实验六：生物碱的提取

粉防己生物碱的提取分离和鉴别粉防己为植物防己科粉防己Stephania tetrandrd S.Moore的根，又名汉防己，是祛风解热镇痛药物，其有效成分为生物碱，主要是汉防己甲素和汉防已乙素。

汉防己生物碱具有降低血压及镇痛的作用，临床上除用作治疗高血压、心绞痛、神经性疼痛、抗阿米巴原虫外，还将粉防已生物碱的碘甲基、或溴甲基化合物作为肌肉松弛剂应用，此外汉防已甲素在动物实验中有抗癌、扩冠和解热抗炎的作用。

一、实验目的1．掌握生物碱的提取原理和实验操作方法；2．掌握生物碱的基本鉴别法；3．掌握生物碱结构与一般性质的关系；4．熟悉用柱层析分离纯化生物碱单体的方法。

二、仪器与试药（一）仪器RE-52旋转蒸发仪 SHB-循环水式多用真空泵分液漏斗（250mL）HHS型电热恒温水浴锅玻璃仪器气流烘干器圆底烧瓶（1000mL）ZF-2型三用紫外仪电热恒温干燥箱移液管（10mL、5mL）蒸发皿小玻璃蒸发器玻璃层析柱（2.0cmⅹ40cm）（二）试药粉防己乙醇盐酸氯仿无水硫酸钠滤纸丙酮中性三氧化二铝无水硫酸钠甲醇浓氨水硅胶G 凡士林脱脂棉漏斗 CMC-Na改良碘化铋钾试液汉防已甲素和汉防已乙素对照品丙酮苦味酸碘化汞钾试液雷氏铵盐试液三、主要成分的结构和性质汉防已根中总生物碱含量为1～3%，主要为汉防已甲素，含量约1～2%，汉防已乙素，含量约0.5%；轮环藤酚碱，含量为0.4%；以及其它数种微量生物碱。

轮环藤酚碱四、实验原理：1．提取：利用游离的伯、仲、叔胺生物碱具有亲脂性，能溶于乙醇的性质，用乙醇提取总生物碱；2．分离：利用水溶性生物碱（季铵类生物碱）易溶于水而难溶于有机溶剂的性质进行二者的分离；3．粉防己甲、乙素的分离：利用甲、乙素在结构上的不同（二者极性大小不同）用氧化铝柱层析来分离甲、乙素。

五、生物碱的提取分离1．总生物碱的提取、亲脂性与亲水性生物碱的分离95%乙醇300mL水浴回流提取1小时，过滤NOCH3OROCH3OCH3ONCH3CH3H HR=CH3R=H汉防己甲素汉防己乙素ONOHOCH3CH3OHOOHCH3同法提取0.5小时，过滤5～10mL浓缩物2%盐酸转移至蒸发皿中充分搅拌，残渣做生物碱反应，将滤液放在分液漏斗中先加入50mL氯仿，pH至9-10，振摇萃取，静置分层后，分出氯仿层30mL萃取1次2次，每次20mL，分出氯仿层20g无水硫酸钠，密闭，（上交）加入丙酮适量（共15mL，少量多次），水浴加热溶解，趁热倒入蒸发皿丙酮液加入中性三氧化二铝3g拌匀，水浴上小心蒸干含生物碱的三氧化二铝颗粒2．低压柱层析分离汉防已甲素和乙素低压柱层析在低压下（0.5-3kg/cm2，一般0.3-1.2 kg/cm2）采用颗粒直径介于经典柱层析（100-200μm）和HPLC（37μm）之间的薄层层析用硅胶（或氧化铝）H或G（50-75μm）作为填充剂的一种柱层析柱，其基本原理与HPLC相同，分离效果也介于经典柱与HPLC之间，用减压干法装柱，铺层紧密均匀，层析带分布集中整齐，同时薄层层析的最佳分离溶剂系统可以直接用于低压柱层析，它是一种分离效果较好，设备简单，操作方便，快速的方法。

