感染性疾病实验诊断

细菌感染的实验室诊断（一）实验室诊断主要包括以检测致病菌及其抗原、产物或核酸为目的的细菌学诊断，以及检测患者血清中特异性抗体为目的的血清学诊断。

一、细菌学诊断（一）标本采集细菌感染性疾病的实验室检查结果主要取决于临床标本的质量、采集时间及方法、实验人员的技术熟练程度及经验。

临床医生应该知道何时和怎样采取标本，需作哪些实验室检查，以及如何解释结果。

为提高致病菌检出率，避免诊断错误或漏检，标本采集与送检过程应遵循下列原则：1．严格执行无菌操作，尽量避免患者正常菌群或外界环境中杂菌污染标本。

采取局部病变标本处，不可用消毒剂，必要时宜以无菌生理盐水冲洗，拭干后再取材。

从呼吸道、消化道、泌尿生殖道、伤口或体表分离可疑致病菌时，应与其特定部位的正常菌群及临床表现一并加以考虑，因为目前内源性感染呈不断上升趋势。

2．根据致病菌在患者不同病期的体内分布和排出部位，采集不同的标本（表7-1）。

例如流行性脑膜炎患者取脑脊液、血液或出血瘀斑；伤寒患者在病程第1～2周内取血液，第2～3周时可取粪便。

尽可能采集病变明显部位的材料。

3．应在疾病早期和使用抗菌药物之前采集标本，否则可能需停药数天后采集，或者在分离培养时加入药物拮抗剂。

4．标本必须新鲜，采集后尽快送检，尤其是检测抵抗力弱的细菌。

若不能立即送检，应将标本置于特殊的转运培养基中，低温保存，以减缓致病菌的死亡，阻止杂菌的过度生长。

送检过程中，除不耐寒冷的脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等要保温外，多数菌可冷藏送运。

（二）致病菌的检验程序主要有直接涂片染色镜检、分离培养、生化试验、血清学试验等，有的尚需作动物试验等。

细菌学快速诊断新技术主要有核酸杂交（nucleic acid hybridization）和聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）等。

敏感性、特异性和检测效率是影响临床诊断程序选择的重要因素。

1．直接涂片染色镜检直接涂片染色镜检法可在显微镜下直接观察致病菌的形态、大小、排列方式和染色特点。

感染性疾病实验室诊断方法的 Logistic回归分析王春晖;刘露;吴学朕;廖惠贞【摘要】Objective To establish a Logistic regression model for investigating the diagnostic values in the de‐tection of C‐reactive protein (CRP) and serum amyloid A (SAA) and procalcitonin (PCT) in the identification of in‐fectious diseases .Methods 230 cases of virus infections ,245 cases of bacterial infections and 200 cases of healthy controls were enrolled in the study .The single factor and multiple factors analysis method were adopted to conduct the comparative analysis on the laboratory tests results ,the Logistic regression model of infectious disease diagnosis method was established and ROC curve was drawn according to the model .Results The differences of CRP ,SAA , PCT ,WBC and SAA/CRP ratio had statistical significance between the infection group and the control group (P<0 .05) .The levels of CRP ,SAA ,PCT ,WBC and NEU% in the bacterial infection group were obviously higher than those in the virus infection group and the control group ,but serum LY% and SAA/CRP ratio in the virus infection group were significantly higher than those in the bacterial infection group (P<0 .01) .The four indicators in the bac‐terial infection group were screened into the Logistic regressionmodel:CRP ,SAA ,PCT and WBC ,in which the areas under ROC curve of CRP ,SAA and PCT were more than 0 .9 ;only SAA and WBC in the virus group were entered in‐to the Logistic regression models ,in which the area under ROC curve of SAA was 0 .859 .Conclusion The Logistic regressionmodel based on the experimental diagnostic technology is helpful for clinical early differential diagnosis of infectious disease ,especially the joint detection of SAA and CRP or PCT is more meaningful .%目的：建立Logistic 回归模型，探讨检测C反应蛋白（CRP）、血清淀粉样蛋白A（SAA）及降钙素原（PC T ）在感染性疾病鉴别中的诊断价值。

