食品沙门氏菌测试方法标准
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《农产品/食品质量安全检测技术》课程-微测试一、单选题1、在做沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒试验时,挑取新鲜培养的适量单菌落接至适量无菌水中,与试剂盒中的标准比浊管进行比对,制成浓度为()菌悬液。
A、0.5麦氏B、0.6麦氏C、0.4麦氏D、0.8麦氏参考答案:A难度:低2、在做沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒试验时,最好从()平板上挑取纯化的可疑菌落进行试验。
A.营养琼脂B.BSC.XLDD.HE参考答案:A难度:低3、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒试验时,接种菌悬液分别至试剂盒的9个圆孔中,每孔接种量为();A、0.3mLB、0.2mLC、0.5mLD、0.8mL参考答案:B难度:中二、多选题1、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒一般包括哪几项生化试验试剂?()A、三糖铁B、靛基质C、尿素D、赖氨酸脱羧酶及其对照参考答案:ABCD难度:中三、判断题1、沙门氏菌赖氨酸脱羧酶对照管黄色,试验管紫色为阴性。
参考答案:F难度:中2、沙门氏菌甘露醇黄色为阳性;山梨醇黄色为阴性。
参考答案:F难度:低四、填空题1、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒一般包括、、、、、、、和生化试验试剂。
参考答案:赖氨酸脱羧酶及其对照、氰化钾及其对照、靛基质、尿素、甘露醇、山梨醇、ONPG、三糖铁难度:高2、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒检验时,在、、和实验孔中滴加2滴矿物油覆盖培养基表面,盖上盒盖;参考答案:氨基酸对照、赖氨酸脱羧酶、氰化钾对照、氰化钾难度:中五、问答题1、沙门氏菌干制生化鉴定试剂盒的主要操作步骤有哪些?参考答案:接种:第一步:从铝箔袋中取出试剂盒,打开盒盖;第二步:用接种针从平板上挑取新鲜培养的适量单菌落接至适量无菌水中,与试剂盒中的标准比浊管进行比对,制成0.5麦氏菌悬液,注意菌悬液浓度不宜过大,否则可能产生假阳性结果;第三步:接种菌悬液分别至试剂盒的9个圆孔中,每孔接种量0.2mL;第四步:在氨基酸对照、赖氨酸脱羧酶、氰化钾对照、氰化钾实验孔中滴加2滴矿物油覆盖培养基表面,盖上盒盖;第五步:与三糖铁生化管一同置于36 ℃±1 ℃的恒温恒湿培养箱中培养24 h,其中ONPG 实验培养1~3h观察结果,如为阴性继续培养至24h观察结果;氰化钾实验若24h仍为阴性,可延长培养至48h观察结果;第六步:培养结束后,在靛基质实验孔中滴加2滴靛基质试剂,即刻观察结果。
沙门氏菌基本知识及检测方法沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的致病菌,属于革兰氏阴性杆菌。
它可以引起人体和动物的沙门氏菌食物中毒,病症包括腹泻、发热、呕吐等。
沙门氏菌广泛分布于自然环境和动物体内,可以通过感染食物、水源、环境污染等多种途径传播。
为了保障食品安全,及早发现和控制沙门氏菌污染,需要采用一系列有效的检测方法。
1. 分类:沙门氏菌属于肠杆菌科(Enterobacteriaceae)中的一种细菌。
根据沙门氏菌的表面抗原和酵素特性,可以将其分为超过2500种不同的血清型。
2.形态特征:沙门氏菌是革兰氏阴性杆菌,菌体呈杆状,大小约为0.7-1.5微米。
在染色过程中,菌体呈现出粗糙的外表。
沙门氏菌有时可以长出长鞭毛,使其具有活跃的运动能力。
