凝胶电泳及染色注意事项

文档来源为:从网络收集整理.word 版本可编辑.欢迎下载支持.1文档来源为:从网络收集整理.word 版本可编辑.欢迎下载支持.琼脂糖凝胶电泳常见问题分析问题可能原因解决方法DNA Marker 降解 核酸酶污染每次吸取时更换灭菌枪头，勿将电泳缓冲液带入管中；用后密闭4°C 保存保存不当4°C 或-20°C 保存，避免多次反复冻融；不可加热DNA Marker 无法正确分离 琼脂糖质量差使用质量可靠的琼脂糖制胶 电泳缓冲液多次使用后失效 更换缓冲液 条带黯淡核酸浓度过低 增加上样量核酸降解使用不含核酸酶的试剂和耗材制备样品 DNA 条带被示踪染料掩盖提高上样量；避免使用与目的片段迁移率相同的示踪染料条带模糊或弥散电泳缓冲液多次使用后失效 更换缓冲液核酸部分降解使用不含核酸酶的试剂和耗材制备样品 核酸样品纯度差，含有DNA 结合蛋白或高浓度的盐份 酚/仿抽提或乙醇沉淀去除蛋白、盐份等杂质电压过低，电泳时间过长根据凝胶大小和电泳缓冲液类型，使用适当的电压进行电泳染色时间过长或拍照前放置过久，DNA 条带弥散电泳结束后及时观察、拍照 条带缺失DNA 条带分子量过大使用脉冲凝胶电泳分子量接近的DNA 条带没有分开 选择适当的凝胶浓度进行电泳电泳缓冲液使用不当SD 和TBE 缓冲液适于分析较小分子量的DNA 片段，大片段分子不能完全分离；TAE 缓冲液不适于分离很小的DNA 片段电泳时间过长或电压过高，DNA 走出凝胶缩短电泳时间，调整电压电极插反，DNA 走出凝胶正确连接电极方向 条带大小不正确核酸降解或形成聚合物加热处理或重新制备样品λ DNA 酶切Marker 的cos 位点复性 电泳前65°C 加热5分钟，冰上冷却5分钟以后再上样相同分子量的DNA 片段由于结构或判断DNA 分子是否有特殊结构，分子是否有特殊结构，如缺口、超如缺口、超序列的差异而有不同的迁移率 螺旋、二聚体等；富含AT碱基的DNA迁移率比同分子量富含GC碱基的DNA片段慢 梳子变形，点样孔不在同一水平线上 使用完好的梳子制胶带型异常 不同样本的上样条件不同 选用相同的上样缓冲液，上样量尽可能接近上样量过大或过小 选择合适大小的上样孔，样品应完全覆盖点样孔底部核酸样品纯度差，含有DNA结合蛋白或高浓度的盐份酚/仿抽提或乙醇沉淀去除蛋白、盐份等杂质电泳缓冲液未完全浸没凝胶 上样和电泳时，确保缓冲液始终能完全覆盖凝胶电压过高或电泳时间过长致使凝胶过热和DNA变性 根据凝胶大小和电泳缓冲液类型，使用适当的电压进行电泳凝胶中加入EB造成染色不均 加入EB时充分混匀或电泳结束后再染色凝胶中有气泡或污染物 使用纯水和洁净容器制胶；缓慢灌胶，并赶除气泡点样孔质量差 待凝胶完全凝聚后再取出梳子小片段扩散,条带模糊,粗 错误选择了低浓度凝胶错误选择了低浓度凝胶,,观察大片段用低浓度凝胶用低浓度凝胶,,观察小片段要用高浓度比如观察100bp的小片段用2%2%凝胶跑电泳凝胶跑电泳 琼脂糖质量不好琼脂糖质量不好,,质量不好的琼脂糖分离小片段容易扩散分离小片段容易扩散,,即使是使用高浓度凝胶换用质量好的琼脂糖选择了不合适的电泳缓冲液 SD和TBE缓冲液适于分析较小分子量的DNA片段，大片段分子不能完全分离；TAE缓冲液不适于分离很小的DNA片段DNA凝胶电泳简介一、实验原理DNA电泳是基因工程中最基本的技术，DNA制备及浓度测定、目的DNA片段的分离，重组子的酶切鉴定等均需要电泳完成。

