肝干细胞的研究状况及其在肝病方面的运用前景
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肝脏疾病的干细胞治疗前景《肝脏疾病的干细胞治疗前景》课题申报一、选题的背景和意义肝脏疾病是世界各国面临的重要公共卫生问题之一,如肝硬化、肝癌等,给人类健康和生命造成了严重威胁。
传统治疗方法在提高生存率和生活质量方面存在局限性,需要寻找一种新的治疗手段。
干细胞治疗作为一种新兴疗法,具有显著的治疗潜力,能够修复受损组织、替代功能丧失细胞,成为治疗肝脏疾病的新选择。
本课题旨在探索肝脏疾病干细胞治疗的前景和应用,为推动临床实践提供理论和实验依据,促进肝脏疾病的治疗进步,提高患者的生存率和生活质量。
二、选题的内容和目标本课题的内容主要包括以下几个方面:1.探究干细胞治疗肝脏疾病的机制:通过对肝脏疾病相关的干细胞进行研究,深入理解干细胞在修复受损肝脏组织中的作用机制,为干细胞治疗的临床应用提供理论基础。
2.建立肝脏疾病干细胞治疗模型:结合肝脏疾病的病理生理特点,构建肝脏疾病动物模型,利用干细胞进行治疗实验,评估干细胞治疗效果,为临床实践提供可靠的依据。
3.开展临床前研究:通过对人体来源的干细胞进行体外培养和鉴定,确保其品质和功能,同时进行干细胞与疾病相关细胞的共培养实验,验证干细胞在肝脏疾病治疗上的潜力。
4.开展临床试验:通过合理的研究设计和伦理程序,在符合安全性、效果显著性和可行性的前提下,开展肝脏疾病干细胞治疗的临床试验,评估其治疗效果和不良反应。
本课题的目标主要包括以下几个方面:1.深入了解肝脏疾病干细胞治疗的机制及其潜在应用。
2.建立肝脏疾病干细胞治疗模型,验证干细胞治疗效果。
3.验证肝脏疾病相关干细胞的有效性和安全性,为临床试验做好准备。
4.开展肝脏疾病干细胞治疗的临床试验,评估其治疗效果和不良反应。
三、选题的研究内容和关键技术路线1.研究内容:(1)干细胞在肝脏疾病修复中的机制研究。
(2)肝脏疾病干细胞治疗模型的建立。
(3)干细胞的体外培养和鉴定。
(4)干细胞与疾病相关细胞的共培养实验。
(5)肝脏疾病干细胞治疗的临床试验。
肝脏生物学的研究现状和应用前景肝脏是人体最重要的代谢器官之一,同时也是人体最大的内分泌器官。
它不仅负责体内代谢和解毒排泄,还维护着体内稳态的平衡,是人体健康的重要保障。
肝脏疾病对人类健康的危害严重,如肝炎、肝硬化、肝癌等都是常见的肝脏疾病。
肝脏生物学的研究能够深入了解肝脏的生理和病理机制,为临床治疗提供有力支持。
一、肝脏生物学的研究现状1.基本研究肝脏的基本研究涉及肝脏的解剖、生理、分子生物学和细胞生物学等学科。
近年来,随着现代生物学和基因组学的进步,许多关于肝脏的前沿研究成果不断涌现,如单细胞转录组测序、肝脏干细胞的性质和分化机制、肝脏发育的分子机制等。
这些研究为肝脏疾病的发病机制提供了新思路和新方法。
2.转化医学研究肝炎、肝纤维化和肝癌等是常见的肝脏疾病,难以治愈且病情常常恶化。
传统的治疗方法难以满足临床需求,因此需要更加深入的转化医学研究,以更好地了解肝病的发病机制和治疗方法。
近年来,肝脏移植、基因治疗、RNA干扰技术、基因编辑技术等新技术的出现,为肝病的治疗提供了新的思路和方法。
3.应用研究肝脏疾病的治疗是现代医学的难点,因此对肝脏的应用研究尤为重要。
通过肝脏生物学的研究,可以为肝病的诊断、治疗和预防提供可靠的理论依据和实验基础。
