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高效液相色谱仪的维护和保养

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1 / 4 高效液相色谱仪的维护与保养

液相色谱仪应该进行适当的维护保养，维护保养按照维护频率分为日常维护、每周维护及每月维护。每周维护、每月维护活动均应记录在仪器维护记录本上。

1日常维护

1.1溶剂配制

所有溶剂应为HPLC级，水应为二次超纯水。

溶剂必须经过滤膜过滤，过滤水和有机相时应该选用不同的滤膜。纤维素膜主要用于水溶液，尼龙滤膜和PTFE膜均是通用型滤膜。常用0.45μm滤膜，如果使用亚二微米颗粒色谱柱，建议使用0.22μm滤膜。

溶剂使用前必须脱气，常用超声脱气20-30min。

1.2开机

准备新鲜的纯水和有机溶剂以及方法所需的溶液。

按顺序打开仪器各组件电源→电脑电源→打开工作站。

确认工作站和仪器连接正常，通过工作站或手动打开排气阀，将需要用到的通道分别100%以流速3ml/min~5ml/min排气。（所需流量参考日常工作的排气流量）（多个泵同时排气容易对泵造成损耗，不建议！）

确认各通道排气完成后，关闭排气阀。用20倍以上的柱体积的有机溶剂冲洗系统。（注意：有机溶剂冲洗前需确认之前关机时已经移除系统中的缓冲盐）

调用运行方法，使用5~10倍柱体积的方法所需流动相比例平衡系统。平衡系统前用所需方法的流动相比例在排气阀打开的情况下以3ml/min~5ml/min运行一段时间，让泵中的流动相比例快速达到所需的流动相比例。

更换洗针溶剂、更换密封垫清洗溶剂。

1.3试验中注意

1.3.1流动相

在选择A、B、C、D泵放置流动相时，将盐溶液连接在一个底部梯度阀端口上，有机溶剂连接在一个上部梯度阀端口上。最好使有机溶剂通道位于盐溶液通道的正上方。

最好不要将纯水溶液作为流动相的一组，如果使用了水相作为流动相的一组，应注意定期更换、过滤溶剂，不应超过2天，避免阳光直接照射。如果试验允许，可向水相中加入0.001-0.0001M的叠氮化钠。

1.3.2色谱柱

使用流动相前千万注意，流动相与色谱柱内的保存溶剂和系统内存留溶剂的混溶性，避免形成乳化小液滴，从而毁坏柱子。可以使用异丙醇作为过渡溶剂。

使用保护柱，延长色谱柱的使用寿命。

2 / 4 1.3.2洗针液和清洗密封垫溶液

每天观察洗针液和清洗密封垫的溶液，及时更新。洗针液的选择根据样品的极性，样品可在洗针液中洗针液中溶解，即达到效果，一般情况下，可装50%甲醇溶液或者50%乙腈溶液。清洗密封垫的溶液一般为10%异丙醇。

如果清洗液和洗针液足够，则使用5个工作日后需更换新的溶液。

1.4关机

试验结束后，要把柱子和系统流路冲洗干净，用有机溶剂保存，然后关机。具体步骤如下：

关闭检测器的灯。

确认所有的液相色谱管路畅通。

例如： Agilent 1260 LC 四元泵系统的A\B\C\D四路管路+seal wash管路+系统中的主路旁路。

Waters Alliance系统（包括2690，2695，e2695）的A\B\C\D四路管路+Seal Wash In（绿色标签）+Needle Wash（纯绿色管路）。

将水相管路中的缓冲盐移除。（将缓冲盐的流路更换成纯水，系统中用不大于80%比例的水相冲洗移除缓冲盐。）

将水相溶剂更换成有机相（甲醇或乙腈），并将系统中所有流路置换成有机相。

关闭仪器电源和电脑系统。

2 每周维护

2.1定期灌注：仪器一周（5天）不使用时，需将系统用有机溶剂（一般为甲醇）重新填满。

2.2检查清洗阀滤芯和色谱柱滤芯。清洗阀滤芯被堵塞的表现是有一层黄色或黑色表面、沉淀物，或者打开清洗阀(purge阀)用泵以5 mL/min的流量输送水时它的压力大于10bar即150psi。

2.3检查溶剂过滤器是否堵塞或变色。若有，采用4.3.2的方法清洗。

2.4检查系统是否有漏液情况、缓冲盐结晶情况。若有，采用适当的的方法处理。

2.5使用水冲洗所有多通道梯度阀（MCGV）通道，除掉阀端口中所有可能的盐沉淀物。

3 每月维护

3.1清洗溶剂瓶，清洗完毕放入烘箱中（设置温度80℃）灭菌，2小时候取出放置

3.2清洗溶剂过滤器：用纯水冲洗残留之溶剂后，玻璃过滤器用浓硝酸（35％）的烧杯里浸超过一小时， 再用超纯水彻底冲洗过滤器，玻璃过滤器不能用超声波清洗；不锈钢溶剂过滤头可用甲醇超声波清洗15分钟，再用超纯水彻底冲洗。