2019年华医网继续教育答案-257-感染性疾病的实验
室诊断及临床意义
备注:红色选项或后方标记“[正确答案]”为正确选项
(一)病毒性肝炎的实验室检查
1、患者HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBe(-)、抗-HBcIgM(+)、抗-HBs(-)，正确的判断是（）
A、患慢性乙型肝炎
B、患急性乙型肝炎[正确答案]
C、患慢性迁延性肝炎
D、乙肝恢复期
E、患慢性活动性肝炎
2、常用于乙肝治疗过程中疗效监测的是（）
A、乙肝血清标志物检测
B、乙肝病毒耐药检测
C、乙肝病毒培养
D、乙肝核酸定量检测[正确答案]
E、乙肝病毒基因分型检测
3、临床上用于诊断肝脏疾病的酶，下列那组检测最恰当（）
A、CKGGTALPAMS
B、ASTALTALPGGT[正确答案]
C、AMYLDHGGTα-HBD
D、ACPASTLDHCK
E、TnIASTACPALP
4、可引起碱性磷酸酶升高的疾病不包括（）
A、骨肿瘤
B、肝实质疾病
C、肝癌
D、恶性贫血[正确答案]。

感染性疾病的早期诊断方法课题申报：感染性疾病的早期诊断方法摘要：感染性疾病是威胁人类健康的重要因素之一。

早期诊断是感染性疾病有效控制的关键步骤，对于减少疾病传播、提高治疗效果、降低疾病死亡率具有重要意义。

本课题旨在探索感染性疾病早期诊断方法，提高感染性疾病的防控水平。

通过综合运用现代生物技术手段，结合临床诊疗实际，寻找适用于早期感染性疾病诊断的新型生物标志物及相应检测技术，为感染性疾病的早期诊断提供科学依据。

一、研究背景及意义：感染性疾病是指由各种病原微生物感染引起的疾病，如细菌性感染、病毒感染、真菌感染等。

世界卫生组织数据显示，每年全球约有数百万人因感染性疾病而死亡，给人类的生命安全造成了严重威胁。

感染性疾病的早期诊断对于及时采取有效的治疗措施、阻断传播链条具有重要意义。

然而，由于感染性疾病表现复杂多样，临床症状不一，传统的病原学检测方法存在诊断时间长、敏感性低等问题，导致延误诊断，影响治疗效果。

二、研究目标：该课题旨在探索感染性疾病的早期诊断方法，提高感染性疾病的防控水平，具体目标包括：1. 系统调研：对目前感染性疾病的检测手段、技术及流程进行广泛调研，了解技术的发展趋势和研究热点。

2. 生物标志物的筛选与验证：通过基因组学、蛋白组学等技术手段，筛选和鉴定适用于感染性疾病早期诊断的生物标志物，并进行临床样本验证。

3. 早期诊断技术的建立：基于生物标志物的筛选结果，开发相应的检测技术，建立早期感染性疾病的诊断方法，并进行准确性和可行性的验证。

4. 临床验证与应用：在一定的临床样本中进行验证与应用，评估该方法的敏感性、特异性和临床实用性。

5. 剖析机制：通过实验室模型的建立，剖析早期感染性疾病发生、发展等机制，为手段的改进提供科学依据。

三、研究内容与方法：1. 系统调研阶段：通过文献查阅、实地考察和专家访谈等方式，了解当前感染性疾病诊断方法、存在问题及前沿技术，并分析总结，确定研究方向和目标。

2. 生物标志物筛选与验证阶段：采用基因组学、蛋白组学等方法，对感染性疾病的潜在生物标志物进行筛选和鉴定，并通过临床样本验证其可行性和准确性。

感染性疾病的实验室诊断感染性疾病的实验室诊断介绍实验室检查可直接对微生物进行检测（如：肉眼观察、利用显微镜观察、病原体在培养基上生长）或者间接对微生物进行检测（如抗体检测）。

