血流感染的实验室诊断(可直接使用).ppt

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血流感染实验室诊断课件

加拿大CANWORD监测20022009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
加拿大CANWORD监测2002-2009
Diag Microbiolo Infect Dis. 2011; 69: 307
美国49医院BSI病原谱
CID. 2004, 39: 309-317
• 标准三：年龄<1岁的病人具备下列症状或体征中的至少一项，发热（>38 ⁰C ），低温（<37 ⁰C ），呼吸暂停、脉搏徐缓，并具有下列之一（同上3点略）
临床血流感染（Clinical Sepsis）
具有下列二条件之一者： • 具有非其它已知原因所引起的发烧、血压过低（收缩压≤90mmHg或收缩压低于平常超过40mmHg），少尿（每小时尿量低于30ml）等临床症状任何一项，且符合下列所有条件者：
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需结合临床分析
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为什么需氧+厌氧？
血流感染
• 医院获得性血流感染
– 原发血流感染
• 实验室证实血流感染（Laboratory-confirmed Bloodstream Infection, LCBI） • 临床血流感染（Clinical Sepsis）
– 继发血流感染：血培养分离出有意义微生物，而且此微生物与另一部位之院内感染有关。唯不包括血管或血管内导管装置所引起之血流感染。
PUMCH2012年46株BSI草绿色溶血链球菌药敏结果
2011CHIF-NET489株BSI酵母菌
2011CHIF-NET念珠菌对氟康唑的敏感性
2011CHIF-NET念珠菌对伏立康唑的敏感性
2011CHIF-NET其他酵母菌对氟康唑的敏感性

2023版血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识解读ppt课件

2023版血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识解读
汇报人：xxx 2023-1-03
目录
• 共识背景与目的 • 共识内容概述 • 共识详细解读 • 共识实施建议与挑战 • 未来展望与研究方向
01 共识背景与目的
血流感染现状及挑战
血流感染发病率
血流感染是一种常见的严重感染类型，发病率较高，且呈上升趋势。
提高患者及家属认知度与配合度
宣传教育
通过开展讲座、发放宣传资料等形式，向患者及家属普及血流感染相关知识，提高认知度。
心理疏导
对患者进行心理疏导，减轻其焦虑和恐惧情绪，提高治疗依从性。
家属参与
鼓励家属积极参与患者护理过程，提供情感支持和生活照顾，减轻患者负担。
优化抗菌药物使用与管理政策
严格执行抗菌药物使用指南
根据共识和指南，规范抗菌药物的使用种类、剂量和疗程，降低耐药风险。
加强抗菌药物监管
定期对医院抗菌药物使用情况进行监测和评估，确保药物使用的合理性和规范性。
完善抗菌药物管理政策
建立抗菌药物分级管理制度，加强处方审核和点评，促进抗菌药物合理使用。
05 未来展望与研究方向
新型血液培养技术应用前景
病原体多样性
导致血流感染的病原体种类繁多，包括细菌、真菌、病毒等，给诊断和治疗带来挑战。
耐药性问题
随着抗菌药物的广泛使用，耐药菌株不断增多，给血流感染的治疗带来困难。
临床诊断需求
血流感染的早期诊断和病原体鉴定对于制定治疗方案和改善预后具有重要意义。
血液培养技术应用与发展
血液培养技术原理
通过制定共识，规范血液培养技术的临床应用，提高血流感染的诊断准确性和及时性。
促进抗菌药物合理使用

