猪急性心肌梗死模型的建立(一)
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心肌梗死动物模型具体方法及步骤原型物种人来源结扎冠状动脉左前降支(LAD)导致心梗模式动物品系SPF级SD大鼠,健康,3-4W,雌雄各半,体重为180g-200g。
实验分组实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期72h建模方法心肌梗死是指心肌的缺血性坏死,是一种急性及严重的心脏状态。
心脏作为血液循环动力中心这一功能的实现,需要冠状动脉不断提供的血流供应,当冠状动脉发生病变而狭窄或堵塞,使得冠状动脉的血流急剧减少或中断,便会使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血,心肌无法得到足够氧气,最终导致心肌不可逆的缺血性坏死,心脏的收缩和舒张功能降低,机体供血不足,严重者最终导致机体死亡。
1. 大鼠用3%戊巴比妥钠(30mg/kg),腹腔注射麻醉,用小动物剃毛器剃除大鼠胸部及腋下毛发(充分暴露手术区),用碘酒和75%乙醇术区消毒。
2.气管插管:麻醉后,夹趾检测无反应即可进行MI手术。
打开外置光源、显微镜开关,打开呼吸机,设置好各参数(呼吸比2:1,潮气量6-8 mL,频率70 次/min),将气管插管沿声门插入气管,取下大鼠接上呼吸机,观察大鼠呼吸状况,胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功,即可进行MI手术。
3. 大鼠采用右侧卧位,用眼科剪在左前肢腋下,用显微剪于三、四肋间打开胸腔充分暴露心脏,显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包,充分暴露左冠状动脉前降支(LAD)或所在区域。
4. 结扎冠状动脉:于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取5-0带针缝合线,于左心耳根部下方肺动脉圆锥旁以5-0 无创缝合线穿过左冠状动脉前降支( LAD),以完全阻断LAD血流。
5.关胸:结扎完成后,5-0缝线完全缝合胸腔开口(保证无缝隙、无错位)关闭胸腔,由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。
6.术后管理:术后密切关注大鼠状态,有无呼吸异常等。
待大鼠自然苏醒后将大鼠从呼吸机上取下并取下气管插管,正常饲养。
急性心肌损伤后心肌修复的初步观察廖占玲;王炳银;刘峰【摘要】目的评估大鼠急性心肌梗死后,梗死边缘区和右心室非梗死区心肌细胞增殖情况,探讨其在修复损伤心肌中的可能作用.方法 2012年1月起选取苏州大学动物实验中心SD大鼠14只,采用随机数字表法分为两组:实验组采用开胸结扎冠状动脉前降支制作急性心肌梗死模型,对照组开胸置缝线而不结扎.于术后第10日处死大鼠,采集梗死边缘区及非梗死区心肌组织.处死大鼠前12h和24h分别腹腔注射50 mg/kg 5-溴-2-脱氧尿苷(Brdu).苏木精-伊红(HE)染色后观察心肌组织形态学和病理学变化,免疫组织化学法检测Brdu阳性心肌细胞.结果大鼠急性心肌梗死后左心室梗死边缘区及右心室非梗死区均可见Brdu阳性心肌细胞,即存在心肌细胞增殖/再生.实验组梗死边缘区Brdu阳性心肌细胞比例为对照组的5.7倍[(1.26±0.15)%vs (0.22±0.06)%](P<0.01);右心室非梗死区Brdu阳性细胞为对照组的4.2倍[(0.75±0.12)%vs (0.18±0.07)%](P<0.01);实验组梗死边缘区Brdu阳性细胞与右心室非梗死区比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论大鼠急性心肌梗死后心肌细胞可增殖再生,梗死边缘区及右心室非梗死区均可见心肌细胞增殖,且均显著高于对照组.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2014(020)008【总页数】3页(P1487-1489)【关键词】急性心肌梗死;大鼠;心肌细胞再生;增殖【作者】廖占玲;王炳银;刘峰【作者单位】上海交通大学医学院苏州九龙医院心脏中心,江苏苏州 215021;上海交通大学医学院苏州九龙医院心脏中心,江苏苏州 215021;上海交通大学医学院苏州九龙医院心脏中心,江苏苏州 215021【正文语种】中文【中图分类】R541.4传统的观念一直认为心脏是一个终末分化器官,心肌细胞不能再生,肥大是其唯一的表现形式。