电泳检测技术是指利用带电颗粒在电场中能向异性电极泳动这一现象来分离、纯化或分析检测供试品的一种生物化学技术。

原理：许多生物分子都带有电荷，在电场作用下可发生移动，由于混合物中各组分所带电荷性质、数量以及相对分子质量各不相同，使在同一电场作用下，各组分的泳动方向和速率也各有差异，所以在一定时间内，它们移动距离不同，从而可达到分离鉴定的目的。

DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时，包括电荷效应和分子筛效应。

琼脂糖是由天然的琼脂加工制得，是一种直链杂聚多糖，溶于热水，形成溶胶，冷却后成为孔径范围从50nm到大于200nm的大网孔径凝胶。

由于孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，该电泳技术是目前分离、分析DNA片段的标准方法。

DNA琼脂糖凝胶电泳的原理DNA 分子是两性电解质，在高于其等电点的溶液（pH8.0~pH8.3 DNA分子本身的大小和构型、凝胶浓度决定了DNA分子的迁移速度。

）中，碱基几乎不解离，磷酸基团全部解离，DNA 分子带负电荷，在电场中向正极移动。

DNA分子大小对迁移速率的影响：相对分子质量大，迁移慢；相对分子质量小，迁移快。

DNA分子构型对迁移速率的影响：迁移速度：闭环﹥直链DNA﹥开环DNA。

琼脂糖凝胶浓度的影响：同样大小的线性DNA片段，在不同浓度的琼脂糖凝胶中的迁移速度不同，浓度越大，迁移的越慢常用的电泳上样缓冲液含溴酚蓝，有的还含有二甲苯青，这些指示剂可以指示电泳的速度。

溴化乙淀（EB）是核酸的染色剂，能插入DNA分子中形成荧光结合物，EB在紫外线照射下的发射荧光。

荧光的强度与DNA的含量成正比，从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置及估计出待测样品的浓度。

EB是强致癌剂。

电泳操作步骤(整个过程要求带一次性手套1、胶槽准备①将凝胶托盘放入制胶盒中;②将加样梳垂直插入到制胶盒的小凹槽内，梳齿底端和凝胶托盘有1mm的间隙;③将制胶盒放在调整好的水平台上。

2、凝胶准备用1×TAE配制1％琼脂糖凝胶。

凝胶电泳分离DNA的要点：首先根据待分离DNA的特点选择凝胶电泳的类型，目前电泳的方法已十分成熟，类型也十分多，各有各的优缺点，实际使用中因根据实验的需求选择电泳类型，实验室比较常用的有平板琼脂糖凝胶电泳和垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳。

一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以；如果需要分辨率高的电泳，特别是只有几个bp的差别应该选择聚丙烯酰胺凝胶电泳。

总体的原则是正确使用及操作电泳装置仪器的前提下，注意以下细节：①.根据待分离DNA片断的大小及其差异选择适宜浓度的凝胶，对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2％之间，低浓度的用来进行大片段核酸的电泳，高浓度的用来进行小片段分析；聚丙烯酰胺凝胶也有针对分离片断的大小有不同的胶浓度配比。

②.不管是在琼脂糖凝胶还是聚丙烯酰胺凝胶的制备过程中都要严格杜绝气泡的产生，否则会严重影响电泳结果，导致结果的不可靠性。

凝胶需充分凝固但不宜放置时间过长，可根据实验环境适当调节以确保电泳效果；特别在制备聚丙烯酰胺凝胶中，往往要根据气温适当得改变所加的凝胶催化剂的含量，温度越高凝胶速度越快，如果凝胶过快会导致胶硬而脆，对后期的染色带来不便。

