生化实验复习题及答案

1 . 第一章 提取与分离技术

一、名词解释

1、机械破碎法

2、物理破碎法

3、温度差破碎法

4、压力差破碎法

5、超声波破碎法

6、渗透压变化法

7、化学破碎法

8、酶促（学）破碎法

9、自溶法

10、抽提

11、盐溶

12、盐析

13、沉淀分离法

14、分段盐析

15、KS分段盐析

16、β分段盐析

17、等电点沉淀法

18、有机溶剂沉淀法

19、复合沉淀法

20、金属盐沉淀法

21、选择性变性沉淀法

二、填空题

1、细胞破碎的方法有 、 和 。

2、机械破碎法按照使用机械的不同可分为 、 和 。

3、常用的物理破碎法有 、 和 等。

4、常用的压力差破碎法有 、 和 等。

5、化学破碎法采用的表面活性剂有 和 两种。其中之一按其带电荷性质又可分为 和

两种。

6、根据抽提时所采用的溶剂或溶液的不同。抽提的方法主要有 、 、 和 等

7、常用的沉淀分析法有 、 、 、 、 和 等。

8、常用的金属盐沉淀法有 和 。

9、蛋白质盐析时，带入大量盐离子杂质，可采用 、 和 方法脱盐。

10、要分离和提纯核酸过程中，常用 来沉淀DNA和RNA。

11、常用的使蛋白质沉淀的方法有 、 、 、 和 等。

12、

三、是非题（对的打√、错的打×）

1、渗透压变化法可用于革兰氏阳性菌的破碎。（ ）

2、有机溶剂破碎细胞主要是使细胞膜磷脂结构破坏，从而使细胞膜的透过性增强。（ ）

生化及分子生物学复习资料（15天30题）

一、蛋白质结构与功能

本章重点：

1、氨基酸的结构及通式、名称、分类；

2、蛋白质的各级结构特点及功能特点；

3、蛋白质的理化性质，如光学性质、胶体性质（稳定因素）、变性、复性；

习题：1、生物的不同层次结构？

答：环境小分子——小分子前体——大分子——大分子复合物——超分子结构——细胞器——细胞——组织——器官——生物机体

2、α-螺旋的结构特点

多肽链的主链原子沿一中心轴盘绕所形成的有规律的螺旋构象。 α-螺旋是蛋白质中最常见、最多的二级结构元件。其结构特征为：

（1）几乎都是右手螺旋；

（2）螺旋每圈包含3.6个氨基酸残基， 每一个氨基酸沿轴旋转100度，螺距为0.54nm；

（3）螺旋以链内氢键维系。

3、变性蛋白质的性质改变

①结晶及生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。

②硫水侧链基团外露。

③理化性质改变，溶解度降低、沉淀，粘度增加，分子伸展。

④生理化学性质改变。分子结构伸展松散，易被蛋白酶水解。

4、生鸡蛋和熟鸡蛋哪个更有营养？

答：（1）熟鸡蛋比生鸡蛋更有营养；（2）熟鸡蛋已经发生蛋白质变性，容易被蛋白酶水解，便于消化吸收；（3）熟鸡蛋中的病原微生物因蛋白质热变性而死亡，食用更安全；（4）生鸡蛋清内的抗生物素蛋白会与生物素结合生成一种稳定的化合物，使生物素不能被肠壁吸收。

