下调组织蛋白酶B对人食管鳞癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

空国塞旦匡刊!Q!!生!旦筮!!鲞筮!翅￡塾i望!塑』!望婴型堕里!!鲤!型丛塑!堕堡坠!!：!!!!：!!!：!!：堕!：!57冬凌草甲素联用刺五加皂甙对Ec一9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用孙明月王留兴李月华孙桢【摘要】目的研究冬凌草甲素与刺五加皂甙联用对裸鼠E c一9706模型的抑瘤作用。

方法以E c一9706细胞株接种裸鼠制成荷瘤模型，研究冬凌草甲素与刺五加皂甙联用高、中、低剂量组与阳性对照组比较对荷瘤裸鼠的抑瘤效应。

结果高、中、低剂量组及阳性对照组1和2的抑瘤率分别为35．1％，37．1％，43．1％，49．6％和19．2％，与空白对照组比较差异均有统计学意义，高、中、低剂量组和阳性对照组1、阳性对照组2相比，差异有统计学意义(P<0．01)；三个剂量组间差异无统计学意义(P>0．05)。

结论冬凌草甲素与刺五加皂甙联用对E c一9706荷瘤裸鼠有明显的抑瘤作用，能提高生命质量。

【关键词】冬凌草甲素；刺五加皂甙；抑瘤作用恶性肿瘤严重危害着人类的健康，在各类疾病死因中居前位，如何有效防治恶性肿瘤已成为医药界的重大课题…。

近年来国内外在肿瘤防治中己取得不少进展，主要采用手术、化学治疗、放射治疗及生物治疗等综合措施。

但是对于中晚期恶性肿瘤的临床治疗具有一定的局限性、且效果不佳。

近年我国传统医学中的中药成为抗肿瘤药物研究的热点。

中药复方制剂在控制肿瘤增殖、减毒增效、预防复发、延长生存期、改善生活质量等方面具有独特的优势旧J。

本实验中采用两味中药提取物以研究其对E c一9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用。

本实验通过对冬凌草与刺五加提取物——甲素与皂甙对E c一9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用的观察，以期为临床联合应用冬凌草甲素与刺五加皂甙提供依据。

1材料与方法1．1研究材料：冬凌草有效成分甲素由河南省科学院天然植物研究所提供，刺五加有效成分皂甙购于吉林大学医学院有机化学教研室。

消癌平注射液(南京圣河药业有限公司，批准文号：国药准字Z20025868)，平阳霉素(天津太河制药有限公司，批准文号：国家准字H12020933)。

下调miR-21表达抑制食管鳞癌EC9706细胞中K-
ras表达的研究的开题报告
研究背景：
食管鳞癌是一种高度侵袭性的肿瘤，对人体健康造成很大的危害。

miRNAs是一种非编码小分子RNA，能够通过结合靶基因的3'非翻译区，调节靶基因的表达。

miR-21作为一种普遍表达于多种癌症中的miRNA，在食管鳞癌中的表达水平也显著升高，并且与肿瘤的发生、发展密切相关。

K-ras是一个可激活多种信号通路的重要蛋白质，其在食管鳞癌中的异常表达也被广泛研究。

本研究旨在探究下调miR-21表达对食管鳞癌EC9706细胞中K-ras表达的影响。

研究内容：
在本研究中，将通过构建miR-21下调表达的EC9706细胞模型，利用PCR检测细胞中K-ras mRNA的表达量，并进行Western blot和免疫荧光染色检测K-ras蛋白的表达水平。

