蜡样芽孢杆菌国标检测方法
蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）是一种广泛存在于自然环境中的细菌，它可以生长在食品和环境中，因此对于食品和饮料行业来说，蜡样芽孢杆菌的检测非常重要。国际上已经制定了相关的标准，而国内也制定了具体的检测方法。本文将介绍蜡样芽孢杆菌国标检测方法并展开详细描述，以供相关行业参考。
1. 国标检测方法
蜡样芽孢杆菌国标检测方法主要采用了生物学检测和分子生物学检测方法。生物学检测主要使用平板计数法和过滤膜法，分子生物学检测主要使用聚合酶链式反应法（PCR法）和实时荧光定量PCR法（qPCR法）。
2. 样品选择
需要检测的样品包括：发酵食品、膳食补充剂、调味品、果蔬制品、肉制品和乳制品等。
3. 样品制备
样品制备前应先进行预处理。首先采样应在保持样品原有状态的基础上进行。对于固体样品，应采用加热处理或浸泡法进行分离；对于液体样品，应使用过滤方法或离心沉淀法进行分离。
4. 平板计数法
平板计数法是指直接将样品加入含有富含营养物质的寒天平板中，将平板培养在适宜的环境中，形成菌落后进行计数。整个操作过程需要消毒操作标本及工具，取样后用无菌吸管挤压或邀约样本，点样于寒天平板上，用无菌毛细管在菌液上滴蒸馏水，最后在恰当条件下培养。
5. 过滤膜法
过滤膜法将膜片放入模具上，加入样品后进行过滤，将膜片放入含营养物质的寒天平板中，使其形成菌落后，进行计数。操作过程中需要对膜片进行密封操作以避免空气污染。
6. PCR法
PCR法是指从样品中提取DNA，并使用特定引物进行扩增，在扩增过程中计量目的DNA的含量。PCR方法的核心技术是产生大量DNA分子复制，以此来检测目标DNA。
7. qPCR法 qPCR法是指通过PCR法产生信息荧光信号，以定量检测目标DNA的含量。qPCR法和PCR法类似，都是通过DNA扩增并检测扩增产物来判断样品是否含有目标DNA。
医学信息２０１３年２月第２６卷第２期（下半月）Ｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｆｅｂ．２０１３．Ｖｏ１．２６．Ｎｏ．２
一起蜡样芽胞杆菌引起食物中毒的检测
范和
（湖南省洞口县疾病预防控制中心，湖南洞口４２２３（）０）
摘要：目的调查分析一起食物中毒的原因，为食物中毒的处理提供依据。方法根据流行病学调查和临床症状，选择需要鉴定的致病茵，依据
ＧＢ４７８９．１０一一２０１０、ＧＢ／Ｔ４７８９．１４一一２００３，对采集的标本进行致病菌的分离和鉴定。结果对食物中毒相关的５份食物样品、１份饮用水、１份呕
吐物、２份涂抹样品进行检测；对５例患者急性期和恢复期双份血清进行蜡样芽胞杆菌抗体水平检测。结果检出５株蜡样芽胞杆菌，双份血清
抗体滴度均有４倍以上升高。结论这是一起由蜡样芽胞杆菌污染豆腐渣而引起的食物中毒。
关键词：食物中毒；蜡样芽胞杆菌；检测
Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ Ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｃｅｒｅｕｓ
ＦＡＮ Ｈｅ
ｆＨｕｎａｎ ＤｏｎｇＫｏｕＸｉａｎ ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｄｏｎｇｋｏｕ ４２２３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｃａｕｓｅ ｏｆ ａ ｃａｓｅ ｔｈａｔ ｐｅｏｐｌｅ ｓｕｆｆｅｒｅｄ ｆｏｏｄ ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆ０ｒ ｈｏｗ ｔｏ ｄｅａｌ ｗｉｔｈ
ｔｈｅ ｃａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｅｅｄｅｄ ｔｏ ｂｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｗｅｒｅ ｃｈｏｓｅｎ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ａｂｏｕｔ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ
ｓｙｍｐｔｏｍｓ．Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｂａｓｉｓ ｏｆ ＧＢ４７８９．１０一一２０１０、ＧＢ／Ｔ４７８９．１４—２００３．
２００７年３月第４卷第３期ＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＤｉｇｅｓｔ
造成局部微循环改变，局部缺血，引起沿颈内动脉分布的动眼
神经的血管功能障碍导致神经缺血性病变引发 。眼球运动
神经大多由中脑长旋动脉或大脑后动脉穿透支供血，亦认为
ｏＭ可由动眼神经被水肿的大脑后动脉压迫或被大脑后动脉与
小脑上动脉钳夹所致 。ｏＭ的诊断除有偏头痛的特点外，还必
须与能引起眼肌麻痹的其他器质性病变，如痛性眼肌麻痹、某
些颅内肿瘤、颈内动脉瘤、糖尿病、重症肌无力及多发性硬化
等病相鉴别 。本例患者出现“视物不清伴视物成双”症状
以前，曾有左侧头痛史，呈搏动性，程度剧烈，伴恶心呕吐，
无明显诱因，持续３天，头颅ＭＲＩ未见新发病灶，排除了颅内
器质性疾忠，故０Ｍ的诊断成立。偏头痛中医属于“脑风”、“首
风”、头风”、“头半边痛”的范畴，眼肌麻痹中医称为“视岐”，
病因多以风、火、痰、瘀以及肝、脾、肾等脏腑功能失调为主，
中医学认为，头为诸阳之会。髓海所居之处，既有经络与脏腑相
连，又有诸窍与内外沟通，故各种原因导致脏腑功能失调，使
得气滞血瘀，脉络痹阻。清窍不利，经筋失养，肌肉纵缓不收是
引发该病的主要原因。针灸治疗可以调整脏腑阴阳，调和气血，
疏通经络，补虚泻实，扶正祛邪，侧头部是少阳经所过的部位，
此选少阳经头部的经穴为主，远端循经取穴相结合，并施以泻
法，从而达到通络化瘀止痛作用。并且选取眼疾要穴疏通经络，
运行气血，增加局部的血液循环，改善或增强其营养代谢，加 ・个案护理・
速恢复眼肌的运动功能，从而达到治愈的目的。
参考文献
【１】李建章主编．头痛头晕诊断治疗学【Ｍ】．北京：中国医药科
技出版社．１９９３：４５—５０．
【２】ＰｒａｔＳ Ｊ Ｍ，Ｍａｔｅ ＯＳ Ｂ，Ｇａｒａｉｚａｒ Ｃ．Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ＭＲＩ
ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ＯＣＵｌＯｍＯｔｏｒ ｎｅｒｖｅ ｉｎ ｃｈ¨ｄｈｏｏｄ
食品中蜡样芽胞杆菌检验原始记录
样品编号： 检验开始时间： 年 月 日
样品名称： 检验完成时间： 年 月 日
检测项目：蜡样芽胞杆菌 检测依据：GB4789.14-2014第一法第二法
一、平板计数法：
无菌操作称（量）取样品25g加入225ml的无菌生理盐水中，用螺旋刀片式均质器以8000r/min~10000r/min均质2分钟，做成1∶10样品液；若样品为液态，吸取25ml样品至盛有225ml无菌生理盐水的锥形瓶（预置适当数量的无菌玻璃珠）中，震荡混匀，作为1:10的样品匀液。
取1∶10样品匀液1ml加入到盛有9ml生理盐水稀释管中，混匀，做成1∶100样品均液。根据对样品污染状况的估计，按上述操作，依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。每递增一次，换用1支1ml无菌吸头。根据对样品污染状况的估计，选择2~3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），以0.3ml、0.3ml、0.4ml接种量分别移入三块MYP琼脂平板，然后用无菌L棒涂布整个平板。倒置于培养箱，30±1∶培养24±2h，如果菌落不典型，可继续培养24±2h。
从每个平板中挑取至少5个典型菌落（小于5个全选），分别划线接种于营养琼脂平板做纯培养，30±1∶培养24±2h，进行确认实验。
编号 空白 培养时间 培养温度
稀释度 / / /
接种量 / / /
MYP琼脂菌落数
典型菌落总数(A) / / /
镜检/革兰氏染色 / / /
用于鉴定的菌落数（C） / / /