一、实验目的1. 学习生物碱的提取、分离和鉴定方法。

2. 掌握生物碱的理化性质和反应特点。

3. 提高实验操作技能和数据分析能力。

二、实验原理生物碱是一类含有氮原子，具有生物活性的有机化合物。

本实验通过从植物中提取生物碱，然后对其进行分离和鉴定。

三、实验材料与仪器材料：1. 植物样品（如颠茄、烟草等）2. 无水乙醇3. 氢氧化钠溶液4. 醋酸酸化试剂5. 醋酸铅溶液6. 醋酸铜溶液7. 氯化钡溶液8. 硝酸银溶液仪器：1. 水浴锅2. 蒸发皿3. 烧杯4. 滤纸5. 研钵6. 离心机7. 显微镜8. 紫外分光光度计四、实验步骤1. 提取：将植物样品干燥、粉碎后，加入无水乙醇，回流提取一定时间，过滤得到滤液。

2. 浓缩：将滤液蒸发浓缩至一定体积。

3. 酸化：向浓缩液中加入醋酸酸化试剂，使生物碱沉淀。

4. 过滤：过滤得到沉淀，用少量水洗涤沉淀。

5. 分离：将沉淀加入醋酸铅溶液，观察是否产生沉淀，若产生沉淀，则说明有生物碱存在。

6. 鉴定：- 加入醋酸铜溶液，观察是否产生蓝色沉淀，若产生蓝色沉淀，则说明有生物碱存在。

- 加入氯化钡溶液，观察是否产生白色沉淀，若产生白色沉淀，则说明有生物碱存在。

- 加入硝酸银溶液，观察是否产生白色沉淀，若产生白色沉淀，则说明有生物碱存在。

五、实验结果与分析1. 提取：从植物样品中成功提取出生物碱。

2. 分离：通过酸化、过滤和分离等步骤，成功分离出生物碱。

3. 鉴定：通过加入醋酸铅溶液、醋酸铜溶液、氯化钡溶液和硝酸银溶液，成功鉴定出生物碱。

六、实验讨论1. 生物碱的提取和分离过程中，要注意控制提取时间、温度和溶剂用量，以确保提取效率和分离效果。

2. 生物碱的鉴定方法较多，可根据实际情况选择合适的鉴定方法。

3. 生物碱在医药、农业等领域具有广泛的应用，本实验有助于了解生物碱的提取、分离和鉴定方法。

七、实验总结本实验成功提取、分离和鉴定了植物中的生物碱，加深了对生物碱的认识，提高了实验操作技能和数据分析能力。

第1篇一、实验目的1. 学习掌握汉防己中生物碱的提取方法。

2. 掌握生物碱的分离纯化技术。

3. 熟悉生物碱的鉴定方法。

二、实验原理汉防己是一种传统中药材，具有祛风除湿、利水消肿、镇痛消炎等功效。

其主要成分是多种生物碱，如汉防己碱、去甲基汉防己碱等。

本实验通过采用有机溶剂提取法提取汉防己中的生物碱，再利用低压柱层析和薄层层析等方法进行分离纯化，最后通过光谱分析等手段对分离得到的生物碱进行鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：汉防己药材、氯仿、甲醇、石油醚、硅胶、活性炭等。

2. 仪器：索氏提取器、旋转蒸发仪、低压柱层析仪、薄层层析仪、紫外可见分光光度计、红外光谱仪等。

四、实验步骤1. 汉防己药材的预处理将汉防己药材剪碎，用乙醇回流提取2小时，过滤，浓缩得到浸膏。

2. 生物碱的提取将浸膏用氯仿溶解，加入活性炭脱色，过滤，浓缩得到氯仿溶液。

3. 生物碱的分离将氯仿溶液用硅胶柱层析分离，依次用石油醚、氯仿-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，收集各个洗脱液。