此外，将采用MTT法检测细胞增殖情况及Transwell法检测细胞迁移能力的变化。

预期成果：
本研究预计可以得出下调miR-21表达抑制EC9706细胞中K-ras表达及细胞增殖、迁移的结论。

这将有助于深入理解miR-21对食管鳞癌的重要性，并拓宽食管鳞癌治疗的研究方向。

组织蛋白酶B特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用张红;娄欣;曹学全;孙淼淼;高冬玲;张岚;宋一民;李冰;陈奎生【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2007(042)001【摘要】目的:探讨组织蛋白酶B(CB)特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用.方法:将体外转录合成的针对CB的特异性siRNA设10 μmol/L、15 μmol/L和20 μmol/L 3个不同剂量转染人食管癌EC9706细胞,用Boyden chamber体外侵袭实验检测转染前后细胞体外侵袭力的变化.对照组设无关siRNA 转染组、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不进行任何操作).结果:和正常对照组相比,特异性siRNA 15μmol/L组和20 μmol/L组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P＜0.05),而10 μmol/L特异性siRNA组、空白对照组和无关siRNA转染组与正常对照组之间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:特异性CB siRNA能有效抑制人食管癌EC9706细胞的体外侵袭力.【总页数】3页(P17-19)【作者】张红;娄欣;曹学全;孙淼淼;高冬玲;张岚;宋一民;李冰;陈奎生【作者单位】郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052;郑州大学第一附属医院病理科,河南省肿瘤病理重点实验室,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.siRNA靶向沉默MALAT-1基因对人食管癌EC9706细胞体外侵袭迁移的影响[J], 张璞;薛锋;周斌2.组织蛋白酶B特异性siRNA对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B基因表达的影响 [J], 娄欣;张红;曹学全;孙淼淼;高冬玲;张岚;宋一民;李冰;陈奎生3.人脐带间充质干细胞裂解液在体外对食管癌EC9706细胞增殖与迁移的抑制作用[J], 刘富磊;齐博;赵宝生;姚文建;李汉臣;白玉;钟根深4.人脐带间充质干细胞对食管癌细胞EC9706增殖、迁移和对裸鼠移植瘤的抑制作用 [J], 姚文健;白玉;赵宝生;刘尚国;齐博5.下调组织蛋白酶B对人食管鳞癌EC9706细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制[J], 冯天平;赵景志;尹磊;陈奎生;李晟磊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

2me对食管癌ec9706细胞系增殖凋亡及cyclin b1和cmyc基因表达的影响唰呻唰adw 恻恻唰吨，h mm州FD 唰唰4 川刷刷句。

阳川moo mm川川A E，州州Y 4『二仲L仇仔者作文论位学原创性声明本人郑重声明 t 所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。

除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。

对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。

本声明的法律责任由本人承担。

学位论文作者: 注: 日期: ):J/)年{ 月/- 日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。

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1/ 3保密论文在解密后应遵守此规定。

H 期: /o 年 b 月 (0 R 摘耍摘要二甲氧基雌二醇 (2-methoxyestradiol ， 2-ME) 是 17- 雌二醉在体内的生理代谢产物，它具有抑制多种肿瘤细胞生长和抗血管尘成的活性，但作用机制尚不明确。

本文以食管癌 EC9706 细胞系为对象，研究 2-ME 对 EC9706 细胞的生长抑制和诱导凋亡效果，并初步考察其作用机制。

1. 2-M 配对配 C9706 细胞增殖及凋亡的影响 EC9706 细胞系分别经 0 .1， 0.5 ， 1 ， 2 ， 5 ， 10 J1 moVL 2-ME 处理 24 ，48 和 72h 后进行生长抑制分析。

Mr 法检测其对 EC9706 细胞的生长抑制效果，结果以实验组细胞存活百分比表示。

抑制USP9x表达增强食管癌Ec9706-R细胞的放射敏感性晋瑞; 金迎迎; 王敏聪; 惠文涛; 李毅; 李芳; 贾辉; 潘继元; 马红兵【期刊名称】《《中国癌症杂志》》【年(卷),期】2019(029)007【总页数】8页(P486-493)【关键词】泛素特异性蛋白酶9x; 放射抗拒食管癌细胞; 放射敏感性; 抗髓样细胞白血病-1【作者】晋瑞; 金迎迎; 王敏聪; 惠文涛; 李毅; 李芳; 贾辉; 潘继元; 马红兵【作者单位】西安交通大学第二附属医院医学影像科陕西西安710004; 西安交通大学第二附属医院肿瘤放疗科陕西西安710004; 西安交通大学第二附属医院肿瘤科陕西西安710004【正文语种】中文【中图分类】R735.1在我国癌症的发生率和死亡率逐年增加，从2010年开始癌症已成为我国人口死亡的主要原因。

