浮游菌检测操作规程演示教学

XXXXXXXXXXX有限公司质量控制管理制度1 目的：规定药品生产洁净室（区）中悬浮粒子的检测方法和操作要求。

2 范围：适用于洁净室（区）中悬浮粒子的监测。

3 责任：QA人员。

4 规程：4.1 引用标准：GB/T16292-16294-2010996《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》、《药品生产质量管理规范》（2010年修订）。

4.2 概述：洁净区悬浮粒子监测采用计数浓度法，既通过收集悬浮在空气中的生物性粒子于专门的培养基（选择能证实其能够支持微生物生长的培养基），经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室的微生物浓度。

4.3 仪器：浮游菌采样器，型号：ASB-2100型，使用时严格按照仪器操作SOP （JSZB01-071）操作。

4.4 测试方法4.4.1 方法提要本标准采用的方法是计数浓度法。

即通过收集悬浮在空气中的生物性粒子于专门的培养基（选择能证实其能够支持微生物生长的培养基），经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室的微生物浓度。

4.4.2 人员的职责和培训洁净室（区）的测试人员应进行本专业的培训并获得相应资格后才能履行对洁净室（区）测试的职责，其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。

洁净室（区）的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不能带进D级以上的区域。

4.4.3 测试要点4.4.3.1必须按照测试仪器的检定周期，定期对仪器作检定。

使用校验合格，且在使用有效期内的仪器。

4.4.3.2测试仪器在未进入被测区域时，先清洁表面，使用测试仪器时应严格按照仪器说明书操作。

4.4.3.3仪器开机，预热至稳定后，方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正，同时检查采样流量，并根据采样量设定采样时间。

4.4.3.4 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造，采样器严禁渗漏，内壁应光滑。

4.4.4测试步骤4.4.4.1 将洁净的培养皿经170℃干热灭菌3小时，胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA），经高压蒸汽121℃、15分钟灭菌冷却至约60℃备用。

浮游菌采样器操作规程浮游菌采样器主要用于采集水中的浮游菌，可以帮助研究人员了解水体中浮游菌群落的组成和变化趋势，为水生态系统的研究提供重要依据。

浮游菌采样器的特点是采样快速、操作简单、取样量大、样品质量好等。

二、浮游菌采样器的结构和组成浮游菌采样器由采样器本体、滤膜、过滤器等组成。

采样器本体主要由采样头、采样管、手柄等组成。

滤膜是用于过滤水样的部件，是采样操作中最关键的部分之一。

过滤器则是用于将过滤后的水样从滤膜中取出的部件。

三、浮游菌采样器的操作步骤1. 准备工作：将浮游菌采样器取出并检查是否完好无损，将采样头和采样管拆开，准备滤膜和过滤器。

2. 操作步骤：(1) 将采样头插入采样管中，用力固定。

(2) 将滤膜安装在采样头上，注意滤膜的方向应与采样头相同。

(3) 将采样管插入水中，使采样头尽量靠近水底，并在不断移动采样器的同时进行采样。

(4) 采样时间一般为5-10分钟，在采样过程中要注意不要碰到水底或者岸边，以免污染样品。

(5) 将采样器取出，拆下采样头和采样管，将滤膜用过滤器取出，将过滤器盖好，标明采样时间和地点等信息。

(6) 将过滤后的水样排空，清洗采样器和滤膜，并做好采样器的保养工作。

四、浮游菌采样器的注意事项1. 在进行采样操作前，要检查采样器和滤膜是否完好无损，以免出现漏水等情况。

2. 采样时要注意不要碰到水底或者岸边，以免污染样品。

3. 采样时间一般为5-10分钟，不要过长或过短。

4. 采样完毕后要立即将采样器拆开取出滤膜，并做好标记和记录工作。

5. 采样器使用后要及时清洗和保养，保证下次使用时的可靠性和准确性。

以上就是浮游菌采样器的操作规程，希望能够为大家在水生态系统的研究中提供一些帮助。

文件制修订记录一、目的：建立洁净区浮游菌测定操作规程，使操作标准化，规范化。

二、范围：各生产车间、质控部、取样间等洁净区。

三、责任人：质控部检验员。

四、管理内容：1 标准依据：新版《药品生产质量管理规范》2 微生物监测的标准：为评估无菌生产的微生物状况，应对微生物进行动态监测，监测方法有沉降菌法、定量空气浮游菌采样法和表面取样法（如：棉签擦拭法和接触碟法）等。

