脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验报告

脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：14临床输血学号： 3140704004姓名：宁立军组别：第七组合作者：牛恺文黄可秀朱晋辉实验室：第六实验室指导老师：罗军实验的得分：一、实验目的通过革兰氏染色并在油镜下观察细菌形态结构、细菌的生化反应和细菌的血清学反应等手段区别和鉴定脓汁标本中和粪便标本中细菌，检测病原微生物，并进行细菌药物敏感性试验。

二、实验器材1器材接种环接种针打火机马克笔酒精灯电热恒温培养箱物显微镜电炉试管（带棉塞）称量纸药勺牛皮纸橡皮筋尺子锥形瓶高压蒸汽灭菌器镊子玻片吸水纸2 试剂药品普通营养琼脂培养基蒸馏水脓汁标本粪便标本石蜡油生理盐水结晶紫卢戈碘液 95%乙醇稀释复红葡萄糖微量发酵管（2支）乳糖微量发酵管（2支）青霉素抗菌素纸片链霉素抗菌素纸片庆大霉素抗菌素纸片兔血浆福氏志贺菌诊断血清三、方法与步骤1培养基制备称取一定量的肉汤培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸一次，趁热分装；称取一定量的营养琼脂培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸三次（煮至刚刚冒泡，立刻置于台面，半分钟后再煮），使完全溶解，趁热分装。

（平板培养基：以无菌操作，倾注平皿10ml，琼脂完全凝固后，平板倒放，4℃冰箱保存备用。

斜面培养基：培养基趁热斜放，培基不超过试管长度的2/3，琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。

）贴上标签后灭菌使用。

2空气与人体体表细菌学检查根据空气中细菌气溶胶粒子，在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到培养基表面，培养以后，计数菌落形成单位（CFU），了解空气的污染情况。

平板盖打开，盖朝下放在平板旁，琼脂平板暴露15分钟即可。

在普通平板上接种手指上的细菌。

第1格为洗手前，第2格为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。

3细菌分离培养接种前，接种环烧灼灭菌。

取标本在平板表面上方密集涂布5～10 mm²。

烧掉接种环上多余的标本。

冷却后，应用分区划线分离法，将脓汁标本接种于营养琼脂平板（2份），粪便标本接种于伊红美蓝平板（2份）。

2016年秋季学期微生物学实验报告1、了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理。

2、熟悉常见病原性球菌及常见肠道致病菌的检查程序，掌握各检查实验操作。

3、了解脓汁和粪便标本中病原菌的检测的临床应用及临床意义。

4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。

5、熟悉抗生素对于不同细菌的作用机理。

6、树立牢固的无菌观念。

二、实验器材：1、培养基：营养琼脂平板、伊红美兰平板、斜面、营养肉汤、半固体琼脂2、标本：脓汁标本、粪便标本、空气细菌培养物、手指皮肤细菌培养物、细菌分离培养物、斜面培养物、营养肉汤培养物、药敏试验培养物3、器材：1）培养基的制备：天平、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、试管、试管架、刻度吸管、洗耳球、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、干粉培养基、酒精灯、火机。

2）细菌的分离培养：碘酒棉球，酒精棉球、眼科镊子、接种环。

3）细菌的纯培养: 接种环。

4）细菌的形态学检查：生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、结晶紫染液、芦戈氏碘液、95%酒精、稀释石炭酸复红、染色架、接种环。

5）细菌的生化试验:糖发酵管、抗菌素（青霉素、链霉素、庆大霉素）纸片、眼科镊子、接种针、接种环、小砂轮、葡萄糖发酵微量管、乳糖发酵微量管、兔血浆、生理盐水、载玻片。

