茜草提取物对胃癌MGC-803细胞株的诱导凋亡及抗增殖作用
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茜草的功效与作用茜草的食用方法茜草的功效与作用是什么?茜草属于止血药,茜草为茜草科植物茜草的根及根茎,南北各地均产,春、秋两季均可采挖,去掉茎苗,洗净晒干,生用或炒用。
茜草的功效与作用:【性味与功效】味苦、性寒。
功效:凉血止血,行血祛瘀。
【传统应用】主治各种血热妄行之出血症,如咯血、呕血、便血、尿血、肌衄、鼻衄、崩漏等。
也主治妇女闭经、月经不调、产后恶露不下、关节疼痛,跌仆损伤等病症。
本药常用于以下传统方剂:①茜梅丸(《本事方》):茜苹根、艾叶、乌梅肉,治疗血衄无时;②茜草丸(《圣济总录》):茜草、雄黑豆、甘草,治疗吐血后虚热燥渴。
止血名方十灰散中也有茜草根。
【主要成分】主要含蒽醌类、萘醌类茜草酸苷、环烯醚萜类等成分。
1.蒽醌类:为茜草属植物的主要成分,分离出蒽醌类单体49个。
2.萘醌类:为蒽醌类生物合成的中间体,已分离出8个。
3.环己肽类:目前分离出该类成分6个,为茜草属植物的抗癌活性成分。
4.萜类:从茜草及其变种黑果茜草中分得多个五环三萜。
5.多糖:从茜草分得3种多糖(RPS一1,一2,一3),RPS一2和RPS-3有较明显的清除自由基的作用。
6.微量元素如铁、铜、锌、锰等。
7.其他成分。
【药理作用】(一)止血作用茜草根水浸液可缩短家兔凝血时间。
对凝血的三个阶段-凝血活酶生成、凝血酶生成、纤维蛋白形成都有促进作用。
还可能与抗肝素效能有关。
(二)升白作用茜草酸苷工、茜草酸苷Ⅱ都能使狗的外周白细胞数量升高。
该两种苷的苷元相同,由此而合成茜草双酯片(1,4-萘二酚2,3二羟基乙酯)具有升白作用,能促进造血干细胞增殖分化,促使贮存的粒细胞释放,并能防治环磷酰胺等化疗药物引起的白细胞减少症。
目前已经临床应用多年。
茜草提取物408茜苷(茜草酸葡萄糖苷)具有升白作用和治疗急性放射病的作用,对gamma;射线受照小鼠T淋巴细胞有明显的保护作用,提示茜苷可加强小鼠的细胞免疫功能。
(三)抗癌作用茜草根甲醇提取物具有显著的抗小鼠S180和P388白血病活性。
黄芩素抑制胃癌MGC-803细胞增殖和迁移孙沛林;朴日龙;王莹;任香善;陈丽艳;林贞花;朴英实【摘要】AIM: To investigate the effects of baicalein(BAI)on the proliferation and migration of gastric cancer MGC-803 cells and the mechanisms.METHODS:After MGC-803 cells were treated with BAI at different concen-trations,the viability of the MGC-803 cells was tested by MTT assay.The cell colony formation ability were detected by plate colony formation assay.Wound-healing and Transwell cell migration assays were used to test the migration ability of the MGC-803 cells.The concentration of 12-hydroxyeicosatetraenoic acid(12-HETE)was measured by ELISA.The pro-tein levels of platelet type 12-lipoxygenase(p12-LOX),vascular endothelial growth factor(VEGF),p-ezrin and epithelial-mesenchymal transition(EMT)markers in MGC-803 cells were determined by Western blot.RESULTS:BAI significantly inhibited the proliferation,plate colony formation and migration abilities of the MGC-803 cells(P<0.05 or P<0.01), down-regulated the concentration of p12-LOX metabolite 12-HETE significantly(P<0.05 or P<0.01), decreased the protein levels of p12-LOX,VEGF,p-ezrin,vimentin and Snail(P<0.05 or P<0.01),and increased the protein expres-sion of E-cadherin(P<0.01).CONCLUSION:BAI suppresses the proliferation and migration abilities of gastric cancer MGC-803 cells effectively.These effects of BAI may be related to regulating the protein levels of p12-LOX,VEGF,p-ezrin and EMT-related proteins.