AB-PAS试剂盒使用说明
- 格式:pdf
- 大小:103.47 KB
- 文档页数:4
A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)使用说明书【产品名称】通用名称:A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)英文名称:Strep A Test【包装规格】25人份/盒。
【预期用途】A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)是一种快速免疫层析试验,用于定性检测咽拭子标本中的A群化脓性链球菌抗原。
A群链球菌是引起咽炎的主要病原体。
对该致病原做出准确诊断是正确治疗这种疾病的重要条件。
链球菌感染后要选用抗生素治疗,如果未经治疗,可能会引起诸如风湿热之类的严重后遗症1。
检测A群链球菌感染的传统方法是将咽拭子标本培养24-48小时后,证实β溶血菌落是A群链球菌2。
阳性结果可通过观察羊血琼脂平板上微生物对杆菌肽的敏感性而获得3,4。
基于碳水化合物抗原群特异性可对A群链球菌做出免疫学诊断5。
A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)使用的是免疫层析方法,所用抗体对A群链球菌是特异的。
试验设计可对抗原在试剂上进行提取,没有转移步骤,标本完全包含在检测卡中,结果6分钟可得。
【检验原理】A群链球菌抗原检测试剂盒(胶体金法)是一种检测咽拭子标本中A群化脓性链球菌抗原的薄膜免疫层析试验。
一条吸附到硝酸纤维素膜上的兔抗A群链球菌抗体带,作为样本线,另一条吸附到同一膜上的兔抗种属抗体,作为对照线。
结合有可视粒子的兔抗A群链球菌抗体和种属抗体干燥结合到惰性纤维支持物上,形成的结合物垫与带条带的薄膜结合在一起构成检测条。
检测条和一个放咽拭子的小孔位于书形检测卡的两侧。
试验时,将咽拭子插入检测卡中,从滴瓶中加入提取试剂,将咽拭子转三圈。
温育1分钟后,将检测卡闭合,使提取的标本与检测条接触。
A群链球菌抗原被固定的A群链球菌抗体捕获,并与结合物抗体结合。
固定的抗种属抗体捕获另一可视结合物,阳性结果5分钟内出现,5分钟读数时的阴性结果表明不存在A群链球菌抗原。
试验结果可用紫红色线的存在与否来解释。
阳性结果会出现样本线和对照线两条线,阴性结果只出现一条对照线,其他检测结果表示试验无效。
特殊染色:阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色实验案例1、临床应用用于胃标本组织切片的胃粘膜上皮肠化生分类、糖原和粘液物质形态观察前的染色。
主要应用于胃粘膜上皮化生分类。
在胃粘膜活检时,判别肠化生的类型较之受累程度可能更为重要。
在判别完全或不完全性肠化生时,一般的HE染色即可辩认,但判别是大肠型或小肠型,必须采用AB、PAS及HID粘液的组化染色。
阿利新蓝染色液(PH2.5)用于显示酸性粘液物质,主要应用于粘液性疾病的鉴别诊断。
PAS过碘酸雪夫氏染色液用于糖原和黏液物质染色,主要应用于鉴别细胞内的空泡状变性及心肌病变和心血管方面的疾病,还可用于鉴别观察缺血缺氧早期心肌坏死或梗死区的糖原和糖原累积疾病,糖尿病器官,某些肿瘤的(如:肝细胞瘤、胆管瘤、横纹肌等)诊断及研究。
主要用于糖元、中性粘液的染色。
2、适用范围适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片、火棉胶切片、树脂切片等染色3、原理方法阿利新蓝-过碘酸雪夫氏套染法3、PAS染色液A试剂(高碘酸) B试剂(Schiff氏试剂)4、染色方法切片脱蜡水洗后:1)AB染色液(阿利新蓝染色液PH2.5)染色5~10分钟,水洗;2)PAS染色液A试剂(高碘酸)染色5分钟,蒸馏水洗;3)PAS染色液B试剂(Schiff氏试剂)染色5~10分钟,水洗;4)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:硫酸化粘液呈黑色,酸性粘液呈兰色,中性粘液呈红色。
5、AB染色液(阿利新蓝染色液PH2.5)做酸性粘液物质染色时操作说明染色方法:切片脱蜡水洗后:1)阿利新蓝染色液染色5~10分钟,水洗至无染料脱落;2)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:酸性粘液物质呈蓝色。
