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“CK－MB”测定的干扰现象及实验对策湖北省兴山县人民医院彭兰张娥、万芳、邹志宝443711【摘要】目的：探讨“CK－MB”升高的干扰原因及实验对策。
方法：采用免疫抑制法测定“CK－MB”，采用酶偶联速率法测定总CK活性。
结果，10名健康献血员、56名本院心内科人、15名本院收治的恶性肿瘤病人三组人员同时检测“CK－MB”及总CK活力；在正常献血员中有一例CK－MB值异常升高，达总活性的61%；在56例心内科病人血清中CK－MB单项升高16例，总CK单项升高33例，二项指标同时升高28例；在15例恶性肿瘤患者血清中CK －MB单项升高7例，总活性升高2例，二项同时升高1例。
结论：采用免疫抑制法CK－MB作为心肌梗塞诊断指标的特异性仍须探讨，实验存在较多的干扰因素，且CK－MB结果升高与恶性肿瘤有密切关系。
【关键词】：CK－MB 总CK 干扰用免疫抑制法检测血清CK-MB活性,观察其活力单位及与CK 的比值关系作为诊断急性心肌梗死的相对特异性指标、预测冠状动脉再通的治疗效果和观察病情变化等,已被临床广泛应用。
一般情况下正常人CK-MB主要存在于人体心肌细胞内,血清中CK的存在形式主要是CK-MM,只有少量CK-MB,不超过总活性的5%,心肌梗死发生时最高值也不超过38%。
但在日常检测工作中经常发现临床血清标本中CK-MB检测值与理论值不符合,最多见的就是CK-MB检测值大于总CK检测值的现象。
现就肌酸激酶及其同工酶的组成、临床意义和检测的方法学等方面简要分析其原因并就解决方法提出建议。
CK－MB存在于心肌细胞胞浆中，CK－MB作为诊断急性心肌梗塞或心肌坏死的特异时指标，在心肌坏死症状发作4－5小时达正常上限，12－24小时达高峰，72小时逐步恢复。
基层实验室多采用免疫抑制法测定CK－MB，对不同病程的心肌病提供较特异诊断，本室通过三组不同人群的CK－MB测验结果发现，采用免疫抑制法测定CK－MB指标有假性增高现象，与临床体征明显不符，现先从实验原理探讨；免疫抑制法测定CK－MB是用抗体将M亚基抑制，测定B亚基，结果乘以2即为CK－MB活性，当血清中出现文献报道中的巨CK或CK－BB及其它成份时，由于它们不受抗M亚基抗体抑制，其活性已完全测出，再乘以系数2,就可能出现CK－MB升高或高于总CK的现象，造成CK－MB结果失真，本室从1999.9-2000.5共收集71份血清测定CK－MB及总CK活性，现将实验中出现的异常结果提出探讨。
ckmb质量法单独升高原因
CK-MB是肌酸激酶同工酶，它主要存在于心肌组织中。
当心肌
组织受损时，CK-MB释放到血液中，因此CK-MB质量法单独升高可
能是由以下原因导致的：
1. 心肌梗死，当心肌组织发生梗死时，由于细胞破坏，CK-MB
会释放到血液中，导致血清中CK-MB浓度升高。
这是CK-MB单独升
高最常见的原因之一。
2. 心肌炎，心肌炎是由病毒感染或自身免疫性疾病引起的心肌
组织炎症。
在心肌炎时，心肌细胞受损，释放CK-MB到血液中，导
致血清中CK-MB浓度升高。
3. 心肌创伤，心肌创伤可能是由于心脏手术或其他外伤引起的。
在这些情况下，心肌组织受损，导致CK-MB释放到血液中，引起血
清中CK-MB浓度升高。
4. 心肌炎症性疾病，一些炎症性疾病，如类风湿性心脏病或心
肌炎，也可能导致CK-MB质量法单独升高。
总之，CK-MB质量法单独升高通常是由于心肌组织受损所致，最常见的原因是心肌梗死。
然而，还有其他一些疾病和情况也可能导致CK-MB质量法单独升高，因此如果发现CK-MB升高，需要进一步的临床评估以确定具体的原因。
血清ＣＫ—ＭＢ高于ＣK的异常原因分析(２)XXXXXXXX当在小儿轮状病毒感染时,大概有１０%会出现CK偏高，当CＫ升高得很厉害时，M亚基无法完全封闭，或是当肌肉创伤及肌肉注射时，ＣＫ同工酶只检出CK-MＭ时,也会出现CＫ－ＭB大于CK的情况。
2.３CK-MB试剂因素：主要表现为试剂污染或使用已过有效期的试剂。
一般的CＫ-ＭB检测标本量较小，因此一盒试剂往往长期、多次使用,从而有可能导致试剂污染。