3.生长特性:沙门氏菌是嗜好性厌氧菌,但也可以在氧气存在的条件下生长。
最适生长温度为37℃,但也可以在20-45℃范围内生长。
沙门氏菌可以在多种细菌培养基上繁殖。
它主要利用碳源进行代谢,产生酸和气体。
5.病症:沙门氏菌感染引起的病症包括腹泻、发热、恶心、呕吐等。
在部分情况下,沙门氏菌可以引发严重的感染,包括败血症、心内膜炎和肾脏感染等。
沙门氏菌的检测方法:1.传统培养法:传统培养法是检测沙门氏菌的常用方法。
该方法需要将样品接种到富含营养成分的培养基上,进行孵育。
菌落形成后,可以通过形态、生理和生化特性进行初步鉴定。
然后,通过血清试验、生化特性测试等进行进一步的确认和鉴定。
2.分子生物学方法:分子生物学方法在沙门氏菌检测中得到广泛应用。
其中,PCR(聚合酶链式反应)技术是最常用的方法之一、PCR可以对沙门氏菌的特异基因序列进行扩增,从而快速而准确地检测沙门氏菌。
另外,核酸杂交和DNA序列分析等技术也可以用来进行沙门氏菌的检测和鉴定。
3.免疫学方法:免疫学方法是一种基于抗原-抗体反应的检测方法。
通过检测沙门氏菌的抗原或抗体,可以快速确定样品中是否存在沙门氏菌。
沙门氏菌检验能力验证技术方案沙门氏菌是一种存在于动物和人类肠道中的细菌,可以引起沙门氏菌感染。
由于其传播途径多样且易于感染,沙门氏菌成为食品安全和公共卫生的重要问题。
为了确保食品的安全性,需要对检测沙门氏菌的实验室进行能力验证。
以下是一个针对沙门氏菌检验能力验证的技术方案。
一、实验室设备准备1.需要准备培养基、培养皿、离心管和移液器等常规实验室设备。
2.保证实验室的温度和湿度适宜,以促进沙门氏菌的生长和培养。
二、样本准备1.选择新鲜的食品样品,如鸡蛋、肉类或蔬菜等,并保证样品的新鲜度,以确保样品中的沙门氏菌含量。
2.将样品进行消毒,以杀死潜在的细菌和病原体,然后进行预处理,如打碎、切割或混合。
三、沙门氏菌培养和检测1.使用适当的培养基,如SS培养基或XLD培养基等,将样品接种到培养皿中,然后在适当的温度和湿度下培养。
2.根据实验需要,选择不同的培养期,一般情况下选择24小时的培养期。
3.培养结束后,观察培养皿上是否有沙门氏菌的生长,如有则表示样品中可能含有沙门氏菌。
4.进一步确认是否为沙门氏菌,可以进行进一步的鉴定测试,如气体产生试验或生化试验等。
四、记录和分析结果1.对于每个样品,记录培养结束后培养皿上的菌落数量和形态。
2.分析结果,计算出样品中沙门氏菌的存在量,可以使用经验计数法或统计学方法进行计算。
3.将实验结果与预期结果进行比较,评估实验室的沙门氏菌检验能力是否达到要求。
五、能力验证1.根据实验需要和要求,选择合适的参考材料进行能力验证。
2.安排合适的被试验员进行实验,确保实验员具备相关的培训和经验。
3.分析验证结果,评估实验室的沙门氏菌检验能力,并根据结果进行改进和调整。
六、结果验证1.将实验结果分析和能力验证结果整理成报告,明确实验室的沙门氏菌检验能力是否达到预期要求。
2.如果实验室的能力未达到要求,可根据评估结果进行改进和培训,以提高实验室的能力。
通过以上技术方案,可以对沙门氏菌的检验能力进行有效的验证。
沙门氏菌检验程序沙门氏菌是一种常见的致病微生物,能引起人类和动物的感染疾病。
因此,在食品、水源、环境等方面对沙门氏菌的检测尤其重要。
下面我们将介绍一下沙门氏菌检验的步骤和方法。
1. 样品采集对于食品、水源等样品的采集需要遵守严格的规定。
例如,食品样品需要在加工、贮存和分配之前采集,以确保沙门氏菌检验的准确性。
样品应当在采集之后尽快送到实验室进行检测。
2. 样品处理根据不同的样品类型和特性,采用不同的处理方法。
例如,对于牛奶、鸡蛋等液态食品,需要进行破坏性处理,以确保沙门氏菌的释放。
对于土壤、粪便等样品,需要进行外层细菌的去除处理。