中国小型猪心导管介入冠状动脉栓塞心肌梗死模型制作及方法(1)复制方法体重18~22kg雄性中国小型猪。
按30mg/kg的剂量戊丨巴丨比丨妥丨钠静脉注射麻醉,动物固定后分离股静脉建立静脉通路以补液及给药,接心电监护。
无菌作颈部切口,分离颈总动脉,动脉穿刺插入鞘管,给肝素200U/kg抗凝,通过静脉通道给利多卡因(5mg/kg)以预防室颤。
采用左前斜位(45°),在X线机透视下经鞘管将右冠指引导管插入至主动脉升段,通过泛影葡胺造影定位使导管开口与冠状动脉开口同轴,将导丝小心插入冠状动脉左前降支,再通过球囊导管送入栓子至左前降支中下1/3处。
造影确认阻断血流后,依次退出导丝、球囊及导管、鞘管,缝合颈部切口,术后观察14d后处死动物,取心脏并做相关检查。
观测指标的选择可选用功能性指标(如心电图、超声心动图、无创性心功能测定、放射性核素tuo心肌血流测定等),生化指标(各种心肌酶、心肌代谢及其他生化指标),形态学指标(心肌梗死范围、心肌病理切片观测心肌损伤修复情况、心肌细胞及心肌小血管新生情况等)。
多指标观测可从多方面反映心肌梗死发生、发展、转归以及各种治疗措施的近期及远期疗效。
(2)模型特点本模型制作方法不需开胸等复杂手术,也不需结扎冠状动脉,可避免手术创伤对动物造成重大的伤害及机体内环境的重大改变,保持胸腔内环境稳定;同时可进行活体(在体)、长期、多指标的连续、动态观测。
因该模型稳定,可进行准确的定位、定量研究,结果可靠,重复性好,所以既可用于急性试验,观察药物的即刻作用;又可进行慢性试验,术后观察数日、数周或更久的动态变化过程以及药物的长期疗效。
特别是观察心肌修复过程,心肌细胞及心肌小血管再生等作用,说明各种治疗措施或药物的远期疗效。
但本试验技术难度大,技巧性强,操作复杂,需依赖X线机、介入设备,并需多学科合作配合,才能取得成功。
(3)比较医学中国小型猪心脏及冠状动脉系统的解剖生理特点与人相似,优于犬及其他动物,其模型更符合临床特点。
五指山小型猪在心血管系统疾病建模中的应用田玉龙;钟红珊【摘要】五指山小型猪是中国特有的、具有自主知识产权的高度近交猪种,具有遗传性稳定、体型小、体重轻、抗逆性强等特点,因组织器官结构及生理生化指标与人类相似,已越来越广泛地应用于医学研究领域.在我国,五指山小型猪被用来构建高脂血症模型、动脉粥样硬化模型、急慢性心肌缺血致急性心肌梗死模型和心力衰竭模型、心脏骤停模型、心肺复苏后心肌代谢评估等心血管疾病模型.五指山小型猪在心血管系统解剖及生物学行为与人高度相似,将会在未来心血管疾病研究中发挥日益重要的作用.【期刊名称】《介入放射学杂志》【年(卷),期】2016(025)004【总页数】4页(P363-366)【关键词】五指山小型猪;心血管系统疾病;动物模型;医学研究【作者】田玉龙;钟红珊【作者单位】110001沈阳中国医科大学附属第一医院介入放射科、辽宁省影像诊断与介入治疗重点实验室;110001沈阳中国医科大学附属第一医院介入放射科、辽宁省影像诊断与介入治疗重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R528.1DOI:1O.3969/j.issn.1OO8-794X.2O16.04.O22单位:110001沈阳中国医科大学附属第一医院介入放射科、辽宁省影像诊断与介入治疗重点实验室【Abstract】W uzhishan miniature pig breed isunique to China,which ishighly inbred pig breed with independentintellectualpropertyrights.The pigshave somecertain characteristics,such asgenetic stability,smallsize,lightweightand strong resistance,etc.As its structures oftissues and organs as wellas its physiologicaland biochemicalindex are quite similarto those ofhuman beings,ithasbeen more