近年来,例如纳米技术、分子影像学、模拟手术等新技术的发展,使得肝脏病例的诊断、治疗和预防方式更加个性化。
二、肝脏生物学的应用前景1.临床肝脏疾病的诊断通过肝脏的基础研究和应用研究,可以为肝病的诊断提供更加丰富和准确的手段。
特别是分子影像学和分子诊断技术的发展,便携且非侵入性的毒性测试和集成肝外器官治疗等技术,不仅可以早期诊断肝病,还可以对肝病进行更加详细和全面的评估和监测。
2.肝病的治疗目前,肝移植、基因治疗和肝细胞治疗等都是临床上常用的治疗方式,但由于肝病的复杂性和病情的多样化,需要更多的转化医学研究。
例如,基因编辑技术和CRISPR-Cas9等新技术的应用,可以通过精准的基因编辑调控肝细胞的免疫功能,治疗肝病。
干细胞移植治疗肝病研究的进展与实践随着现代医学技术的不断进步,人们的健康问题也得到了越来越好的解决。
其中,干细胞移植治疗肝病成为了一个备受关注的研究领域。
干细胞移植治疗肝病是指将干细胞移植到肝脏中,通过干细胞的自我更新和分化能力,在肝脏重建和修复方面起到作用。
这种治疗方式具有针对性强、效果显著等优点,在临床上得到了广泛的应用。
一、肝病的危害和现状肝病是现代世界公共卫生面临的主要问题之一。
据统计,全球有约2.5亿人患有肝病,每年有100万人死于肝病。
我国因肝病死亡人数更是位居世界第一。
肝脏是人体最重要的除药物外的代谢器官,但是,当肝脏受到严重损伤时,会引发一系列的代谢紊乱和炎症反应,随着疾病的加重,甚至会导致肝功能衰竭和肝癌等疾病的发生。
因此,如何治疗和预防肝病成为了一个急需解决的问题。
二、干细胞移植治疗肝病的原理干细胞移植治疗肝病是指将干细胞注入到肝脏内部或门脉中,使其分化为成熟的肝细胞,从而实现对受损肝脏的修复和重建。
干细胞移植治疗肝病的原理基于干细胞的自我更新和分化能力,并利用干细胞分化成为各种功能性细胞的特点,使其分化为成熟的肝细胞,具有增殖能力和分泌能力,从而对受损的肝脏进行修复和重建。
三、干细胞移植治疗肝病的应用干细胞移植治疗肝病自问世以来,受到了广泛的应用。
国外学者对该技术进行了很多的临床试验,发现干细胞移植治疗肝病的效果显著。
同时,我国也对干细胞移植治疗肝病进行了一些探索性的研究,初步证实了该技术的有效性。
干细胞治疗的主要方式有3种:1.造血干细胞移植通过骨髓或外周血中提取干细胞,然后经过处理后移植到患者体内进行治疗。
2.肝脏再生运用人体干细胞移植技术,利用干细胞潜在分化为肝细胞的特性,让干细胞分化为肝细胞,并再生患者受损的肝脏组织。
3.肝炎病毒基因治疗运用肝炎病毒基因治疗的方法,使肝细胞重新表达被病毒所抑制的基因,从而使得肝脏得到修复。
四、干细胞移植治疗肝病的前景干细胞移植治疗肝病是一种治疗效果显著的技术,具有很好的应用前景。
肝脏再生的干细胞治疗研究课题申报书一、研究背景和意义肝脏是人体最重要的器官之一,具有重要的代谢和解毒功能。
然而,肝脏疾病在全球范围内占据了主导地位,给健康和社会经济带来了巨大负担。
面对日益增长的肝脏病患者,传统的治疗方法如肝移植、药物治疗等仍然存在一些局限性。
因此,寻找更有效、安全且可行的治疗方法成为迫切需要解决的问题。
干细胞治疗作为一种新兴的治疗方式,已经取得了一些令人鼓舞的成果。
干细胞可以自我更新并具有分化为多种细胞类型的潜能,因此成为肝脏再生治疗的理想选择。
通过干细胞植入,可以促进肝脏组织的再生和修复,从而实现肝脏疾病的治疗。