4. 生物碱的纯化将收集到的各个洗脱液用旋转蒸发仪浓缩，得到生物碱粗品。

5. 生物碱的鉴定（1）紫外可见分光光度法：对生物碱粗品进行紫外可见光谱扫描，测定最大吸收波长。

（2）红外光谱法：对生物碱粗品进行红外光谱扫描，分析其官能团。

（3）质谱法：对生物碱粗品进行质谱分析，确定其分子量。

五、实验结果与分析1. 生物碱的提取通过索氏提取法，从汉防己药材中成功提取出生物碱。

2. 生物碱的分离采用低压柱层析法，将提取得到的生物碱进行分离，得到多个组分。

3. 生物碱的纯化通过旋转蒸发仪浓缩，得到生物碱粗品。

4. 生物碱的鉴定（1）紫外可见分光光度法：生物碱粗品在紫外可见光谱中具有特定的吸收峰。

（2）红外光谱法：生物碱粗品在红外光谱中具有典型的生物碱官能团吸收峰。

（3）质谱法：生物碱粗品的质谱结果显示出与其分子量相符的峰。

综上所述，本实验成功从汉防己中提取、分离和鉴定了生物碱，为汉防己的药理作用研究提供了实验依据。

实验六柱色谱-紫外分光光度法测定万氏牛黄清心丸中总生物碱的含量一、目的要求1.掌握用连续回流提取法定量提取中药制剂中生物碱的原理和操作方法。

2.掌握柱色谱法净化样品和用吸收系数法测定盐酸小檗碱的基本原理和操作方法。

二、基本原理用连续回流提取法，将生物碱以盐的形式提取后，用氧化铝做净化剂进行液-固萃取净化处理，使提取液中具有紫外吸收的黄酮类及其他极性大的干扰组分保留于柱上，小檗碱、药根碱等小檗碱型生物碱被洗脱，以消除干扰。

盐酸小檗碱在345nm±1nm处有最大吸收，在此波长处测定洗脱液的吸收度，以吸收系数法按盐酸小檗碱计算总生物碱含量。

三、仪器与试药1.分析天平、恒温水浴锅、分光光度计。

2.量瓶、三角瓶、烧杯、刻度吸管、量筒、索氏提取器、色谱柱。

3.色谱用中性氧化铝，其他试剂均为AR级。

4.万氏牛黄清心丸(市售品)。

四、操作步骤1.提取去剪碎的万氏牛黄清心丸约4g，精密称定，置索氏提取器中，加盐酸-甲醇(1﹕100)适量，加热回流提取至提取液无色，提取液移至50mL量瓶中，用盐酸-甲醇(1﹕100)稀释至刻度，摇匀。

2.净化精密量取上述提取液5mL，置氧化铝柱(内径约0.9cm，中性氧化铝5g，湿法装柱，用30mL乙醇预洗)上，用25mL乙醇洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。

3.测定法精密量取上述净化液2mL，置50mL量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀。

以2mL乙醇及0.05mol/L H2SO4液稀释至50mL的混合液为空白，用1cm比色池，E)为728计算即在345nm波长处测定吸收度。

按盐酸小檗碱(C20H17NO4·HCL)的吸收系数(1%1cm得。

本品按干燥品计算，含总生物碱以盐酸小檗碱计，不得少于1.7%。

五、思考题1.本实验操作中应注意哪些问题？2.欲证明此方法的可靠性，须做什么试验？如何设计？。

一、实验目的1. 学习生物碱的提取和分离方法。

2. 掌握利用酸碱中和反应从植物材料中提取生物碱的原理。

3. 熟悉实验操作步骤，提高实验技能。

二、实验原理生物碱是一类含氮的有机化合物，广泛存在于植物中，具有多种生物活性。

本实验通过利用生物碱与酸碱反应的性质，从植物材料中提取生物碱。

具体操作步骤包括：原料的预处理、提取、酸碱中和、沉淀、过滤、干燥等。

三、实验材料与仪器材料：1. 植物原料（如金鸡纳树皮、鸦胆子等）2. 稀盐酸3. 氨水4. 乙醇5. 水合氯醛6. 硅藻土7. 石棉仪器：1. 烧杯2. 玻璃棒3. 过滤器4. 滤纸5. 蒸发皿6. 烘箱7. 分析天平四、实验步骤1. 原料预处理：将植物原料洗净、干燥、粉碎，过40目筛。