一般的检测手段包括·显微镜检查( 显微镜检查)·培养(培养)·免疫学试验（凝集反应试验如乳胶凝集试验、酶免疫测定、蛋白质印迹、沉淀试验、补体结合试验）免疫学试验·核酸为基础的鉴定方法( 以核酸为基础的鉴定方法)·非核酸鉴定方法( 以非核酸为基础的鉴定方法)培养通常是明确微生物的金标准，但是结果可能要在数天或数周后才能得到，并且不是所有的病原体都可以通过培养得到，因此可以选择其他有参考价值的试验。

当一种病原体得到培养及鉴定后，实验室就可以评估其对抗微生物药物的敏感性药敏试验。

有时也可以用分子生物学的方法来检测特定的耐药基因。

一些试验（如革兰染色，常规的需氧培养）可以检出多种病原体，并且通常在许多可疑的感染性疾病的诊断中被使用。

然而由于通过这些试验可能使得一些病原体被遗漏，因此临床医生必须知道对每种可疑病原体检测所用的每个试验的局限性。

当出现可能被遗漏的情况时，医生需要对怀疑的病原体进行特异性的检测（如特异染色或特异培养基）或建议实验室选择更多有针对性的试验进行检测。

显微镜检查显微镜检查速度快，但是准确性有赖于检测者的经验以及检测设备的质量。

除标准的实验室外，由于质控方面的不足常常限制了医生选择显微镜检查作为确诊的方法。

组织的显微镜检查可能需要区分病原微生物来自于侵袭性疾病或仅仅为表面定植－这种区分往往难以由培养来判别。

虽然有一些不能被染色的标本要通过水分固定来检出真菌、寄生虫（包括蠕虫的卵和幼虫）、阴道来源细胞和能动的微生物（如毛滴虫属）、梅毒螺旋体（通过暗视野显微镜），但是大多数标本用染剂处理后都能使病原体带有颜色，让它们在背景中突显出来。

为了提高真菌的可分辨度，可用10%氢氧化钾（KOH）溶解周围的组织和非真菌病原体。

感染性疾病诊疗规范第一节轮状病毒感染【诊断要点】1.流行病学：流行季节北方以寒冷季节1～3月份为主，南方以春夏季为主，可以通过水污染暴发流行，亦可以通过接触传播。

2.临床表现：潜伏期数小时至一周。

（1）起病急，腹泻为主，黄色水样便，无粘液及脓血便，腹泻每天5～10次不等，伴恶心，呕吐，腹痛及乏力。

（2）腹部压痛，肠鸣音增强，部分患者有不同程度的脱水。

（3）体温正常或低热，病程数日或稍长，预后良好。

3.实验室检查（1）常规检查血白细胞大致正常或稍偏高，分类中淋巴细胞增多，大便外观稀水样便，镜检多无异常，少数可见少量白细胞。

（2）粪便中病毒抗原检测。

1）电镜检查：粪便作免疫电镜检查可检出轮状病毒颗粒。

2）单克隆法或免疫斑点试验检测粪便上清液中的病毒抗原，后者敏感性及特异性较强。

3）用法检测患者血清中特异性抗体，恢复期有4倍以上的增高则有诊断价值。

4）病毒核酸电泳图分析：提取病人粪便中的病毒核酸进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据电泳图谱即可确诊。