6）结果分析：尺子。

三、方法与步骤1、营养肉汤培养基的制备取1.1g营养肉汤粉末于锥形瓶中，加入50ml蒸馏水，摇晃锥形瓶使其几乎完全溶解。

将锥形瓶置于电陶炉上加热至沸腾，观察固体是否完全溶解，冷却后分装至试管内。

2、细菌的分离培养（平板划线分离法）甲→脓汁标本→营养琼脂平板乙→脓汁标本→营养琼脂平板丙→粪便标本→伊红美蓝平板丁→粪便标本→伊红美蓝平板1）接种环烧灼灭菌，以免污染标本。

2）取标本3～5ul。

3）转动平板，当看到平板表面象镜面有反光的时候，保持这个角度，划线时就能看清划线痕迹，以便控制划线。

4）接种环与平板呈30～40度角，在平板表面上方，以曲线的形式，作大幅度来回连续划线，边划边退，线段要划得长而密集，每区划线不少于30条5）甲、乙烧掉接种环上多余的标本。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：组别：实验目的通过革兰氏染色并在油镜下观察细菌形态结构、细菌的生化反应和细菌的血清学反应等手段区别和鉴定脓汁标本中和粪便标本中细菌，检测病原微生物，并进行细菌药物敏感性试验。

实验器材1器材接种环接种针打火机马克笔酒精灯电热恒温培养箱物显微镜电炉试管（带棉塞）称量纸药勺牛皮纸橡皮筋尺子锥形瓶高压蒸汽灭菌器镊子玻片吸水纸2 试剂药品普通营养琼脂培养基蒸馏水脓汁标本粪便标本石蜡油生理盐水结晶紫卢戈碘液95%乙醇稀释复红葡萄糖微量发酵管（2支）乳糖微量发酵管（2支）青霉素抗菌素纸片链霉素抗菌素纸片庆大霉素抗菌素纸片兔血浆福氏志贺菌诊断血清方法与步骤1培养基制备称取一定量的肉汤培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸一次，趁热分装；称取一定量的营养琼脂培养基，至于三角烧瓶中，加入适量的蒸馏水，煮沸三次（煮至刚刚冒泡，立刻置于台面，半分钟后再煮），使完全溶解，趁热分装。

（平板培养基：以无菌操作，倾注平皿10ml，琼脂完全凝固后，平板倒放，4℃冰箱保存备用。

斜面培养基：培养基趁热斜放，培基不超过试管长度的2/3，琼脂凝固以后，4℃冰箱保存备用。

）贴上标签后灭菌使用。

2空气与人体体表细菌学检查根据空气中细菌气溶胶粒子，在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到培养基表面，培养以后，计数菌落形成单位（CFU），了解空气的污染情况。

平板盖打开，盖朝下放在平板旁，琼脂平板暴露15分钟即可。

按下图在普通平板上接种手指上的细菌。

第1格为洗手前，第2格为洗手后，第3格为消毒后，第4格空白对照。

3细菌分离培养接种前，接种环烧灼灭菌。

取标本在平板表面上方密集涂布5～10 mm²。

烧掉接种环上多余的标本。

冷却后，应用分区划线分离法，将脓汁标本接种于营养琼脂平板（2份），粪便标本接种于伊红美蓝平板（2份）。

接种完毕后，接种环烧灼灭菌。

将平板倒置37℃培养18～24h,观察结果。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。

了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。

二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W 电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：○1培养基的制备、消毒和灭菌:1.调配→溶化→矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。

2.干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。

②细菌的分离培养:采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。

③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。

挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→干燥→固定→革兰染色⑤细菌的生化试验等:糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1.在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测（作者：bibi）目的从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。

方法培养基的制备、消毒和灭菌，细菌的分离与培养，细菌群体和个体形态特征的观察，细菌生化反应鉴定。

结果脓汁标本形成黄、白两种颜色菌落，均为革兰氏阳性菌，均对青霉素和链霉素敏感；粪便标本形成紫黑和粉红色两种菌落，均为革兰氏阴性菌，对青霉素不敏感，对链霉素敏感。

四种细菌均对广谱抗菌素庆大霉素敏感。

关键词：脓汁粪便微生物细菌菌落生化鉴定药敏试验引言：常见的化脓性病原菌有葡萄球菌、链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、假单胞菌、流感杆菌等。