③.电泳样品上样量：各样品的上样量应基本一致，上样量过多可能导致上样孔超载，出现条带拖尾，上样量太少不足以铺满孔底会导致条带亮度不均匀。

在琼脂糖凝胶电泳中的上样量一般是25~ 50μL,而在聚丙烯酰胺凝胶电泳中一般为10 μL，当然依不同电泳槽上样量可能会不一样。

④.电泳样品：PCR样品最好在24h内进行电泳，回收样品应尽量缩短在紫外光下的照射时间，提取的DNA样品在电泳前须去除蛋白和多余的盐分。

⑤.电泳缓冲液：电泳缓冲液应经常更换，确保电泳环境清洁和保持电泳所需的离子强度和pH值。

⑥.电泳时的电压：电泳时应根据电泳槽、凝胶浓度和所分离样品的片段大小选择合适的电压，最大电压不宜超过20V/cm，温度<30℃，大分子量DNA电泳，温度<15℃。

R N A凝胶电泳步骤及注意事项内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）R N A凝胶电泳步骤及注意事项1%的RNA琼脂糖凝胶电泳可以用来检测RNA的完整性，本实验的主要目的是熟悉植物总RNA非变性胶电泳操作原理和操作方法与步骤。

一、实验目的掌握植物总RNA非变性胶电泳的原理和方法。

二、实验原理RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。

非变性电泳使用%%的凝胶，不同的RNA条带也能分开，但无法判断其分子量。

只有在完全变性的条件下，RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。

因此要测定RNA分子量时，一定要用变性凝胶。

在需快速检测所提总RNA样品完整性时，配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。

三、实验材料、器具及药品蘑菇的总RNA溶液。

电泳仪，电泳槽，电子天平，移液器，枪头，微波炉，紫外透射检测仪等。

琼脂糖，1XTAE电泳缓冲液，μg/ml溴化乙锭(EB)10X载样缓冲液。

四、实验步骤(1)用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶，加1×TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。

(2)在超净工作台上，用移液器吸取总RNA样品4μl于封口膜上。

在实验台上再加入5μl 1×TAE电泳缓冲液及1μl 的10X载样缓冲液，混匀后，小心加入点样孔。

(3)打开电源开关，调节电压至100V，使RNA由负极向正极电泳，约30min后将凝胶放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。