2. 提取：取一定量的预处理好的植物原料，加入适量的乙醇，加热回流提取2小时。

3. 过滤：将提取液过滤，滤液待用。

4. 酸碱中和：将滤液加入适量的稀盐酸，搅拌，直至生物碱沉淀完全。

5. 沉淀：将混合液静置，待生物碱沉淀完全后，取出上层清液。

6. 过滤：将沉淀物过滤，滤液待用。

7. 干燥：将滤液加入适量的水合氯醛，搅拌，使生物碱沉淀完全。

静置，待沉淀完全后，取出上层清液。

8. 过滤：将沉淀物过滤，滤液待用。

9. 干燥：将滤液加入适量的硅藻土，搅拌均匀。

静置，待生物碱沉淀完全后，取出上层清液。

10. 过滤：将沉淀物过滤，滤液待用。

11. 干燥：将滤液加入适量的石棉，搅拌均匀。

静置，待生物碱沉淀完全后，取出上层清液。

12. 干燥：将滤液蒸发浓缩，待水分蒸发至一定程度后，取出干燥。

五、实验结果与分析经过上述步骤，成功从植物原料中提取出生物碱。

实验过程中，需要注意以下几点：1. 在提取过程中，温度不宜过高，以免破坏生物碱的结构。

2. 在酸碱中和过程中，盐酸的浓度不宜过高，以免过度酸化，导致生物碱的损失。

3. 在沉淀过程中，需控制好时间，以确保生物碱沉淀完全。

4. 在干燥过程中，需注意温度的控制，以免生物碱分解。

第1篇一、实验目的1. 了解汉防己生物碱的提取、分离与鉴定方法。

2. 掌握回流提取、低压柱层析等实验操作技术。

3. 学习天然产物中活性成分的提取与分离过程。

二、实验原理汉防己（Stephania tetrandra S. Moore）为防己科千金藤属植物，其根含有多种生物碱，如汉防己甲素、乙素等。

本实验采用回流提取和低压柱层析方法，从汉防己根中提取生物碱，并进行分离和鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：汉防己根粉、95%乙醇、丙酮、硅胶、氧化铝、硝酸银、氨水、氯化钡等。

2. 实验仪器：圆底烧瓶、回流装置、布氏漏斗、抽滤瓶、低压柱层析柱、超声波清洗器、电子天平、紫外分光光度计等。

四、实验步骤1. 汉防己生物碱的提取（1）称取100 g汉防己根粉，置于1000 ml圆底烧瓶中。

（2）加入500 ml 95%乙醇，回流1 h。

（3）过滤，同法提取一次，合并乙醇提取液。

（4）浓缩至干，得浸膏。

2. 低压柱层析（1）装柱：取25 cm长、内径1.8 cm的层析柱，用减压干法装硅胶约25 g（高约20 cm）。

（2）拌样加样：取汉防己碱约150 mg，加少量丙酮热溶（刚溶为度），用滴管加到1.5 g硅胶上，仔细拌匀，水浴上蒸干，碾细，通过一个长颈漏斗小心加在柱顶，轻轻垂直顿击，待样品表面平整不拌动时，上面再盖约1~2 cm高的空白硅胶，再加盖一圆形滤纸片，压紧。

（3）洗脱：开动气泵待用。

用滴管顺层析柱柱壁仔细加入溶剂，收集不同洗脱组分。

3. 汉防己生物碱的鉴定（1）紫外分光光度法：将提取的生物碱溶液在紫外分光光度计上测定其最大吸收波长。

（2）薄层色谱法：将提取的生物碱溶液点于薄层板上，与已知标准品进行对照，观察其Rf值。

五、实验结果与分析1. 提取结果：经回流提取和低压柱层析，从汉防己根中成功提取出生物碱。

2. 鉴定结果：紫外分光光度法测定，提取的生物碱溶液最大吸收波长为285 nm；薄层色谱法鉴定，提取的生物碱与已知标准品对照，Rf值一致，证明提取的生物碱为汉防己生物碱。

生物碱提取——从茶叶中提取咖啡因一、实验题目：生物碱提取——从茶叶中提取咖啡因二、实验日期:实验地点：实验指导老师：三、实验目的1、学习从植物中提取生物碱的原理及方法。

2、通过学习从茶叶中提取咖啡因的实验，掌握一种从天然化合物中提取和提纯有机化合物的方法。

3、练习升华法纯化咖啡因的方法。

四、实验原理茶叶中含有生物碱，其主要成分是含量约占3-5%的咖啡因和含量较少的茶碱和可可豆碱。

此外，茶叶中还含有11-12%的丹宁酸以及叶绿素、纤维素、蛋白质等物质。

咖啡因是一种白色针状的晶体，无臭，味苦。

易溶于水、乙醇、丙酮、氯仿，微溶于石油醚，难溶于苯和乙醚。

咖啡因在100℃时失去结晶水，并开始升华，178℃时升华很快。

无水咖啡因的熔点为238℃,它的化学名称是 1,3,7-三甲基-2,6-二氧嘌呤，其结构式如下：咖啡因具有刺激心脏、兴奋大脑神经和利尿等作用，因此，可作为中枢神经兴奋剂，在医学上有重要的用途。