%目的:探讨黄芩素(BAI)对胃癌MGC-803细胞增殖和迁移的作用及机制.方法:MGC-803细胞用不同浓度BAI处理后,采用MTT法检测细胞的存活率;平板集落形成实验检测细胞的集落形成能力;划痕愈合实验和Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力;ELISA 检测12-羟基二十碳四烯酸(12-HETE)的浓度;Western blot实验检测血小板型12-脂氧合酶(p12-LOX)、血管内皮生长因子(VEGF)、p-ezrin和上皮-间充质转化(EMT)标志物蛋白的表达.结果:BAI可显著抑制MGC-803细胞的增殖、平板集落形成及迁移(P<0.05或P<0.01),显著下调p12-LOX代谢产物12-HETE的浓度(P<0.05或P<0.01),并显著下调p12-LOX、VEGF、p-ezrin、vimentin和Snail 蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01),上调E-cadherin蛋白的表达水平(P<0.01).结论:BAI可有效抑制胃癌MGC-803细胞的增殖和迁移,其机制与BAI调控p12-LOX、VEGF、p-ezrin及EMT相关蛋白的表达变化有关.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2018(034)003【总页数】6页(P417-422)【关键词】黄芩素;胃癌;细胞增殖;细胞迁移【作者】孙沛林;朴日龙;王莹;任香善;陈丽艳;林贞花;朴英实【作者单位】延边大学肿瘤研究中心,吉林延边133000;吉林省妇科肿瘤生物信息学重点实验室,吉林延边133000;延边大学医学院机能实验中心,吉林延边133000;延边大学肿瘤研究中心,吉林延边133000;吉林省妇科肿瘤生物信息学重点实验室,吉林延边133000;延边大学肿瘤研究中心,吉林延边133000;吉林省妇科肿瘤生物信息学重点实验室,吉林延边133000;延边大学肿瘤研究中心,吉林延边133000;吉林省妇科肿瘤生物信息学重点实验室,吉林延边133000;延边大学肿瘤研究中心,吉林延边133000;吉林省妇科肿瘤生物信息学重点实验室,吉林延边133000;延边大学肿瘤研究中心,吉林延边133000;吉林省妇科肿瘤生物信息学重点实验室,吉林延边133000【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R730.23胃癌是全世界最常见的消化道肿瘤之一,在中国、日本和韩国等这些亚洲国家具有较高的发病率[1]。
摘要茜草是我国一种传统中药,其化学成分以蒽醌及其糖苷类化合物为主,具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抑制人体表皮细胞增殖等生物活性,可作为天然抗氧化剂治疗由自由基引起的疾病,并且无毒副作用。
本实验结合吸附柱色谱法和薄层色谱法,辅助于结晶、重结晶等方法分离中药茜草乙酸乙酯萃取物中的抗氧化活性成分。
基于已有实验基础,选取低极性段冲洗下来的ⅡL系列物质为研究对象,以环己烷:乙酸乙酯作为洗脱体系进行进一步分离,经两次柱层析分离,得到较纯组分ⅣLBB。
ⅣLBB 组分通过结晶、重结晶进一步纯化得到单体化合物ⅡLBB-1;采用铁离子还原(FRAP) 法及二苯代苦味酰基自由基(DPPH) 法对ⅡL,ⅡLB,ⅡLBB-1 的总抗氧化活性及清除自由基活性进行了测定。
ⅣLBB-1经薄层色谱检测只有一个斑点,说明ⅡLBB-1组分是单体化合物;ⅡLBB-1的抗氧化活性高于ⅡL但低于ⅡLB,且都低于Vc、Ve。
