大鼠的麻醉
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动物麻醉麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉,保障实验动物的安全,使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。
一、常用的麻醉药(一)常用局部麻醉剂:普鲁卡因,此药毒性小,见效快,常用于局部浸润麻醉,用时配成0.5%~1%;利多卡因,此药见效快,组织穿透性好,常用1%~2%溶液作为大动物神经干阻滞麻醉,也可用0.25%~0.5%溶液作局部浸润麻醉。
(二)常用全身麻醉剂:1. 乙醚乙醚吸入法是最常用的麻醉方法,各种动物都可应用。
其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。
但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加;通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动,并且容易引起窒息,在麻醉过程中要注意。
但总起来说乙醚麻醉的优点多,如麻醉深度易于掌握,比较安全,而且麻醉后恢复比较快。
其缺点是需要专人负责管理麻醉,在麻醉初期出现强烈的兴奋现象,对呼吸道又有较强的刺激作用,因此,需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉),通常在麻醉前20-30分钟,皮下注射盐酸或硫酸吗啡(每公斤体重5~10mg)及阿托品(每公斤体重0.1mg)。
盐酸吗啡可降低中枢神经系统兴奋性,提高痛阈,还可节省乙醚用量及避免乙醚麻醉过程中的兴奋期。
阿托品可对抗乙醚刺激呼吸道分泌粘液的作用,可避免麻醉过程中发生呼吸道堵塞,或手术后发生吸入性肺炎。
进行手术或使用过程中,需要继续给予吸入乙醚,以维持麻醉状态。
慢性实验预备手术的过程中,仍用麻醉口罩给药,而在一般急性使用,麻醉后可以先进行气管切开术,通过气管套管连接麻醉瓶继续给药。
在继续给药过程中,要时常检查角膜反射和观察瞳孔大小(如发现角膜反射消失,瞳孔突然放大,应立即停止麻醉。
万一呼吸停止,必须立即施行人工呼吸。
待恢复自动呼吸后再进行操作。
2. 苯巴比妥钠此药作用持久,应用方便,在普通麻醉用量情况下对于动物呼吸、血压和其它功能无多大影响。
通常在实验前半至一小时用药。
大鼠水合氯醛麻醉心得本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉,所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。
在先前的实验中,剂量为0.3mL/100g(这个剂量来自于师姐使用的经验),麻醉完全清醒时间约4h(当初没有记录开始清醒的时间)现在由于实验方案有所改动,希望麻醉的时间尽量缩短(1~1.5h),而麻醉深度保持不变,这样在侧脑室注射操作后,大鼠能够尽快的恢复清醒状态,便于后续的实验操作。
因此,对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索,我把它贴出来,跟大家分享一下。
动物:雄性SD大鼠4只,平均体重356g(这里就不算标准差了),水合氯醛浓度分为4%、7%、10%三个水平。
结果:如下表格所示:水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10%水合氯醛剂量 0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3 mL/100g诱导时间约7min 约4min 约7min 约4min 约4min麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉麻醉开始清醒时间约90min 约100min 未观察约68min 114min 结论:1、麻醉的诱导,似乎从4%到(7%、10%),随着浓度的增加,麻醉诱导的时间缩短。
但在7%及10%这两个浓度,麻醉时间基本一致。
2、麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。
3、麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗?》的这篇中,有战友提出“把水合氯醛配成4%的,而不是10%的,这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距,可安全了”,我的经验是这样:(1)确实,4%的水合氯醛在实验中比较安全,我们一般用于追加麻醉的时候,4%水合氯醛每次1mL,追加一到两次,安全度颇高。
