn and to breeding by three factors (7 patterns) including illumination <100 lx ,single-eyestalk ablation and a salinity of 8 for 60 days .No significant difference was observed in survival rate of the broodstock in the experiment (P>0 .05) .There was no significance difference in spawning time and egg-carrying rate of the broodstock (P>0 .05)in the groups of illumination < 100 lx ,single-eyestalk ablation and the illuminance < 100 lx + single-eyestalk ablation ,significantly higher than that in the other 4 groups and in the control group (P< 0 .05) .The crayfish broodstocks in groups of illumination <100 lx ,the single-eyestalk ablation and illumination <100 lx+single-eyestalk ablation spaw ned 15~18 d earlier than the crayfish broodstocks in the control group did ,with as much egg carrying rate as 2 .5 times ,2 .75-fold and 2-fold in the controlgroup ,respectively .%选择光照度＜100 lx、去单侧眼柄、盐度8的盐水3个诱导因素随机组合为7种诱导方式，诱导克氏原螯虾繁殖。
华东师范大学硕士学位论文红螯螯虾（Cherax quadricarinatus）精荚形成、精子代谢及其雄性腺结构和功能研究姓名：***申请学位级别：硕士专业：动物学指导教师：***20050501中文摘要本文根据目前水产养殖中存在的丰要问题和国内外发展的现状，采用组织学、组织化学、细胞学、生物化学、离体共培养等技术和方法，较为系统的研究了红螯螯虾（Ｃｈｅｒａｘｑｕａｄｒｉｃａｒｉｎａｔｕｓ）雄性生殖系统中精荚的结构和形成，精英中精予的代谢方式，以及雄性腺对生殖的影响。
以期为有效提高人工育苗活化率及其促进该虾养殖也的发展提供理论参考。
红螯螯虾取自浙江水产养殖场，各实验结果如下：１．红螯螯虾输精管可分为前、中、后输精管。
前输精管卷曲段为低柱状上皮，分泌弱嗜酸性丝状分泌物，主要成分为中性粘多糖和蛋白质，蛋白亚基分子量为１１６ｋｄ，形成均匀的初级精荚壁：中输精管上皮有３／４增厚，为高柱状上皮，成丛状向内腔突起。
出现大量具有分泌颗粒状嗜酸性分泌物的分泌泡。
分泌物嗜酸性，颗粒状，丰要成分为酸性粘多糖和蛋白质，蛋白亚基分子量为６３．８ｋｄ，形成不均匀，黏性极好的次级精英壁。
在中输精管的后段，分离出一个新的小管，内有少量絮状分泌物。
后输精管则要简单的多，肌层较前两者厚，同时管腔也膨大，其内精荚结构完整。
后输精管与射精管相连，两者之间有一狭部，内有瓣膜相隔。
射精管肌层厚，上皮明显突起，内无精荚。
红螯螯虾精荚仅一个，索状，非交配时，储存在后输精管，由瓣膜相隔。
交配时纵肌收缩，瓣膜之间问隔增大。
环肌收缩，将精英推入射精管，主要通过物理作用缢裂成精荚小段，黏附到雌体腹板。
精荚由精子群、糖荚基质和精荚壁组成；精荚基质中含有交织的纤丝，精荚壁完全包裹精子，分初级、次级精荚壁两层，初级精荚壁由致密的纤丝组成，包裹精子和精荚基质：次级精荚壁由大小不等的小泡和疏松的纤丝组成，包裹在初级精荚壁之外，前、中、后输精管的上皮细胞均具有合成、分泌精荚形成物质的功能。