3. 培养培养基选择含有适当氧气和营养物质的培养基,如SS(Salmonella-Shigella)培养基、XLD(Xylose-Lysine-Desoxycholate)培养基等。
将样品分别接种到不同的培养基上。
4. 培养将分别接种的培养基放入恒温箱中进行培养。
将温度设定为37°C至42°C,进行18小时至24小时的培养。
在培养过程中观察样品的生长和变化。
5. 分离取出培养好的样品进行观察。
将预处理样品浸泡在缓冲液中,将溶液过滤。
过滤的溶液留下来,转移到盘子上。
用肉眼观察菌落的形态,观察不同菌落的特点。
根据菌落的特点进行分离。
6. 鉴定在鉴定步骤中,需要进行各种化学试剂处理,如氧化氢酶测试、葡萄糖测试等。
同时需要使用专业仪器,如API试剂盒、ELISA试剂盒等。
通过这些鉴定手段,确定检测出的菌落是否为沙门氏菌。
7. 结论最后,根据检测结果得出客观和准确的结论,以便针对食品、水源或环境污染等问题采取相应的措施。
总之,沙门氏菌的检验程序是一个非常复杂和严谨的过程,需要专业的实验室和技术人员进行操作。
我们应当高度重视沙门氏菌检验的重要性,以确保我们的食品质量和健康安全。
沙门氏菌检测标准、方法及实验关键点.检验沙门氏菌的原因和意义:据统计我国细菌性食物中毒中70%~80%是由沙门氏菌引起的,人一旦摄入含有大量沙门氏菌(105~(106个/g)的动物性产品,就会引起细菌性感染,进而在毒素作用下发生食物中毒导致胃肠炎、伤寒和副伤寒且沙门氏菌的传播媒介众多,肉、蛋以及食品从加工到出售的过程中都十分容易发生污染。
因此对沙门氏菌的检验事关重大。
二、检测及鉴定:沙门氏菌的检测要在二级生物安全实验室及二级生物安全柜(在负压情况下防止致病微生物气溶胶飘离实验室对实验人员及环境造成污染)中进行。
沙门氏菌典型菌落形态:生化鉴定显示:API20E 生化鉴定是根据快速酶促反应及代谢产物的检测技术发展的一种细菌编码鉴定法,广泛应用于临床、食品中革兰氏阴性杆菌的快速鉴定。
限值要求:参考CAC、ICMSF、欧盟、澳大利亚和新西兰、美国、加拿大、香港、台湾等国际组织、国家和地区的即食食品中沙门氏菌限量标准及规定,《GB29921-2013食品中致病菌限量》按照二级采样方案对所有11类食品设置沙门氏菌限量规定,具体为n=5,c=0,m=0(即在被检的5份样品中,不允许任一样品检出沙门氏菌)。
三、沙门氏菌传统检测方法的关键控制点1、样品处理尽可能缩短解冻时间,使竟争菌群生长最少,并减小对沙门氏菌的损伤致病菌取样一定要均匀并具有代表性(蛋黄蛋清混匀取样)。
2、培养基及培养方面(1)没有一种培养基可疑准确无误的筛选出沙门氏菌,必须选择多种选择性培养基同时筛选,只能说显色培养基综合选择性更强。
(2)试剂和培养基的配置一定要严格按照说明书配置,是否需要高压灭菌,添加剂用量及培养基保存条件。
(3)有1%沙门氏菌乳糖发酵阳性,为了避免漏检乳糖阳性菌必须选择不依赖乳糖的培养基,目前BS培养基认为是最适合的。
(4)BS培养基是分离沙门氏菌的高效培养基,特别适用于伤寒类的沙门氏菌,不是所有的选择性培养基都能有效分离出伤寒沙门氏菌和副伤寒沙门氏菌,BS是分离伤寒类沙门氏菌的首选培养基。
GuidetoChinesePoultry2006年第23卷第24期禽业园地近年来,沙门氏菌食物中毒和动物感染沙门氏菌十分严重。
由肠炎沙门氏菌引起人的急性胃肠炎,在世界各国有增加的趋势,已成为国际公共卫生的一个重要课题。
沙门氏菌作为致病菌检测的一项重要指标,在公共卫生、食品卫生、畜牧兽医和出入境检验检疫中均有重要意义。
下面就对沙门氏菌的检测方法进行简单的介绍。
一常规方法从病料中分离培养为基础的常规方法,对这种方法的相关研究较多。
虽然该方法是迄今为止最确实的方法,但由于沙门氏菌常在肠系膜和膜淋巴结中而不在肠腔中出现等原因,故排泄到粪中去的细菌可以是间歇的和低密度的,所以有时必须重复分离并采取大量样品在增菌肉汤中培养。
此外,这种常规方法为确诊而进行的细菌学鉴定需要几人才能报告结果,因此该方法不够简便、准确和快速。