食管癌的发生率已跃居我国恶性肿瘤发病的第3位，死亡率位居第4位[1］。

放疗是中晚期食管癌患者最主要的治疗手段，但是放疗抗拒严重影响了食管癌的放疗效果[2-3］。

因此克服食管癌的放疗抗拒仍然是治疗食管癌的一大挑战。

泛素化在包括癌症在内的多种生物学过程中具有重要的调节作用。

它通过泛素化酶和去泛素化酶的活动调节胞内蛋白可逆的翻译后修饰，从而几乎控制蛋白质功能的所有方面[4-5］。

泛素特异性蛋白酶（ubiquitin-specific proteases，USPs）是去泛素化酶中最大的一个家族。

USP9x是USPs家族的一员，它与多种肿瘤的发生、发展以及肿瘤细胞的放射抗拒相关[6-8］。

Peng等[9］的研究显示，USP9x 的表达与食管鳞状细胞癌的浸润深度和淋巴结转移相关，且USP9x高表达与食管鳞状细胞癌患者较差的生存率有密切联系，但目前它对食管癌细胞放射抗拒的作用尚未见报道。

本研究利用小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）技术在我们建立的放射抗拒食管癌Ec9706-R细胞中沉默USP9x基因，观察该基因沉默对Ec9706-R细胞放射敏感性的影响，并探讨其可能的作用机制，旨在为临床上降低食管癌的放疗抗拒提供科学依据。

三氧化二砷对食管癌细胞系EC9706作用的研究栗敏;马洪宇;赵培荣;樊青霞;王留兴【期刊名称】《肿瘤基础与临床》【年(卷),期】2006(19)1【摘要】目的探讨不同浓度三氧化二砷(As2O3)对食管癌细胞系EC9706的生长抑制作用及其机理.方法不同浓度三氧化二砷作用于细胞EC9706,采用MTT法检测细胞生长,倒置显微镜观察细胞形态,并通过DNA梯状电泳和流式细胞仪检测凋亡.结果三氧化二砷剂量依赖性抑制细胞生长;观察到典型的细胞凋亡形态学特征性改变;琼脂糖电泳呈现凋亡DNA梯状条带;流式细胞仪分析,细胞株EC9706存在明显的G0/G1期阻滞.结论As2O3具有抑制食管癌细胞株EC9706生长作用,其机理是诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞.【总页数】3页(P10-12)【作者】栗敏;马洪宇;赵培荣;樊青霞;王留兴【作者单位】郑州大学第一附属医院肿瘤科,河南,郑州,450052;郑州市中医院,河南,郑州,450007;郑州大学第一附属医院肿瘤科,河南,郑州,450052;郑州大学第一附属医院肿瘤科,河南,郑州,450052;郑州大学第一附属医院肿瘤科,河南,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.管通方醇提物对人食管癌 EC9706细胞抑制作用的研究 [J], 李建省;靳锋;王宝蕊;张竹君;杨维建;丁文君;张新丽;徐进2.TSA对食管癌细胞系EC9706细胞周期作用及分子机制的探讨 [J], 刘霞;冯婷;马俊芬;赵继敏;杨洪艳;黄幼田;董子明3.鞣酸对人食管癌细胞系EC9706的抑制作用 [J], 童强;陈滋华;吴清明;王小虎;王强4.曲古霉素A对食管癌细胞系EC9706细胞凋亡的作用及机制 [J], 刘霞;冯婷;马俊芬;赵继敏;黄幼田;董子明5.卡培他滨对食管癌细胞系EC9706细胞毒性和放射增敏作用的研究 [J], 曲智锋;高社干;张洛;韩晶;单探幽;冯笑山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