在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。

试剂：(1)MOPS缓冲液(10*):L 吗啉代丙烷磺酸(MOPS) ，L NaAc, 10mol/L EDTA。

(2)上样染料：50%甘油，1mmol/L EDTA ,%溴酚蓝，%二甲苯蓝。

(3)甲醛。

(4)去离子甲酰胺。

v电泳槽清洗：去污剂洗干净(一般浸泡过夜)——水冲洗——乙醇干燥——3%H2O2灌满——室温放置10分钟——%DEPC水冲洗。

RNA凝胶电泳步骤及注意事项RNA 凝胶电泳是分子生物学中常用的实验技术之一，用于分离和分析 RNA 分子的大小和完整性。

下面将详细介绍 RNA 凝胶电泳的步骤及需要注意的事项。

一、实验准备1、试剂和材料琼脂糖：用于制备凝胶。

电泳缓冲液：常用的有 MOPS（3-（N吗啉基）丙磺酸）缓冲液或TAE（Tris乙酸EDTA）缓冲液。

RNA 上样缓冲液：包含染料如溴酚蓝等，用于指示电泳进程。

RNA 分子量标准：用于估计 RNA 片段的大小。

核酸染料：如溴化乙锭（EB）或更安全的替代染料。

2、仪器设备电泳槽：确保电泳槽清洁，无杂质和污染。

电源：提供稳定的电压和电流。

凝胶成像系统：用于观察和记录电泳结果。

二、RNA 样品制备1、 RNA 提取使用合适的方法从细胞或组织中提取 RNA，确保 RNA 的质量和完整性。

提取过程中要注意避免 RNA 酶的污染。

2、 RNA 定量使用分光光度计或荧光定量仪对提取的 RNA 进行定量，确定 RNA的浓度。

3、 RNA 变性将 RNA 样品在适当的条件下（如加热或加入变性剂）进行变性处理，使其由二级结构变为线性单链，以保证在电泳中能够按照分子量大小进行分离。

三、凝胶制备1、选择合适的琼脂糖浓度根据要分离的 RNA 片段大小选择琼脂糖的浓度。

一般来说，分离较大的 RNA 片段（＞2000 nt）使用低浓度琼脂糖（如 05% 1%），分离较小的 RNA 片段（＜2000 nt）使用较高浓度琼脂糖（如 12% 2%）。

2、融化琼脂糖在微波炉中或电炉上加热融化琼脂糖，期间要小心搅拌，避免溶液溢出。

3、加入电泳缓冲液待琼脂糖溶液冷却至 50 60°C 时，加入适量的电泳缓冲液，充分混匀。

4、灌胶将琼脂糖溶液倒入制胶模具中，插入梳子，避免产生气泡。

等待凝胶完全凝固（约 30 60 分钟）。

四、电泳1、取出梳子凝胶凝固后，小心拔出梳子，避免损坏凝胶孔。

2、加入电泳缓冲液在电泳槽中加入适量的电泳缓冲液，没过凝胶表面 1 2 mm。

dna凝胶电泳注意事项
1.安全操作：DNA凝胶电泳涉及使用电流和化学药物，必须
遵循实验室安全规定并佩戴个人防护装备，如实验手套和安全眼镜。

2.远离火源：电泳室中的电源和电缆应远离水和易燃物，以防
止火灾和电击事故的发生。

3.正确连接设备：确保正确连接电泳槽、电源和电极，以免使
电泳结果受到干扰或损坏电气设备。

4.正确选择电解质缓冲液：根据所需分辨率、DNA大小和电
极材料选择正确的电解质缓冲液，以确保最佳的分离效果。

5.准备样本：将DNA样本热变性，然后快速冷却，以防止DNA在电泳过程中重新结对。

添加适当的载体染料，以便观
察和测量DNA带的迁移距离。

6.正确加载样品：用微量移液器或吸管将样品加入到凝胶孔中，然后轻轻敲击孔板以使样品沉入凝胶，避免空隙的出现。

7.恒定电压/电流：根据实验需要设置适当的电流或电压，保
持恒定，并确保电泳时间适当，以免样品移出凝胶。

8.正确运行电泳：启动电泳，并确保电泳槽中有足够的电解质
缓冲液覆盖凝胶，以保持恒定的离子浓度和温度。

9.记录结果：在电泳结束后，用电泳染色剂染色或用紫外线照
射直接观察凝胶板上的带状DNA区域，并记录结果或拍照保存。

10.安全处理凝胶和化学品：正确处置使用过的凝胶和化学品，遵循实验室废物处理程序，以保护环境和他人的安全。

S D S-聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳该技术首先在1967年由Shapiro建立，1969年由Weber和Osborn进一步完善。

一、原理聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺 (简称Acr) 和交联剂N，N’—亚甲基双丙烯酰胺（简称Bis）在催化剂作用下，聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶，并以此为支持物进行电泳。

聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移率将蛋白质分离成若干条区带，如果分离纯化的样品中只含有同一种蛋白质，蛋白质样品电泳后，就应只分离出一条区带。

SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键，并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物，使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷，掩盖了各种蛋白分子间天然的电荷差异。

因此，各种蛋白质-SDS 复合物在电泳时的迁移率，不再受原有电荷和分子形状的影响，而只是棒长的函数。

这种电泳方法称为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（简称SDS—PAGE）。

由于SDS-PAGE 可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度，因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度，如果被鉴定的蛋白质样品很纯，只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质，那么SDS—PAGE 后，就只出现一条蛋白质区带。