本课题旨在研究肝脏再生的干细胞治疗方法,通过临床实验和基础研究相结合,探索干细胞治疗肝脏疾病的实际应用价值和机制,为临床肝脏病患者提供更有效的治疗手段。
二、研究计划1. 干细胞的来源和分离方法本研究计划将以多种方式获得干细胞,包括胎盘干细胞、间充质干细胞和诱导多能干细胞。
通过不同的分离方法,筛选和纯化出高质量的干细胞。
2. 干细胞治疗肝脏再生的机制通过合理设计的实验方法,研究干细胞治疗肝脏再生的机制。
包括通过转录组、蛋白质组和代谢组学等手段,分析干细胞在肝脏再生过程中的信号通路、基因表达和代谢变化。
同时,观察干细胞植入后的生存状态,为进一步优化治疗方案提供理论依据。
3. 干细胞治疗的安全性和效果评估通过动物实验验证干细胞治疗的安全性和效果。
在动物模型中,观察干细胞植入后的生存状态、肝脏组织修复程度和功能恢复情况,评估干细胞治疗的潜力和应用前景。
4. 临床试验的设计和实施制定合理的临床试验方案,设计适当的观察指标和评价体系。
招募符合条件的肝脏病患者,分组进行干细胞治疗和对照组治疗,同时进行长期随访和疗效评估。
5. 伦理和安全保障本课题研究涉及到人体试验和相关临床治疗,必须严格遵循伦理规范和相关法律法规。
确保研究的伦理合规性和安全性。
三、预期成果1. 肝脏再生干细胞治疗的安全性和有效性验证。
干细胞治疗在肝病中的应用研究近年来,随着干细胞技术的不断发展和完善,干细胞治疗逐渐成为医学领域研究的热点之一。
干细胞治疗在肝病治疗上的应用也愈发得到重视,以期为广大肝病患者带来新的希望。
干细胞是一种能够自我复制和分化为不同类型细胞的原始细胞,是治疗肝病的有力工具。
当前,干细胞治疗肝病已经成为国内外学者的研究热点。
从干细胞类型来看,包括胚胎干细胞、诱导多能干细胞以及体细胞干细胞等。
其中,体细胞干细胞作为一种潜在的干细胞来源,因具有来源广泛、来源便捷、存储简单、生物安全性高等优点而受到广泛的关注。
目前,干细胞治疗在肝病的应用主要包括两个方面:一是通过干细胞移植治疗肝病,二是利用干细胞进行肝细胞修复和再生。
干细胞移植治疗肝病主要是通过将干细胞移植到患者体内,分化为肝细胞进行修复和再生。
干细胞移植的技术路线主要有以下几种:一是干细胞移植后分化为肝细胞进行修复;二是干细胞通过分泌生长因子等细胞因子,刺激肝细胞增殖和分化;三是利用干细胞修复和再生肝的微环境,促进肝再生。
在临床应用方面,干细胞移植治疗肝病主要应用于急性和慢性肝病、肝癌等方面。
干细胞移植疗法可以有效地减轻肝脏的负担,避免肝细胞坏死和功能衰竭,同时防止肝病继发性疾病的发生和转移。
值得一提的是,目前体细胞干细胞的研究重点已经从移植治疗向肝细胞修复和再生方向转化。
干细胞具有分化成为肝细胞的能力,可以作为肝细胞修复和再生的有效工具。
在干细胞修复肝细胞的研究中,当前主要有以下几种技术路线:一是在体外催化体细胞成为干细胞,进而分化为肝细胞进行肝细胞修复;二是利用干细胞通过分泌生长因子等细胞因子,促进肝细胞增殖和分化;三是干细胞移植到肝脏中进行修复。
这些技术路线将为干细胞修复肝细胞和再生肝的研究提供技术支撑和理论基础。
近年来,国内外学者对于干细胞治疗肝病进行了深入的研究和探索,取得了如下研究成果:一是针对干细胞移植治疗肝病方面,利用多种来源的干细胞在动物模型中进行了移植治疗,取得了一定的临床疗效;二是针对干细胞修复肝细胞和再生肝方面,通过体细胞重编程以及重建肝脏微环境等技术路线,取得了一系列优秀的研究成果,未来具有广泛的应用前景。