【鉴别诊断】本病应与其他腹泻性疾病鉴别。

【治疗原则】无特效抗病毒药物，以对症治疗为主，纠正脱水，维持水电解质平衡。

【预防】隔离病人，防止食物和水的污染，加强个人卫生和饮食卫生。

第二节手足口病【诊断要点】1. 流行病学：多发于4—9 月份，以5岁以下儿童多见，可有密切接触史。

2. 临床表现：可有发热，手足口臀部红色斑丘疹，疱疹，部分重症患儿可有易惊，肢体抖动，意识障碍，脑膜刺激征阳性，病理征阳性，肺出血，呼吸循环衰竭等。

3. 实验室检查：血常规示大多数白细胞正常，淋巴细胞百分比升高。

部分患儿可有白细胞升高，血糖升高。

，，，—升高等【治疗原则】1. 行消化道，呼吸道隔离1—2 周，卧床休息。

流质，半流质饮食。

皮肤粘膜皮疹护理。

2. 可用病毒唑抗病毒治疗5—7 天，根据病情酌情应用痰热清，喜炎平，甘利欣等。

重症患者根据病情应用甘露醇，加强龙，丙种球蛋白等。

3. 可酌情应用抗生素防治细菌感染，不能进食者给予葡萄糖，电解质，维生素等输液对症治疗。

感染性疾病的诊断检测新技术的开发感染性疾病是世界范围内的一个共同问题。

在过去的几十年里，科学家们一直在致力于开发更高效、更准确且更快速的检测方法和技术，以提高感染性疾病的诊断准确率并帮助人们更快地得到治疗。

1. 传统的感染性疾病检测方法传统的感染性疾病检测方法主要包括细菌培养和血清学检测。

虽然这些方法在很长一段时间内是医学界的主要检测手段，但它们存在一些缺陷：（1）细菌培养需要较长的时间，一般需要 48-72 小时才能获得结果。

这代表着有些病人在等待检测结果的过程中可能已经失去了宝贵的治疗时间。

（2）针对某些病原体的细菌培养技术并不高效。

例如，即使在经过多次细菌培养之后，有些病原体仍然无法被检测出来，这可能导致以下两种情况：一是该病原体的某个亚型无法被培养出来；二是病原体的数量太少，无法通过培养得到足够的数量。

（3）血清学检测并不一定能够检测到所有的病原体。

例如，对于一些病原体来说，人体的免疫系统会很快地清除它们，这就意味着即使病人是感染了某种病原体，但在病情出现时，他们的血液中也可能不会有足够的抗体。

2. 新技术的发展：分子诊断技术与传统的检测方法不同，分子诊断技术是一种利用特殊的酶反应来检测病原体核酸的方法。

分子诊断技术已经发展了几十年，且随着时间的推移，其应用范围越来越广泛。

最初的分子诊断技术主要是通过 PCR 反应来扩增核酸。

尽管 PCR 技术能够扩增极微量的核酸，但这种技术也同样有缺陷：（1）需要较长时间——反应的热循环需要花费几小时的时间。

（2）对试剂的需求大—— PCR 反应中需要大量的酶和缓冲液，使得药物的成本变高。

（3）对设备的要求高——需要比较复杂的仪器才能进行 PCR 反应。

尽管 PCR 反应存在这些不足之处，但它仍然是一种非常有用的工具，在感染性疾病的检测中有广泛的应用。

随着时间的发展，科学家和医师们开始开发其他的分子诊断技术来取代 PCR。

3. 新技术的发展：纳米技术近年来，纳米技术已经成为一个热门的领域，许多研究人员正在致力于开发更高效和更准确的感染性疾病检测技术。

病毒性肝炎的实验室检查1、甲型肝炎病毒的主要传播途径（）A、血液传播B、母婴传播C、昆虫媒介传播D、粪-口传播E、性接触传播答案: D、粪-口传播2、常用于乙肝治疗过程中疗效监测的是（）A、乙肝血清标志物检测B、乙肝病毒耐药检测C、乙肝病毒培养D、乙肝核酸定量检测E、乙肝病毒基因分型检测答案: D、乙肝核酸定量检测3、患者HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBe(-)、抗-HBc IgM(+)、抗-HBs (-)，正确的判断是（）A、患慢性乙型肝炎B、患急性乙型肝炎C、患慢性迁延性肝炎D、乙肝恢复期E、患慢性活动性肝炎答案: B、患急性乙型肝炎4、可引起碱性磷酸酶升高的疾病不包括（）A、骨肿瘤B、肝实质疾病C、肝癌D、恶性贫血E、变形性骨炎答案: D、恶性贫血5、临床上用于诊断肝脏疾病的酶，下列那组检测最恰当（）A、CK GGT ALP AMSB、AST ALT ALP GGTC、AMY LDH GGT α-HBDD、ACP AST LDH CKE、TnI AST ACP ALP答案: B、AST ALT ALP GGT中枢神经系统感染性疾病的实验室诊断1、病毒性脑炎脑脊液中葡萄糖含量多（）A、减低B、增高C、正常D、明显增高E、明显减低答案: C、正常2、患者，14岁，患脑膜炎，有皮肤瘀点。