SDS—PAGE 可分为圆盘状和垂直板状、连续系统和不连续系统。

本实验采用垂直板状不连续系统。

所谓“不连续”是指电泳体系由两种或两种以上的缓冲液、pH 和凝胶孔径等所组成。

1．样品的浓缩效应在不连续电泳系统中，含有上、下槽缓冲液(Tris—Gly，pH8.3)、浓缩胶缓冲液(Tris—HCl，pH6.8)、分离胶缓冲液(Tris—HCl，pH8.8)，两种凝胶的浓度(即孔径)也不相同。

在这种条件下，缓冲系统中的HCl 几乎全部解离成Cl－，两槽中的Gly (pI＝6.0，pK a=9.7)只有很少部分解离成Gly 的负离子，而酸性蛋白质也可解离出负离子。

DNA琼脂糖凝胶电泳一,实验原理琼脂糖凝胶电泳是分离和纯化DNA 片段的常用技术.把DNA样品加入到一块包含电解质的多孔支持介质(琼脂糖凝胶)的样品孔中,并置于静电场上.由于DNA分子的双螺旋骨架两侧带有含负电荷的磷酸根残基,因此在电场中向正极移动.在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应.具有不同的相对分子质量的DNA片段泳动速度不一样,因而可依据DNA分子的大小来使其分离.凝胶电泳不仅可分离不同分子质量的DNA, 也可以分离相对分子质量相同,而构型不同的DNA分子.在电泳过程中可以通过示踪染料或相对分子质量标准参照物和样品一起进行电泳而得到检测.相对分子质量标准参照物相对可以提供一个用于确定DNA片段大小的标准.在凝胶中加入少量溴化乙锭(ethidium bromide, EB),其分子可插入DNA的碱基之间,形成一种络合物,在254～365nm波长紫外光照射下,呈桔红色荧光,因此也可对分离的DNA进行检测.一般琼脂糖凝胶电泳适用于大小在0.2kb～50kb范围内的DNA 片段.本实验介绍琼脂糖凝胶的制备以及琼脂糖凝胶电泳在DNA片段分离中的应用方法.琼脂糖凝胶浓度（%）线状DNA分子分离范围（kb）0.3 5--600.6 1--200.9 0.5--71.2 0.4--61.5 0.2--32.0 0.1--2琼脂糖凝胶电泳是用于分离纯化和鉴定核酸的方法，根据琼脂糖的溶解温度，把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖。

低熔点琼脂糖的熔点为62--65,溶解后在37下维持液体状态约数小时,主要用于DNA片断的回收、质粒与外源性DNA的快速连接等。

DNA在琼脂糖凝胶中的迁移速度与琼脂糖浓度、DNA分子量及其构象、电泳缓冲液、电场强度等因素有关，一般说来，DNA片断越大或者琼脂糖浓度越大，其迁移速率越大；而电场强度越高，其迁移速率越大。