基因编辑技术和干细胞在肝病治疗中的应用肝病是指肝脏出现了各种不同的疾病,严重的肝病甚至可以威胁到人类的健康与生命安全。
幸运的是,现代医学的发展让人们对于肝病的治疗拥有了更多的选择。
在这些选择中,基因编辑技术和干细胞在肝病治疗领域中的应用成为了热门的话题。
那么,这两种技术到底有着怎样的应用前景和挑战呢?下面就让我们来进一步了解。
一、基因编辑技术在肝病治疗中的应用在肝病领域,基因编辑技术最常用的方式是利用CRISPR/Cas9系统可精准编辑人类基因组的特性,设计、构建和验证关键基因编辑工具。
这项技术可以在干细胞或成体细胞中重构DNA序列,实现一些想像不到的目标。
在治疗肝病的应用上,基因编辑技术可以实现以下几点:1、通过基因编辑调控在肝脏中表达的基因,来有效地治疗一些与肝病有关的基因突变。
比如,人们已经针对一些肝癌细胞中的基因进行了编辑,从而扩大了肝癌治疗的选择范围。
2、对于一些肝病患者,肝细胞的基因结构可能存在错误,导致病人无法正常代谢脂肪,从而出现肝硬化等过度脂肪代谢的问题。
而基因编辑技术可以通过对这些基因进行编辑来纠正患者肝细胞的结构。
相较于传统疗法,基因编辑方法不仅更加优秀,而且有着更好的疗效和安全性,进而扩大了治疗肝病的选择空间。
3、基因编辑技术也可以帮助人们大量生产肝细胞来治疗患病肝脏。
通过对肝细胞进行基因编辑,生产出大量可以用于治疗肝病的肝细胞,从而降低肝病治疗的成本,并且提高治疗效果和利用MAS6371等基因编辑技术治疗肝硬化的成功率。
二、干细胞在肝病治疗中的应用干细胞治疗是一种有效的治疗方法,在研究上表现出巨大钱潜力,这已经成为一个致力于找到治疗肝病新方法的主流研究方向之一。
在这方面,肝组织的干细胞研究是一个热点。
干细胞来源可以自体或异体,包括脐带干细胞、胚胎干细胞、成人间充质干细胞等,它们都有不同的优点和技术难关,而且也都有着广泛的临床应用。
1、自体肝细胞移植从肝组织积累的自体干细胞可以产生肝细胞,并抑制炎症反应等症状。
肝脏细胞生物学研究及应用前景肝脏作为重要的身体器官之一,是人体内一个极为复杂的化学反应系统。
在这个系统中,肝脏细胞的生物学功能起到了至关重要的作用。
肝脏细胞生物学研究是对人体健康的保障和治疗方法的研发提供了有力支持。
本文将对肝脏细胞生物学研究的重要性、目前研究的进展以及未来的发展方向进行探讨。
一、肝脏细胞生物学研究的重要性肝脏是人体重要的代谢器官之一,维持着身体代谢平衡。
肝脏细胞生物学研究的重要性在于,肝脏细胞的生物学和生理学作用决定了肝脏对其他器官和整个人体的影响。
由于肝脏细胞为身体内代谢反应的中心,无论是生化反应、分解分子、生成分子、氧化分解分子,还是对毒物的代谢,肝脏细胞都可以发挥重要的作用。
因此,对肝脏细胞的研究至关重要。
在医学研究中,许多药物在肝脏中都有代谢或毒性。
其中,长期或大剂量使用的药物往往会对肝脏产生不同程度的损伤。
肝脏细胞的生物学研究有助于研究人体在吸入某些东西或摄入某些药物时肝脏的反应,为医药产业的研发和临床应用提供基础数据。
另外,肝癌、肝炎等肝脏疾病在全球居高不下,对肝脏生物学的研究能帮助改善这些疾病的治疗策略并提高治愈率。
二、肝脏细胞生物学研究的进展肝细胞是肝脏的主要细胞类型,其代谢功能使其成为发挥体内能量代谢、毒物转化和激素转化最重要的器官之一。