关键词:中药茜草;柱层析;分离;抗氧化AbstractRubia Cordifolia L. is a traditional medicine of China. The main chemical composition is anthraquinones and its glycosides .It has antioxidant, antibacterial, anti-inflammatory, anti-tumor, inhibition of human epidermal cell proliferation and other biological activity, can be treated diseases caused by free radical as a natural anti-oxidant , and has no side effects.This study combined adsorption column chromatography and thin layer chromatography (TLC) to separate the antioxidant components from ethyl acetate extract of Chinese medicine Rubia Cordifolia L. Based on the original experiment, select ⅡL which was seperated from the section of low polar as the research object for further purification. Select the cyclohexane: ethyl acetate as elution system, after twice seperation, we obtain ⅡLBB fraction, then recrystallization, re-crystallized, ⅡLBB is obtained, TLC showed only one spot. So fraction ⅡLBB-1 is pure compound. The total antioxidant activity, scavenging of free radical activity of ⅡL,ⅡLB,ⅡLBB-1were evaluated by the iron reduction (FRAP) method and 1, 1-pheny-2-picrylhydrazyl(DPPH) method, use Vc, Ve as positive control. The results showed that the antioxidant activity of ⅡLBB-1 is higher than ⅡL but less than ⅡLB, and all lower than Vc, Ve.Keywords: Rubia Cordifolia L; free radicals; chromatography; antioxidant目录摘要 (I)Abstract (II)第1章文献综述 (1)1.1 药用植物茜草 (1)1.1.1 茜草简介 (1)1.1.2 茜草的主要化学成分 (1)1.1.3 茜草的药理作用 (1)1.2 分离方法 (4)1.2.1 结晶、重结晶法 (4)1.2.2 色谱法 (4)1.3抗氧化活性测定 (8)1.3.1 Fe3+还原(FRAP) 法 (8)1.3.2 硫代巴比妥酸(TBA) 法 (8)1.3.3 二苯代苦味酰基自由基(DPPH) 法 (8)1.4 本课题的研究背景 (9)1.4.1 什么是自由基 (9)1.4.2 自由基的产生及抗氧化 (9)1.5 本课题的研究意义 (10)第2章实验部分 (10)2.1 实验原料与仪器设备 (10)2.1.1 实验原料 (10)2.1.2 仪器设备 (11)2.2 实验方法 (11)2.2.1 ⅡL组分的分离 (12)2.2.2 ⅡLB组分的分离 (14)2.2.3 ⅡLBB-1组分的分离 (15)2.2.4 分离组分抗氧化活性的测定 (15)2.2.5 DPPH 法测定分离组分清除自由基能力 (17)第3章结果与讨论 (18)3.1 薄层色谱法显色分析浓缩后的样品 (18)3.1.1 ⅡL系列物质分离浓缩样品TLC显色分析 (18)3.1.2 ⅡLB系列物质分离浓缩样品TLC显色分析 (19)3.1.3 ⅡLBB-1组分分析 (20)3.2 茜草乙酸乙酯萃取组分的抗氧化活性分析 (21)3.2.1 组分总的抗氧化活性分析 (21)3.2.2 组分的清除自由基能力分析 (21)第4章结论与建议 (23)4.1 结论 (23)4.2 建议 (23)参考文献 (24)致谢 (25)第1章文献综述1.1药用植物茜草1.1.1茜草简介茜草别名蒨草、血见愁、地苏木、活血丹、土丹参、红内消、破血草、染蛋草、红根草等[1]。
蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用的形态学观察孙抒;金哲;李基俊【期刊名称】《四川中医》【年(卷),期】2005(23)2【摘要】目的 :探讨蛴螬提取物体外对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡的形态学观察。