传统的沙门氏菌检测方法的改进内容主要集中在选择性培养基的选择上。
如由于沙门氏菌具有可特异性地分解丙烯乙二醇产酸,使中性红指示剂变红的生化特征,在分离培养基中加入丙烯乙二醇、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D呋喃半乳糖,可实现对沙门氏菌的分离与鉴定工作同步进行,使沙门氏菌检测所需时间从常规方法的4~6d缩短至2d;采用Salmosyst培养基进行增菌后,在Rambach培养基上进行分离培养,可实现对沙门氏菌的快速检测,大大减少了检测中所需培养基种类,同时培养过程全部在37℃下进行,操作简便。
二应用免疫酶标技术目前己有应用ELISA对猪沙门氏菌抗体进行检测的报道。
张艳红通过试验确定了快速检测肠炎沙门氏菌的竞争ELISA方法(C-ELISA)。
目前正在研制肠炎沙门氏菌特异性单克隆抗体Hgm,两株单抗联合使用将会更准确地检测肠炎沙门氏菌。
杨爱萍的试验结果表明单抗直接ELISA法灵敏度高,特异性强,可避免人为因素造成的假阴性,且能在短时间内快速筛去大量的阴性样品。
检测时间比传统方法大为缩短,为加快产品流通提供了方便与可能。
86·FOOD INDUSTRY分析 检测 陈文财 惠州市食品药品检验所食品中沙门氏菌的快速检验方法泛用于遗传病诊断和微生物检验中。
(我个人认为沙门不会用)荧光定量RT-PCR检验法基于沙门氏菌fimY基因序列,进行引物和探针的设计,利用基因重组技术对检测的定量标准品进行构建,可借助荧光定量RT-PCR法对沙门氏菌进行检测。
该方法操作简单、检验快速、适用范围广,在临床诊断、商品检验、食品卫生监管等领域均有运用。
多重PCR快速检验法多重PCR快速检验法基于质粒毒力基因spvC、16S rRNA、fimA、致病基因invB序列设计引物,多重PCR检测沙门氏菌株基因组DNA,以此实现对沙门氏菌的快速检验。
多重PCR快速检验法可对沙门氏菌的多种毒力因子进行鉴定,是沙门氏菌株检验和鉴定的新方法。
变性高效液相色谱检测法 变性高效液相色谱结合多重PCR反应技术可对食品中的沙门氏菌进行快速检测。
该方法以fimY基因为靶基因,选择引物可实现对多重PCR体系的优化,由此可对沙门氏菌进行快速鉴别。
该方法的特异性、灵敏性较高,其扩增产物为284bp,可对沙门氏菌进行快速检验,并能进一步验证多重PCR的特异性。
沙门氏菌是食物常见的病原菌,具有传播媒介多、途径繁复等特点,容易污染食品而危害人体健康。
另外,沙门氏菌是多种有紧密联系细菌的泛指,包括导致伤寒、胃肠及引起食物中毒的众多细菌。
文中提到的几种快速检验法与传统检验法相比,具有操作简单、特异性强、灵敏度高等特点。
但这些方法也存在各自缺陷,试纸快速检验法检验纯菌时,若目菌>103cfu/ml时,纸片菌斑密集,可导致假阴性反应的发生。
PCR检验的特异型取决于所选扩增的靶序列,若为保守的特异片段,所选引物就会显示出特异型。
LAMP技术的产物复杂多样,引物设计要求较高,目标单链DNA的分离困难,无法对扩增产物的序列进行分析;其在同一温度条件下采用多条引物扩增非特异性条带,可能会出现假阳性结果。
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一类常见的细菌,通常存在于一些动物体内,例如家禽和家畜的肠道内。
它们也有可能通过食物和水传播到人体内,导致沙门氏菌感染。
本文将介绍沙门氏菌检验及分析的相关内容。
1. 沙门氏菌的检验方法(1)血清凝集反应法以沙门氏菌的特异性抗原与沙门氏菌患者血清反应,观察血清凝集是否发生,来判断患者是否感染了沙门氏菌。
这种方法快速简便,但准确度较低。
(2)细菌培养法将患者样本培养在含有沙门氏菌生长所需营养物的培养基上,观察是否出现菌落,来判断是否感染了沙门氏菌。
这种方法耗时较长,但准确度较高。
