生物人教版选修1学案:课堂互动 专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 Word版含解析
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课堂互动
三点剖析
1.选择性培养基
选择性培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基,其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。
我国劳动人民在12世纪(宋代)时,已根据红曲霉有耐酸和耐高温的特性,采用明矾来调节酸度和用酸米来抑制杂菌的方法,培养出纯度很高的红曲霉,这实际上就是一种选择性培养基。
从混合样品中获得某种微生物的方法,通常有两种:第一种办法可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理,专门在培养基中加入该营养物,从而使它成为一种加富培养基。
采用这类“投其所好”的策略即可使该微生物大大增殖,在数量上超过原有占优势的微生物,以达到富集培养的目的。
用于加富的一些物质主要是一些特殊的碳源和氮源,如纤维素可被用来富集纤维素分解微生物,甘露醇用来富集自生固氮菌。
第二种办法则可利用该分离对象对某种制菌物质的抗性,在混合培养物中加入该抑制物质,经培养后,由于原来占优势的他种微生物的生长受到抑制,而分离对象却可趁机大大增殖,使之在数量上占据优势。
用于抑制他种微生物的选择性抑制剂有染料、抗生素等。
由于在土壤中几乎可找到任何微生物,所以土壤往往是首选的采集目标。
土壤采样必须考虑以下几个问题:
2.土壤中采集菌样
(1)土壤中有机物的含量有机物含量高,土质就肥,一般在其中微生物数量也越多,反之亦然。
(2)采土的深度土壤的深度不同,其通气、养分和水分的分布情况也不同。
表层的土壤由于直接受日光曝晒,故较干燥,微生物也不易大量繁殖。
在离地面5~20 cm处的土壤,微生物含量最高。
(3)植被情况植被的种类与微生物的分布有着密切的关系。
例如,在冬天灌水的水稻田土壤中,真菌的分布较多。
(4)采土的季节以春秋两季为宜。
这时土壤中的养分、水分和温度都较适宜,微生物的数量也最多。
采土时尤其应注意土壤中的含水量,水分过多会造成厌氧环境,不利于放线菌的生长繁殖。
真菌虽需要较高的相对湿度,但基质中的水分却不宜过多。
因此要避免在雨季采集土样。
此外,土壤的pH也应适当注意,细菌和放线菌在中性或微碱性土壤中居多,而真菌则在偏酸性的土壤中较丰富。
(5)采土方法选择好适当地点后,用小铲子除去表土,取5~20 cm处的土样几十克,盛入事先灭过菌的防水纸袋内,并在上面记录采土时间、地点和植被等情况。
学以致用
【例1】分析下面培养基的配方:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。
请完成下列问题:
(1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是______和______。
(2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何进行选择的?
解题提示:碳源是提供碳元素的物质,氮源是提供氮元素的物质。
所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。
绝大多数生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以这种培养基对微生物有选择作用。
选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
选择培养基筛选微生物的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
答案:(1)葡萄糖尿素(2)有选择作用。
因为此配方中尿素是唯一氮源,因此,只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
【例2】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是()
A.涂布了一个平板,统计的菌落数是230
B.涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238
C.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163
D.涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233
解题提示:在设计实验时,一定要涂布至少3个平板作为重复组;在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需重新实验。
在设计实验时,一定要涂布至少3个平板,作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以A、B不正确。
C项虽涂布了3个平板,但是,其中1个平板的计数结果与另两个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。
答案:D。