方法 :通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜技术及吖啶橙 (AO) /溴化乙锭 (EB)荧光染色方法和免疫细胞化学技术检测蛴螬提取物对MGC 80 3胃癌细胞诱导凋亡作用的方式。
结果 :(1)光镜及电镜观察结果表明 ,蛴螬 (终浓度为4mg/ml)作用于MGC 80 3胃癌细胞 2 4h后 ,可见胞核固缩、胞核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化 ;(2 )经AO/EB荧光染色观察结果表明 ,当终浓度为4mg/ml的蛴螬作用于MGC 80 3细胞 2 4h后 ,其凋亡率和破膜率与自然凋亡率和破膜率相比均有显著性差异 ,其凋亡率为 86 3% (P <0 0 0 1) ,破膜率为 4 1 9% (P <0 0 0 1)。
说明蛴螬提取物确实有诱导MGC 80 3细胞凋亡的作用 ,同时也有细胞毒作用 ,但以诱导细胞凋亡为主。
(3)应用免疫细胞化学技术(S P法 )检测用药前后ki 6 7抗原的表达改变 ,探讨蛴螬提取物在体外对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖作用。
结论 :蛴螬提取物在体外对人MGC 80 3胃癌细胞株有显著抗增殖及诱导凋亡作用。
【总页数】4页(P12-15)【关键词】MGC-803;胃癌细胞株;体外;诱导凋亡;提取物;抗增殖;形态学观察;目的;方法;结论【作者】孙抒;金哲;李基俊【作者单位】延边大学医学院病理学教研室【正文语种】中文【中图分类】R735.2;R273.52【相关文献】1.蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株凋亡相关基因作用的研究 [J], 金哲;孙抒;李基俊;李雪梅2.桦褐孔菌提取物对人胃癌BGC-823细胞株诱导凋亡作用和抗增殖的机制 [J], 钟秀宏;孙东植;高宇;杨淑艳;崔基成3.桦褐孔菌提取物对胃癌MGC-803细胞株的抗增殖与诱导凋亡作用 [J], 李英秀;崔基成;孙东植;高元哲;崔永4.蛴螬联用羟基喜树碱体外对人MGC-803胃癌细胞株抗增殖及药物敏感性的研究[J], 孙百研;孙抒;金哲;李基俊5.茜草提取物对胃癌MGC-803细胞株的诱导凋亡及抗增殖作用 [J], 朴成哲;孙东植;宋京郁因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
重楼总皂苷对胃癌细胞株MGC-803生长的抑制作用贾科;吴庆琛;张成【摘要】Purpose To investigate the inhibitory effects of total saponins of paris polyphylla root on growth of gastric carcinoma cell line MGG-803, and to explore molecular mechanism of its actions. Methods MTT assay was used to determine the inhibitory effect of total saponins of paris polyphylla root on the growth of MGG-803 cells. The changes of cell cycle and apoptotic rate of the cells were detected by flow cytometry. The expressions of EphA2, survivin and Caspase-3 were respectively examined by flow cytometry. Results After incubation with different concentrationsof total saponins of paris polyphylla root for 12 to 72 h, the growth of MGG-803 cell was significantly inhibited in time-and dose-dependent manner. Total saponins of paris polyphylla root at different concentrations blocked the cells at S phase and increased the apoptotic rate, and significantly down-regulated the protein expressions of EphA2 and survivin, while upregulated the expression of Caspase-3 protein in MGG-803 cells. Conclusion The mechanism may be related to down-regulating protein of EphA2 and surviving, and as well as up-regulating the protein of Caspase-3.