由于肝细胞数量少,分离困难,为了方便研究,研究人员通常将肝细胞系或转化的肝细胞作为研究对象,以代替原先的肝脏细胞。
目前,肝脏细胞生物学研究进展迅速。
研究成果不仅为肝脏疾病治疗带来新希望,而且为药物研发提供了重要的基础资料。
肝细胞细胞学、信号选择性通路、miRNA、肝纤维化等领域的研究得到了极大的发展。
肝细胞细胞学研究的主要目标是探究肝细胞的形态学特征、功能、超微结构、蛋白质、基因及其调节机制等方面,已在传染性疾病、毒性药物和人免疫缺陷病毒感染方面取得了较大的进展和丰硕的成果。
信号通路消耗是肝细胞功能的重要反应,对该领域的研究致力于寻找新的信号转导路线,疾病的发生与发展与某些相关信号转导机制的失衡密切相关。
肝干细胞的研究状况及其在肝病方面的运用前景摘要阐述肝干细胞的特性、起源、分化和发育的特点,以及肝干细胞在治疗肝病方面可能发挥的作用。
方法采用中外文献综述方式。
结果肝干细胞是具有双分化潜能的细胞,它可源于卵圆细胞、胎肝前体细胞、骨髓造血干细胞以及胰腺前体细胞。
肝干细胞可通过流式细胞仪分离,可在特殊的培养条件下长期培养。
肝干细胞在肝细胞移植、体外人工肝、基因治疗方面有着广阔的前景,它给众多的肝病患者带来了新的希望。
关键词:肝干细胞分化培养近年来有关干细胞的研究是国内外研究热点之一,干细胞在医学领域的应用前途也极为广阔。
肝干细胞属于前体细胞,是存在于成熟肝组织中的分化细胞,不能自我修复,不具有分化能力。
肝干细胞在肝细胞移植、体外人工肝、基因治疗方面有着巨大的潜力,对于了解肝细胞的发育及肝癌、肝硬化等疾病的发生机制都有重要帮助。
我国是“肝炎大国”,是各型发病率较高的国家,多种病毒性肝炎及相关肝病严重危害着我国人民的身体健康。
因此可以说,目前有关于肝干细胞在基础与临床方面新的科学研究进展给以上疾病患者带来了新的希望。
1、肝干细胞的特性及起源一般认为,干细胞就是那些具有无限或有限但可被延长自我修复能力的细胞,它们可形成两种或两种以上高分化的后代。
千细胞是具有多分化潜能的细胞,按其来源一般可分为成体干细胞和胎干细胞。
肝干细胞是具有双分化潜能的细胞,可向肝细胞和胆管上皮细胞分化发育。
胚胎期肝干细胞来源于肝始基,成年期肝干细胞可能来源于管细胞和骨髓造血干细胞。
1.1、成体肝干细胞成体肝细胞正常情况处于静止期,增生分裂非常缓慢。
当肝脏部分切除或药物损伤肝脏后,肝细胞开始活化增生。
如果肝严重受损或肝细胞增生受到抑制时,肝干细胞开始活化,这就是一般所说的卵圆细胞或前体细胞这些细胞具有克隆形成能力和双分化能力,可分化为肝上皮细胞和胆管上皮细胞。
通常状况下,成体肝干细胞的数量非常少,细胞的直径约10~12mm,核成卵圆形,核浆比例高。
在实验中一般都采用肝细胞大量丢失的方法,导致肝细胞生长反馈信息缺失,促使卵圆细胞的快速生长。
一般来说,卵圆细胞是先变为嗜碱性肝细胞再分化为成熟肝细胞,它的来源是由胆管周围逐渐迁入肝实质。
1.2、胚胎肝干细胞由于成体肝干细胞含量非常少,人们开始关注胚胎干细胞,大部分实验研究基于鼠的胚胎肝。
在鼠的胚肝中,卵圆细胞含量相对较高,大约2%~5%。
肝脏源于肝始基(hepatoblast),在鼠的胚肝形成早期,大鼠胚龄9.5~15天(小鼠胚龄8.5~15天间),肝脏细胞形态均一,核浆少,此间的肝细胞大部分被认为有双向分化能力。