6、PAS染色液(过碘酸雪夫氏染色液)做糖元、中性粘液染色时操作说明染色方法:切片脱蜡水洗后:1)高碘酸染色5分钟,蒸馏水洗;2)Schiff氏试剂染色5~10分钟,水洗;3)脱水、透明、封固、镜检。
结果参考:糖元、中性粘液物质呈红色。
北京华越洋生物提供QQ1733351176标准阿利新蓝染色液CAS:75881-23-1分子式:C56H68N16S4Cl4Cu产品简介:阿利新蓝(Alcian)又称爱先蓝或阿尔辛蓝等,是一种类铜钛花青共轭染料,最初用于纺织纤维染色。
这种阳离子染料与酸性基团结合,也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。
阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成。
该异硫脲基呈中度碱性,使阿利新蓝带阳离子。
阿利新蓝使碳水化合物着色的确切机制不明,普遍认为是阳离子的异硫脲基通过静电与组织内的多聚阴离子相连。
如含羧基和硫酸根的酸性黏液物质的羧基和硫酸根形成不溶性复合物,即染料分子中带正电荷的盐键和酸性黏液物质中带负电荷的酸性基团结合呈蓝色。
pH值为2.5时组织内的羧基电离,带有一个负电荷,与阿利新蓝中的阳离子形成盐键,是带有羧基的组织(如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白)染色。
pH值为1.0时,组织内的硫酸根电离,带有一个负电荷,与阿利新蓝中的阳离子形成盐键,使带有硫酸根的组织(如硫酸黏液物质)染色。
中性黏蛋白(如胃黏膜和Brunner腺体部位的中性黏蛋白)不能与阿利新蓝反应。
操作步骤(仅供参考):1、二甲苯脱蜡,通过梯度乙醇后,入蒸馏水再水化。
2、入阿利新蓝酸化液浸泡3min。
3、入阿利新蓝染色液染色30min。
4、流水冲洗5min。
5、入核固红染色液复染5-10min。
6、流水冲洗1min。
北京华越洋生物提供QQ17333511767、梯度乙醇脱水,二甲苯透明。
8、中性树胶封片。
染色结果:注意事项:1、固定液采用10%中性福尔马林。
2、若要选择性鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖,应使用pH值低( pH=1)的阿利新蓝,即调pH值为1.0。
染色程序和孵育时间与pH值为2.5的阿利新蓝操作相同,染色时间应相应延长。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产地:国产提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。
AB-PAS染色某些细胞如胃肠的杯状细胞能分泌粘稠的分泌物,含有大量的糖称粘多糖。
中性粘液物质含有氨基己糖和游离的己糖基,酸性粘液物质也含有氨基己糖并含有各种酸根。
此方法先染阿利新蓝染酸性粘液物质为蓝色,并阻断酸性粘液物质的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生产二醛而着红色。
只有中性粘液物质的乙二醇基被高碘酸生成二醛后与雪夫试剂中的无色品红作用生成红紫色复合物。
染色实验步骤:1、切片脱蜡至水。
2、阿利新蓝染液浸染或滴染5-10min。
稍水洗。
3、0.5%高碘酸水溶液氧化5-10min。
4、流水冲洗数分钟蒸馏水换洗两次。
5、雪夫试剂暗处浸染或滴染15~30min。
6、流水冲洗5-10min。
7、苏木素复染核1min左右,盐酸酒精分化,氨水返蓝。
8、95%酒精I 5min-95%酒精II 5min-无水乙醇I 5min-无水乙醇II 5min脱水,二甲苯透明中性树胶封固。
(一定要湿封,在组织上的二甲苯未挥发完组织变干之前封片,否则易出现黑色的结晶状物即空气结晶)。
染色结果:糖原、中性粘液物质呈红色,酸性粘液物质呈蓝色,混合性粘液物质呈蓝紫色或紫蓝色,胞核呈蓝色。
1、高碘酸溶液为透明溶液,长时间染色如果没有带入杂质的话此溶液一直是透明的,所以无法从常规的颜色辨别高碘酸的好坏,只有定期更换,根据标本的多少1~2月更换一次。
2、雪夫试剂要放入冰箱保存,临用前半小时取出恢复至室温,用后又倒回原瓶内放冰箱保存;雪夫试剂出现淡红色就不能继续使用了。
3、如果没有要求,可以不染核,要染核的话染色一定要浅。
