实验资料

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被动吸烟可不同程度影响学习记忆能力。

这一研究结论是通过采用跳台实验检测被动吸烟环境下小鼠的学习记忆能力变化情况后得出的。

他们共选取40只雄雌各半实验用小鼠,随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,并将后3组小鼠分别放入染毒柜中,用自动被动吸烟装置分别吸1支、2支、4支,被动吸烟速度约为1支/10分钟,吸完后10分钟从染柜中取出小鼠,每天1次,连续7天;而对照组小鼠不做任何处理。

对照组和实验组小鼠均在7天后放入箱底为通电铜栅、箱内装有橡皮台的反射箱内,通以电脉冲进行跳台实验。

结果被动吸烟的高、中、低3个剂量组小鼠,跳台潜伏期延长,表明被动吸烟可以损害小鼠的学习和记忆能力。

在衡量小鼠记忆能力的第二次跳台实验中,实验对照组小鼠错误次数较第一次跳台显著减少,表明小鼠对电击有一定的记忆能力;而被动吸烟组小鼠第二次跳台实验时,其错误次数与第一次跳台实验比较无明显减少,即对电击无记忆能力,表明被动吸烟可影响小鼠记忆能力。

目的探讨具有神经营养因子( NGF)样活性的土党参多糖对小鼠学习记忆的作用效果。

方法以东莨菪碱、亚硝
酸钠、乙醇分别造成小鼠学习记忆获得障碍、记忆巩固障碍和记忆再现障碍, 采用跳台法、Y水迷宫法和暗箱法进行观察。

结果土党参粗多糖( 150 m g /kg和300 mg /kg )、土党参多糖纯组分( 150 mg /kg和300 mg / kg)及脑复康( 500 mg /kg) 均可
使小鼠逃避伤害刺激的反应速度加快, 错误次数明显减少, 遭电击时间缩短(与模型组比较, P < 0. 01或P < 0. 05), 两药
的效果相近(P > 0. 05)。

结论具有NGF样活性的土党参多糖具有改善小鼠学习记忆能力的作用。

1材料与仪器
1. 1动物昆明种小鼠, 体质量( 20 2) g, 雌雄兼用, 由重庆医科大学实验动物中心提供, 许可证号: SCXK(渝) 2007- 001。

1. 2仪器与试药小鼠Y水迷宫, 小鼠跳台仪, 小鼠暗箱仪, 2010监控处理软件, 土党参粗多糖( C JP)、土党参多糖纯组分( CJP1)由本课题组提供。

脑复康, 湖北华中药业有限公司产品, 批号:
20080307; 亚硝酸钠, 分析纯, 重庆川江化学试剂厂产品, 批号:
20081222; 氢溴酸东莨菪碱注射液, 徐州莱恩药业有限公司产品,
批号: 200909291; 酒精, 食用级别; 三氯化铝, 分析纯。

2方法
2. 1分组及给药筛选合格小鼠( 跳台法、Y 水迷宫法、暗箱
法) , 随机分7组, 每组14只, 雌雄各半。

空白组、模型组、脑复康
对照( 500 mg /kg )、土党参粗多糖低剂量组( CJP- M, 150 m g /
kg)、土党参粗多糖组高剂量组( CJP- H, 300 m g /kg )、土党参多
糖纯组分低剂量组( CJP1- M, 150 m g /kg)、土党参多糖纯组分高
剂量组( CJP1- H, 300 mg /kg )、空白组、模型组给予等体积生理
盐水灌胃。

2. 2行为学检测[ 6]
2. 2. 1跳台法实验时将小鼠置于跳台仪中, 适应环境3 m in, 然
后底部铜栅通以36 V, 2 mA 交流电, 记录动物受到电刺激后跳上
绝缘平台的反应时间和5 m in内受电击的次数(错误次数) , 作为
学习成绩。

24 h后将小鼠置于橡皮垫上, 记录小鼠第一次跳下绝
缘平台的时间( 潜伏期)和5 m in 内受电击的次数(错误次数),
作为记忆成绩。

2. 2. 2暗箱法实验时, 将小鼠背朝洞口放入明室, 同时开始计
时和通电( 36 V, 2 mA 交流电), 小鼠进入暗室立即遭到电击, 记
录小鼠受到电击的时间, 以此作为学习成绩。

24 h 后测验, 记录
小鼠第一次进入暗室的时间(潜伏期)和5 m in内的错误次数, 以
此作为记忆成绩。

2. 2. 3 Y 型水迷宫每只小鼠每天训练12次, 小鼠每游完3 次
休息15 s, 记录第2天测试中12次小鼠一次性到达目的地的所
需时间。

2. 3学习记忆障碍模型[ 6]
2. 3. 1东莨菪碱致记忆获得障碍模型连续给药7 d, 于第7 天
灌胃10 m in后, 空白组按体质量注射生理盐水, 其它组按体质量腹腔注射氢溴酸东莨菪碱3 m g /kg, 注射后进行跳台训练, 24 h
后测试; 第9、10天进行Y 水迷宫训练测试, 按上述给药方案注射氢溴酸东莨菪碱, 记录第10天成绩。

2. 3. 2亚硝酸钠致记忆巩固障碍模型连续给药7 d, 进行跳台
法训练, 训练结束后立即给药, 空白组颈前部皮下注射生理盐水, 其它组按体质量120 mg /kg注射亚硝酸钠, 24 h后测试。

2. 3. 3 40%乙醇致记忆再现缺失模型连续给药8 d, 经暗箱法
训练后, 重测前, 对照组灌生理盐水, 其它组按体重0. 1 m l/10g
灌服40%乙醇, 30 m in后测试记忆能力。

2. 4实验数据统计应用SPSS 17. 0软件进行统计分析, 实验数
据以 x s表示, 采用单因素方差分析t检验, 显著性水平设在
a= 0. 05。

3结果
3. 1东莨菪碱致动物记忆获得障碍模型东莨菪碱为中枢神经
系统抑制药, 抑制乙酰胆碱在递质间的释放, 形成记忆障碍, 各组小鼠被动回避反应测试成绩(跳台法)见图1, 主动回避反应测试
成绩( Y水迷宫法)见图2。

由图1和图2可以看出, 与模型组比较, C JP和CJP1在实验剂量范围, 能明显缩短小鼠逃避电击的时间(潜伏期)、缩短游泳寻觅平台的时间(P < 0. 01) 。

其中多糖组
在相同剂量, C JP1组小鼠潜伏期明显低于CJP组小鼠潜伏期, 而与阳性对照脑复康组无显著差异, 说明CJP和CJP1具有改善东
莨菪碱致动物记忆获得障碍功能作用。