针头挑破瘀点，渗出物细菌培养，最可能发现那种细菌（）A、脑膜炎奈瑟菌B、新型隐球菌C、流感嗜血杆菌D、肺炎链球菌E、麻风分支杆菌答案: A、脑膜炎奈瑟菌3、脑脊液静置12-24小时后出现薄膜，多见于（）A、化脓性脑膜炎B、结核性脑膜炎C、流行性乙型脑炎D、真菌性脑膜炎E、蛛网膜下腔梗阻答案: B、结核性脑膜炎4、鉴定患者标本中新型隐球菌最有价值的染色方法是（）A、革兰染色法B、萋-尼抗酸染色法C、镀银染色法D、墨汁染色法E、瑞氏染色法答案: D、墨汁染色法5、下列疾病时脑脊液中氯化物含量明显减低的是（）A、病毒性脑膜炎B、化脓性脑膜炎C、隐球菌性脑膜炎D、结核性脑膜炎E、流行性乙型脑炎答案: D、结核性脑膜炎血流感染的实验室诊断（一）1、血培养的污染率应控制在（）A、5% 以下B、 10%以下C、3%以下D、2%以下E、15%以下答案: C、3%以下2、血培养中污染菌的判断依据不包括下列哪一点（）A、细菌的种类B、是否是混合感染C、多次培养中，阳性报告所占比例D、阳性报告出现的时间长短E、一套血培养中出现的细菌的情况答案: B、是否是混合感染3、怀疑血流感染的患者正确的采血时机不包括（）A、在抗菌药物使用前采集B、于高热、寒战高峰到来之前0.5～1小时采集C、于寒战或发热后1小时采集D、于高热、寒战高峰时采集E、在血中抗生素浓度低谷时采血答案: D、于高热、寒战高峰时采集4、血流感染诊断的“金标准”是（）A、血标本中细菌的核酸检测B、患者的临床表现C、血培养培养出病原菌D、降钙素原检测结果显著升高E、患者血常规检测白细胞升高答案: C、血培养培养出病原菌5、采集血培养标本时下列说法正确的是（）A、采集动脉血比静脉血要好B、血标本先注入需氧瓶再注入厌氧瓶C、采血量越多越好D、2d-5d内无需重复采集E、血培养标本如不能及时送检应放在冰箱内答案: D、2d-5d内无需重复采集血流感染的实验室诊断（二）1、血清内毒素检测主要用于协助诊断（）A、革兰阳性菌感染B、革兰阴性菌感染C、酵母菌感染D、丝状真菌感染E、以上都不是答案: B、革兰阴性菌感染2、β-(1,3)-D-葡聚糖在那种菌侵袭性感染时会显著性升高（）A、革兰阳性菌感染B、革兰阴性菌感染C、念珠菌感染D、毛霉菌感染E、新型隐球菌答案: C、念珠菌感染3、可能影响曲霉菌半乳甘露聚糖检测的因素不包括（）A、新生儿B、使用抗肿瘤药物C、自身免疫性肝炎D、血液透析E、使用半合成青霉素答案: B、使用抗肿瘤药物4、可能导致PCT检测产生假阴性的原因是（）A、小细胞肺癌B、血液透析C、出生48h内的新生儿D、之前进行过有效的抗生素治疗E、持续性或重症心源性休克答案: D、之前进行过有效的抗生素治疗5、通过检测PCT指导抗生素的使用和监测治疗效果时，下列说法错误的是（）A、PCT浓度低于0.1ng/ml不需要抗生素治疗B、排除其他原因，PCT浓度高于0.5ng/ml有必要抗生素治疗C、排除其他原因，PCT浓度高于0.5ng/ml不需要抗生素治疗D、排除其他原因，PCT浓度高于2 ng/ml有必要抗生素治疗E、治疗一周后PCT浓度下降了90%，需要停止抗生素治疗答案: C、排除其他原因，PCT浓度高于0.5ng/ml不需要抗生素治疗。