因为酸性粘液物质着蓝色,如果核蓝色太深对比不明显。
4、一定要先染阿利新蓝后染PAS,否则蓝色着染少而浅结果不准确,原因是酸性粘液物质的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生产二醛与雪夫试剂中的无色品红作用生成红紫色复合物后再难跟阿利新蓝结合。
抗A、抗B血型定型试剂(人血清)抗A、抗B血型定型试剂(人血清)使用说明书•【药品名称】通用名称:抗A、抗B血型定型试剂(人血清)汉语拼音:Kang-A、Kang-B Xuexingdingxingshiji(Renxueqing)•【成份】本品主要成份为:合格的人抗A、抗B血型血清•【性状】抗A:浅蓝色澄明液体。
抗B:浅黄色澄明液体。
•【适应症】专用于鉴定人ABO血型。
•【规格】10ml/支•【用法用量】(1)平板法(玻片法):本品与受检者全血或10%红细胞生理氯化钠悬液按1:1使用,不必再稀释,按照有无凝集判定结果。
(2)试管法:本品与受检者5%红细胞生理氯化钠悬液按1:1使用,不必再稀释,摇匀,1000r/min离心1分钟或室温静置1小时,按照有无凝集判定结果。
血型抗A试剂抗B试剂A+-B-+O--AB++•【注意事项】(1)对含有较多自身冷凝集素的受检者,在鉴定血型时往往被误定为AB血型,遇到此种情况,需用37?C生理氯化钠溶液洗涤受检者红细胞2~3次,以去除吸附在红细胞上的冷凝集素,然后再鉴定血型。
(2)在做配型试验时,如发现有不配合现象,则取受检者血清,用已知A或B血型红血胞进行反定型试验,以核实原鉴定的血型是否正确。
(3)用立即试管法不能测出亚型(如Ax),需延长作用时间。
(4)凡抗球蛋白试验(CoombsTest)阳性、新生儿溶血病或获得性溶血性贫血患者红细胞,因其红细胞表面吸附有抗体球蛋白,故干扰血型的鉴定,遇到此种情况需进行吸收释放试验。
(5)本品如出现浑浊或变色则不能使用。
(6)在有效期内使用。
•【孕妇及哺乳期妇女用药】不影响人体•【儿童用药】不影响人体•【贮藏】2~8?C避光保存•【包装】抗A、抗B各1支/盒塑料瓶•【有效期】12个月【注意】药物说明书里面有三种标识,一般要注意一下:1.第一种就是禁用,就是绝对禁止使用。
2.第二种就是慎用,就是药物可以使用,但是要密切关注患者口服药以后的情况,一旦有不良反应发生,需要马上停止使用。
抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)操作规1抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)操作规程一、检测目的用于检测患者血型二、标本要求新鲜全血或5%红细胞悬液社三、试剂单克隆抗A、抗B抗体(两瓶\盒)四、测定原理:利用单克隆抗A、抗B抗体和相应的红细胞抗原发生特异性凝集反应的原理。
能和抗A抗体发生凝集反应,而不和抗B抗体反应的为A型;和抗B抗体发生凝集反应而不和抗A抗体发生反应的为B型;同时能和抗A及抗B抗体发生凝集反应为AB型;而不被抗A及抗B 抗体凝集的则为O型。
五、操作步骤(玻片法)1.标记:取一载玻片,用蜡笔画上直径2cm左右的两个圆圈,分别标记抗A、抗B。
2.抗血清:在玻片蜡笔圈内按标记所示分别滴加抗A、抗B标准抗血清各一滴。
3.红细胞:在抗A、抗B圈内加被检者全血各一滴。
用玻棒将红细胞与抗体充分混匀,摇动玻片,肉眼观察玻片蜡笔圈内有无颗粒状凝集及凝集程度,判定阴性、阳性。
阴性指视野中红细胞程均匀散布,无凝集颗粒显微镜下红细胞分散存在,无聚集靠拢现象。
阳性时红细胞出现凝集。
六、质量控制1. 分型血清质量性能符合要求,用毕后应放置冰箱保存,以免细菌污染。
2.试管、滴管和玻片必须清洁干燥,防止溶血。
3.按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以6℃为最强,但为了防止冷凝集现象的干扰,一般仍在室温内进行试验,36℃可反应减弱。
4.观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。
七、干扰因素1.分型血清效价太低、亲和力不强;8 s2.受检者红细胞上抗原位点过少或抗原性减弱;3.受检者血清中缺乏应有的抗-A/抗-B抗体; `4.各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集。
