大鼠麻醉
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大鼠水合氯醛麻醉心得本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉,所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。
在先前的实验中,剂量为0.3mL/100g(这个剂量来自于师姐使用的经验),麻醉完全清醒时间约4h(当初没有记录开始清醒的时间)现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短(1~1.5h),而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复清醒状态,便于后续的实验操作。
因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下。
动物:雄性SD大鼠4只,平均体重356g(这里就不算标准差了),水合氯醛浓度分为4%、7%、10%三个水平。
结果:如下表格所示:水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10%水合氯醛剂量 0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3 mL/100g诱导时间约7min 约4min 约7min 约4min 约4min麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉麻醉开始清醒时间约90min 约100min 未观察约68min 114min 结论:1、麻醉的诱导,似乎从4%到(7%、10%),随着浓度的增加,麻醉诱导的时间缩短。
但在7%及10%这两个浓度,麻醉时间基本一致。
2、麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。
3、麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗?》的这篇中,有战友提出“把水合氯醛配成4%的,而不是10%的,这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距,可安全了”,我的经验是这样:(1)确实,4%的水合氯醛在实验中比较安全,我们一般用于追加麻醉的时候,4%水合氯醛每次1mL,追加一到两次,安全度颇高。
(2)而水合氯醛的致死剂量,我不是很了解,希望知道的战友能够告知一声。
对于10%的水合氯醛,我们用到0.3mL/100g也很安全,应该距离致死剂量还有一段距离,麻醉深度与维持时间也很确切。
动物头部电极植入手术操作流程一、大鼠麻醉选择与使用:1、麻醉剂选择:戊巴比妥钠 40~60mg/kg,体重小于300g时,可考虑55mg/kg或酌情减少用量(2-3%浓度);或乌拉坦1~1.5g/kg(20-25%浓度)2、根据体重换算出麻药用量,注意所配药品浓度,根据需要的mg数,决定注射的ml.3、给药途径:腹腔注射4、操作流程:右手轻轻捉住大鼠尾巴,将大鼠放置在鼠笼上方或操作台上,待其安静后,可用左手的姆指和食指捏住耳后枕颈部皮肤即可提起,掌心向上将鼠体置于掌心中,用无名指和小指将鼠尾压住。
腹腔注射位置:两大腿根部水平线,中线旁1-2cm.腹腔平面向上倾斜45°,插入时有落空感,回抽无血,匀速注入。
5、电极植入中麻醉维持:如手术时间过长,动物麻醉效果减轻时,可用乙醚适当吸入麻醉。
二、电极制作实验中所用电极应预先准备,根据实验目的和要求,选择不同电极。
1、皮层电极,可选用小不锈钢螺钉(眼镜/手表用螺钉)2、深部电极,采用绝缘金属丝制作三、手术流程1、术前准备:(1)手术器件准备:大、小手术剪各1把,弯头止血钳4-6把(用于暴露手术视野),手术刀柄及刀片,直止血钳1-2把(用于手术中夹持止血),持针器1把(用于皮肤缝合),手术针(弯针),缝线若干,小螺丝刀1把(用于固定螺钉电极),有齿镊1把,小手术镊1-2把,钻头1-2个(大小根据实验需要确定),手术盘(手术中放置手术器件)1个,器件盒1个(用于手术器件消毒保存)上述手术器件需要进行消毒灭菌处理(高温高压消毒或75%酒精浸泡30分钟。
(2)其它实验所需物品玻璃器皿(盛水,用于丢弃毛发),消毒棉棒,明胶海绵(止血用,需要事先剪成小块),小号培养皿1个(用于调制牙托粉),颅钻,手术台灯,加热垫(用于动物麻醉后保温),消毒手术巾若(用于保护手术视野),电极及接插件(事先制作好),废报纸若干(垫在大鼠下面,便于实验后清洁),动物台秤,普通剪刀,2、实验药品准备(1)麻药:事先按要求浓度配好,冰箱冷藏,手术前提前取出,温度低是适当加温(2)牙科水泥及牙科水(用于电极固定)(3) 75%酒精,碘酒,用于手术部位皮肤消毒(4)庆大霉素针剂或粉剂,电极植入完成后,皮肤缝合前的消炎处理3、手术过程(1)大鼠称重:打开电子天平开关后,将称容器放在天平上,去皮清零。