%目的:研究重楼总皂苷对胃癌细胞株MGC-803生长的抑制作用,并探讨其作用机制.方法:采用MTT法检测重楼总苷对MGC-803细胞生长的抑制作用,采用流式细胞术测定细胞周期变化及细胞凋亡率,并分析E-phA2、survivin及Caspase-3蛋白的表达变化.结果:重楼总皂苷可显著抑制MGC-803细胞的生长,并且呈时间-刺量依赖关系;可阻滞细胞于S期,诱导细胞凋亡率的升高;可显著抑制EphA2、survivin蛋白的表达,同时上调Caspase-3蛋白的表达.结论:其作用机制可能与下调EphA2和survivin的表达以及促进Caspase-3的表达有关.【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2011(032)004【总页数】4页(P284-286,290)【关键词】重楼总皂苷;胃癌;MGC-803;细胞凋亡;EphA2;survivin蛋白;Caspase-3蛋白【作者】贾科;吴庆琛;张成【作者单位】重庆医科大学附属第一医院,重庆,400016;川北医学院附属医院,四川南充,637000;重庆医科大学附属第一医院,重庆,400016;重庆医科大学附属第一医院,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】R285.5胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病率位居各类肿瘤的首位,胃癌的治疗除了手术、放疗和化疗外,中医药治疗也越来越受到人们的关注[1]。
抗癌口服液体外对人胃癌MGC-803细胞株的抗增殖作用及药物敏感性的研究许相范;孙抒;孙百研;金哲;李雪梅【期刊名称】《中国中医药科技》【年(卷),期】2003(010)004【摘要】目的:探讨抗癌口服液体外给药对胃癌MGC-803细胞株的抗增殖作用并观察其药物敏感性.方法:应用MTT法、生长曲线及集落形成率的测定研究该中药在体外对人胃癌细胞株增殖的抑制作用及药物敏感性.结果:用MTT法和生长曲线的检测结果表明,该中药在体外对MGC-803胃癌细胞株有明显抑制作用,加药组与对照组相比其生长抑制率有显著性差异(P<0.01),而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性.通过集落形成率的测定结果表明,加药组与对照组相比其集落形成率和集落形成抑制率有显著性差异(P<0.01),说明该中药对MGC-803胃癌细胞株有明显的抗增殖作用.结论:该中药在体外能够抑制胃癌细胞增殖,并对MGC-803胃癌细胞株有较好的敏感性.【总页数】2页(P203-204)【作者】许相范;孙抒;孙百研;金哲;李雪梅【作者单位】延边大学肿瘤研究中心·延吉,133000;延边大学肿瘤研究中心·延吉,133000;延边大学肿瘤研究中心·延吉,133000;延边大学肿瘤研究中心·延吉,133000;延边大学肿瘤研究中心·延吉,133000【正文语种】中文【中图分类】R273.52【相关文献】1.CIK细胞对MGC-803胃癌细胞株抗增殖及诱导凋亡作用的研究 [J], 孙抒;李雪梅;王建光;杨万山;李香丹2.MTT法检测体外培养人胃癌细胞株MGC-803对苦参素注射液的药物敏感性 [J], 朱艳琴;鲁光华;徐玉芳3.桦褐孔菌提取物对胃癌MGC-803细胞株的抗增殖与诱导凋亡作用 [J], 李英秀;崔基成;孙东植;高元哲;崔永4.蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用的形态学观察 [J], 孙抒;金哲;李基俊5.茜草提取物对胃癌MGC-803细胞株的诱导凋亡及抗增殖作用 [J], 朴成哲;孙东植;宋京郁因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
茜草的研究进展摘要:本文介绍了现代茜草在化学、炮制变化和提取工艺等方面的研究现状以及对炮制提取方面的一些优化,并借此对茜草研究的前景提出了自己的一些看法。
关键词:茜草;茜草炭;化学成分;炮制工艺茜草主要为茜草科植物茜草Rubia cordifolia L.的干燥根及茎,又被称作四轮草、拉拉蔓、过山藤、小活血等。