病毒感染性疾病的检验诊断及方法病毒性疾病检验诊断应首先根据临床特征和流行病学资料，初步判断可能感染的病毒。

然后根据可疑病毒的生物学特点、机体免疫应答和临床过程，结合患者当前所处的时机，确定检验诊断的方法。

有些病毒感染潜伏期较短，发病时机体免疫系统尚未完全应答，没有抗体产生，因此可选择测定病毒颗粒、病毒抗原或病毒核酸。

对于潜伏期超过10天的病毒感染，可检测特异性的IgM抗体来进行早期快速诊断、区别初次和再次感染。

对可在机体内形成持续感染或潜伏感染的病毒，可检测急性期和恢复期双份血清的IgG抗体滴度有无4倍以上升高，或直接检测病毒核酸。

对原因不明，可能有新病毒感染时，应采集相应部位的标本进行病毒分离，同时应采取双份血清以确认分离的病毒为病原病毒。

对同一症状可由多种病毒引起的情况，应同时检测几种相关病毒的病毒颗粒、抗原或抗体，对由多个型别组成的病毒可测定它们的共同抗原。

病毒感染的实验室检查包括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出以及特异性抗体的检测。

1 标本的采集与送检临床医师根据流行病学资料，疾病的症状与体征综合判断可能为何种病毒感染，留取适宜的标本送检。

实验结果对诊断病毒感染的价值，很大程度上取决于标本的采集和处理的方式是否恰当。

正确采集标本，及时运送和处理，是极为重要的。

1.1 采集标本的时间尽可能在发病的初期，急性期或患者入院的当天进行。

疾病后期由于机体产生免疫力，开始清除病毒，使病毒数量减少或消失，不易检出。

1.2 标本种类的选择根据临床感染的症状及流行病学资料，判断可能感染病毒种类，选择相应部位采取标本。

处理标本时要考虑病毒的生物学特性，如有包膜病毒冻融易被灭活。

某些病毒如麻疹病毒吸附茬白细胞上，为了有效分离病毒，血液标本应加抗凝剂。

1.2.1 心脏疾病可采取咽拭子、粪便、心脏组织或心包液标本。

分离相关的肠道病毒，包括埃可病毒、柯萨奇A组和B组病毒，也可采取血液标本进行血清学诊断。

1.2.2 中枢神经系统感染可采取咽拭子、粪便标本、脑脊液标本进行肠道病毒的分离；采取咽拭子、脑膜组织分离单纯疱疹病毒，亦可采取脑脊液进行PCR检查；采取咽拭子，尿液、脑脊液或唾液标本用于分离腮腺炎病毒。

2020年华医网继续教育答案-1716-感染性疾病实验
室诊断
备注:红色选项或后方标记“[正确答案]”为正确选项
详见医搜题
(一)溶组织阿米巴实验室诊断技术
1、关于溶组织阿米巴发病机理，以下哪项是阿米巴原虫的致病因子（）
A、阿米巴原虫的侵袭力
B、阿米巴原虫的毒力[正确答案]
C、细菌的作用
D、宿主的防御机能
2、我国阿米巴病流行特征说法错误的是（）
A、我国多见于南方[正确答案]
B、发病率农村高于城市
C、发病率男性高于女性
D、发病率成年高于儿童
3、关于阿米巴病原学诊断粪检标本，滋养体的伪足活动在便后（）内可见到
A、5min
B、8min
C、10min[正确答案]
D、15min
4、阿米巴病原学诊断注意事项中，原虫与白细胞和脓细胞鉴别的方法是加一滴（）冰乙酸后加盖玻片镜检
A、1%[正确答案]
B、2%
C、3%
D、4%
5、在阿米巴病原学诊断粪检标本取样后，标本在4度时不宜超过（）
A、1-2小时
B、2-3小时
C、3-4小时。