导管相关血流感染的实验室诊断课件

❖ 真菌引起的导管相关血行感染的死亡率更高。
Mermel LA, Farr BM, Sherertz RJ et al.Guidelines for the management
of intravascular catheter related infections. Infect Control Hosp
导管相关血流感染的实验室诊断
Maki 滚动法
导管相关血流感染的实验室诊断
导管尖阳性培养结果
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
保留导管 ✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓阳性报警时间 (CVC & 外周血)
#1
#2
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
导管相关血流感染的实验室诊断
致病菌
❖ 常见的致病菌凝固酶阴性的葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌，和白色念珠菌。
导管相关血流感染的实验室诊断
检测方法
❖移走导管
✓ Maki Roll (半定量) ✓超声波降解和稀释 (定量) ✓通过管腔抽吸 (定量)
❖保留导管
✓定量培养 (CVC & 外周血) ✓达到阳性的时间 (CVC & 外周血)
导管相关血流感染的实验室诊断
哪部分用于培养
导管相关血流感染的实验室诊断
导管相关血流感染（CRBSI）的病原学诊断
America
600
-
2006-2007
Y.G.Kwak et at.10
Korea
96
-
2007-2008
Thongpiyapoom et at. 12
Thailand
1
1 422
2000-2002

血流感染实验室诊断.pptx

血培养污染菌
• 在多次血培养中单次培养下列细菌阳性 • 凝固酶阴性葡萄球菌 • 棒状杆菌 • 微球菌 • 丙酸杆菌 • 芽孢杆菌
• 如多次培养阳性，可能为条件致病菌，需结合临床分析
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第27页/共70页
为什么需氧+厌氧？
两种组合均能检测
非条件致病菌 Mayo Clinic
Pathogen No.
or <4 G/L or >10% 未成熟中性粒细胞 • 32%患者有1瓶以上CNS阳性，BSI68 %，污染12% (p <0.001) • 没有SIRS症状：BSI 5%，污染29% (p <0.001)
Clin Microbiol Infect. 2012 online
第32页/共70页
单瓶血培养CNS的BSI和污染患者区别
OR=1.23
OR=0.93
Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online
第39页/共70页
抗菌药物治疗与血流感染死亡率
死亡率
Chest 115 (2): 1999 第40页/共70页
血培养三级报告制度
血培养阳性
终报告
40
第41页/共70页
血培养结果回报对治疗的影响
第44页/共70页
阳性血培养－基于PCR的检测
• PCR特异性检测
• 病原特异性PCR
• 特定耐药基因检测：葡萄球菌mecA, 肠球菌van • 细菌载量：肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数
• 广谱检测：PCR扩增特定靶位
• 多态性分析 • 测序 • 后续基因检测 • 种特异性real-time PCR
• 血流感染（bloodstream infection, BSI）：败血症和菌血症目前统称为血流感染。

血流感染幻灯片课件

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血培养三级报告制度
血培养阳性
终报告
Page 13
CRP与疾病的活动性及检测的临床意义
CRP与疾病的活动性
CRP检测的临床意义
1.CRP升高见于感染、炎症、心梗、手术和创伤 ➢ 当组织损伤或急性感染数小时后即可明显上升（ 100-1000%） ➢ 在细菌感染时显著性增高，而病毒感染时增高不明显（正常或轻度升高） ➢ 高敏C反应蛋白水平高的人患心血管病的风险较高，反之则低
血PCT浓度与病程发展呈正相关可对感染程度及器官机能障碍的严重性进行准确的判断
Page 19
PCT指导抗生素使用
参考值（ng/ml）
说明
PCT＜0.1
无细菌感染，避免应用抗生素
0.1≤ PCT ＜ 0.25
可能无细菌感染，不鼓励应用抗生素
0.25≤ PCT ＜ 0.5
可能有细菌感染，建议应用抗生素
Page 4
继发性血流感染
血培养分离出有意义微生物，而且此微生物与另一部位之院内感
染有关。唯不包括血管或血管内导管装置所引起之血流感染。社区获得性血流感染
Page 5
血流感染监测的重要性
为血流感染的流行病学提供基本信息，监测发生趋势和发生率
为新出现的病原菌或耐药表型提供早期预警；监测罕见菌的检测
阳性血培养－基于PCR的检测
PCR特异性检测
病原特异性PCR 特定耐药基因检测：葡萄球菌mecA, 肠球菌van 细菌载量：肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数
广谱检测：PCR扩增特定靶位
多态性分析测序后续基因检测种特异性real-time PCR
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血培养阳性－核酸荧光原位杂交（PNA FISH）