部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体;5.由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因;6.血清中有意外抗体,如自身抗-I,常引起干扰;7.老年人血清中抗体水平大幅度下降;编写者:科主任签字:日期:2011年4月6日。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒使用说明产品简介:β-半乳糖苷酶染色试剂盒(β-Galactosidase Staining Kit)是一种基于衰老时SA-β-Gal(senescence-associatedβ-galactosidase)活性水平上调而对衰老细胞或组织进行染色检测的试剂盒。
在普通的光学显微镜下就可以观测到细胞或组织的衰老情况。
绝大多数正常细胞被认为仅有有限的分裂能力,在不能分裂后就进入衰老状态。
此时细胞仍然是存活的,但细胞的基因和蛋白的表达谱发生了很大改变。
衰老细胞不能在一些常规的刺激下再诱导细胞分裂,并且衰老细胞的细胞周期分布也比较特殊,不同于一些损伤诱导的细胞休眠,也不同于细胞生长接触抑制的情况。
衰老细胞通常体积变会大,表达pH 6.0时有高酶活性的β-半乳糖苷酶。
细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化(aging)的一种潜在原因。
本试剂盒可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物,在衰老特异性的β-半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。
本试剂盒仅染色衰老细胞,对衰老前的细胞(presenescent cells)、静止期细胞(quiescent cells)、永生细胞(immortal cells)或肿瘤细胞等不会染色。
对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定,对于普通的切片也至少足够检测100个样品,使用6孔板测定,足够测定100个样品。
产品组成:试剂(C):β-半乳糖苷酶染色液A1ml4℃避光试剂(D):β-半乳糖苷酶染色液B1ml4℃避光试剂(E):β-半乳糖苷酶染色液C100ml4℃避光使用说明书1份自备材料:1、PBS或HBSS2、细胞培养器皿3、显微镜操作步骤(仅供参考):(一)贴壁细胞染色:1、对于6孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用PBS或HBSS洗涤1次,加入1ml β-半乳糖苷酶染色固定液,室温固定15min。
PAS染色试剂盒操作步骤及注意事项
货号:G1280
规格:2×50ml/2×100ml
保存:2-8℃保存,避免光照,复检期为6个月。
试剂盒组成:
高碘酸液50ml/100ml
Schiff染液50ml/100ml
产品说明:
PAS染液(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖原或其他多糖物质。
高碘酸是一种氧化剂,能将多糖分子中相邻的二醇基氧化成二醛基,醛基能与希夫试剂(Schiff reagent)反应生成红色不溶性复合物。
操作说明:(仅供参考)
1、染色步骤
1)切片脱蜡至水;
2)高碘酸液处理5-10分钟;
3)流水冲洗5分钟,擦干切片上多余水分;
4)滴加Schiff染液,染色10-15分钟;
5)流水清洗5-10分钟;
6)Mayer苏木素复染;
7)分化、水洗;返蓝、水洗;
8)常规脱水,二甲苯透明;
9)中性树胶封片。
2、显微镜观察结果:糖原、中性粘液物质呈红色,细胞核呈蓝色。
注意事项:
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.试剂均应低温保存,临用前半小时取出恢复室温。
3.高碘酸处理温度以不高于20℃为宜,室温高时,处理时间可适当缩短。
Schiff染液染色时间可随温度调整,室温高可减少染色时间,冬季室温低,可延长至20分钟左右。
4.第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。