茜草在我国大部分地区都有分布,其中陕西渭南河南洛阳河北邢台等地茜草产量较高[i]。
茜草味苦,性寒,归肝心经,具有行血祛瘀,凉血止血,止咳祛痰等作用[ii]。
茜草长期以来作为天然的染料和药用植物得到广泛使用。
现代研究表明茜草能显著抑制表皮细胞增殖活性,且具有抗癌活性的作用[iii]。
正文提纲1 化学成分研究1.1蒽醌及其苷类1.2萘醌及其苷类1.3多糖类1.4 环己肽类1.5萜类1.6微量元素2 病理作用研究2.1止血作用2.2抗癌作用2.3抗菌作用2.4抗氧化作用2.5 免疫抑制作用2.6祛痰和抗乙酰胆碱作用3.炮制方面3.1炮制工艺3.2炮制工艺的优化3.3炮制前后药理作用的变化4提取工艺4.1超声提取4.2有机溶剂热回流提取4.3微波提取4.4微型化提取1.化学成分1.1蒽醌及其苷类蒽醌类物质是茜草的主要有效化学成分之一,茜草根的乙醇提取物中, 蒽醌类成分有茜草素、1-羟基-2-甲基-蒽醌、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-(O-6-乙酰基)新橙皮苷、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O新橙皮苷、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-(O-6-乙酰基)-β-D吡喃葡萄糖苷、羟基茜草素、异茜草素、伪羟基茜草[iv]。
王素贤等又分得八个蒽醌类化合物:1, 6-二羟基-2-甲基蒽醌-3-β-乙酰基-葡萄糖苷(2-1)木糖苷、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌、1-羟基蒽醌、1,2,4-三羟基蒽醌、1,3,6- 三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷、1,2-二羟基蒽醌-O-B-D吡喃木糖(1-6)-β-D吡喃葡萄糖苷、1,3-二羟基-2-羟甲基蒽醌-3-O-β-D吡喃木糖(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷及1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃木糖(1-2)-β-D(6-O-乙酰基)吡喃葡萄糖苷[v],其中1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-β-D-吡喃木糖(1-2)-β-D(6-O-乙酰基)吡喃葡萄糖苷为一新化合物,而甲醇提取物中蒽醌类成分有: 3-甲氧甲酸-1-羟基蒽醌、14-二羟基-2-甲基蒽醌、1-羟基-2-甲基蒽醌、1-羟基-2-羟甲基蒽醌、柚木醌[vi]。
塞来昔布抑制人胃癌细胞MGC803细胞增殖及其分子机制罗苏明;周毅【期刊名称】《新疆医学》【年(卷),期】2013(043)008【摘要】目的:研究塞来昔布在体外对人胃癌细胞MGC803生长增殖及其抗肿瘤的相关分子机制.方法:体外培养人胃癌细胞MGC803,MTT法检测塞来昔布在相同浓度下,不同时间对于胃癌细胞增殖的影响,并计算IC50值;RT-PCR法检COX-2、MMP-9的mRNA的表达影响;结果:MTT结果显示:相同干预浓度塞来昔布抑制人胃癌细胞增殖,其24 h,48 h,72 h的IC50分别为:(98.67±11.755)μmol/L、(67.506±6.646)μmol/L、(57.662±15.809)μmol/L; RT-PCR结果显示:人胃癌细胞MGC803正常对照组及塞来昔布干预组COX-2mRNA灰度值分别为:0.918±0.031,0.301±0.002(t =16.037,P=0.000);MMP-9mRNA灰度值分别为:0.928±0.041,0.360±0.012(t =10.487,P=0.003);结论:塞来昔布抑制胃癌细胞增殖,塞来昔布抗肿瘤机制可能通过抑制COX-2及MMP-9的mRNA的表达来实现的.【总页数】4页(P10-13)【作者】罗苏明;周毅【作者单位】830001新疆乌鲁木齐新疆维吾尔自治区人民医院胃肠外科;830001新疆乌鲁木齐新疆维吾尔自治区人民医院胃肠外科【正文语种】中文【相关文献】1.新加良附方抑制人胃癌细胞增殖的分子机制 [J], 李亚;石凤芹;朱陵群;田劭丹;董青;侯丽2.南蛇藤提取物增强抑癌基因Maspin抑制人胃癌细胞株MGC803侵袭能力的研究* [J], 钱亚云;金凤;白云飞;曹玲;刘延庆;姜馨;吉兰芳;杨林;朱耀东;陈珏;顾昊3.巴马汀和小檗碱对人胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用 [J], 赵伟;张秀珍4.塞来昔布抑制人结肠癌细胞Caco-2细胞增殖及其分子机制 [J], 罗苏明;刘妍芳;韩振魁;斯坎德尔·努尔买买提;李鹏;郑建忠5.毛茛有效部位D1对人胃癌细胞MGC803细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步研究 [J], 朱峰妍;虞迪;成旭东;曹志飞;王薇丹;鲍美美;蒋小岗;顾振纶因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