jaswinderpal等将从fischer344大鼠肝脏中分离出的胎肝上皮经门静脉输入二肤酶IV(DPP IV),阴性fischer344大鼠肝脏(受体鼠肝脏2/3肝切除术,然后用“restrosine”处理)移植一个月后检测,发现DPP IV(+)细胞延长伸入肝实质内,表现为肝细胞和胆管细胞显型,形成新的肝板和胆管样结构。
现在许多类似的实验都支持这一观点。
1.3、肝干细胞的分离与培养肝干细胞的分离与培养是进行体外研究的关键,同时也为肝干细胞的临床应用奠定了基础。
目前对于肝干细胞的分离多采用荧光激活细胞筛选法(FACS) ,利用流式技术结合免疫荧光标记单克隆技术来分离,这种方法分离效率和细胞纯度较高,但需要较高特异性的细胞膜表面标志。
体外培养和体内移植实验证实,在小鼠胎肝中可分离出具有肝干细胞特征的细胞。
monga等运用微切割技术分离肝干细胞,用含有肝细胞生长因子(HGF)、flt-3因子、干细胞(SCF)因子的培养液进行干细胞培养,并可获得生长良好的肝前体细胞。
1.4、肝干细胞的起源目前多数学者认为,在胚胎发育过程中,一些原始的多能干细胞始终保持着未分化状态,滞留在机体组织内。
肝干细胞作为一种定向双能干细胞,可能是多起源的。
造血干细胞是可以分化为所有成熟血细胞系的多潜能细胞,虽然这些血细胞系来源于中胚层,最近的资料显示,这些造血干细胞可以分化为不同的内胚层系,如肝细胞。
采用流式细胞术的方法从脊髓血中纯化出的CD34(+)Lin(+)造血前体细胞可以表达变异型AFPcDNA序列。
这些变异型类型可以在造血细胞K562系出现之外,还可以在正常的骨髓、胸腺和脑中找到,但在正常的脾、肠、肝或肝肿瘤细胞系却HePG2找不到。
啮齿类动物实验资料显示,人类骨髓细胞能够分化为肝细胞和胆管细胞。
人们己经通过异性骨髓移植的方法证实卵圆细胞可以来自肝外。
2000年Alison MR等将一个男性患者的骨髓移植入女性患者体内,结果在受体肝细胞中检测到了Y染色体,不过转化细胞的数量较少,这说明骨髓移植后,受者肝细胞可能表达供者造血系的基因阎。
另外,Zuleuski H 等从胰腺分离的胰岛前体细胞在特殊的培养条件下进行体外培养也获得了肝上皮细胞阎。
现在认为肝干细胞的候选者有卵圆细胞、胎肝前提细胞、骨髓造血干细胞、胰腺前体细胞等洲。
研究显示,卵圃细胞和造血干细胞有许多共同的表面标志。
己经有实验证明,将小鼠骨髓移植入没有明显损伤的肝脏,发现一些细胞表达移植细胞的标志。
2、肝干细胞的分化和发育目前肝干细胞的发育机制还不十分清楚,经典的理论认为肝脏起源于肝始基,不久又分化为头、尾两部。
在胚胎合成的晚期,肝干细胞分化为小细胞,小细胞分化为成熟细胞。
体外培养实验证明,肝非实质细胞贴近小细胞时,小细胞增长的速度迅速减慢。
在细胞外基质的刺激下,小细胞开始成熟,胞质增多,富含线立体、粗面内质网、过氧化体、糖原等,一些细胞开始出现双核。
随后,肝板样结构形成,细胞间开始形成胆小管。
随着肝脏非实质细胞的侵入,分泌细胞外基质形成窦间隙,肝细胞逐渐成熟,肝板的厚度逐渐变薄。
成年以后,大部分死亡肝细胞被临近的肝细胞分裂增生补充。
肝脏严重受损时,包括由于药物、毒素、病毒引起的肝硬化和较大面积的肝坏死,肝干细胞开始激活并向肝细胞分化。
同时,循环血中或肝内滞留的骨髓造血干细胞补充一部分Hering管内的死亡细胞侧网。