沙门氏菌的感染对人体健康有很大影响,因此对沙门氏菌的分析也非常重要。
(1)简单的感染症状一般情况下,沙门氏菌感染的症状包括腹泻、呕吐、发热等。
这些症状通常在感染后1-3天内出现,并可持续数日至数周不等。
(2)食品检测沙门氏菌通常通过食物途径传播,因此食品检测是非常重要的。
食品中是否存在沙门氏菌可通过简单的生化方法来鉴定。
(3)抗生素敏感性测试对于沙门氏菌感染的治疗,抗生素是常用的治疗手段之一。
在使用抗生素前,应进行抗生素敏感性测试,以确保所选择的抗生素对沙门氏菌有效。
3. 沙门氏菌感染的预防(1)注意卫生沙门氏菌多数存在于家禽和家畜的肠道内,因此在处理家禽和家畜时应注意卫生,避免沙门氏菌感染。
食品加工时应注意卫生,使用新鲜食材,逐层消毒,避免沙门氏菌感染。
(3)加强个人卫生个人卫生习惯也是预防沙门氏菌感染的重要措施。
包括勤洗手,不用食指挖鼻孔和耳朵等行为,不用手接触眼睛、口鼻、食物等等。
4. 总结以上就是沙门氏菌检验及分析的相关内容。
沙门氏菌属于一类较为常见的细菌,引起的感染对人体健康有很大的危害。
因此,对沙门氏菌进行检验及分析,以及采取预防措施是非常必要的。
沙门氏菌药敏试验的判定标准如下:首先,根据实验方法的不同,将沙门氏菌药敏试验分为两种判定标准,即琼脂稀释法和肉汤稀释法。
在琼脂稀释法中,当细菌浓度低于1×10^5 cfu/ml时,药物的最小抑菌浓度(MIC)就是其最低杀菌浓度(MBC);当细菌浓度高于1×10^5 cfu/ml时,需要选择琼脂稀释法中的敏感菌株,通过将药物点种在平板培养基上,待对数期沙门氏菌生长繁殖后,再加入判断敏感性的划痕线,通过观察划痕线处是否生长细菌来判定敏感性。
如果细菌生长,则药物为沙门氏菌的敏感药物。
肉汤稀释法中,实验步骤和判定标准也有详细的说明。
首先,要选择合适的药物浓度进行药敏试验,然后将无菌的沙门氏菌人工培养物液体培养物接种到相应的肉汤培养基中,使其达到一定的细菌数密度。
随后将配制好的药物稀释液进行接种,通常用适当的接种工具挑取适量的细菌混合菌悬液接种于含药平板培养基中混合均匀,在接种前需要注意确保培养基与稀释药液充分混匀,并在4分钟以内完成接种。
完成接种后放在相应条件下培养。
沙门氏菌药敏试验的最后结果判定需要根据细菌生长情况、抑菌圈大小、敏感性带的位置以及是否出现多重耐药性带等因素综合考虑。
在判断结果时,如果细菌在培养基中生长良好,则表明该药物对沙门氏菌没有抑制作用。
如果细菌在含有药物的平板培养基中不生长或生长较少,则表明该药物对沙门氏菌具有高度敏感性。
如果敏感性带较窄或抑菌圈较小,则表明该药物对沙门氏菌的敏感性较低。
同时需要注意的是,如果沙门氏菌同时表现出多重耐药性,则表明该药物对沙门氏菌的敏感性很低。
综上所述,沙门氏菌药敏试验的判定标准涉及到多个方面,需要综合考虑多种因素进行判断。
因此在进行沙门氏菌药敏试验时,需要严格按照实验方法进行操作,以确保结果的准确性。
同时,对于不同的药物和细菌浓度组合,也需要进行充分的试验和验证,以确保药物的安全性和有效性。
食品中沙门氏菌的快速检验方法作者:陈文财来源:《食品界》2017年第07期食源性病原菌中,沙门氏菌的分布广、危害大,食用沙门氏菌污染后的食物,可罹患感染性腹泻疾病。
水中沙门氏菌的繁殖能力弱,冰箱中其可存活3-4个月,自然环境下的粪便中沙门氏菌可存活1-2个月。
37℃的环境中,沙门氏菌的繁殖最佳,而在20℃以上即可大量繁殖[1]。
所以,对低温储存食品的质量进行防护至关重要。
沙门氏菌主要存在于家禽、蛋、肉类产品中,食物在生产运输过程中,低温储存环境下容易被污染。
而在食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒病例位居第一或二位。
沙门氏菌的传统检测方法需要经过前增菌、选择性增菌、划线分离、生化鉴定及血清学鉴定等步骤,整个检验过程大约需要4-7天且存在操作繁琐、灵敏度低等缺陷,故容易出现错检或漏检现象;无法满足食品中沙门氏菌快速检测的需求。