一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC 就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
大鼠水合氯醛麻醉心得本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉,所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。
在先前的实验中,剂量为0.3mL/100g(这个剂量来自于师姐使用的经验),麻醉完全清醒时间约4h(当初没有记录开始清醒的时间)现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短(1~1.5h),而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复清醒状态,便于后续的实验操作。
因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下。
动物:雄性SD大鼠4只,平均体重356g(这里就不算标准差了),水合氯醛浓度分为4%、7%、10%三个水平。
结果:如下表格所示:水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10%水合氯醛剂量 0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3 mL/100g诱导时间约7min 约4min 约7min 约4min 约4min麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉麻醉开始清醒时间约90min 约100min 未观察约68min 114min 结论:1、麻醉的诱导,似乎从4%到(7%、10%),随着浓度的增加,麻醉诱导的时间缩短。
但在7%及10%这两个浓度,麻醉时间基本一致。
2、麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。
3、麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗?》的这篇中,有战友提出“把水合氯醛配成4%的,而不是10%的,这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距,可安全了”,我的经验是这样:(1)确实,4%的水合氯醛在实验中比较安全,我们一般用于追加麻醉的时候,4%水合氯醛每次1mL,追加一到两次,安全度颇高。
(2)而水合氯醛的致死剂量,我不是很了解,希望知道的战友能够告知一声。
对于10%的水合氯醛,我们用到0.3mL/100g也很安全,应该距离致死剂量还有一段距离,麻醉深度与维持时间也很确切。
大鼠的麻醉点击次数:3690 发表于:2008-06-25 22:38转载请注明来自丁香园来源:<a href=''>丁香园</a>一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/ kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC就够了,老鼠的异氟烷MA C大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
大鼠脑脊液骨髓的采集方法步骤一:麻醉大鼠将大鼠置于麻醉箱中,使用一般常用的麻醉方法,如使用注射器将麻醉剂注射到大鼠体内,或将大鼠放入具有麻醉效果的气体环境中(如氧化乙烯、异氟醚等),使大鼠进入深度麻醉状态。
步骤二:准备工具和材料准备需要的实验器材和材料,包括注射器、微量注射器、针头、创口贴、消毒液、手套等。
步骤三:固定大鼠的头部将麻醉好的大鼠放到一块柔软的垫子上,然后将大鼠的头部固定在取样位置上,以保证操作时头部不会有移动。
步骤四:刮除毛发并消毒使用刀片或电动剃刀将取样部位的毛发刮除干净,并用消毒液进行彻底消毒,以避免感染。
步骤五:穿刺脊髓采用腰椎穿刺法,使用无菌注射器和针头将其插入到脊髓腔内。
刺穿脊髓后,抽取相应的脑脊液样品。
步骤六:收集脑脊液利用微量注射器收集抽取的脑脊液样品,注意避免气泡的产生。
收集足够的脑脊液样品用于后续实验。
步骤七:处理采集部位在完成采集后,将针头缓慢地拔出,然后用无菌纱布或创口贴轻轻按压采集部位,以止血,防止感染。
大鼠骨髓的采集方法:步骤一:麻醉大鼠将大鼠置于麻醉箱中,使用一般常用的麻醉方法,如使用注射器将麻醉剂注射到大鼠体内,或将大鼠放入具有麻醉效果的气体环境中(如氧化乙烯、异氟醚等),使大鼠进入深度麻醉状态。
步骤二:准备工具和材料准备需要的实验器材和材料,包括注射器、微量注射器、针头、创口贴、消毒液、手套等。