现在普遍认为肝干细胞的分裂增生是不对称的,子代的两个细胞中,一个分化为组织细胞,参与组织损伤修复,正常肝脏干细胞不分裂增生,另一个保持干细胞的特性,在门静脉的周围存在少量处于静止期的卵圆细胞,卵圆细胞是干细胞的前体细胞。
干细胞被激活后,必须在适宜的微环境中才能分化成熟。
研究者发现,分离出的肝前体细胞在移植前必须经过retrosine处理后,才能分化为肝细胞和胆管细胞造血干细胞也只能在肝脏分化为肝细胞和胆管细胞。
肝干细胞的分化和发育是一个复杂的过程,其确切的机制还不十分清楚。
我们己经知道在体外培养的条件下,胚胎肝干细胞在没有任何生长因子的培养基中可以自主生长,地塞米松、转化生长因子是胆管上皮细胞分化形成的促进因子。
最近,人们从细胞系HUH-7分离出肝细胞瘤源性生长因子,这种来源于肝细胞瘤的细胞可以在无血清的培养基中自主生长。
此外,生长因子、白介素、整合素对于调控肝干细胞分化的不同阶段都有重要作用。
随着基因芯片技术的日益成熟,人们可以进一步确定在肝细胞的不同分化阶段中,各种细胞因子的不同含量。
3、肝干细胞在肝病方面的应用肝干细胞的研究在基础与临床方面都有广泛的应用前景。
3.1、肝干细胞在基础研究方面的应用体外培养实验间接模拟了肝细胞的成熟过程,一方面,肝干细胞的分化和发育研究有助于阐明肝脏的发生、发展、成熟的发育规律,以及一些疾病如肝纤维化的发生机制另一方面,干细胞的异常增生分裂与肿瘤的发生密切相关,研究人员Libbrecht L等在肝细胞腺瘤中,用免疫组化的方法发现了介于肝原始细胞和正常肝细胞的中间细胞。
肝原始细胞和这些类似肝细胞的中间细胞分布在整个肿瘤中,不同的部位分布密度不同。
Vessy Cj等采用富含乙基硫氨酸、无胆碱的饮食喂养一种P53缺失的小鼠,这种方法建立的模型小鼠体内卵圆细胞数量会大大提高。
将卵圆细胞注射到无胸腺的裸鼠体内,可以看到这些细胞系可以形成类似肝肿瘤的结构,采用的检测手段包括,分析Northern blotting基因表达和免疫组化检测卵圆细胞白蛋白、转铁蛋白的表达,以及卵圆细胞的标记AFP、M(2)-丙酮酸激酶和A6等,这一实验证实卵圆细胞直接参与肝肿瘤的生成团。
现在多数学者认为肝干细胞可能与结节性发育不良、肝细胞癌和胆管细胞癌的发生有关系,但由于没有直接的证据,目前存在着较大的争议。
因此研究干细胞的增生和分化规律,有助于阐明肿瘤的发生机制。
3.2、肝干细胞在药物或化学物质评估方面的应用目前新药的药理、药效及药物代谢方面的研究所用的细胞系多来源于肿瘤细胞系或其它种属,干细胞的研究进展使得我们还可选用鼠胚胎来进行药物的敏感性、光毒性和胚胎毒性实验。
具体方法包括,鼠的全胚胎培养,鼠枝芽微细胞团实验、鼠胚胎干细胞实验等。
人胚胎干细胞系的建立除了可以从细胞水平来研究人对药物的反应,还可对化学物质的毒性和效能进行评估,对农业、化肥工业等领域的发展也有重要意义。
3.3、肝干细胞在临床研究方面的应用利用胚胎干细胞(Escell)进行基因介入治疗对于遗传性肝脏代谢障碍疾病,可以通过转基因技术将缺陷基因导入干细胞,筛选出阳性细胞后移植入患者肝脏,纠正肝脏代谢紊乱。
胚胎干细胞在人工肝、肝移植方面的应用体外培养的干细胞为人工肝和肝自体移植提供了细胞来源,临床上可用于治疗肝衰竭、肝坏死等严重肝脏疾病。
目前,限制肝干细胞研究的瓶颈主要是肝干细胞的分离和鉴定方面的困难。
如何克服这些困难,深入开展干细胞的研究,为广大肝病患者提供更加切实有效的治疗手段,已经日益成为科研和医务工作者的关注热点。