因此,寻求有效方法对沙门氏菌进行检验,有效预防沙门氏菌病具有重要意义。
试纸快速检验法试纸快速检验法具有敏感、特异等优点,其将微生物的鉴定、分离合二为一,利用微生物测试纸片,通过专有技术将显色培养基变为便于使用的测试纸片。
其检验迅速、经济、方便,主要用于沙门氏菌的快速初筛。
沙门氏菌显色培养基法用显色培养基对沙门氏菌进行鉴定,以通过改良的选择性培养基为基础,使沙门氏菌在选择性培养基上的菌落显示出特定的颜色,便于观察。
其原理是利用目标菌特有的生理生化反应,将细菌特异性酶的显色底物加入培养基中,根据菌落颜色可对菌种进行鉴定。
显色培养基法操作简单、方便,将食品样品增菌后直接划线于选择性培养基,于37℃培养18~24h,然后观察生长菌的颜色。
显色培养基检验法在环境、医药和食品领域的使用广泛,能够有效提高微生物检测的工作效率。
不足之处是存在假阳(阴)性问题,部分操作有待进一步优化。
聚合酶链反应(PCR)检验法体外酶促基因扩增是在体外对自然DNA复制进行模拟的一种技术,借助寡核苷酸引物在靶DNA序列两端于模板链分端互补的物性经过DNA变性,经模板-引物复性、taq DNA聚合酶催化,发生引物链延伸反应,这一过程循环30次,即可在短时间内促使靶DNA扩增。
食品中沙门氏菌检测方法比对摘要:本实验采用国标、VIDAS和快速测试片三种检测方法,对ACAS组织的冻干粉(模拟食品)中沙门氏菌的测定能力验证样品进行检测,证明VIDAS和快速测试片具有检测灵敏度高、特异性强、时耗短和效率高等特点。
关键词:GB 4789.4-2016; VIDAS;快速测试片;沙门氏菌沙门氏菌是一群寄生于人或动物肠道内的革兰氏阴性肠道杆菌,是一种重要的人畜共患病原菌。
主要通过动物的消化道传染致病,可引起伤寒、食物中毒、急性肠胃炎等多种疾患,由于沙门氏菌在自然界广泛存在,且对人类健康具有很大的威胁,故世界各国普遍规定食品中不得检出沙门氏菌。
我实验室在2022年ACAS组织的“冻干粉(模拟食品)中沙门氏菌的测定的能力验证”中应用 VIDAS、快速测试片和GB 4789.4-2016三种不同的检测方法检出了四例沙门氏菌,现报告如下:1.材料和方法1.1供试样品ACAS提供的四份能力验证样品、一份自制阳性质控样品和一份自制阴性质控样品。
1.2仪器VIDAS:购于法国生物梅里埃公司。
生化培养箱:购于上海一恒科技公司。
实验菌株:沙门氏菌标准菌株和粪肠球菌标准菌株,由CICC菌种保藏中心提供。
1.3试剂VIDAS沙门氏菌试剂盒:购于法国梅里埃公司。
沙门氏菌生化鉴定试剂盒:购于北京陆桥技术股份有限公司。
沙门氏菌诊断血清:购于兰州生物制品研究所。
1.4培养基沙门氏菌增菌培养基:BPW、SC、TTB、RVS和M肉汤。
沙门氏菌选择性培养基:BS、XLD和沙门氏菌显色培养基。
沙门氏菌初步鉴别培养基:三糖铁琼脂(TSI)。
沙门氏菌快速测试片,以上培养基均购于北京陆桥技术股份有限公司1.5检测方法1.5.1 VIDAS法:按VIDAS工业试剂培训手册执行1.5.2国标法:GB 4789.4-20161.5.3快速测试片法:快速测试片使用说明1.6检测步骤1.6.1GB 4789.4-2016检测步骤1.6.1.1无菌操作吸取25mL样品于225mL灭菌BPW中,拍打均质1min,36℃培养18h。
四种分离式培养基检测沙门氏菌的效果比对作者:黄耀雄,胡海艳,郑苗,张显勇,梁翠琴来源:《现代食品》 2017年第6期摘要:目的:为了更好地开展食品中沙门氏菌的检验工作,使检测工作更加准确、高效,保障食品安全,开展此项目的研究。
方法:参照食品国家标准食品微生物检验GB 4789.4-2010食品中沙门氏菌的检验和GB4789.28-2013培养基和试剂的质量要求。