(2)而水合氯醛的致死剂量,我不是很了解,希望知道的战友能够告知一声。
对于10%的水合氯醛,我们用到0.3mL/100g也很安全,应该距离致死剂量还有一段距离,麻醉深度与维持时间也很确切。
SD大鼠脂肪采取简介SD大鼠脂肪采取是一种常用的实验方法,用于研究大鼠脂肪组织的特性和功能。
在这篇文档中,我们将介绍SD大鼠脂肪采取的步骤和注意事项。
希望本文能为相关科研人员提供一些帮助。
步骤1.准备实验材料:–SD大鼠–麻醉剂(如异氟醚)–消毒液–手术器械(如手术刀、手术剪、镊子等)–无菌培养皿和离心管2.麻醉SD大鼠:–将SD大鼠置于麻醉箱中,通过给予适量的麻醉剂使其进入麻醉状态。
–确保大鼠完全进入麻醉状态后,将其取出放在手术台上。
3.消毒操作区域:–使用消毒液彻底清洗手术台及手术器械,以减少感染风险。
4.实施脂肪采取:–使用手术刀在大鼠身体的特定位置(如腰部)切开皮肤,并将切口扩大。
–使用手术剪和镊子小心地分离脂肪组织,注意不要损伤其他组织。
–通过运用轻柔的力量,将脂肪组织完整地取出,并放置在无菌培养皿中。
5.脂肪组织的处理:–将采取的脂肪组织放入离心管中,并加入适量的生理盐水进行清洗。
–对脂肪组织进行离心,以去除其中的杂质。
–可根据实验需求,将清洗后的脂肪组织进行冷冻保存或进一步处理。
6.注意事项:–在实施脂肪采取之前,应经过相关机构的批准,并遵循相关伦理规定。
–在实施手术时,应注意麻醉剂的使用量,确保大鼠在手术过程中不会醒来。
–手术过程中要小心操作,避免伤及大鼠的其他组织。
–操作过程中要保持工作区域的洁净,使用无菌器械进行操作,以减少感染风险。
结论SD大鼠脂肪采取是一项常见的实验技术,用于研究脂肪组织的性质和功能。
通过遵循正确的操作步骤和注意事项,可以获得高质量的脂肪样本,为后续的实验研究提供可靠的基础。
同时,在进行实验前应获得相关批准,并遵循伦理规定,以确保动物的福利和实验的科学性。
希望本文对于进行SD大鼠脂肪采取的科研人员有所帮助。
注:本文所提供的步骤和注意事项仅供参考,具体操作应根据实验要求和相关规定来进行。
雌鼠的手术过程:1. 麻醉:先将大鼠采用40mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射进行麻醉,取俯卧位于手术面板上。
2. 备皮:剪去大鼠背部中下部分被毛,碘伏消毒3. 切口:在无菌条件下在背部中线旁0.5-1.0cm做纵行切口。
位置大概位于大鼠肋弓与脊椎边缘夹角的位置稍微向下0.5-1cm,向两侧分离皮肤,筋膜及肌肉,在左右两侧腹后壁肌肉层较薄弱处打开腹腔,切口尽量小。
4. 寻找卵巢:大鼠的活体卵巢呈粉红色,表面呈桑椹状,处于发情周期时可能会充血而呈深红色。
刚一开始寻找卵巢比较困难,有以下几个线索:(1)先找到输卵管,输卵管颜色深红,与肠管相比壁厚较饱满,然后沿着输卵管寻找末端的卵巢;(2)卵巢周围有一块脂肪,与其他组织明显不同,从切口视野下也比较容易识别,呈游离状;(3)卵巢因纤维组织牵引脂肪形成一小凹,如果切口位置得当的话能直接看到此小凹,从此处用无齿镊轻提脂肪就可以看到桑椹状黄豆粒大小的卵巢;(4)要注意的一点是右侧卵巢比左侧要高一些,寻找右侧卵巢的时候稍加注意5. 切除:以无齿镊探入腹腔将卵巢连带输卵管末端轻轻提出体外,小号止血钳在子宫末端与卵巢之间的最细处夹闭,0号手术线结扎后用眼科剪将卵巢全部切除;松开止血钳,将子宫轻轻还纳入腹腔,分别缝合肌肉层和皮肤,对皮后酒精棉球清理手术切口。
手术过程中需要注意动作轻柔,尽量避免对肠管进行过分牵拉和夹捏;卵巢切除前的结扎一定要可靠,避免术后出血造成大鼠死亡(结扎很重要,因为卵巢周围的脂肪组织比较松软,很容易造成结扎线脱落,务必注意,不然老鼠内出血死亡,前功尽弃)。
雄大鼠的去势:1.麻醉剂的选用。
用无巴比妥或乙醚都行。
2.麻醉后,仰卧,露出睾丸,常规消毒等,切一0.5厘米的小口(视情况而定,如果太小可以再切大点,但不要太大),把睾丸挤出,结扎精索,此时可以摘除睾丸,注意消毒处理,缝合即可。
3.去势后的大鼠不能放在温度太低的环境下。
注意饲养条件。
动物麻醉方法及给药剂量一、动物麻醉的目的1. 清醒状态的动物虽然更加接近其生理状态,但是试验过程中的各种强刺激容易引起动物大脑皮质的抑制,使动物机体发生生理机能障碍影响到实验的结果。
甚至引起动物死亡或休克。
2. 防止动物伤害实验操作者。
3. 基于人道主义的考虑,麻醉是动物保护所必需采取的措施。
二、麻醉的类型和方法1. 全身麻醉的方法:吸入麻醉:吸入麻醉是将挥发性麻醉剂或气体的麻醉剂经过动物的呼吸道进入体内产生麻醉的效果。