and more widely used in the field ofmedicalresearch.In China,W uzhishan miniature pigshave already been used in establishing various models of cardiovascular system diseases,including hyperlipidemia model,model of atherosclerosis,acute and chronic ischemia-induced myocardialinfarction model,heartfailure model,heart arrestmodel,modelused forevaluation ofmyocardialmetabolism aftercardiopulmonary resuscitation,etc.In aspectofthe cardiovascularsystem anatomy and biologicalbehavior,W uzhishan miniature pigs are highly similar to human beings,therefore,the utilization of W uzhishan miniature pigs willplay an increasingly importantrolein thestudyofcardiovasculardiseasein thefuture.(J Intervent Radiol,2O16,25:363-366)【Key words】W uzhishan miniature pig;disease ofcardiovascular system;animal model;medical research猪在解剖学及生理学方面与人有较大的相似性,其在医学研究中的重要性日渐显著。
常见心脑血管疾病的动物模型选择与建立学号:11311032 姓名:钱江平 班级:11中药(1)班摘要:目的:探讨常见心脑血管疾病的动物模型及其建立。
方法:通过查阅资料,了解常见心脑血管疾病的类型,进而再通过查阅论文等,理出常见心脑血管疾病模型的建立方法。
结论:通过对各种心脑血管疾病的动物模型的研究,可以看出不同动物在面对不同心脑血管疾病是,他们各有优缺点。
我们在选择动物时,应具体考虑。
关键词:心脑血管疾病 动物模型 动物模型建立我国老龄化的加快老年人心血管疾病日益突出其发病率和死亡率日趋升高,提高心血管疾病的防治水平刻不容缓"随着现代医学的快速发展心血管疾病的预防!诊断和治疗等方面都取得一定的进展。
我国每年因心脑血管疾病而死亡的人数大约为260万,约占总死亡比例的45%。
实验动物作为生命科学研究的基础和重要的支撑条件,广泛应用于临床医学和实验医学研究[2],通过建立实验动物模型,能为临床应用提供很多理论指导。
一、高血脂及动脉粥样硬化症动物模型(一)概述腹腔注射蛋黄乳液造成小鼠高血脂模型是一种适合于药物大面积初筛的高血脂动物模型。
通过在动物饲料中加入过量的胆固醇和脂肪,饲养一定时间后,它的主动脉及冠状动脉处会逐渐形成粥样硬化斑块,并出现高血脂症。
高胆固醇和高脂饮食,加入少量胆酸盐,可增加胆固醇的吸收,如再加入甲状腺抑制药--甲基硫氧嘧啶或丙基硫氧嘧啶可进一步加速病变的形成。
(二)方法:1.小型猪:猪在许多生物学指标上与人类非常相似,被认为是研究人类疾病最合适的实验动物模型,既经济实用,又克服了同种器官的短缺。
如在比较医学中,科学家根据猪自身生理病理发生的过程研究人类衰老的机理,根据猪与人共同感染的疾病研究人的疾病在猪中的发生发展规律,从而为人类疾病的诊断、防治和治疗提供理论依据。
小型猪建高血脂模型,一般选用选用Gottigen系小型猪较为理想,用1%~2%高脂食物饲喂6个月即可形成动脉粥样硬化病变。