蛋白质一、二、三、四级结构；β-折叠、α-螺旋

二、核酸结构与功能

本章重点：

1、核酸的功能，是遗传物质（肺炎球菌转化实验）；

2、核酸的结构特点，B型DNA双螺旋结构特点；

3、核酸的理化性质，变性、复性；

4、核酸的测序方法及原理。

习题：1、B型双螺旋DNA的结构特点？

（1） 两条反向平行的多核苷酸链围绕一个“中心轴”形成右手双螺旋结构，螺旋表面有一条大沟和小沟；

（2）磷酸和脱氧核糖在外侧，通过3’，5 ’ －磷酸二酯键相连形成DNA的骨架，与中心轴平行。碱基位于内侧，与中心轴垂直；

一、判断题

（ ）1. 嘌呤核苷酸的合成顺序是，首先合成次黄嘌呤核苷酸，再进一步转化为腺嘌呤核苷酸和鸟嘌呤核苷酸。

（ ）2. 嘧啶核苷酸的合成伴随着脱氢和脱羧反应。

（ ）3. 脱氧核糖核苷酸的合成是在核糖核苷三磷酸水平上完成的。

（ ）4. 核苷酸酶是一类特异性的磷酸单酯酶。

（ ）5. 黄素酶的辅酶均含有腺苷酸成分。

（ ）6. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤，也可以是次黄嘌呤。

（ ）7. 使用谷氨酰胺类似物作为抗代谢物，不能阻断UMP生成dTMP的代谢。

（ ）8. 嘧啶核苷酸环的组成原子来自Asp和氨。

（ ）9. 嘧啶环的4、5、6号原子来自甘氨酸。

（ ）10. 体内降解产生β-氨基酸的是嘌呤碱基。

（ ）11. 核苷磷酸化酶能分解核苷生成碱基和戊糖。

（ ）12. 痛风症是由于体内尿素合成过多或降解受阻所致。

（ ）13. Lesch-Nyhan综合症（自毁容貌症）是由于缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶，导致体内尿酸堆积所致。

（ ）14. 乳清酸是合成嘌呤核苷酸的中间产物。

（ ）15. CoA中含有泛酸和鸟嘌呤核苷酸。 二、单选题

1．嘌呤核苷酸从头合成时首先生成的是：

A．GMP B．AMP C．IMP D．ATP E．GTP

2．人体内嘌呤核苷酸分解的终产物是：

A．尿素 B．肌酸 C．肌酸酐 D．尿酸 E．β丙氨酸

3．下列化合物合成时不需要S-腺苷甲硫氨酸提供甲基的是：

A．磷酸肌酸 B．肾上腺素 C．褪黑激素 D．卵磷脂 E．胸腺嘧啶

4．体内脱氧核苷酸是由下列哪种物质直接还原而成

A．核糖 B．核糖核苷 C．一磷酸核苷 D．二磷酸核苷 E．三磷酸核苷

5．HGPRT（次黄嘌呤-鸟嘌磷酸核糖转移酶）参与下列哪种反应：

A．嘌呤核苷酸从头合成 B．嘧啶核苷酸从头合成 C．嘌呤核苷酸补救合成

名词解释：

1. 蛋白质的变性作用：在某些物理和化学因素作用下，蛋白质特定的空间构象被破坏，即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失，。

2. 增色效应：在DNA变性解链过程中，由于碱基之中的共轭双键被暴露出来，使DNA在260nm处的吸光值增加，称为增色效应。

3. 糖的有氧氧化：体内组织在有氧条件下，葡萄糖车体氧化分解成CO₂、H2O并释放大量能量的过程。

4. 胆汁酸的肠肝循环：在肠道中重吸收的胆汁酸，经过门静脉重新入肝脏。肝脏再把游离胆汁酸转变成结合胆汁酸，与重吸收的结合胆汁酸一起重新随胆汁排入肠腔，此过程称为胆汁酸的肠肝循环 。

5. 氮平衡：指正常人摄入氮等与排出氮，反映正常人的蛋白质代谢情况。

6. 酶的活性中心：酶分子中由必需基团相互靠近形成的直接和底物结合并和酶的催化作用直接相关的部位。

7. DNA的变性作用：某些理化因素（PH、温度、离子强度等）会导致DNA双键互补碱基对之间的氢键发生断裂，使双链DNA解离为单键。

8. 糖异生：从非糖化合物转变为葡萄糖或糖原的过程。

9. 糖原合成：由单糖合成糖原的过程。

10. 乳酸循环：肌糖原分解产生乳酸，经血液循环运送至肝，经糖异生作用转变成为肝糖原或葡萄糖，葡萄糖释放入血后又被肌肉组织摄取用以合成肌糖原，此过程称为乳酸循环。

11. 生物转化：非营养物质经过氧化、还原、水解和结合反应，使其极性增加或活性改变，而易于排出体外的过程。

简答

1. 利用超速离心法，可将血浆脂蛋白分为哪四类？请写出这四类血浆脂蛋白的生理功能。

答：可分为：

(1) 乳糜微粒（CM）：为运输外源性甘油三酯和胆固醇脂至骨骼肌、心肌、脂肪等组织，运输外源性胆固醇至肝。

(2) 极低密度脂蛋白（VLDL）：主要由肝细胞合成，是运输内源性甘油三酯的主要形式。

(3) 低密度脂蛋白（LDL）：主要由人血浆转变而来，是转运肝合成的内源性胆固醇的主要形式。