动态取样应避免对洁净区造成不良影响。

对表面和操作人员的监测，应在关键操作完成后进行。

在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微生物监测。

2.1 微生物监测的动态标准洁净区微生物监测的动态标准如下：（2）单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。

3 浮游菌的测试方法3.1 方法提要本方法采用计数浓度法，即通过收集悬游在空气中的生物性粒子于专门的培养基，经若干时间，在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，从而判定洁净环境内单位体积空气中的活微生物数，以此来评定洁净室（区）的洁净度。

3.2 所用的仪器、设备和培养基a）浮游空气尘菌采样器；b）培养皿；c）培养基；d）恒温培养箱。

3.2.1 浮游空气尘菌采样器；严格按照《FKC-1型浮游空气尘菌采样器标准操作维修保养规程》进行仪器操作。

3.2.2 培养皿采样器一般采用∅150mm×15mm、∅90mm×15mm、∅65mm×15mm三种规格的硼硅酸玻璃培养皿。

可根据所选用采样器选择合适的培养皿。

3.2.3 培养基普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。

其配制方法见附录A。

3.2.4 恒温培养箱必须定期对培养箱进行检定。

4 测试步骤4.1 测试前仪器、培养皿表面必须严格消毒。

4.1.1 采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂消毒，用于A级洁净室的采样器宜一直放在被测房间内。

4.1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。

浮游菌检测标准操作规程1.目的规范浮游菌检测操作和方法。

2.适用范围适用于医药工业洁净室和洁净区，微检室或局部空气净化区域（包括洁净工作台）的浮游菌的测试和环境的验证。

3.责任者检测人4.方法提要4.1本标准采用的方法是计数浓度法。

即通过收集悬浮在空气中的生物性粒于于专门的培养基（选择能证实其能够支持微生物生长的培养基），经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数，以判定该洁净室的微生物浓度。

5.测试要点4.5.1必须我照测仪器的检定周期，定期对仪器作检定。

使用校验合格，且在使用有效期内的仪器。

4,5.2测试仪器在未进入被测区域时，若必需，则先清洁表面，或在相应的洁净室内准备和存放（用保护罩或其他适当地外罩保护仪器）。

4.5.3在100级洁净室内用纸时，上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物，在100级级洁净室内不能用铅笔或橡皮。

4.5.4使用测试仪器时应严格按照仪器说明书操作。

4.5.4.1仪器开机，预热至稳定后，方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正，同时检查采样流量，并根据采样量设定采样时间。

4.5.4.2采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。

4.5.4.3采样管严禁渗漏，内壁应光滑。

4.5.4.4釆样管的长度应根据测点的高度定，尽量减少弯曲。

4.6 培养皿4.6.1采用ɸ90 mm×15 mm规格的培养皿。

4.6.2离心式采样器采用专用的固形培养条。

4.7培养基大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或沙氏培养基（SDA）其配制见对应说明书4.8恒温培养箱必须定期对恒温培养箱进行校验。

4.9测试步骤4.9.1测试前仪器、培养基表面必须严格消毒。

4.9.4.1采样器进入被测试的房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100级洁净室的釆样器宜预先先放在被测房间内。

4.9.4.2用消毒剂擦净培养皿的外表面。

4.9.4.3采样前，先用消毒剂清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面，釆样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。

1.目得建立浮游菌检测操作规程,规范人员操作，保证洁净环境能达到洁净要求。

2.范围本规程适用于本公司洁净室(区)中浮游菌得监测.3.依据YＹ0033-200０《无菌医疗器具生产管理规范》、GB/T16293－２010《医药工业洁净室（区)浮游菌得测试方法》4.职责品管部负责洁净室(区)中浮游菌得监测。

5.浮游菌测试步骤5、1测试前仪器、培养皿表面应严格消毒5、１、1采样器进入被测房间前先用消毒房间得消毒剂灭菌，用于100及洁净室得采样器宜预先放在被测房间内.5、1、２用消毒剂擦拭培养皿得外表面。

