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血栓与止血检验的基本方法一、一期止血缺陷筛查试验要点1：出血时间（bleeding time，BT）（1）原理：测定在皮肤受特定条件外伤后，出血自然停止所需的时间即为出血时间。
BT反映了毛细血管与血小板的相互作用，包括内皮下组织与血小板黏附（通过vWF的作用）、血小板的聚集和释放等反应，以及PGI2与TXA2的动态平衡。
（2）临床意义出血时间延长见于血小板减少症；先天性血小板功能异常，如血小板无力症、血小板贮存池病；获得性血小板功能异常，如尿毒症、药物影响、异常蛋白血症、骨髓增生性疾病；血管性血友病；遗传性血管周围结缔组织病如艾-唐综合征。
一般凝血因子缺乏出血时间不延长，但某些严重的因子缺乏（如因子Ⅹ和Ⅺ）及无纤维蛋白原血症可以延长。
出血时间缩短见于某些严重的高凝状态和血栓性疾病。
此外，出血时间还广泛用于外科手术前的出血筛选和抗血小板药物的监控，以免发生出血。
（3）注意事项试验前一周患者应停服阿司匹林、噻氯吡啶等抗血小板的药物。
要点2：束臂试验（tourniquet test或capillary fragility test，CFT）（1）原理通过前臂局部加压，使静脉血流受阻，给予毛细血管以负荷，观察前臂皮肤一定范围内新出现的出血点数目，来估计血管壁的完整性及其脆性。
（2）参考值5cm直径圆圈内新出血点的数目：男性少于5个；女性及儿童少于10个。
（3）临床意义新出血点的数目超过正常为阳性，见于①血管壁结构和（或）功能缺陷，如：遗传性出血性毛细血管扩张症、过敏性紫癜、单纯性紫癜及其他血管性紫癜。
②血小板的量和（或）质异常，如：原发性和继发性血小板减少症、血小板增多症、先天性（遗传性）和获得性血小板功能缺陷症。
③血管性血友病（vWD）。
二、二期止血缺陷筛查试验要点3：凝血酶原时间测定（prothrombin time，PT）（1）原理：在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶（人脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液）和钙离子，使凝血酶原变为凝血酶，后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白。
有关血栓与止血检测项目的临床应用一．凝血障碍性疾病1．筛选试验选用APTT和PT作为筛选试验，根据筛选试验的结果，大致有以下四种情况：（1）APTT和PT都正常：除正常人外，仅见于遗传性和继发性因子ⅩⅢ缺乏症。
获得性者常由于严重肝病、肝脏肿瘤、恶性淋巴瘤、白血病、抗因子ⅩⅢ抗体、自身免疫性溶血性贫血和恶性贫血等引起。
（2）APTT延长伴PT正常：多数是由于内源性凝血途径缺陷所引起的出血性疾病，如血友病A、血友病B、因子Ⅺ缺陷症；血循环中有抗因子Ⅷ、抗因子Ⅸ或抗因子Ⅺ抗体存在；DIC时可见因子Ⅷ、因子Ⅸ、Ⅺ减低；肝脏疾病时可见因子Ⅸ、Ⅺ减少；口服抗凝剂时可见因子Ⅸ减少。
（3）APTT正常伴PT延长：多数是由于外源性凝血途径缺陷所引起的出血性疾病，如遗传性和获得性因子Ⅶ缺乏症，获得者常见于肝脏疾病、DIC、血循环中有抗因子Ⅶ抗体存在和口服抗凝剂等。
（4）APTT和PT都延长：多数是由于共同途径缺陷所引起的出血性疾病。
如遗传性和获得性因子Ⅹ、Ⅴ、凝血酶原（因子Ⅱ）和纤维蛋白原（因子Ⅰ）缺乏症；获得性者主要见于肝脏疾病和DIC，口服抗凝剂时凝血因子Ⅹ和凝血酶原减低。
此外，血循环中有抗因子Ⅹ、抗因子Ⅴ和抗因子Ⅱ抗体存在时，它们也相应延长。
临床应用肝素治疗时，APTT和PT也都相应延长。
2．血友病和血管性血友病的基因诊断：（1）血友病A：可采用：a.间接基因诊断b.直接基因诊断（2）血友病B：由于因子Ⅸ基因小，所以血友病B可用直接基因测序的方法来解决：（3）血管性血友病（von Willebrand disease, vWD）的基因诊断：vWD携带者检测和产前诊断也是利用多态性标记进行间接诊断。
当然，对于明确缺陷的家系，亦可用缺陷基因作直接诊断。
①可变数目的串联重复顺序（ATCT），其杂合子频率高，在白种人群中杂合子频率为98%；②限制性内切酶片段长度多态性（RFLP），利用这些多态性标记，可对部分家系作携带者检测和产前诊断。