实验研究CHINESE COMMUNITY DOCTORS南蛇藤属于卫矛科南蛇藤属植物,是我国重要的药用植物,主要用于抗炎镇痛、活血消肿、祛风解毒等[1]。
近年来,有关南蛇藤乙酸乙酯提取物(COE)抗肿瘤免疫机制方面的研究越来越多。
大量国内外研究表明,从中药南蛇藤提取的有效成分COE具有很好的抗肿瘤活性。
它已被证实通过细胞毒作用、抑制肿瘤细胞的迁移侵袭与增殖,促进肿瘤细胞凋亡等多种机制发挥抗肿瘤作用[2]。
本实验将不同浓度COE作用于胃癌细胞系MGC-803,经24h、48h培养后,观察COE对胃癌细胞生长抑制及细胞周期的影响,为COE抑制胃癌的机制进行理论上的探索,更重要的是为开发生物利用度高的抗肿瘤新药提供理论和实验依据。
资料与方法细胞株:人胃癌细胞系MGC-803,由中南大学湘雅医学院病理实验室传代培养。
实验试剂:①南蛇藤:西安文竹生物科技有限公司(批号071254);②5-氟尿嘧啶:凯立德生物医药技术(上海)有限公司;③MTT:Sigma公司;④RPMI1640培养基和胎牛血清:美国GIBCO公司;⑤二甲基亚矾:上海莼试生物技术有限公司;⑥胰蛋白酶:GIBCO公司;⑦酶联免疫检测仪:美国宝特公司;⑧流式细胞仪:美国BD公司;⑨CO2培养箱:美国NAU-RE公司。
实验方法:⑴药物制备:将南蛇藤茎切断,粉碎成粉,烘干(20kg),95%乙醇(150L)加热回流提取3次,3h/次,合并回收溶剂后减压浓缩并进行真空冻干,得到COE[3]。
⑵细胞培养:将人胃癌MGC-803细胞常规培养于含有10%胎牛血清的RPMI1640培养基中,置37℃恒温、体积分数含5%CO2饱和湿度培养箱中培养,每2~3d传代1次,传代后取对数生长周期细胞进行实验。
⑶实验分组:实验设空白对照组(不完全1640培养液),南蛇藤提取物组(5、10、20、40、80、160mg/L),阳性对照5-FU组(3.125、6.25、12.5、25、50、100mg/L)。
茜草提取物体内抗肿瘤作用的研究目的:研究茜草提取物体内抗肿瘤作用,为新型抗肿瘤中药的开发提供理论依据和实验基础。
方法:用茜草提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用;采用生命延长率实验方法,用茜草提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠的生命延长作用。
采用血清药理学实验方法,观察含药血清体外对人肝癌HepG2细胞株抗增殖作用。
结果:(1)茜草提取物小、中、大剂量组对小鼠移植性肉瘤S180实体瘤有显著的抑制作用(与模型组比较,中剂量组P<0.05,大剂量组P<0.01);(2)生命延长率实验结果小剂量及中剂量组均有很好的延长作用,与对照组相比P<0.05。
结论:茜草提取物对S180小鼠具有延长生命的作用。
茜草提取物对小鼠移植性S180肉瘤具有抑制作用。
(3)血清药理学实验结果,终浓度分别为10%、20%、25%的灭活的含药大白鼠血清对HepG2细胞株有很好的抑制增殖作用,对照组相比P<0.05。
标签:抑瘤率;毒性实验;血清药理学目前国内茜草提取物对恶性肿瘤的研究尚少。
虽然新辅助化疗以及靶向药物正在研究当中,但是患者的5年生存率仍然很低。
因此,我们需要寻找一种新的更有效的抗肿瘤药物,增强治疗疗效,改善患者的生活质量,延长患者的生存时间。
1材料与方法1.1材料(1)PBS缓冲液(pH:7.2-7.4):购于北京中杉金桥生物技术有限公司(2)枸橼酸缓冲液(pH:6.0):购于北京中杉金桥生物技术有限公司(3)电子天平:天津市天平仪器有限公司MP 200A型1.2方法体内抑瘤实验取72只雄性昆明小鼠[1],无菌条件下取接种S180 7天的小鼠腹水,用0.9%生理盐水以1:3稀释至含瘤细胞1×106/ml,在每只右腋下接种0.2ml,次日将小鼠随机分6组(每组12只)并称重:1组为生理盐水(荷瘤模型对照)组,灌服生理盐水;2组为阳性对照组,腹腔注射环磷酰胺(CTX)0.02g/kg/日;3、4、5组为茜草提取物小、中、大剂量给药组(剂量分别为0.66g/kg/d、1.32g/kg/d、2.64g/kg/d生药),给药组1次/日灌胃,连续给药10天;6组为空白对照组,不接种瘤细胞、不附加任何刺激。