血流感染的实验室诊断课件

PPT学习交流
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（一）标本采集
• 寒战后体温高峰前细菌含量最高。
• 血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐下降而越来越少。
• 血液采样的最佳时间是在寒战后和发热高峰前，此时阳性检出率最高。
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13
（一）标本采集
采血量成人采血量为5～10ml / 瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。儿童采血量为3～5ml / 瓶，采取儿童瓶。
• 两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染 • 两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固酶阴性
的葡萄球菌，也应考虑为致病菌
PPT学习交流
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（二）细菌种类
• 检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。
• 检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。
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9
二、自动化血培养系统
• 仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。
• 判读公式：加速度法速率法起始阈值法
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10
三、标本采集和运送
PPT学习交流
11
（一）标本采集
• 采集时间 1.尽可能在抗菌药物使用前； 2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集； 3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外； 4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超过39℃才抽血，而错过时机。
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（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。

血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识ppt课件

性率。
推荐使用抗菌药物
03
• 在采血前合理使用抗菌药物，可以提高培养的阳性率。
提高血液培养技术的特异性
推荐使用特异性更高的培养基
• 使用特异性更高的培养基可以减少培养的假阳性。
对可疑菌株进行分子生物学鉴定
• 分子生物学鉴定可以提高鉴定的准确性和特异性。
对培养阳性菌株进行抗菌药物敏感试验
• 抗菌药物敏感试验可以指导临床医生合理用药，避免滥用抗菌药物。
监测复发
• 血液培养技术可监测血流感染的复发情况，及时发现并制定相应的治疗方案。
05
血液培养技术在血流感染诊断中的优化建议
提高血液培养技术的检测效率
推荐使用自动化血液培养系统
01
• 自动化血液培养系统可以提高培养效率，缩短培养时间
，减少误报和漏报。
常规采用需氧和厌氧两种培养方式
02
• 需氧和厌氧培养可以覆盖更多的病原体，提高培养的阳
• 血液培养是诊断BSI的常规方法，但存在检
2
测时间较长、费用较高等局限。
• 近年来，随着分子生物学和免疫学技术的
3
不断发展，血液培养技术得到了广泛应用和改进。
共识方法和范围
• 本共识采用基于文献的系统评价方法，对血液培养技术在BSI诊断中的应用进行了全面评估和分析。
• 本共识涵盖了不同类型血液培养技术的基本原理、应用范围、优缺点及发展方向等内容，旨在为临床医生在诊断和治疗BSI时提供参考和指导。
• 对于不同类型血流感染，需要研究更加快速、敏感和特异的检测方法，以便更早地确诊并指导治疗
• 血液培养技术的普及程度和可及性仍需进一步改善，以便更多患者能够及时接受诊断和治疗
• 需要加强血流感染防控意识，降低抗生素耐药性的产生，提高血流感染整体诊疗水平

血流感染的实验室诊断

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（三）血培养的现状
• 不正确采样 • 污染问题
皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。
• 阳性检出率低 • 检验周期长
编辑课件
7
二、全自动血培养系统
编辑课件
8
二、自动化血培养系统
我院使用的是BacT / ALERT 3D 全自动细菌、分枝杆菌培养系
统
工作原理：
细菌在培养基中代谢基质时产生CO2,并水解成H+， H+透过瓶底滤过膜，瓶底乳胶感应器颜色由墨绿色变成黄色。
血流感染的实验室诊断
编辑课件
1
1 血流感染概述 2 自动化血培养系统 3 标本采集和运送 4 阳性报警后处理方法 5 如何判断是否污染
编辑课件
2
一、血流感染概述
编辑课件
3
（一）血流感染的定义
• 血流感染（bloodstream infections,BSI ）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。
编辑课件
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编辑课件
9
二、自动化血培养系统
• 仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。
• 判读公式：加速度法速率法起始阈值法
编辑课件
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三、标本采集和运送
编辑课件
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（一）标本采集
• 采集时间 1.尽可能在抗菌药物使用前； 2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集； 3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外； 4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超过39℃才抽血，而错过时机。