５、１、3采样前,先用消毒剂清洗采样器得顶盖、转盘以及罩子得内表面，采样结束，再用消毒剂轻轻喷射罩子得内壁与转盘。

5、1、4采样口及采样管，使用前必须高温霉菌，如用消毒剂对采样管得外壁及内壁进行消毒时,应将管中残留液倒掉并晾干。

5、1、５采样人员应穿戴与被测洁净区域相应得工作服,在转盘上放入或调换培养皿前,双手用消毒剂消毒或无菌手套操作。

5、1、6采样仪器经消毒后先不放入培养皿,开启浮游菌采样器，使仪器中得残余消毒剂蒸发，时间不少于5min,并检查流量并根据采样量调整设定采样时间.5、１、7关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子。

5、1、8置采样口于采样点后，开启浮游菌采样器进行采样。

５、2培养5、2、１全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。

5、2、２采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TＳA）配制得培养皿经采样后,在30℃—35℃培养箱中培养,时间不少于2d;采用沙氏培养基(SDA)配制得培养皿经采样后，在2０℃—2５℃培养箱中培养，时间不少于5d。

５、2、3每批培养基应有对照试验，检验培养基本身就是否污染。

可每批选定３只培养皿作对照培养。

5、3菌落计数5、３、1用肉眼对培养皿上所有得菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5-1０倍放大镜检查,就是否遗漏.5、3、2若平板上有2个或2个以上得菌落重叠，可分辨时仍可以2个或２个以上菌落计数。

1. 目的建立洁净室（区）浮游菌检测的标准操作程序，用以规范检测人员的检测操作。

2. 范围适用于洁净室（区）浮游菌的检测。

3. 职责3.1 专职检验员负责洁净室浮游菌的检测，并在检测结束后出具检测记录报告。

3.2 质量监督员负责监督本规程的执行。

4. 内容4.1仪器设备及培养基4.1.1培养皿：玻璃培养皿或一次用无菌培养皿。

4.1.2培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）。

4.1.3仪器：浮游空气尘菌采样器、恒温培养箱、立式高压蒸汽灭菌锅。

4.2检测用培养基平皿的制备玻璃培养皿使用前应先灭菌，制备培养基平皿时注意无菌操作，每批次应设置对照平皿。

制备好的培养基平皿在2～8℃的环境中存放。

4.3 采样空态或静态测试时，采样点的布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于集中，按照洁净区的面积大小，而制定最少采样点数目，不得少于最少采样点数目。

动态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置，应根据产品的生产及关键工艺操作区设置。

表1 最少采样点数 表2 最小采样量面积（m 2）洁净度级别10010 000 100 000 <10 2～3 2 2 ≥10～<20 4 2 2 ≥20～<40 8 2 2 ≥40～<100 16 4 2 ≥100～<200 40 10 3 ≥200～<40080206注：表中的面积，对于单向流洁净室指的是送风面积，对于非单向流洁净室指的是房间面积。

4.3.1 采样点位置工作区采样点的位置离地0.8米～1.5米左右（略高于工作面）。

送风口测点位置离开送风面30cm 左右，可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。

图1 采样点位置参考图4.3.2 采样次数每个采样点一般采样一次。

4.4 采样注意事项4.4.1 采样前应仔细检验每个培养基平皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。

洁净度级别 采样量（L/次）100级 1000 10 000级 500 100 000级 100 300 000级1004.4.2测试用具要做无菌处理，以确保测试的可靠性，正确性。

