角膜内皮移植术后角膜内皮细胞变化的临床观察_杨德琪

·述评·重视角膜移植植片内皮细胞慢性失功的研究谢立信作者单位：266071 青岛山东省眼科研究所（Email：lixinxie@）【摘要】随着配型技术及新型免疫抑制剂的临床应用，器官或组织移植术后早期急性免疫排斥发生率明显下降，慢性移植物失功成为导致远期移植失败主要的原因之一。

研究表明角膜移植术后和全身实质器官移植术后一样存在角膜植片慢性失功的过程，且角膜植片慢性失功已经成为再次角膜移植的主要原因之一。

因此，重视角膜植片慢性失功对临床防治角膜移植植片慢性失功，延长角膜植片的存活率有着重要的意义。

（眼科，2009，18：145-147）【关键词】慢性失功；角膜移植；角膜植片；角膜内皮细胞Pay much attention to the research of chronic corneal allograft dysfunction after cornealtransplantation Xie Lixin. Shandong Eye Institute, Qingdao 266071, China (Email：lixinxie@)【Abstract】With the clinical application of new technology and immunosuppressive drugs, the early acute graft rejection had been significantly decreased. Howerer, chronic graft failure in long-term transplantation has become one of the most important reasons. As the same as body solid organ transplantation, chronic corneal allograft dysfunction was indeed present after penetrating keratoplasty and has been one of the main reasons causing keratoplasty again. Therefore, studying the mechanism of chronic allograft dysfunction will be of the most important significance in clinical prevention and treatment for chronic graft corneal transplant failure, especially in prolongation of corneal grafts survival rate. (Ophthalmol CHN, 2009, 18: 145-147 )【Key words】chronic corneal allograft dysfunction; corneal transplantation; corneal graft; corneal endothelial cell随着配型技术及新型免疫抑制剂的临床应用，器官或组织移植术后早期急性免疫排斥发生率明显下降，慢性移植物失功（chronic transplant dysfunction，CTD）成为导致远期移植失败主要的原因之一。

邵应峰博士论文导师陈家祺正文
图２－４术后角膜内皮细胞密度改变
图２－５术后共焦显微镜下角膜基质细胞和板层刨面改变。

Ａ术后３个月角膜基质细胞增大活跃板层界面可见少量瘢痕。

Ｂ术后６个月角膜基质细胞以开始恢复，瘢痕有所减轻。

ｃ术后１２个月基质细胞已接近正常生理情况，未见明显瘢痕组织。

Ｄ、Ｇ、Ｈ术后１８个月、２４个月和３６个月基质细胞处于生理状态，板层无瘢痕。

图２－６患者眼部裂隙灯检查。

Ａ术前。

Ｂ术毕。

ｃ术后３个月角膜已透明。

Ｄ、Ｅ、Ｆ术后１２个月、２４个月、３６个月患者角膜透明。

视轴Ｉ）（无明显瘢痕，深层缝线未引起不良反应。

・临床研究・全植床深板层角膜移植术后角膜上皮基底细胞的共焦显微镜活体动态观察叶宇峰　姚玉峰　周　萍　金玉奇　潘　飞O bserva ti on of the hea li n g process of cornea l ep itheli a l ba s a l cells after full bed deep l am ell ar kera topl a sty w ith confoca l m i croscopyYe Yufeng,Yao Yufeng,Zhou P ing,J in Yuqi,Pan Fei.D epart m ent of O phthal m ology,S ir R un R un Shaw Hospital,M edicine School of Zhejiang U niversity,Zhejiang310016,China Abstract　O bjecti ve　To investigate the healing p r ocess of corneal ep ithelial basal cells on the surface of cryop reserved tissue donor after full bed deep la mellar kerat op lasty(F BDLK).　M ethods　T wenty patients after F BDLK were exam ined with slit2scanning conf ocal m icr oscope,and cryop reserved donor graft in-20℃was used in operati on.The well2defined i m ages of basal ep ithelial layer were selected,and the basal cell density,cellular area and poly megathis m after operati on were deter m ined using the method of“invert i m age”conducted by the cust om ized s oft w are and compared with nor mal value.　Results　The re2 ep ithelializati on on the surface of donor were perfor med by ep ithelial basal cells of reci p ients3-4days after the F BDLK.The density of re2ep ithelialized ep ithelial basal cells at the central corneas was5122±515,5348±504,5265±469,5270±440,5309±418cells/mm2at0.5,1,3,6,12months after F BDLK res pectively and was si m ilar t o nor mal value(5335±502 cells/mm2).Re2ep ithelialized ep ithelial basal cells were r ound and bigger in shape,and a big nucleus can be seen in the central part of these cells.The density and mor phol ogy of the corneal basal cells re mained relatively stable up t o12months after the operati on.　Conclusi on　Re2ep ithelializati on of cornea ep ithelial basal cells of reci p ients on the surface of cryop reservaed tissue of donor can be achieved at a nor mal s peed after full bed deep lamellar kerat op lasty(F BDLK).Density and mor phol ogy of re2 ep ithelialized cells return t o nor mal statue half2month after the operati on. Key words　deep lamellar kerat op lasty;confocal m icr oscopy;corneal ep itheliu m;basal cell摘要　目的　通过对全植床深板层角膜移植术(F BDLK)后不同时期角膜上皮基底细胞的观察,了解角膜基底上皮在经冰冻保存过的角膜材料表面上的重建过程。