克氏原鳌虾的睾丸与雌性器官研究近年来，生物学领域的研究取得了巨大的进展，其中涉及到了众多动物的繁殖机制与生理特征。
在这些研究中，克氏原鳌虾的睾丸与雌性器官的研究备受关注。
本文将探讨克氏原鳌虾睾丸和雌性器官的结构特征、生理功能以及相关的研究进展。
克氏原鳌虾（英文学名：Oncopeltus fasciatus）是一种常见的昆虫类动物，广泛分布于北美地区。
它们是一种外显性性别决定的动物，雄虫和雌虫在外形上有明显的区别。
其中，睾丸和雌性器官是性别特征的重要组成部分。
首先，让我们来了解一下克氏原鳌虾睾丸的结构特征。
克氏原鳌虾的睾丸位于腹部背侧，由一对呈椭圆形的器官组成，它们与其他内脏器官相互连接。
睾丸主要由睾小管和配子细胞组成。
在成熟的雄性个体中，睾丸内会产生并储存大量的精子。
通过输精管，精子能被输送到生殖腔内与雌性个体进行受精。
而在克氏原鳌虾的雌性个体中，则存在着不同的生殖器官，包括卵巢、子宫和生殖道等。
卵巢位于腹部中央，由一对呈椭圆形的器官组成。
在成熟的雌性个体中，卵巢中可产生成熟卵细胞，这些卵细胞会通过输卵管进入子宫。
子宫是一个管状的器官，其壁内衬有柱状上皮细胞，负责卵细胞的储存和成长。
最后，生殖道是连接子宫与外界的通道，它可以对外界的精子进行接纳并与之受精。
在克氏原鳌虾的繁殖过程中，睾丸和雌性器官发挥着重要的作用。
雄虫通过配子细胞的产生，能够产生大量的精子并进行存储。
而在雌虫中，卵巢的功能包括卵巢卵巢卵细胞的生成和成熟，并通过输卵管输送至子宫。
一旦受精，精子会与卵细胞结合并在子宫内形成受精卵。
这些受精卵会在子宫内进行进一步的发育，最终被释放到外界。
除了基本的结构和生理特征之外，克氏原鳌虾的睾丸和雌性器官的研究还涉及到生殖调控、细胞发育以及繁殖行为等方面。
研究人员通过分子生物学、细胞生物学以及行为学等多学科的研究手段，揭示了克氏原鳌虾生殖系统的调控机制和相互作用。
近年来，利用现代生物学手段对克氏原鳌虾的睾丸和雌性器官进行的研究已经取得了一系列重要的发现。
眼柄切除对克氏原螯虾蜕皮・生长・性腺发育的影响殷海成(河南工业大学,河南郑州450001)摘要于1996年在虾池试验中用烧烫挤压法切除雌性克氏原螯虾单侧、双侧眼柄,研究了眼柄切除对克氏原螯虾蜕皮、生长及性腺发育的影响。
结果表明,在该试验条件下,去除眼柄后,克氏原螯虾蜕皮加快,蜕皮周期缩短,生长速度同比例增长。
蜕皮、生长速度和性腺发育均是双侧组>单侧组>对照组,组间差异极显著(P<0.01)。
切除单侧、双侧眼柄后,克氏原螯虾加快卵巢成熟,而且组间差异极显著(P<0.01)。
关键词眼柄切除;克氏原螯虾;蜕皮;生长;性腺发育中图分类号S966.12文献标识码A文章编号0517-6611(2007)16-04818-02E ffe c ts o f E y e s ta lk Ab la t ion o n th e M o lt in g,G row th an d G o n ad D e v e lo pm en t o f Pr oca m bar us cl ar k iaY I N H a i-c h en g(H en an U n ive rsity o f T ech n o logy,Zh en g zh ou,H en an450001)A b s tra c t Inth e po o l tes t in1996,th e u n ila te ra l eye sta lk an d b ila te ra l ey es ta lk o f Pr o cam barus c l ark ia w e re ab la ted by bu rn ex tru sion m e th od.I t w a s fou nd th a t a fte r th e eye sta l k w as ab la ted,th e m o lti n g o f Pro ca m bar u s clark ia qu ick en ed,th e m o ltin g pe riod sh o rten