3.3清洗管路：移除色谱柱，接两通。分别使用60℃-70℃的纯化水（流速：1.0ml/min）、异丙醇（流速：0.5ml/min）、甲醇（流速：1.0ml/min）冲洗4个管路，单个管路冲洗不少于30分钟。

3.4检测器：检查氘灯使用时长及氘灯能量，是否满足准确检测的需求，根据实际情况提前购买备用氘灯。

3 / 4 4.泵的常见问题及解决方案

项目 现象 原因 解决方案

1 当阀关闭后，有溶剂从废液管出口滴出 泵头漏液 更换冲洗阀滤芯或冲洗阀

2 压力脉动不稳定 主动入口阀滤芯不干净 更换主动入口阀后，进行渗漏测试以验证

3 梯度性能问题，间歇性的压力波动 溶剂过滤头堵塞 清洗或更换溶剂入口过滤芯

4 滤芯的压降大于10bar即150psi（5ml/minH2O冲洗阀打开）说明堵塞了 滤芯不干净 更换冲洗阀滤芯或冲洗阀

5 泵头下侧漏液

保留时间不稳定

压力脉动不稳定 密封垫磨损严重 更换泵密封垫后，进行渗漏测试以验证

6 密封垫寿命比期望的要短 柱塞杆有划痕 更换密封垫时请检查柱塞杆

7 清洗溶剂减少 清洗密封垫漏液 更换清洗密封垫

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详细解决方案见《安捷伦四元泵及单泵使用手册》

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液相色谱仪的维护保养和注意事项

液相色谱仪的维护保养和注意事项

液相色谱仪的维护保养和注意事项

一、日常维护保养

1. 清洗和清理仪器内部定期清洗和清理液相色谱仪的内部，包括流动相管道、检测器、色谱柱等部分，以防止堵塞和污染。使用专用的清洗液清洗仪器，并根据仪器说明书进行正确的操作。

2. 检查泵密封和柱塞杆定期检查液相色谱仪的泵密封和柱塞杆，确保其正常运转。若发现密封圈磨损或柱塞杆有异物堵塞，应及时更换或清理。

3. 更换过期或损坏的零件随着使用时间的增长，液相色谱仪的一些零件可能会过期或损坏，如流动相过滤器、单向阀等。发现这些零件出现问题时，应及时更换，以保证仪器的正常运转。

4. 校准仪器为保证液相色谱仪的准确性和稳定性，应定期进行仪器校准。根据仪器说明书的要求，按照操作规程进行校准，并记录校准结果。

二、使用注意事项

1. 防止压力过高或过低液相色谱仪的正常运转需要稳定的压力。在使用过程中，应避免压力过高或过低，以免对仪器造成损害。若发现压力异常，应及时检查泵、流路和检测器等部分，并采取相应措施。

2. 避免使用不适当的流动相流动相是液相色谱仪的重要组成部分，使用不适当的流动相可能会影响分离效果和仪器寿命。在使用流动相时，应注意其纯度、极性和组成等参数，并根据实验要求选择合适的流动相。

3. 定期检查泵密封和柱塞杆液相色谱仪的泵密封和柱塞杆是仪器的重要部件，若出现故障可能会影响仪器的正常运行。在使用过程中，应定期检查泵密封和柱塞杆的状态，如有异常应及时更换或维修。

高效液相色谱仪通用维护保养方法(2017)

高效液相色谱仪通用维护保养方法(2017)

高效液相色谱仪维护保养方法

高效液相色谱仪的保养分为日常保养和专业保养。介绍的日常保养操作是有用户自行完成的。其它专业的保养操作由供应商工程师或维修人员完成。

1 . 每日保养内容

1.1 在泵运行前检查溶剂是否脱气和抽滤。

1.2 检查管道中是否会存在气泡，管路是否有泄漏（观察开泵后的压力）。

1.3 在使用缓冲盐流动相后应使用高水相溶剂彻底脱盐冲洗系统，再将整个系统保存在纯有机相的系统中。

1.4 每天使用完系统后必须将水相倒掉，水相溶剂瓶尽量空瓶过夜，避免微生物生长。

1.5 密封清洗液尽量保证新鲜。

2. 定期保养内容

2.1 溶剂瓶过滤头尽量3个月更换，如果不能更换，3个月需要超声清洗一次，清洗时需要将整个过滤头拔出来注意过滤片方向。

注：有的型号的过滤头不能超声处理。

2.2 定期检查泵模块混合器出口的在线过滤片的压力，当压力大于100pa时需要清洗，尽量更换。

2.3 当长期使用含有缓冲盐体系的流动相时，定期检查泵的后密封泄漏情况。

2.4 定期检查自动进样器，进样针扎瓶盖位置的正确性。

2.5 定期检查自动进样器针座，进样阀转子密封使用次数，一般仪器进样超过10000次需要更换自动进样器的消耗品。

3. 维护保养方法

3.1 判断仪器脱气机是否正常：打开purge阀，流速设为2ml/min，然后提起过滤头，让体系进一些空气，再放下过滤头，看气泡是否会减少来判断脱气机是否起作用。 3.2 有的溶剂过滤头不可超声清洗，可用35%硝酸浸泡1小时后再用溶剂清洗；