结果:本次研究选用的沙门氏菌显色培养基(CAS)、亚硫酸铋琼脂(BS)、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)和HE琼脂(HE)4种培养基的生长率、选择性、特异性均符合GB4789.28-2013中的要求,通过实际加标的结果对比分析发现,显色培养基CAS要优于BS、XLD、HE培养基。
结论:在这四种分离式培养基中,显色培养基CAS在分离食品中的沙门氏菌过程中特异性和敏感性是最好。
在实际的检测过程中,应灵活运用选择合适的培养基,减少漏检。
关键词:沙门氏菌;培养基;分离效果比较揶浍卸室卸巍揶浍卸卸,垓萋�橥砘嬖停,瘾椹瞍煅�世�讵猿婿哝,憷煅蹂挽�钴猿芑戢卸,爿讵憷徐跆瘾椹钴麟刳丝。
瞍洳卸圊爿讵耖愿耖70%ⅵ80%毽揶浍卸熠衙钴,蘖爿�憷呷钴肟、颖�世黏�[1],对分离出的沙门氏菌流行病的研究十分必要。
现如今在食品中检测沙门氏菌的方法主要是常规的生化检测方法、分子生物学方法以及免疫学检测,把目标检测菌从样品中分离出来主要采用常规培养基培养分离。
为了更好地开展食品中沙门氏菌的检验工作,做好食品安全风险检测,保障食品安全,开展如下研究。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株鼠伤寒沙门氏菌ATCC13311、金黄色葡萄球菌ATCC6538、奇异变形杆菌CMCC49106、粪肠球菌ATCC19433(广东省微生物种质资源库)。
1.1.2 培养基与试剂沙门氏菌显色培养基(CAS)(法国科玛嘉公司),缓冲蛋白胨水(BPW)、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)、亚硫酸铋琼脂(BS)、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)、HE琼脂(HE)、胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA)(北京陆桥技术股份有限公司)。
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤:
1.样品采集:从待检测的食品中采集适量样品,确保样品的代表性。
2.样品处理:将采集的样品进行适当处理,如破碎、研磨等,以便后续的
检测操作。
3.增菌培养:将处理后的样品接种到选择性培养基中,进行增菌培养。
选
择性培养基可以抑制其他微生物的生长,促进沙门氏菌的增殖。
4.分离培养:将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上,进行分离培
养。
鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌,并对其进行鉴别。
5.生化鉴定:对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定,以确定其是否为
沙门氏菌。
常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。
6.血清学鉴定:对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定,以确定其
具体血清型。
常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。
7.药敏试验:对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验,以确定其对不同药物
的敏感性,为临床治疗提供参考。
需要注意的是,食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。
因此,在实际操作中,应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。