此外有极少数单位因为标本量太小，对已过有效期的试剂舍不得弃之，因而存在使用过期试剂的现象。
由于试剂长时间暴露于空气中,造成试剂的浓缩,因而导致CK－MＢ检测结果的假阳性。
2。
4仪器因素：主要表现为对仪器使用熟练程度不够,参数设置有误.ＣK 与CK－MB不同，CK校准品和质控品在大多数的复合校准品或质控品血清中均提供有其值,而CK－MB则由于其本身的不稳定性,市面上CK-MＢ的校准品或质控品较少见，而且其价格也较其他酶类校准品高得多。
因此，一般医院都未使用CＫ－ＭＢ校准品和质控品，而是采用厂家试剂盒使用说明书提供的理论因素，在理论因素设置时，不同仪器略有差异。
大多仪器理论因素设置与测定结果的小数位数无关，因而可随便设置,而有些仪器则不然,如日立生化分析仪,其结果的小数位数与因素直接相关,存在１０n(n为整数）倍数关系。
因此,在该类仪器上凡是使用理论因素的检测项目其结果保留的小数位应与理论因素保持一致，否则将会出现检测结果缩小或放大1０ｎ倍。
当CK-ＭB设定参数放大时，检测结果进行n倍扩大，造成检测结果的不准确。
XXXX病历中的患者血清非溶血性标本，在排除仪器及试剂的影响因素外，考虑到患者有癌症伴转移,机体免疫系统发生紊乱,血清中可能存在巨ＣK1或CＫ２,从而导致了CK－MB CK的结果.今后我们在临床工作中，如常规检测发现血清中ＣK－ＭＢ异常增高(甚至ＣＫ-MB ＣK)的患者，应结合患者临床症状全面分析，并做进一步检查。
肌酸激酶同工酶杂化型（MB）的应用与假性增高的原因及处理作者：白冰王鹏飞史光华来源：《健康必读（上旬刊）》2019年第08期【摘 ;要】肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzymes）别名为血清肌酸激酶同工酶，是一种酶类成分，它有三种同工酶形式：肌肉型、脑型、杂化型，最为广泛使用的是杂化型的肌酸激酶同工酶简称（CK-MB），它在患者患有心肌损伤的时候是较好的血清标志物，目前广泛的检测方法是速率法，在大量的检测结果中证实此法所检测的结果中有小部分为假性增高，而CK-MB质量法采用的是单克隆抗体，具有抗原抗体反应的特异性及高度专一性，与其同工酶CK-BB及CK-MM无交叉反应，可以更好的反应指标的高低，因此本文来对CK-MB的应用及检测方法上的缺陷和优势进行比较。
结合我院目前对于此种情况的处理进行探讨。
【关键词】肌酸激酶同工酶杂化型（MB）;假性增高;【中图分类号】R197;;;;;;【文献标识码】A; ;;;;【文章编号】1672-3783（2019）08-0082-021 肌酸激酶同工酶的分型及CK-MB的应用1.1分型：肌肉型（MM）、脑型（BB）、杂化型（MB）.肌酸激酶分子是由脑型亚单位（B）和肌型亚单位（M）组成的二聚体，正常人体组织中常含3种同工酶，按电泳快慢顺序分别为CK-BB（CK1）、CK-MB（CK2）和CK-MM（CK3）。
CK-BB主要存在于平滑肌和脑组织中，血清中几乎没有;CK-MB主要存在于心肌组织中，占血清中CK的0～4%;CK-MM主要存在于骨骼肌中，占血清中CK的96%～ 100%。
CK-MB有自己的亚型，包括MB2（组织形式）和MB1（转化形式）。
CK-MB2从心肌释放后，羧基末端被血浆羧基肽酶N水解，去掉一个赖氨酸残基转化为血清修饰亚型CK-MB1。
CK和CK-MB是心肌组织损伤的敏感指标之一，特别是CK-MB更具特异性。
心肌损伤过程中CK的升高主要是由于CK-MB的升高引起，表现为二者的同时升高。
35例恶性肿瘤患者血清CK-MB异常增高原因分析血清中谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶(LDH)、a-羟丁酸脱氢酶(a-HBDH)、肌酸激酶(CK)、心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)由于在心肌组织中含量丰富，一直是衡量心肌受损的指标，特别是CK-MB被认为是诊断急性心肌梗死特异性很强的指标[1]。
我们在2008-2010诊治的35恶性肿瘤患者血清中CK-MB异常增高，现报道如下，并对其中原因进行初步分析。