不同浓度琼脂糖凝胶DNA分离范围见上图表。

二,仪器及试剂1.仪器及耗材:水平电泳槽,电泳仪,凝胶成像分析系统,微波炉,微量移液器,透明胶带,点样或parafilm,100 ml或250 ml锥形瓶,量筒,吸头等.2.试剂及配制:50×TAE缓冲液的配制:2 mol/L Tris-乙酸,0.05 mol/L EDTA(pH 8.0)配制1000 mlTris 242 g冰乙酸 57.1 ml0.5 mol/L EDTA 100 ml加入600 ml去离子水后搅拌溶解,将溶液定容至1 L后.高温高压灭菌,室温保存.1×TAE缓冲液的配制:称量20 ml的50×TAE缓冲液,再加入980 ml的去离子水.溴化乙啶贮存液:10 mg/ml 溴化乙啶配制:100 ml称取1 g溴化乙啶,置于100 ml烧杯中,加入80 ml去离子水后搅拌溶解.将溶液定容至100 ml后,转移到棕色瓶中.室温保存.6×上样缓冲液:0.25%溴酚蓝,0.25%二甲苯青FF,30%甘油.配制:10 ml溴酚蓝 25 mg二甲苯青FF 25 mg甘油 3 ml用6×TAE缓冲液定溶至10 ml,分装成1 ml/管.-20℃保存.其它试剂:DNA样品,DNA Ladder ,琼脂糖三,操作步骤1. 制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g(0.5g)琼脂糖置于锥形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液.2. 胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净,晾干,放入制胶玻璃板.取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子.将内槽置于水平位置,并在固定位置放好梳子.将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层.室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拔梳子,取下胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中.添加1×TAE电泳缓冲液至没过胶板为止.3. 加样:在点样板或parafilm上混合DNA样品和上样缓冲液,上样缓冲液的最终稀释倍数应不小于1X.用10 ul微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内,每加完一个样品,应更换一个加样头,以防污染,加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面.(注意:加样前要先记下加样的顺序).4. 电泳:加样后的凝胶板立即通电进行电泳,电压60-100V,样品由负极(黑色)向正极(红色)方向移动.电压升高,琼脂糖凝胶的有效分离范围降低.当溴酚蓝移动到距离胶板下沿约1cm处时,停止电泳. (5)电泳完毕后,取出凝胶,用含有0.5 ug/ml的溴化乙锭1×TAE溶液染色约20 min,再用清水漂洗10 min.(6)观察照相:在紫外灯下观察,DNA存在则显示出红色荧光条带,采用凝胶成像系统拍照保存.四,常见问题及注意事项1.配琼脂糖时应使其完全熔化后方可制胶.2.琼脂糖凝胶易于破碎,操作时要轻缓.3.电泳时应注意电源线路,预防触电.4.溴化乙淀具有致癌作用,配制及使用时应带乳胶或一次性塑料手套.并在专门的实验室内使用.5.紫外线对人体有损伤作用,开灯时间不宜太长,注意防护.6.DNA带形状模糊:DNA加样过多;电压太高;凝胶中有气泡.7.质粒DNA的存在形式有3种,①共价闭环DNA(cccDNA),常以超螺旋形式存在;②开环DNA(ocDNA),此种质粒DNA的两条链中有一条发生一处或多处断裂,因此可以自由旋转从而消除张力,形成松弛的环状分子;③线状DNA,因质粒DNA的两条链在同一处断裂而造成.因此质粒DNA电泳的结果中有可能出现三条泳带,它们的泳动速度为: cccDNA > 线状DNA > ocDNA.添加来自TIANGEN的资料:1,琼脂糖:不同厂家＼不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同,影响DNA的迁移及其荧光背景的强度,应有选择的使用.2,凝胶的制备:凝胶中所加的缓冲液应该与电泳槽中的相一致,溶化的凝胶应该及时倒入板中,避免倒入之前凝固结块,倒入板中的凝胶应该避免出现气泡,以免影响电泳结果.3,电泳缓冲液:为保持电泳所需的离子强度和PH,应经常更新电泳缓冲液.4,样品加入量:一般情况下,0.5CM宽的梳子可加0.5微克的DNA量,加样量的多少依据加样孔的大小及DNA中片断的数量和大小而定.当加样孔大时,样品上样量应相应加大,否则会造成条带浅甚至辨认不清楚;反之,则应该适当减少加样量,但是上样量过多会造成加样孔超载,从而导致拖尾或扩散,对于较大的DNA此现象更明显.5,DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率,平行对照样品中应该使用同样的缓冲条件以消除这种影响.6,DNA迁移率取决于琼脂糖的浓度,迁移分子的形状及其大小.采用不同浓度的凝胶有可能分辨范围广泛的DNA分子,制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度.小片断DNA的检测应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,以提高分辨率.。