血液培养技术用于血流感染诊断临床实践专家共识PPT课件

采样时机
在患者寒战、发热初期或开始使用抗菌药物前进行血液采样，以提高阳性检出率。
与其他检测方法联合应用策略
分子生物学技术
如PCR、宏基因组测序等，可提高病原微生物检测速度和准确性，有助于早期诊断和治疗。
免疫学方法
如抗原检测、抗体检测等，可用于辅助诊断和病原体鉴定，提高诊断特异性。
关注特殊人群及复杂情况处理
血液培养技术定义
• 血液培养技术是一种通过采集患者血液样本，在体外进行培养、分离和鉴定病原菌的技术，用于血流感染的诊断。
血液培养技术分类
需氧瓶和厌氧瓶培养
根据病原菌的需氧和厌氧特性，将血液分别接种至需氧瓶和厌氧瓶中进行培养。
自动化血培养系统
采用自动化仪器连续监测血液样本中的微生物生长，提高检测速度和准确性。
采集部位选择
优先选择外周静脉血，必要时可采集动脉血或骨髓血。
采集时机
尽量在抗菌药物使用前采集，以提高阳性率。
采集量
成人每次采集10~20ml，儿童根据年龄和体重适量采集。
转运要求
采集后应立即送检，避免长时间放置和转运过程中的污染。
实验室检测流程优化
接收与登记
实验室接收标本后应立即登记，核对标本信息。
考虑采样时机、采样量、转运过程等因素对结果的影响，必要时进行复检。
报告规范
采用统一格式书写报告，包括患者信息、标本信息、检测结果及解读等内容。
06 临床实践中应用建议及注意事项
患者筛选标准与时机把握
筛选标准
对于疑似血流感染患者，应根据其临床症状、体征及实验室检查等指标进行综合评估，以确定是否需要进行血液培养。
儿童与老年人
应根据患者年龄、免疫状态等因素调整采样量和抗菌药物使用策

血流感染ppt课件

血流感染的类型
微生物证实的血流感染
脓毒症—全身炎症反应综合征
导管相关性血流感染
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LOGO
导管相关性血流感染
导管相关性血流感染（CRBSI）是指留置血管插管的患者出现血流感染的临床表现（如发热、寒战），从导管和外周血培养中分别培养出相同的病原菌，并排除其他感染源可证实为
CRBSI.
17
谢谢！
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血流感染
•血流感染的概念血流感染（BSI）是一种严重的全身感染性疾病，
病原微生物在循环血液中呈一过性、间歇性或持续性存在，对机体所有脏器，特别是心脏瓣膜、关节等造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥漫性血管内凝血（DIC），甚至死亡。
1
血流感染
1.根据发病场所分类 .社区获得性感染（CABIS） .医院获得性感染（HABSI）
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2.脓毒症
•由细菌感染引发全身炎症反应的临床过程，诊断标准如下：
(1)具有细菌感染的证据，但血培养可以阳性或阴性。
（症脓血症
脓毒症患者具备下述6项中的2项即可诊断为重症脓毒症：（1）低氧血症（PaO/FiO2≤300）。（2）少尿[＜0.05ml/（㎏·h）]连续2小时。（3）乳酸中毒（＞2mmol/L）。（4）血小板减少（＜ 100×109/L）及凝血酶原时间延长（＞正常对照组2s以上）。（5）空腹血糖＞ 6.4mmol/L。（6）意识改变（兴奋11、烦躁或嗜睡）。
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血流感染的后果
显著增加住院时间显著增加患者病死率严重威胁患者安全
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血流感染的诊断
国家卫计委（原国家卫生部）2001年颁布的标准定义为：体温>38℃或<36℃,同时合并下列情况之一：① 有入侵门户或迁徙病灶。②有全身中毒症状而无明显感染灶。③有皮疹或出血点、肝脾肿大、血中性粒细胞增多伴核左移，且无其他原因可解释。④收缩压低于12kpa（90mmHg）。 ⑤血培养分离出病原微生物（若为皮肤正常菌群，如类白喉棒状杆菌、肠杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、丙酸杆菌等，需在不同时间采血2次或多次培养阳性），或血液中检测到病原体的抗原物质，可诊断为血流感染。