冠心病心肌重构的研究进展叶琳;成方方;袁桂莉【摘要】近些年来研究表明心肌梗死后心脏重构的现象严重,包括结构重构,心电重构,神经重构等.在急性心肌梗死幸存人群中,仍有多数人因致命性心律失常或难治性心力衰竭而死亡.心肌梗死后,心脏发生了诸多病理生理变化,有研究表明炎性因子过度激活、各种离子通道蛋白的异常,以及信号通路的改变促进了心肌各种重构现象的发生.%In recent years,numerous studies have shown that cardiac remodeling after myocardial infarction (MI) is a serious phenomenon,including structural remodeling,atrial electrical remodeling (AER),and neural remodeling. Most of the survivors of acute MI still die of fatal arrhythmias or refractory heart failure. MI leads to a variety of pathophysiological changes in the heart. Th studies have shown that excessive activation of inflammatory factors, abnormalities of various ion channel proteins,as well as the changes of signaling pathways promote various myocardial remodeling.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2018(040)009【总页数】5页(P1409-1413)【关键词】心肌梗死;心电重构;神经重构;结构重构【作者】叶琳;成方方;袁桂莉【作者单位】075000 河北省张家口市,河北北方学院研究生院;075000 河北省张家口市,河北北方学院研究生院;河北北方学院附属第一医院【正文语种】中文【中图分类】R541.4各种心脏结构或功能性疾病,包括高血压、糖尿病、冠心病、肥胖和代谢综合征等最终可累及心脏的疾病,以及服用心脏毒性药物史、酗酒史,风湿热史及家族性心肌病史等情况,都会造成心肌重构,但冠心病是心脏器质病变最常见的类型,也是危害人类健康的常见病,随着生活水平的提高和老龄化社会的到来,我国心肌梗死发病率呈逐年上升趋势。
透析血泵辅助联合主动脉内球囊反搏(IABP)治疗急性心肌梗死后心源性休克的实验室研究庞玲品,王冲冲,陈普文,黄石安( 广东医学院附属医院 心内科,广东 湛江 524001)摘要:目的 探讨联合降低左心室舒张末压及左心室后负荷与单纯降低左心室后负荷对急性心肌梗死后血流动力学的影响。
方法 采用小型猪急性心肌梗死模型,右侧下肢股动脉穿刺留置动脉鞘及IABP导管外接驱动泵,双侧上臂动脉穿刺,留置动脉鞘,分别送7F猪尾巴导管至左心室和升主动脉分别连接血泵的入口和出口,右侧股静脉穿刺留置静脉鞘,送swan-gans导管至肺动脉测定血流动力学参数。
结果 IABP治疗后各项血流动力学参数与IABP治疗前比较差异均有显著性,血泵联合IABP治疗与单纯IABP治疗各项血流动力学参数有进一步改善,各组比较差异具有显著性。
IABP治疗前平均肺动脉压(mPAP) =(36.60±1.67)mmHg;肺毛细血管楔嵌压(PWCW) =(20.20±1.30)mmHg;心排指数(CI)= 1.66±0.11;主动脉内平均动脉压(mAP)=(57.60±3.65)mmHg;IABP治疗后mPAP=(31.4±2.07)mmHg; PWCW=(16.00±1.87)mmHg;CI=1.98±0.08;mAP=(64.60±3.05)mmHg;血泵联合IABP治疗后mPAP=(26.20±1.30)mmHg;PWCW=(11.60±1.52)mmHg; CI=2.32±0.08; mAP=(68.20±2.77)mmHg。
结论 在降低左心室后负荷的基础上,进一步降低左心室容量负荷,更有利于降低心肌梗死后肺毛细血管楔嵌压,提高左心室心排指数.关键词:急性心肌梗死;血泵;主动脉内球囊反搏;左心功能。
中图分类号:R 275.9 文献标识码:B心源性休克是急性心肌梗死的主要死亡原因[1-2],随着诊疗技术的发展,上世纪九十年代中期后心源性休克的死亡率有所下降,急性心肌梗死合并心源性休克病死率仍然超过60%[3-4],IABP治疗可以降低左心室后负荷,从而降低其病死率,但对于严重左心室泵衰竭患者,心肌收缩力显著减弱,不能有效泵出血液导致左心室收缩末期残存血液增加,IABP 仍不能有效改善循环从而导致死亡。
猪急性心肌梗死模型的建立(一)
作者:蒋益波,冯毅,丁建东,王宇
