观察动物细胞PPT012

０　

观察动物细胞与植物细胞实验教学与反思　

金华市青看中学（３２１０００）　滕晨　

在这一实验的准备过程中，我按照初一科学实验活动册　

的要求，准备好实验药品、仪器，买好新鲜的洋葱，牙签和　

卷纸，先配好０．０１％亚甲基蓝溶液和０．９％的生理盐水、红墨　

水，分别倒入到４８个细口试剂瓶中，贴上标签。为了维持日　

腔上皮细胞的正常形态，便于观察，必须首先滴一滴生理盐　

水。而亚甲基蓝是给人体口腔上皮细胞染色用的，在实际的　实验操作过程中，往往有些学生就疏忽了这一点导致实验的　

失败，原因是忘记在观察动物细胞之前要滴一滴生理盐水或　

在观察洋葱表皮细胞时滴一滴清水。除了准备好以上的实验　

仪器之外，还有要用到显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴　

管、刀片、洋葱表皮永久装片、烧杯、清水。　

在这个实验中，一般老师都会先复习一下显微镜的结构　

及功能、显微镜的操作步骤，即安放、对光、放片、调焦和　观察。有些学生在不熟悉操作的情况下，在对光这一环节就　

会出现问题，如在对光时不使用大光圈或显微镜的反光镜不　

对准光源，不清楚在光线亮时要使用平面镜，而光线暗时使　

用凹面镜，这个时候，学生便开始手忙脚乱了，然后问老师　

为什么没看到一个清晰明亮的视野，我一一指出问题的所在　

并回答。在放片这一环节，也有一部分同学不知道要把载玻　

片放在压片夹下先固定好然后再观察，这些都是容易出错的　

操作。在用低倍镜转换成高倍镜时，有些学生不清楚应该这　时应使用细准焦螺旋而不是粗准焦螺旋，否则就看不到物像　

了。在观察时，很多学生会忘记画出观察到的物像。边观察　

边记录有助于提高学生的实验效率。下面我就将两个实验的　

步骤简单地介绍一下。　

一、观察洋葱表皮细胞的实验步骤　

１．用干净的纱布将载玻片擦拭干净，在干净的载玻片上　

滴一滴清水。这一步骤是成功实验的开头，而事实上往往一　部分学生是很容易遗忘的。所以当实验失败时，纠其原因，　

才发现自己在一开始就忘记在载玻片上滴一滴清水。清水可　

山西农业科学 2023，51（11）：1252-1259Journal of Shanxi Agricultural Sciences

NF-κB和Nrf2信号通路在成肌细胞抗氧化应激中的作用

李君 1，王鹤洁 1，安洁 2，李俊玲 1，窦敏敏 1，翟竹汇 1，

何浪 1，李振月 1，秦健 1，2，3，杜荣 1

（1.山西农业大学 动物医学学院，山西 太谷 030801；2.山西农业大学 生命科学学院，山西 太谷 030801；3.山西农业大学 实验教学中心，山西 太谷 030801）

摘要：成肌分化是动物肌肉发育的关键环节，与其健康和生产性能密切相关。为研究成肌细胞抗氧化应激的机制，试验分离了绵羊胎儿成肌细胞，利用地塞米松处理分化中的成肌细胞建立氧化应激模型；试验分为4组，包括正常分化48 h组（N 48 h）、地塞米松处理分化48 h组（Dex 48 h）、正常分化72 h组（N 72 h）、地塞米松处理分化72 h组（Dex 72 h），通过倒置显微镜观察各组细胞的形态变化，利用ROS检测试剂盒检测ROS含量，用RNA-seq检测NF-κB和Nrf2信号通路相关基因mRNA的表达情况，并采用皮尔森相关系数法分析相关性，用STRING数据库分析蛋白的互作关系。结果表明，地塞米松诱导的氧化应激对成肌分化具有明显的抑制作用，且抑制作用随处理时间的延长而增加；ROS含量较各自对照组均显著增加，且随着处理时间的延长而增加。由RNA-seq分析结果可知，与对照组相比，地塞米松处理组NF-κB和Nrf2信号通路被激活，上游基因P65、IKK2、IκBα、IκBβ、Nrf2、Keap1以及相应下游靶基因SOD1、SOD2、FHC、HO-1、GSH-Px的mRNA相对表达量均显著升高，各基因之间存在不同程度的相关性以及错综复杂的蛋白互作关系，其中Keap1基因是联系2条通路的重要枢纽。综上所述，在成肌细胞分化过程中，NF-κB和Nrf2信号通路交互联系，共同在地塞米松诱导的成肌细胞氧化应激中发挥抗氧化作用。关键词：绵羊；成肌细胞；成肌分化；RNA-seq；氧化应激；NF-κB通路；Nrf2通路中图分类号：Q27 文献标识码：A 文章编号：1002‒2481（2023）11‒1252‒08

纳雍县中小学教学仪器借（领）用登记表

新房

中（小）学

科目 生物 任课教师 朱宏俊 班级 七（1）

实验题目 探究温度对霉菌生活的影响 分组 √

演示

所

借

仪

器

或

药

品

名 称 单 位 数 量 备 注

馒头或其他食品 个 14

塑料袋 个 14

归还后实验室管理员签字：_____________ 借用人：__________

年 月 日

纳雍县中小学教学仪器借（领）用登记表

新房

中（小）学

科目 生物 任课教师 朱宏俊 班级 七（1）

实验题目 练习使用显微镜 分组 √

演示

所

借

仪

器

或

药

品

名 称 单 位 数 量 备 注

显微镜 台 14

写有“e”字的玻片 片 14

擦镜纸 张 14

纱布 张 14

归还后实验室管理员签字：_____________ 借用人：__________

年 月 日

纳雍县中小学教学仪器借（领）用登记表

新房

中（小）学

科目 生物 任课教师 朱宏俊 班级 七（1）

实验题目 观察人和动物的细胞结构 分组 √

演示

所

借

仪

器

或

药

品

名 称 单 位 数 量 备 注

显微镜 台 14

载玻片 片 14

生理盐水 ml 10 0.9%

碘液 ml 10

镊子 把 14

滴管 只 14

消毒牙签 只 30

纱布 张 14

吸水纸 张 14

永久玻片 片 若干 其他动物细胞的

盖玻片 片 14

归还后实验室管理员签字：_____________ 借用人：__________

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

细胞生物学实验报告

动物细胞融合

【实验目的】

⒈了解动物细胞融合的常用方法。⒉学习化学融合的基本操作过程。

⒊观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化。

【实验原理】

细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括病毒诱导融合、化学诱导融合和电激诱导融合。

⒈病毒诱导融合

仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。这类病毒的被膜中含有融合蛋白，可介导病毒和宿主细胞融合，同时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。

⒉化学诱导融合

很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。PEG是被广泛使用的化学融合剂。

⒊电激诱导融合 包括电诱导、激光诱导等。其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。

【实验用品】

⒈材料

鸡血红细胞。⒉试剂

50%PEG、Hank’s溶液(pH7.4)、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。⒊器材

正置显微镜、离心机、离心管、载玻片、盖玻片、滴管、注射器等。

【实验步骤】

⒈鸡血红细胞的制备和保存

用无菌注射器先吸入Alsevers溶液1ml，再从鸡翼下静脉取血0.5~1ml，取出后放入刻度离心管中，再加入2~3mlAlsevers溶液，使总量为4~5ml，混匀并封口，置于4℃冰箱内。