ed an d th e g row th speed o f Pro ca m-barus clark ia in crea sed.T h e m o ltin g frequ en cy,t h e g row thspeed an d g on ad deve lopm en t o f Pro cam barus c lark ia in3trea tm en t g roup s w e re b ila te ra l g roup >u n ila te ra l g rou p>CK g rou p an d th e re w a s specia lly s ign ifican t d iffe ren ce be tw een th e grou ps(P<0.01).A fte r th e u n ila te ra l ey es ta lk an d b ila tera l ey es ta lk w e re cu t Proca m bar u s c lark ia p ick ed u p th e m ayu ra tion o f h is ova ry an d a specia lly sign ifican t d ife ren ce w a s fou nd am on g grou ps.K e y w o rd s E ye sta l k ab la tion;Pro ca m bar u s clark ii;M o ltin g;G row th;G on ad de ve lopm en t克氏原螯虾作为新兴水产养殖资源,养殖数量虽逐年扩大,仍供不应求,制约因素是虾苗的供给缺口较大。
因此,加快克氏螯虾生长成熟、促进排卵具有重要意义。
切除眼柄可促进虾类生长、性腺成熟,如S ukum a ran N等切除眼柄诱导虾的繁殖及加拿大海洋渔业部海洋中心切除螯虾眼柄试验,提高了螯虾生产率[1];王镇平、赵铁柱等切除淡水青虾眼柄可促进人工育苗的效果[2];蔡生力对凡纳对虾眼柄切除来进行亲虾培育研究[3]及张海燕、张国新分别对日本沼虾和日本对虾的眼柄摘除对其催熟研究,获得了较满意的效果[4-5]。
笔者对性腺发育早期雌性克氏原螯虾单侧、双侧眼柄切除诱导其蜕皮、生长及成熟,目的是能人工调控其生长和性腺发育成熟,促进其养殖产业化,加快发展地方渔业经济;同时,为了解眼柄神经内分泌与克氏原螯虾的生长、蜕皮及性腺成熟之间的关系提供基础资料。
1材料与方法1.1 材料于1996年7月12日在武汉市蔡甸区黄金湖拉网捕捞的克氏原螯虾中挑选体长、体重、体色基本一致的雌性个体120只,运回华中农业大学水产学院基地。
1.2试验处理将供试克氏原螯虾随机分成3组,每组40只,分养于3个3×4×1m3水泥池,编号为1、2、3,水深30 c m。
3个试验池中放置竹筒、瓦片和投放少量水葫芦,水池上方架设防晒网,饲料为生鱼片、熟米粒。
每隔3d清理1次虾池和每天换水1/2。
从1996年7月12日～19日预饲养7d。
1996年7月19日早8:00时,对1号虾池中虾进行单右侧眼柄切除,对2号虾池中虾进行双侧眼柄切除,3号虾池中虾不作处理(对照)。
眼柄切除方法为烧烫挤压法,眼柄切除处理后放回原来的池内,开始为期50d的试验。
1.4 测定项目与数据处理1996年9月8号试验结束时,捞起现存的虾,测量体长、体重(体长指眼柄基部到尾尖的长度,体重指鲜活重),计算成活率。
试验前后计算体长、体重基金项目湖北省科技厅重点攻关项目(05AA205B01)。
作者简介殷海成(1964-),男,河南郑州人,讲师,从事经济动物繁殖、发育生物学研究。
收稿日期2007-03-02平均数、平均增长率、平均增重率和标准差,差异显著性检验用方差分析。
蜕皮观察每天早晚各1次,直到试验结束,计算蜕皮频率:(蜕皮总次数/起始只数)×100。
试验结束后解剖观察性腺发育。
2结果与分析2.1切除眼柄对蜕皮、生长的影响试验结果列于表1。