摘要]目的:探讨应用经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)球囊堵闭猪冠状动脉建立急性心肌梗死动物模型的实验方法。
方法:选用苏中幼猪12只,麻醉后经股动脉置入PTCA球囊至冠状动脉左回旋支分支,堵闭血流90min,行心电图、血流动力学、心脏二维超声、TTC染色及光镜、电镜检查以判断急性心肌梗死模型是否成功建立。
结果:12只猪均完成冠状动脉左回旋支分支的封堵,部分实验动物显示心电图呈典型急性心肌梗死动态图形变化,球囊堵塞1h后超声检查出现心室局部运动异常;堵塞90min再灌注30min后处死猪,取出心肌作TTC染色及光镜、电镜检测,证明成功建立猪急性心肌梗死模型。
结论:应用PTCA球囊封堵冠状动脉可成功建立猪急性心肌梗死模型,方法简便易行,具有创伤小、死亡率低等优点。
关键词]心肌梗死;猪;动物模型
目前,国外多采用猪做心血管疾病研究的模型。
猪的心脏在解剖结构、心脏血管分布、心脏与体重比等方面和人的心脏很相似,特别是其冠状动脉系统侧支交叉分布较少以及不易建立新的侧支循环1]的特性是大鼠、兔及犬的心脏所不可比拟的。
作者在参照文献的基础上,摸索出一套简便易行的方法,成功地建立了猪心肌梗死(心梗)模型。
1资料与方法
1.1动物健康小型猪,由东南大学医学院动物中心提供,均为雄性,体重25~30kg,共12只。
1.2TTC染色剂氯化三苯基四氮唑(2,3,5Triphenyltetrazoliumchloride,TTC,Sigma公司)2g加入生理盐水200ml配制成1%的TTC。
1.3方法
1.3.1实验动物的麻醉基础麻醉:术前禁食8h,安定1mg・kg-1、氯胺酮10mg・kg-1、阿托品1mg肌肉注射。
维持麻醉:戊巴比妥钠0.1mg・kg-1・min-1耳静脉维持。
气管插管:插管型号7.0,长度28cm,插入长度26cm。
呼吸机:容量控制在12ml・kg-1,12次・min-1。
给氧浓度60%。
1.3.2心梗模型的建立动物取仰卧位,右侧腹股沟部、前胸部及四肢备皮,常规消毒后铺巾,切开皮肤、皮下组织及肌肉,分离暴露出右股动脉。
动脉穿刺后经J型0.035in(1in=0.0254m)导丝送入6F(1F=0.33mm)动脉鞘管,肝素100U・kg-1,隔1h静脉注射肝素1000U。
用0.035in导丝引导将6FJudkins造影导管送至主动脉根部,注射欧乃派克行左、右冠状动脉造影,明确分析冠状动脉分布,选择左回旋支分支为堵塞目标血管,选用指引导管6FJL (JudkinsLeft)置入左冠状动脉,将0.014in经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneousfransluminalcoronaryangioplasty,PTCA)导丝放至左回旋支分支,造影确认后用压力泵以3~6atm(1atm=101.325kPa)扩张球囊,行缺血预适应三四次,每次球囊充盈20s,间隔3~5min,无明显异常反应后扩张球囊90min。
造影证实血流阻塞,90min后将球囊撤出,再灌注30min。
在心梗模型建立过程中,接心电监护仪,监测心电图、血流动力学的动态变化,并监测超声心动图的变化。
1.3.3心脏标本的染色及光镜检查(1)TTC染色:静脉注射10%KCl20ml将猪处死,迅速开胸取出心脏,用生理盐水将残余血液冲洗干净,垂直于心脏长轴,自心尖向心底将心脏切成4mm厚的短轴面切片,然后置于1%TTC磷酸盐缓冲液中,放入37℃恒温水浴箱20min之后在10%福尔马林中固定。
正常心肌染色呈砖红色,坏死心肌呈灰白色。
数码相机拍照。
(2)HE染色:快速、准确切取心梗区和缺血区、正常区组织(不超过1cm大小),置入10%福尔马林固定液中,固定后行组织修整、洗涤、酒精逐级脱水,二甲苯置换出组织块中的酒精,石蜡包埋,切片机切成4μm的薄片,HE染色,封片,光镜观察。
1.3.4标本的电镜检查快速、准确切取心梗区和正常心肌组织约1mm3大小,立即置于4%戊二醛固定液中固定2h,磷酸盐缓冲液漂洗3次,酒精逐级脱水,环氧丙烷浸透20min,由
包埋剂包埋样品并聚合(60℃),半簿(500nm)切片定位,超簿(50nm)切片,醋酸铀和枸橼酸铅双重电子染色,电镜观察。
1.4统计学处理应用SPSS10.0软件进行统计学处理,计量资料均以x-±s表示,采用t检验进行显著性检验,P0.05为差异有统计学意义。