本实验从茶叶中提取咖啡因是用适量的乙醇(95%)作溶剂，在索氏提取器中连续萃取，然后浓缩、焙炒、升华而制得。

索氏提取器又叫脂肪提取器，它由三部分组成，下部为烧瓶，上部为球形冷凝管，中间为提取器。

被提取的物质放在提取器中加热至沸腾后溶剂蒸汽通过蒸汽上升管进入冷凝管，被冷凝为液体滴入提取器中。

器内液体与固体进行液-固萃取。

当液面超过虹吸管的顶点时，萃取液自动流回烧瓶中，经加热再蒸发、冷凝、萃取，如此循环，直至大部分可溶性固体物质被萃取，富集于烧瓶为止。

升华是利用固体混合物的蒸汽压或挥发度不同，将不纯净的固体化合物在熔点温度以下加热，利用产物蒸汽压高，杂质蒸汽压低的特点，使产物不经过液体过程而直接气化，遇冷后固化，而杂质则不发生这个过程，达到分离提纯的目的。

C H 33H 37主要试剂及产品的物理常数：（文献值）五、实验部分1、实验仪器：100mL圆底烧瓶、蒸发皿、玻璃漏斗、蒸馏头、球形冷凝管、尾接管、直形冷凝管、烧杯、锥形瓶、量筒等2、实验药品：茶叶、95%乙醇、生石灰3、实验内容、现象与解释：①主要实验流程：②具体实验内容：放入一粒沸石，加热后，滤纸开始变成浅褐色，滤纸的4、实验注意事项：（1）在用蒸发皿除水分的过程中,一定要不停的搅拌，以免爆沸。

竭诚为您提供优质文档/双击可除苦参生物碱的提取实验报告篇一：苦参生物碱的提取分离与鉴定最终版实验五苦参生物碱的提取分离与鉴定苦参是豆科槐属植物苦参的干燥根，含有多种生物碱，总碱含量高达约1%，其中以苦参碱、氧化苦参碱含量最高。

苦参碱可溶于水、乙醚、三氯甲烷、苯，难溶于石油醚。

氧化苦参碱为白色柱状结晶，可溶于水、三氯甲烷、乙醇‘难溶于乙醚、石油醚。

现代药理学研究表明，苦参中的生物碱具有消肿利尿、抗肿瘤和抗心律失常的作用。

一、实验目的本实验通过从苦参中提取苦参生物碱，考察盐酸的浓度和渗漉速度对提取产率的影响了解化学反应萃取分离在天然药物提取过程中的应用掌握渗漉法和离子交换提取生物碱的原理、方法与工艺过程，并熟悉用柱层析法分离生物碱。

二、实验内容（1）苦参总碱的提取。

①将苦参粗粉用不同浓度的hcl溶液润湿后渗漉，收集渗漉液；②将收集的渗漉液通过阳离子交换树脂柱，进行离子交换；③洗脱并回流提取苦参总碱。

（2）分别用柱层析法和溶解度差异法分离氧化苦参碱。

三、实验时间步骤所需时间/h渗漉2离子交换2回流5柱层析（或溶解度差异法）2.5鉴定0.5四、实验原理1.提取与分离方法利用苦参生物碱具有弱碱性，可与强酸结合成易溶于水的盐的性质，将总碱从药材中提取出来。

结合动态连接提取工艺过程，实现生物碱充分溶出。

然后，加碱碱化，即可得到苦参生物总碱。

以苦参碱为例：2.工艺流程五、实验材料与设备1.实验设备与仪器层析柱，渗漉桶，烧杯，布氏漏斗，医用搪瓷盘，恒温水浴箱，层析槽，索氏提取器，研钵。

2.实验材料与试剂苦参，强酸性阳离子树脂，层析用氧化铝，三氯甲烷，甲醇，浓氨水，乙醚，碘化铋钾，盐酸，氢氧化钠。

碘-碘化钾试剂，碘化汞钾试剂，碘化铋钾试剂，硅钨酸试剂。

六、实验步骤1.反应提取步骤（1）动态连续提取①取苦参粗粉200g加一定浓度的盐酸，拌匀，放置30min,使生药膨胀。

②然后装入渗漉桶中，边加边压，层层加紧，全部装完后，药面压平，盖一层滤纸，滤纸上压一些洗净的玻璃塞。