1 对象和方法1.1对象本组男20例，女15例，年龄35-78岁，平均56岁。
原发性肺癌15例；肝癌4例；乳腺癌11例；结肠癌4例；食道癌1例，均经病理组织学确诊，经心电图和心脏彩超检查排除心脏严重疾患。
1.2方法入院当天或次日晨起抽取空腹静脉血，离心分离血清后立即上机检测。
AST、LDH、a-HBDH试剂盒为浙江东瓯公司生产，CK试剂盒为美国波音特公司生产，CK-MB试剂盒为OLYMPUS公司和浙江东瓯公司生产，所用质控品分别为OLYMPUS和RANDOX公司提供。
仪器为日本产OLYMPUS AU400全自动生化分析仪。
AST、LDH、a-HBDH、CK测定均为速率法。
CK-MB测定为免疫抑制法。
2 结果见表1。
表1 恶性肿瘤35例心肌酶增高的情况3 讨论血清CK和CK-MB主要用于急性心肌梗死等心脏病的诊断及动态监测，近年有学者认为也有助于某些恶性肿瘤的诊断和疗效评价。
本组10例CK异常增高(170+74) U／L，7例CK-MB异常增高(78+44)U／L(正常参考值<18 U／L)，这些患者伴随LDH、Q-HBDH及AST的异常增高，有些甚至达到正常值上限的6倍以上，其原因是恶性肿瘤可由于肿瘤细胞恶性增殖和坏死而引起血清LDH及α-HBDH增高[1]。
分析肿瘤患者 CK-MB异常增高的原因：肌酸激酶在细胞质内共有三种同工酶，即CK-MM、CK-MB、CK-BB。
CK-MM主要存在于骨骼肌中。
免疫抑制法测定CK-MB活性假性增高的原因分析【摘要】的：通过对CK-MB异常升高的病例进行分析，探讨用免疫抑制法检测CK-MB活性假性升高的原因及实验对策。
方法：对本院2014年1月～12月临床上遇到的48例CK-MB异常升高的病例进行回顾性分析，探讨用免疫抑制法检测CK-MB活性假性升高的原因。
结果：48例非心肌梗死的病例中，出现CK-MB/CK﹥30%的有24例，出现CK-MB大于CK即比例倒置的有24例。
结论：CK-MB异常升高出现最多的是在肿瘤患者当中，其次是儿科患者，提示在一些恶性肿瘤，婴幼儿患者体内可能存在异常干扰成分。
【关键词】肌酸激酶；活性假性增高；原因分析及临床意义[Abstract]Objective：To analyze the abnormal elevation of CK-MB cases，investigate immunosuppressive activity of CK-MB assay falsely elevated causes and countermeasures experiment.Methods：The hospital in January 2014 ~ 48 cases of abnormal elevation of CK-MB in patients experiencing clinically December were retrospectively analyzed to explore falsely elevated CK-MB activity detected by reason immunosuppression.Results：48 cases of non-myocardial infarction patients，the emergence of CK-MB / CK> 30% of the 24 cases，the emergence of CK-MB is greater than the proportion of inversion of CK namely 24 cases.Conclusion：CK-MB is the most frequent abnormal increase in cancer among patients，followed by pediatric patients，suggesting that in some malignant tumors，may interfere with abnormal body composition of infant patients. [Key words]creatine kinase；false increase activity；Cause Analysis and Clinical Significance正常人CK-MB主要存在于心肌细胞内，血清中CK的存在形式主要是CK-MM，只有少量的CK-MB，不超过总CK的5%，AMI时最高也不超过30%。