浓汁标本在做细菌分离培养的同时，均须直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体，芽孢有无，为临床提供最初的诊治依据。

粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、致病性大肠杆菌属、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。

粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基（如SS、伊红美蓝平板、碱性蛋白胨水），尽可能抑制杂菌，以利于病原菌的检出。

这次实验我们从浓汁标本中检出的是金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌，从粪便标本中检出的是大肠埃希菌、痢疾志贺菌。

更重要的是我们了解了，医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握了微生物试验的基本技能和基本原理，树立了牢固的无菌观念。

同时培养学生自学能力、科学思维能力、动手能力和表达能力。

培养学生从临床标本中分离细菌以查找与疾病有关的病原体，为临床治疗预后调查提供一定的价值1.实验器材：接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、普通冰箱、冷藏室、隔水式电热恒温培养箱、奥林巴斯 CX21型生物显微镜、1500W电炉、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子2.实验方法：2.1培养基的制备、消毒和灭菌培养基制备的一般程序：①调配→溶化→矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。

本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==粪便检查实验报告篇一：脓汁和粪便标本中病原菌的检验实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业：学号：姓名：一实验目的：从脓汁和粪便标本中分离、培养和检测病原体。

了解医学微生物学主要的研究方法和手段，掌握基本技能和基本原理，树立牢固的无菌观念。

二实验器材：试管架,酒精灯,污物盘，普通冰箱，隔水式电热恒温培养箱，奥林巴斯 CX21型生物显微镜，乙醇乙醚，吸水纸，石蜡油，拭镜纸，染色架，革兰染色瓶，1500W电炉，石棉网，手套，酒精棉球，镊子，碘酒棉球,接种针、接种环、油性笔、打火机、试管架、冷藏室、蒸馏水、玻片缸、消毒液、1‰新洁而灭、天平、砝码、细菌干粉培养基、锥形瓶、量筒、试管筐、糖发酵管、灭菌平皿、试管（棉塞）、刻度吸管、洗耳球、称量纸、硫酸纸、牛皮纸、橡皮筋、尺子三方法与步骤：1培养基的制备、消毒和灭菌: ○1. 调配→溶化→ 矫正pH →分装→灭菌→检定→保存。

2. 干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→灭菌→检定→保存。

②细菌的分离培养: 采用平板划线分离法，将取脓汁和粪便标本中混杂的多种细菌，分别在普通平板和伊红美蓝固体培养基表面划线，使之分散成单个细菌，在37℃培养18～24h ，从而分离出单个菌落。

③细菌的纯培养：脓汁标本在普通平板上有黄色、白色两种菌落；粪便标本在伊红美蓝平板上，有紫黑色、淡粉红色两种菌落。

挑选这四种不同菌落分别在斜面培养基上接种④细菌的形态学检查：涂片制备→ 干燥→ 固定→ 革兰染色⑤细菌的生化试验等 : 糖发酵试验, 细菌药物敏感性试验, 血浆凝固酶试验, 半固体接种法, 痢疾血清玻片凝集反应⑥结果观察、分析、总结四结果与讨论结果讨论：1. 在制备好培养基后，我们首先采用的是平板划线分离法，从脓汁标本中分离出黄色和白色两种菌落→在显微镜下观察，这两株细菌均为G+球菌，排列不规则，呈葡萄串状，是典型的葡萄球菌→再结合菌落或菌苔颜色，可初步断定，这两株葡萄球菌分别是金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌→再通过血浆凝固酶试验鉴别，金黄色葡萄球菌是致病菌。

脓汁和粪便标本中病原菌的检测病原菌是引起多种疾病的微生物，包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等。