标准操作规程1 目的规范FSC-Ⅰ浮游生物采样器使用操作。

2 适用范围FSC-Ⅰ浮游生物采样器使用操作。

3 责任者质管部QA检验人员。

4 内容4.1 使用前，连接主机与采样泵之间的导管和电源。

4.2 接上电源线，打开电源开关，此时电源开关上的LED发光管发亮，并显示数字“1”，表示仪器正常。

4.3 运转时间的设定通过控制面板上的“设置Ⅰ”和“设置Ⅱ”按键来实现：“设置Ⅰ”是对分/转个位数的选择，“设置Ⅱ”是对分/转十位数的选择。

4.4 按“启动”键，抽气泵开始抽气，采样托盘按设定的时间进行运转。

采样进行期间，不能改变设定的时间，即按“设置Ⅰ”和“设置Ⅱ”键不响应。

4.5 空气的采样量通过面板上的流量调节旋钮来实现，使流量计中的浮子上方与50L刻度线对齐。

4.6 在流量和运转时间设定完成后，打开采样器透明外罩，迅速将准备好的培养基平皿放入采样托盘内，并把平皿上盖拿出，立即把透明外罩拧上密封。

调节刻度盘，使狭缝平面与培养基表面距离保持在2.0～2.5mm范围内。

4.7 按“启动”键，进行采样，采样结束后，打开外罩，取出培养基平皿。

5 注意事项5.1 本仪器培养皿的直径为15cm。

培养基使用前需经35℃培养48h，检查无菌生长后，方可使用。

5.2 仪器可以和房间一起熏蒸消毒，从一个房间搬到另外一个房间时，用75%洒精棉球对采样口等处进行擦拭消毒。

5.3 检测时，应先测洁净级别高的区域，后测洁净级别低的区域。

标准操作规程5.4 采样时，真空泵的空气过滤器必须放在真空泵箱中，以减少对净化室空气气流的干扰。

5.5 培养皿中培养基的高度尽量一致，若狭缝口离培养基面距离过低或过高，需调节后采样。

5.6 本仪器每年计量一次。

6 型号：FSC-Ⅰ7 生产厂家：苏州吴县净化技术研究所。

浮游菌采样器采样操作过程
浮游菌采样器是一种高效的多孔吸入式尘菌采样器。

它根据颗粒撞击原理和等速采样理论设计，采样直接，采样口风速与洁净室内风速基本一致，能更准确地反映洁净室内的微生物浓度。

采样时，带尘菌空气高速通过微孔，被撞击在培养皿内的琼脂表面；这些活体微生物在培养过程中，发生动态再水化过程，高速生长，从而更快得出结果。

采样操作过程：
一、准备工作
1、将制作好的培养基倒入已灭菌的培养皿中，30~35℃预培养48小时，确证无菌后使用。

2、将仪器用紫外灯照射或用75%酒精擦拭后，以无菌状态传入洁净室。

二、操作方法
1、将浮游菌采集器放置在工作台面上，用采样口直接采样。

如测量位置较高可使用采样管，把管子延伸到所要采样的空间。

2、打开电源通电，根据选择的周期按设置键。

设置键可设置1~10、20、30~90分钟分18档调节，即每按1次设置键，增加10分钟。

3、将盛有培养基的培养皿置于转盘上，放上外罩，压紧压块使之外罩与底座密封。

4、调节刻度盘，旋转调节钮，使狭缝与培养基保持在2mm距离。

5、按启动键，本机待机15秒后，泵开始抽气，转盘开始360°旋转，调节流量旋钮，使流量计浮子上端与50L刻度线相平。

采样完成，拧下外罩，迅速把平皿上盖盖上并取出，并按上述方法放入新的平皿进行第二次采样（若使用采样管，
则换上预先消毒过的第二根采样管）。

6、取出的平皿放置30~35℃培养箱培养，2天后计数。

7、使用完毕后，填写《检验仪器设备使用记录》。

目的: 建立洁净（区）室浮游菌检测标准操作规程。

范围: 适用于洁净（区）室浮游菌监测。

责任：QC人员负责实施, QA人员负责监督。

内容:1取样前准备工作:1.1 依据检测区域的取样点数, 按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基。

1.2 在超净工作台内, 以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装, 待培养基凝固后移出洁净区。

1.3 将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于30～35℃培养48小时。

取出逐个检查, 确认无菌落数后即可使用。

1.4采样: 将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样。

2.仪器、设备和培养基:2.1所用的仪器、设备和培养基:2.1.2 浮游菌采样器2.1.3 培养皿（φ90mm×15mm）2.1.4 培养基（营养琼脂培养基）2.1.5 恒温培养箱2.2 仪器、设备、培养基的要求:2.2.1 浮游菌采样器:2.2.1.1 浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。

2.2.1.2 应严格按仪器说明书的要求进行操作。

1.2.1.4 每次测试前应先接通电源, 启动真空抽气泵, 然后调节流量计和定时器。

2.2.1.5 空气采样量根据需要选定, 已知采样器的流量（L/min）,设定采样时间（min）两者相乘即得采样量（L）。

2.2.1.6 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造, 采样管严禁渗漏, 内壁应光滑, 采样管的长度应根据测定点的高度定, 尽量减少弯曲。

3.测试方法：3.1 测试用仪器、培养皿表面必须严格消毒。

3.1.1 采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌。

3.1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。

3.1.3 采样前, 先用消毒剂消毒采样器的顶盘、转盘以及罩子的内外面, 采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。

3.1.4 采样口及采样管使用前必须高温灭菌, 如用消毒剂对采样管的外壁、内壁进行消毒, 应将管中的残留液倒掉并晾干。