CK-MB的假性升高免疫抑制法测定CK-MB作为诊断心肌损伤的指标已广泛应用。
临床上有时出现CK-MB活性占总CK活性比例的25%以上，甚至等于或高于总CK的现象。
以下节选临床实验室仪器信息网上的文章（部分修改）供各位专家探讨，欢迎批评指正。
免疫抑制法测定CK-MB方法的原理是用抗体将M亚基抑制，测定B亚基活性，结果乘以2既为CK-MB活性。
当血清中出现巨CK或CK-BB时，由于巨CK和CK-BB不被M 亚基抗体抑制，其活性百分之百被测出，且还要乘2，因此就出现了CK-MB等于或高于总CK的现象。
事实上，CK-MB活性占总CK活性的比例很少出现25%以上。
一旦有这样的结果出现，就需要进一步鉴定。
鉴定方法1：琼脂糖凝胶电泳肌酸肌酶同功酶含两种亚基，M亚基和B亚基。
肌酸肌酶由这两种亚基组成的二聚体。
三种不同的组成方式合成三种同功酶。
MM 型主要来自心肌和骨骼肌，MB型主要来自心肌，BB型主要来自中枢组织。
每一种同功酶分子所带电荷不同，在特定电泳条件下，电场中泳动率各不相同。
将患者血清10ul加样于琼制糖凝胶板阴极测2cm处，150V电泳20min，电泳毕在凝胶板上覆盖CK底物并盖一塑料薄膜。
凝胶板置于37℃温育30min，温育后除去覆盖的塑料薄膜烘干进行扫描。
电泳时必须同时做质控（内含CK-MM CK-MB CKBB）以资对照。
琼脂糖凝胶电泳CK同功酶质控血清可显示三条区带，CK-BB 位于阳极侧白蛋白区域，CK-MB位于中间a2或β球蛋白区域，CK-MM位于阴极侧r球蛋白区域。
而巨CK1迁移于CK-MM与CK-MB之间。
巨CK2时位于CK-MM的阴极侧。
2：巨CK的活化能activation energy测定测定活化能的原理为酶的活性依赖于温度。
阿伦尼乌斯（S．A．Arrhenius）公式：K＝A-Ea/RT，可以形成lnK= -Ea/RT+lnA 其中K为酶催化反应速度常数，Ea为活化能（KJ/mol）,R为气体常数（8.3*10-3KJ/mol℃）。
免疫抑制法检测患者血清CK-MB假性升高80例原因分析【摘要】目的：分析免疫抑制法检测患者血清CK-MB假性升高原因。
方法：对我院2014年1月～2015年1月80例血清CK-MB假性升高（CK-MB/CK≥30%）患者临床资料展开回顾性分析，从中总结出致使血清CK-MB假性升高的原因。
结果：80例血清CK-MB假性升高患者的病症类型分为恶性肿瘤、心脑血管疾病、Ⅱ型糖尿病、类风湿性疾病、小儿支气管炎五种，致使其血清CK-MB假性升高的首要原因为免疫抑制法自身因素（38.75%），其余依次为巨CK干扰、CK-BB升高、样本溶血。
结论：导致免疫抑制法检测患者血清CK-MB假性升高的原因包括免疫抑制法自身因素、巨CK干扰、CK-BB升高、样本溶血，应引起临床检验工作者的高度重视以提高血清CK-MB检测准确率，为临床诊疗工作提供更加科学可靠的检验结果。
【关键词】免疫抑制法；血清CK-MB；肌酸激酶；假性升高肌酸激酶（Creatine Kinase，CK）是一种存在于动物心脏、肌肉、脑部等组织细胞浆或者是线粒体中的二聚酶，常被临床看作是心肌酶生化标志物[1]。
在当前临床检验工作中测定血清CK-MB的方法较多，如电泳法、离子交换层析法、免疫抑制法、放射免疫法等，在此其中免疫抑制法操作最为简便且不需要特殊的医疗器械，检测成本较低，成为临床检测工作的首选方法[2]。
然而，随着血清样本检测数量的增加，血清CK-MB假性升高问题随之涌现，给临床诊疗工作开展带来严重不利影响。
鉴于此，本次研究针对免疫抑制法检测患者血清CK-MB假性升高原因予以分析，现内容报道如下：1 资料与方法1.1一般资料选取2014年1月～2015年1月前往我院接受诊疗的80例血清CK-MB假性升高（CK-MB/CK≥30%）患者为研究对象，其中男性55例、女性25例；年龄5岁～55岁，平均年龄（41.27±1.23）岁；病程时间1个月～1.5年，平均病程（8.75±0.25）个月。