细胞因子诱导的杀伤细胞对食管癌EC9706细胞杀伤作用的实验研究刘桂举;梅家转;李瑞君;栗敏;林宏伟【期刊名称】《河南医学研究》【年(卷),期】2011(20)2【摘要】目的:研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对食管癌EC9706细胞的杀伤作用.方法:流式细胞仪检测EC9706细胞NKG2D配体的表达,乳酸脱氢酶释放法测定CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性,裸鼠体内实验验证CIK细胞对肿瘤的影响.结果:EC9706细胞表达MICA和ULBP2,不表达MICB,ULBP1和ULBP3;效靶比10∶1、20∶1、30∶1时CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性分别为(28.81±0.47)%、(37.78 ±0.22)%和(44.31±1.06)%,提示随着效靶比增高,CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤活性踢显增强(P＜0.05);相关分析表明CIK细胞的杀伤活性与CIK细胞表面NKG2D表达及CIK细胞中CD3+CD56+数目密切相关;体内抑瘤实验对照组和治疗组成瘤时间和瘤重差异均具有统计学意义(P＜0.01),治疗组的抑瘤率为35.19%,并且组织病理显示治疗组有较多的淋巴细胞浸润和坏死区.结论:CIK细胞对EC9706细胞具有体内外杀伤作用,有希望成为治疗食管癌的免疫效应细胞.【总页数】4页(P134-137)【作者】刘桂举;梅家转;李瑞君;栗敏;林宏伟【作者单位】郑州人民医院,肿瘤内科,河南,郑州,450003;郑州人民医院,肿瘤内科,河南,郑州,450003;郑州人民医院,肿瘤内科,河南,郑州,450003;郑州人民医院,肿瘤内科,河南,郑州,450003;郑州人民医院,肿瘤内科,河南,郑州,450003【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.细胞因子诱导的杀伤细胞对胃癌细胞的杀伤作用的实验研究 [J], 刘菊香;成祥林;陈铭2.三种来源细胞因子诱导的杀伤细胞对人食管癌裸鼠原位移植肿瘤的转移抑制作用[J], 姚文健;白玉;赵宝生3.NKG2D介导CIK细胞对食管癌EC9706细胞杀伤作用的体外研究 [J], 梅家转;刘桂举;栗敏;林宏伟;李瑞君4.细胞因子诱导的杀伤细胞免疫表型及其对EC9706细胞杀伤活性的影响 [J], 刘桂举;梅家转;栗敏;林宏伟;李瑞君5.细胞因子诱导的杀伤细胞对Raji细胞的杀伤效应及其机制的实验研究 [J], 王平乐;董毅;夏瑞祥;曾庆曙;蔡学杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

食管鳞癌中mTOR/p70S6K信号通路的作用及其阻断策略侯桂琴【摘要】:雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin,mTOR)信号通路在肿瘤发生发展中起重要作用,因而也越来越受到人们的关注。

mTOR是一种非典型的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属于磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶(PIKK)家族。

在哺乳动物中,mTOR下游有两个主要的靶分子,一个是核糖体S6激酶(S6K),另一个是真核翻译起始因子(eIF4E)结合蛋白1(4E-BP1)。

mTOR的激活导致了S6K和4E-BP1的磷酸化,磷酸化的4E-BP1可以从帽-依赖性翻译起始因子 eIF4E上释放出来,最终增强了与细胞生长有关的基因的翻译。

这两个过程也可能与其他的mTOR靶点一起增强了核糖体的生物合成及一些特殊mRNA的选择性翻译。

许多研究证明,mTOR被认为是肿瘤治疗中重要且有前景的治疗靶点,其抑制剂目前正在进行临床及临床前研究,试用于多种癌症如肾细胞癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌及小细胞肺癌等。

食管鳞癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,尤其在我国河南省林州市(林县),食管鳞癌的发生率及死亡率均很高。

但是,mTOR及其信号通路的激活状态在食管鳞癌中尚未见报道,这促使我们研究mTOR/p70S6K信号通路在食管鳞癌发生发展中的作用,为治疗食管鳞癌寻找新的靶点。

在本研究中,我们检测了食管鳞癌细胞系EC9706和Eca109中mTOR及其主要下游因子的激活状态,并检测了雷帕霉素和抗mTOR的小干扰RNA(siRNA agains t mTOR,以下简称mTOR-siRNA)对通路中各因子mRNA及蛋白表达的影响以及对细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。

而且,还观察了雷帕霉素和mTOR-siRNA对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。

结果显示,mTOR/p70S6K信号通路在食管鳞癌中是异常激活的,并且癌细胞的分化程度越低,激活状态越高;另外,还证实雷帕霉素能特异性抑制mTOR/p70S6K信号通路并诱导细胞凋亡,而mTO R-siRNA不仅能抑制信号通路,还能提高细胞对雷帕霉素和顺铂的敏感性。