体长在试验开始时无显著性差异(P>0.05),结束时3组差异极显著(P<0.01),体长:切除双侧组>切除单侧组>对照组,增长率:切除双侧组为切除单侧组的1.73倍,为对照组的2.86倍;体重同样和体长同比例增长,组间差异极显著(P <0.01),增重率:切除双侧分别是单侧组和对照组的1.33倍及1.99倍。
单侧组死亡3只,成活率92.5%,双侧组死亡6只,成活率85%,对照组成活率100%。
单侧组蜕皮107次,平均2.67次,蜕皮频率267%,双侧组蜕皮135次,平均3.375次,蜕皮频率337.5%,对照组蜕皮76次,平均1.9次,蜕皮频率190%。
表1 平均增长(cm)、增重(g)、成活率(%)及蜕皮频率(%)处理切除单侧切除双侧对照起始平均体长 6.325±1.32a 6.228±0.86a 6.486±3.11a结束平均体长8.557±0.84A10.031±1.01B7.872±2.03C 平均增长率35.2961.0621.37起始平均体重11.148±0.21a10.915±0.63a11.649±1.92a 结束平均体重31.023±2.14A36.826±1.04B25.513±0.21C 平均增重率178.28237.39119.02成活率92.585100蜕皮频率267A337.5B190C注:同行相同小写字母表示差异不显著(P>0.05),同行不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。
2.2切除眼柄对卵巢发育的影响克氏原鳌虾的雌性生殖系统由1对卵巢和2根输卵管组成。
卵巢位于心脏下方,肠道的上方,被肝脏覆盖,整个卵巢呈Y字型。
试验初期的解剖观察,卵巢处于发育早期和卵黄发生前期之间,卵巢呈细条状,浅黄色至黄色,卵粒之间间隔紧密,卵膜薄,肉眼可辩,细胞呈椭圆形,长径345～510μm,短径为245～330μm。
安徽农业科学,J ou rn a l o f A nh u i A g r i.S ci.2007,35(16):4818-4819,4821责任编辑李布青责任校对胡先祥试验结束后解剖观察,单侧组的卵巢处于卵黄发生期和成熟期之间,卵巢呈棒状,颜色为深黄色到褐色,卵巢比较饱满,肉眼不辨卵膜,细胞有大小很明显的2种卵粒且多呈椭圆形,较大卵粒相对小卵粒少些,卵细胞的长径0.58～1.21m m,短径0.42～1.04m m(图1a)。
核为椭圆形,位于卵细胞中央,核仁的数量为几个到十几个,主要分布在核四周,靠近细胞核中心也有少量几个,滤泡细胞分布在卵细胞的外周,镶嵌在管状的膜层中(图2a)。
注:a,单侧切除×3;b,双侧切除×3;c,对照×3。
图1 卵细胞(箭头所示)双侧组的卵巢呈棒状,颜色为深褐色至黑色,深褐色占多数,卵巢饱满,及近占据整个胸腔,肉眼不辨卵膜,细胞呈圆形较饱满,卵黄颗粒可见且充满整个卵细胞,卵细胞的直径大小为1.13～1.61m m(图1b)。
此期核仁可见,滤泡细胞体积变小(图2b)。
对照组可见卵巢呈棒状,深黄色至浅褐色,卵粒之间间隔较紧密,卵膜薄,肉眼不容易辨别,卵细胞为多角的圆形或椭圆形,长径在0.65～0.98m m,短径在0.48～0.72m m(图1c)。
细胞核多偏向一边,近圆形,直径约为98μm。
核仁都是沿细胞核四周分布,数量只有几个,滤泡细胞仍处于卵母细胞的最外层的管状夹层中,有的呈细条状,有的呈瓜子状, 1个卵母细胞周围的滤泡细胞通常有几十个之多(图2c)。
注:a,单侧切除×40;b,双侧切除×40;c,对照×60;1,卵细胞;2,胞核和核仁;3,滤泡细胞;4,卵黄颗粒。
图2 放大的卵细胞3小结与讨论(1)甲壳动物去眼柄影响蜕皮和生长,如切除眼柄能诱导M acrobrach i um nob ilii和Penaeus chi nensis的蜕皮,促进生长[6-7];去眼柄对L it openaeus vanna m ei亲虾生长缓慢,蜕皮周期延长[3];而其成虾单、双侧眼柄去除后蜕皮周期缩短等。
张海燕切除日本沼虾双侧眼柄可促使其脱壳生长;王芳等对凡纳对虾去眼柄试验结果表明蜕皮周期明显缩短,但生长未受到影响[8];顾志敏等对青春期蜕壳前的蟹切除任意一侧眼柄,结果说明都能有效促进蜕壳、生长及性腺的旱期发育[9]。