常见的麻醉剂有乙醚、安氟醚、三氟乙烷等,其中乙醚因麻醉深度容易掌握、安全、动物容易恢复等优点,使用最为广泛。
1)大鼠、小鼠、豚鼠的乙醚麻醉:将含有乙醚的棉球/ 纱布放在大烧杯中,将动物放入,封口。
动物先兴奋后抑制,自行倒下。
当动物角膜反应迟钝,肌肉紧张度降低时,即可取出动物。
如果动物逐渐恢复肌肉紧张(挣扎),可重复麻醉一次,待平静后即可开始试验。
如果试验时间较长,可将动物固定在其口鼻处放置含有乙醚的棉球或纱布,并在实验中注意动物的反应,适时追加乙醚的吸入量,以维持麻醉的深度和实践。
2)猫、兔的乙醚麻醉:将动物放进内装含有乙醚的棉球/ 纱布的麻醉瓶中,封口。
经过1~2min,从动物后腿依次出现麻痹现象,而后失去运动能力,表明动物进入麻醉状态。
4~6min 后可以将动物麻醉,如观察到动物倾斜不能站立、跌倒时,说明动物已经深度麻醉,立即取出动物,这时动物肌肉松弛、四肢紧张度降低,角膜反射迟钝,皮肤痛觉消失,可进行试验。
3)犬的乙醚麻醉:首先将犬用绳子绑定,根据犬的大小选择适合的麻醉口罩,将纱布/ 棉花放到口罩内,加入乙醚。
一人固定犬的前后肢,另一人用膝盖顶住犬的胸颈处,一手捏住头颈(注意力量,防止窒息),将口罩套在犬嘴上。
开始乙醚用量可大一些,之后逐渐减少。
犬开始兴奋后出现挣扎、呼吸不规则现象,而后呼吸逐渐平稳,肌肉紧张度逐渐消失,角膜反射迟钝,对皮肤刺激无反应,此时可开始试验。
等呼吸恢复后在继续吸入。
一、SD大鼠的麻醉1、SD大鼠腹腔麻醉把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml/kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC 就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
大鼠的麻醉
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大鼠的麻醉
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一、SD大鼠的麻醉
1、SD大鼠腹腔麻醉
把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
乳化异氟烷制备:用30%的脂肪乳为载体,在室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制成8%的乳化异氟烷。
即将1.2ml的液态异氟烷和21.3ml的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30ml玻璃容器内,在振荡器上以2000r/min的速度剧烈震荡30s,静置30s,然后再以2000r/min速度剧烈震荡50min,达到平衡后放置于4℃冰箱保存备用。
乳化异氟烷,大鼠腹腔注射的半数有效量(ED50)相当于液态异氟烷0.51~0.64ml/kg,半数致死量(LD50)相当于液态异氟烷1.10~1.46ml /kg,治疗指数(TI)为2.24。
致死量大鼠表现为呼吸抑制、心律失常,继而心跳停止。
病理解剖显示腹腔注射乳化异氟烷不会引起心、肺、肝、肠系膜的病理改变。
2、SD大鼠吸入麻醉
可以作一个小金鱼缸(四方形)算出体积,钻个眼用橡皮塞塞住,老鼠装进去封住缸口,从橡皮塞插上注射器给液态吸入麻醉药(如1ml异氟烷可挥发成196ml的气体),算出需要的浓度就会算出需要的液态麻醉药量,一般一个MAC就够了,老鼠的异氟烷MAC大约是2%。
3、SD大鼠经口气管插管
腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜(五官科检查耳朵用的),对面放置好光源(一个射灯),牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G 或16G套管针(戴芯但不超过管口),看到声门(鱼口状)既可插管。
二、异氟醚大鼠麻醉
安全且具有麻醉科特色。
我们是用异氟醚(应该是国产的吧)麻醉的,用那种市面上常见的可以提的比较大的带盖塑料水杯自制一个封闭的小麻醉空间,水杯是那种直桶透明,盖子类似特百惠按盖,上有一个约2cm饮水孔的那种,用一个合适的注射器前端堵住饮水孔。
使用时打开盖子,将杯子对着大鼠,大鼠顺势会自己进去,然后竖起杯子盖上盖,连抓大鼠都省了,超级安全!然后接麻醉机(临床淘汰的机型,不过作试验足够了),注意要事先准备好连接管道(临床上各种管子都是可以互相接口的),打开挥发
器就行了。
我们一般先开最大,大鼠一会儿不动了就麻好了(杯子要求至少半透明)。
注:我们一般同时接着氧气,所以安全有保障,而且要观察着动物,不动就行了,别麻过了!