当人体感染病原菌时，常会产生脓汁和粪便等病理样本。

对病原菌进行检测可以帮助医生诊断疾病和进行治疗。

脓汁是由细胞、细菌、炎性介质和液体组成的炎症渗出物。

脓汁样本的检测可以帮助医生确定炎症发生的部位和病原菌种类，对于引起严重感染的病原菌，如金黄色葡萄球菌和链球菌等，及时检测非常重要。

脓汁样本的采集可以通过穿刺或切开取材。

采集样本前需要进行局部消毒，避免产生假阳性结果。

采集后需要将样本送到合格的实验室进行细菌培养和鉴定。

细菌培养是目前脓汁样本中病原菌检测的主要方法。

样本在培养基上进行检测，通过观察培养基的变化和菌落的形态、颜色等特征，可以初步判断病原菌种类。

此外，还可通过病原菌的生化试验和抗生素敏感试验等来进一步鉴定。

粪便样本中的病原菌检测是临床常用的方法之一。

胃肠道感染、痢疾等疾病常表现为腹泻、呕吐、腹痛等症状，这些症状通常伴随着粪便的改变。

检测粪便样本中的病原菌可以帮助医生确定疾病的病因，进而制定合理的治疗方案。

采集粪便样本需要注意消毒和避免受到多余杂质的干扰。

采集的样本应放入干燥、无菌的容器中，并在24小时内送到实验室进行检测。

粪便样本中的病原菌检测方法分为培养法和分子生物学方法两种。

培养法是常用的方法，具有价格低、操作简单、可检测多种病原菌等优点。

具体操作过程包括将样本放入培养基中，根据菌落形态、色素、大小等特征进行初步鉴定，进一步确定病原菌种类，最后进行抗生素敏感性试验。

分子生物学方法则通过检测病原菌的DNA或RNA序列进行鉴定，具有快速、灵敏、特异性高等优点。

目前已有多种分子生物学方法被应用于粪便样本中病原菌检测，如PCR、LAMP等。

综上所述，脓汁和粪便样本中病原菌的检测有助于医生确定疾病的病因，对于治疗方案的制定具有重要的指导意义。

在样本采集和实验室检测中需要严格遵守操作规程，以确保结果准确可靠。

综合性实验一脓汁和粪便标本中病原菌的检测从临床标本中分离细菌的目的是为了查找与疾病有关的病原菌，这对于临床治疗及预后调查是很有价值的。

所以，在分离时应掌握以下原则，以便指导检出病原菌，避免漏诊误诊。

1．了解微生物在人体的分布。

人体的很多部位与外界相通，存在正常菌群，分离时应注意标本中的菌群是正常菌群的污染，还是致病菌。

另外，机体的某些部位(如血液、骨髓)是无菌的，如检出细菌，应视为致病菌。

2．了解标本来源及临床情况，以便有目的地检出病原菌。

3．根据标本来源和可能存在的病原菌确定选用各种分离培养基，以提高检出率。

如血平板可用于化脓性链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎球菌等的分离。

常见的化脓性病原菌有葡萄球菌、链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、假单胞菌、流感杆菌等。

脓汁标本在做细菌分离培养的同时，均须直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体，芽胞有无，为临床提供最初的诊治依据。

粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基(如SS、伊红美蓝平板，碱性蛋白胨水)，尽可能地抑制杂菌，以利于病原菌的检出。

粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、致病性大肠杆菌、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。

粪便标本中因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辩是否为病原菌，因此，粪便标本一般不作直接涂片检查，只有检查霍乱弧菌、结核杆菌、疑似葡萄球菌或艰难梭菌引起的伪膜性肠炎，以及菌群失调时，才作直接涂片检查。

细菌鉴定工作的原则及基本方法是：1、必须用纯的细菌培养物作鉴定。

因为不同的细菌生化反应结果相差较大，而反应结果是以阳性或阴性表示的，一旦用混合菌做生化反应，结果不可分析。

2、鉴定方法的选择。

测定细菌特征的实验方法很多，应根据鉴定目的选择有价值的、快速简便的试验项目，既能完成鉴定，试验项目又尽可能少。

一、培养基的制备Preparation of Culture Media【实验目的】1了解细菌生长的基本营养条件。