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最新.
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（二）血流感染的类型
• 菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。
• 败血症（septicemia）：细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。
• 脓毒败血症（pyemia）：细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴有多发性脓肿或败血性休克。
最新.
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（三）阳性检出时间
• 阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。
• 阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染大于48h，多为污染
最新.
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（四）重复培养结果
• 与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果相比较，2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时，考虑血
最新.
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（一）标本采集
• 寒战后体温高峰前细菌含量最高。
• 血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐下降而越来越少。
• 血液采样的最佳时间是在寒战后和发热高峰前，此时阳性检出率最高。
最新.
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（一）标本采集
采血量成人采血量为5～10ml / 瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。儿童采血量为3～5ml / 瓶，采取儿童瓶。
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• 阴性曲线
最新.
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• 假阳性曲线
最新.
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五、如何判断是否污染？
最新.
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五、如何判断是否污染？
（一）阳性检出瓶数（二）细菌种类（三）阳性检出时间（四）重复培养结果
最新.
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（一）阳性检出瓶数
• 两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染 • 两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固
酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致病菌
6
（三）血培养的现状
• 不正确采样 • 污染问题
皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。
• 阳性检出率低 • 检验周期长
最新.
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二、全自动血培养系统
最新.
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二、自动化血培养系统
我院使用的是BacT / ALERT 3D 全自动细菌、分枝杆菌培养系统
工作原理：
细菌在培养基中代谢基质时产生CO2,并水解成H+， H+透过瓶底滤过膜，瓶底乳胶感应器颜色由墨绿色变成黄色。
• 毒血症（toxemia）：细菌毒素或代谢产物进入血液引起的临床病症。
最新.
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（三）血培养的现状
送检率低
中国大陆三甲医院中国香港玛丽医院中国台湾台大医院美国John Hopinks
送检量（瓶/日）
20～50 200 300
300～400
床位
1000 1400 2000 1039
最新.
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最新.
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二、自动化血培养系统
• 仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。
• 判读公式：加速度法速率法起始阈值法
最新.
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三、标本采集和运送
最新.
11
（一）标本采集
• 采集时间 1.尽可能在抗菌药物使用前； 2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集； 3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外； 4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超过39℃才抽血，而错过时机。
血流感染的实验室诊断
最新.
1
1 血流感染概述 2 自动化血培养系统 3 标本采集和运送 4 阳性报警后处理方法 5 如何判断是否污染
最新.
2
一、血流感染概述
最新.
3
（一）血流感染的定义
• 血流感染（bloodstream infections,BSI）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。
最新.
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四、阳性报警后处理方法
最新.
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• 血培养阳性报警后，如何处理？
观察培养曲线涂片、转种血平板镜检报告危急值
革兰染色
• 若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？
重新涂片，作瑞氏染色
以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平板上是否生长
最新.
17
最新.
18
最新.
19
• 阳性曲线
最新.
阳性检出率（%）
采血量对阳性检出率的影响
120 100
80 60 40 20
0 0
10
20
30
40
50
60
70
采血量（ml）
最新.
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（二）标本运送
• 采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过2h。
• 不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。
• 如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。
最新.
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（二）细菌种类
• 检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。
• 检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。
• 检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌，污染的可能性很大。