手术过程中的维持麻醉一般也采用吸入麻醉,与诱导时基本类似。
取出诱导好的大鼠,快速固定四肢在操作板上,给大鼠口鼻处罩上剪下的合适注射器(好像是20或30ml注射器)前端,注射器头接诱导时的麻醉管道,连接到麻醉机上,一般维持时开到2,同时供氧,没有给它们插过气管插管,也没有出现窒息的(至少我没见过)。
可作除开胸外的手术,一般切皮处给予少量局麻。
作过颈部血管手术和股动静脉穿刺置管效果都很好。
三、大鼠插管麻醉
给大鼠做过气管插管,用的是改装过的小儿一次性喉镜(不用也可以),插管用的是16G的穿刺针(感觉稍有点短,但可以用的),插管时打开台灯,照着颈部位置,这是挑起舌头(其实用个弯镊子也可以的),就可以看到大鼠的声门,并不是很高,在灯光照射下,声门就像个小窗户似的,一开一合的,很明显。
但是由于空间较小,只能用一只眼看,插管时视线部分受阻,大鼠咽部反应,插管时大鼠有动作,因此插管时不要着急,先将导管放在声门附近,看准了再插。
感觉不是很难,尤其是干过麻醉的人,大家都可以试一下。
四、戊巴比妥钠麻醉大鼠
1、用戊巴比妥钠30mg/kg,不是巴比妥钠!应该配制的浓度3mg/m l,1ml/100g体重,即30mg/kg。
如果此剂量不产生麻醉作用,说明巴比妥钠质量有问题。
2、戊巴比妥钠,2%的,就是100ml纯水加2克药,大鼠用0.2ml/10 0g。
3、戊巴比妥钠,1.5%的,就是100ml纯水加1.5克药,大鼠用0.2m l/100g,即30mg/kg,2%戊巴比妥钠50mg/kg,麻醉时间约为2小时左右。
书上推荐的剂量是30~50mg/kg。
做手术的30mg,麻醉不深。
4、3%的戊巴比妥钠,1ml~1.5ml/kg,但要体重称准。
5、戊巴比妥钠,40mg/kg,但不安全,用水合氯醛腹腔注射最安全,300mg/kg。
或是用乌拉坦。
用复合麻醉,2小时左右很有效。
配方:
戊巴比妥钠:0.886g
水合氯醛:4.25g
硫酸镁:2.12g
无水酒精:14.25ml
丙二醇:33.8ml
去离子水定容至100ml
用量:0.25ml/100g
6、2%戊巴比妥钠50mg/kg,书上推荐的剂量是40~50mg/kg(ip);或者苯巴比妥钠+乙醚麻醉,效果也可以.。
7、在建立肠道缺血再灌注损伤模型中使用戊巴比妥钠,是沿用了很多同事的方案。
使用中麻醉很平稳。
效果很不错。
估计肾脏移植模型和肠道相差不大,不知对否。
五、水合氯醛
1、10%水合氯醛300~350mg腹腔注射效果还可以。
麻醉其效时间约3~5分钟,麻醉维持时间1小时左右。
如果手术时间长还可以追加1/ 3~1/4量。
水合氯醛价格不贵大概40~60元,最好现用现配。
2、水合氯醛是比较好的选择,如果手术实验要求麻醉时间较长,可以使用乌拉坦,该药不贵,一次腹腔注射可以维持麻醉5~8个小时。
建议不要采用戊巴比妥钠,因为该药的安全范围较窄,而且动物的个体差异比较大,容易过量而死亡,呼吸道分泌物增多也是该药产生死亡的常见原因。
3、水合氯醛和戊巴比妥钠均可以的,前者的麻醉持续时间短些,看你的手术需要了,前者的一般剂量为350~400mg/kg,后者的剂量一般可为30mg/kg,均是ip注射,安全性是很好的。
戊巴比妥钠最好用进口分装的,上海试剂公司有售。
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