3.3 判断purge阀的滤芯是否需更换：用水作流动相时，流速为5ml/min时，正常泵压应为0 bar（若打开purge阀时，泵压超过10bar时需更换滤芯）；

3.4 泵的保养

① 使用流动相尽量要清洁；

② 进液处的沙芯过滤头要经常清洗；

③ 流动相交换时要防止沉淀；

④ 避免泵内堵塞或有气泡。

高效液相色谱荧光检测器操作和维护保养规程

高效液相色谱荧光检测器操作和维护保养规程

ISO17025/ISO9001/ISO14001/HSF程序文件范例

文件名称： 高效液相色谱（荧光检测器） 生效日期： 2023-02-21

文件编号： 页数 1/4 生效版本： A0

文件制修订记录

NO 制/修订日期 修订编号 制/修订内容 版本 页次

1 2023-02-21 - 新制订 A0

核准 审核 制订

ISO17025/ISO9001/ISO14001/HSF程序文件范例

文件名称： 高效液相色谱（荧光检测器） 生效日期： 2023-02-21

文件编号： 页数 2/4 生效版本： A0

1.目的

建立高效液相色谱（荧光检测器）的操作规程，使检验员正确使用高效液相色谱，确保实验结果准确性。

2.适用范围

适用于检验人员使用高效液相色谱。

3.操作规程

3.1开机：按下输液泵和检测器模块电源开关，蜂鸣器短暂鸣响，进入自检界面，然后进入程序主界面。打开柱温箱，设置柱温。

3.2排液：将进液管及过滤头放入相应流动相，将排液阀旋钮以逆时针方向旋转180°，以打开排液阀。开启purge键，以9mL/min的流速开始排空，3min后自动停止排空。

3.3流量设定：在输液泵模块，按“Func”光标在“流量设定”字段中闪烁，按照标准要求，输入0.8或1.0mL，按“Enter”确认。开始走基线，以低流速运行30min左右。

3.4波长设定：在检测器模块，按“Func”键，光标闪烁，根据国标输入标准中要求的Ex和Em波长，按“Enter”确认。按“CE”回到初始界面。按“zero”基线归零。

3.5登录在线用户：电脑开机，打开色谱工作站软件“N2000+在线”，点击仪器1登陆，阶层：管理员，密码：123456。

3.6设置实验方法：点击“实验信息”编辑项目、单位、简介，设置保存路径，勾选是否扣除背景。点击“方法”设置仪器配置、组分表、计算、谱图显示、报告编辑。在“仪器配置”菜单下的“仪器描述1”模块中设置波长、流速、柱温等仪器信息，在“进样阀”模块下设置进样体积、结束时间和标题格式（样品批号），点击“采用”，保存方法。下次可直接调用方法。

浅谈高效液相色谱仪的保养与维护

浅谈高效液相色谱仪的保养与维护

浅谈高效液相色谱仪的保养与维护

高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器，在科研实验和工业生产中都有广泛的应用。为了保证仪器的正常运行和数据的准确性，必须对高效液相色谱仪进行定期的保养和维护。本文将从日常保养、仪器维护和故障排除等方面对高效液相色谱仪的保养与维护进行浅谈。

一、日常保养

1. 清洗进样口：进样口是高效液相色谱仪中最容易受到污染的部件之一。在每次使用完毕后，应用纯水进行适当的清洗，以防止残留物的积累影响仪器的使用寿命。

2. 清洗流动相管路：流动相是高效液相色谱仪的核心组成部分之一，其管路中的积聚物可能导致流动相的流动受阻、流动相质量下降等问题。定期对流动相管路进行清洗是十分必要的。一般可以使用甲酸、乙酸或无机酸等进行清洗，然后用纯水反复冲洗，最后用流动相进行冲洗，确保完全清洗干净。

3. 更换柱芯：柱芯是高效液相色谱仪中最易损坏的部件之一，一旦柱芯损坏或堵塞，都会导致分离效果下降、峰形不良等问题。定期更换柱芯是保证分析结果准确的关键。一般情况下，柱芯的使用寿命为100～400次，具体情况视样品性质和柱芯类型而定。

二、仪器维护

1. 检查液路连接：高效液相色谱仪中的液路连接是保证仪器正常运行的关键。定期检查液路连接是否紧固，确保没有泄露现象。若发现泄露，应及时修复或更换相关部件。

2. 校准仪器：高效液相色谱仪的准确性和稳定性是保证分析结果准确的重要因素。在使用高效液相色谱仪之前，应对仪器进行校准。一般可以使用标准样品进行校准，并根据校准结果进行相应的调整。

3. 检查电源和供液系统：电源和供液系统是高效液相色谱仪正常运行的基础。定期检查电源和供液系统是否正常运行，确保电源稳定、供液顺畅。

三、故障排除

1. 泵压不稳：高效液相色谱仪中的泵压是保证流动相流动的关键因素，若泵压不稳定，会导致流动相流速波动、峰形不良等问题。可能的原因包括：流动相泵密封件老化、流动相泵进水等。解决方法：更换密封件、清洗泵柱、检查进样口阀门等。