步骤三:固定大鼠的肢体将麻醉好的大鼠放到一块柔软的垫子上,然后将大鼠的肢体固定在取样位置上,以保证操作时肢体不会有移动。
步骤四:消毒使用适当的消毒液对骨髓采集部位进行消毒,以避免感染。
步骤五:穿刺骨髓用带有针头的注射器穿刺骨髓。
穿刺一般选择胫骨、肱骨或股骨中的一根较粗的部位,并确保穿刺角度和力度适合。
步骤六:采集骨髓通过注射器吸取骨髓样品,并将其收集在一支干燥、清洁的离心管中。
确保采集到足够的骨髓样本以供后续实验使用。
步骤七:处理采集部位在完成采集后,将针头缓慢地拔出,然后用无菌纱布或创口贴轻轻按压采集部位,以止血,防止感染。
大鼠的麻醉一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
描述大鼠剥取脑组织的步骤操作要点,注意事项大鼠剥取脑组织是一项非常重要的实验操作,需要严格按照步骤进行,以保证实验结果的准确性。
下面是描述大鼠剥取脑组织的步骤操作要点和注意事项:
步骤操作要点:
1. 麻醉大鼠:使用适当的麻醉剂将大鼠麻醉,注意麻醉剂的剂量和作用时间,以免对实验结果产生影响。
2. 体表消毒:在开始操作之前,对大鼠的手术部位进行消毒,以避免感染。
3. 穿刺颅骨:使用适当的工具在大鼠头部穿刺颅骨,以便进行脑组织的剥离。
4. 剥离脑组织:使用适当的工具将脑组织分离出来,注意不要损伤脑组织,以保证实验结果的准确性。
5. 存储脑组织:在完成剥离后,将脑组织存储在适当的容器中,以便进行后续实验操作。
注意事项:
1. 需要遵守实验室安全规定,穿戴适当的个人防护用品,如手套、口罩等。
2. 在操作过程中,需要保持手术部位的清洁,并注意避免感染。
3. 在麻醉大鼠时,需要根据大鼠的体重和生理状态确定适当的麻醉剂剂量,并在麻醉过程中监测大鼠的生命体征,如呼吸、心率等。
4. 在剥离脑组织时,需要使用适当的工具,并注意不要损伤脑
组织。
5. 在存储脑组织时,需要选择适当的容器,并注意储存条件,如温度、湿度等。
一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC 就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
大鼠水合氯醛麻醉心得大鼠水合氯醛麻醉心得本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉,所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。
在先前的实验中,剂量为0.3mL/100g (这个剂量来自于师姐使用的经验),麻醉完全清醒时间约 4h (当初没有记录开始清醒的时间)现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短( 1~1.5h ),而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复清醒状态,便于后续的实验操作。
因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下。
动物:雄性SD 大鼠4只,平均体重356g (这里就不算标准差了),水合氯醛浓度分为 4%、7%、 10%三个水平。
结果:如下表格所示:水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10%水合氯醛剂量0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3mL/100g诱导时间约 7min 约 4min 约 7min 约 4min 约 4min麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉麻醉开始清醒时间约90min 约 100min 未观察约 68min 114min结论:麻醉的诱导,似乎从 4%到( 7%、10%),随着浓度的增加,麻醉诱麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。
麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗?》的这篇中,有战友提出氯醛配成4%的,而不是10%的,这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距,可安全了” ,我的经验是这样:导的时间缩短。
但在7%及 10%这两个浓度,麻醉时间基本一致把水合(1)确实,4%的水合氯醛在实验中比较安全,我们一般用于追加麻醉的时候,4%水合氯醛每次ImL,追加一到两次,安全度颇高。
(2)而水合氯醛的致死剂量,我不是很了解,希望知道的战友能够告知一声。
对于10%的水合氯醛,我们用到0.3mL/100g 也很安全,应该距离致死剂量还有一段距离,麻醉深度与维持时间也很确切。