论著作者单位:266071青岛,山东省眼科研究所暨眼科医院(王旭为研究生,现在济南市第二人民医院眼科,250001)通讯作者:谢立信,Em ail :li xinx i e @pub lic .qd .sd .cn穿透性角膜移植术后内皮型免疫排斥反应的临床研究史伟云　王旭　谢立信 【摘要】　目的　探讨穿透性角膜移植术(PK P )后内皮型免疫排斥反应发生的动态变化,及对角膜植片透明性的影响。

方法　对1994年1月至1998年12月在我院行PKP 术并有完整记录的患者648例(648只眼),男444例(444只眼)、女204例(204只眼)进行随访,统计术后0.5、1、3、6、9、12、18、24、36、48个月等10个不同时间内皮型免疫排斥的发生率,以及植片混浊的发生率,比较两者动态变化的相关性,制成动态变化曲线,并对术前的病因与术后内皮型免疫排斥反应发生之间的关系进行分析。

结果　植片混浊与内皮型免疫排斥反应密切相关(线性相关回归分析,P <0.01);术后3年,内皮型免疫排斥反应的发生率仍有一定比例。

术前不同病因及炎性背景的眼病,因内皮型免疫排斥反应发生率不同,而影响植片透明性。

结论　PK P 术后,植片的透明性主要受内皮型免疫排斥反应的影响,二者密切相关;各种角膜疾病因炎性反应不同,其内皮型免疫排斥反应的发生率也不同,重视术后患者的长期随访,对维持术后角膜植片的透明性,保证手术成功率有重要意义。

(中华眼科杂志,2005,41:145-149)【关键词】　角膜移植术,穿透性;　内皮型,角膜;　移植物排斥;　免疫耐受C li n i cal study on th e end othe li a l i m mune rejection after p ene trati n g kera top l asty S H I Wei -yun ,WA NG Xu ,X IE L i -x i n .Shandong Eye Instit ute and Hos pit a l ,Qingdao 266071,Ch i naCorres ponding author :X I E L i -xin ,Ema il :lixi nx ie @public .q d .s d .cn 【Ab stract 】　O b jective To study t he re lati onship be t w een t he g rafts transparency and t he endo t he lial i m mune re jection at differen t periods after penetrati ng keratoplast y (PKP ).M e thod s A fo llow i ng -up w as perfor m ed on pa tien ts rece i ved PKP in Shandong Eye Instit u t e and Ho spita l be t w een January 1994and D ece m ber 1998.A to t a l o f 648cases (648eyes )w ere i nvo l ved i n this study ,including 444m a l e s (444eyes )and 204fe m a l es (204eyes ).The inc i dence of endo t he lial i mmune re j ec tion and g rafts opac ifica tion at the ti me point o f 0.5,1,3,6,9,12,18,24,36and 48m ont hs postoperati ve l y w as co llected .W e m ade t wo curve s t o st udy t he re lati onship bet ween transparence o f grafts and endo t helial rejec tion .Re lationshi p bet ween t he endothe lia l i mmune re jection and the t ypes o f cornea l disea ses be fore the operation w as also analyzed .R esu lts T he re w as a sign ificant re lationshi p bet ween g rafts opacificati on and the endo t he lial i m mune re jection (linea r regression and si m p l e co rre l a tion ,P <0.01).The rate of re j ec tion de creased aft e r 3years po stope ra tively .In fla mma t o ry backg round w as an i m portant factor for the occu rrence o f endo t he lial im mune re jection and g ra ft opacifica tion .C onclusions A ft e r PK P ,endo the lia l i mmune rejecti on is t he critica l fac t o r for a ffecti ng the g rafts transpa rency .Long -ter m fo llo w -up of t he pa tien ts is i m po rtan t for t he m aintaining o f transpa rency o f g ra fts and to ob t a i n a successful result of t he operati on .(Chin J O ph t hal m o l ,2005,41:145-149)【K ey word s 】　K era top l ast y ,pene tra ting ;　Endo t heliu m ,corneal ;　G raft re jection ;　I mmune t o lerance 对穿透性角膜移植术(penetrating ke r a t o plasty ,PKP )来讲,植片的透明度是衡量手术成功的重要标志[1]。

穿透性角膜移植术后角膜内皮细胞密度的改变中国实用眼科杂志第2 0卷( 0 2 2 0 )第l 0期穿透性角膜移植术后角膜内皮细胞密度的改变银勇马挺王养政朱秀萍朱斌良吴洁西安市眼科研究所西安市眼科医院700 10 2目的：观察穿透性角膜移植术后植片角膜内皮细胞密度的变化。

方法：用角膜内皮显微镜对术前供体角膜及术后一年内受体植片的内皮细胞密度进行连续观察。

结果：术后植片内皮细胞下降率为：一周0 2%;二周 3 9%;三周 5 7%;二月8 6%;三月l .9;六月l .8;一 .2 .4 .4 .8 00% 46%年2 7。

6.%结论：穿透性角膜移植术后植片内皮细胞在前三周为快速下降期，第二个月至一年为慢速稳定下降期，将为临床医师在手术时对供体的选择、手术技巧及术后治疗提供参考。

关键词：穿透性角膜移植术角膜内皮细胞密度穿透性角膜移植术( e ert g Kea pat, P n tai rt l y n o s术后3 n l拆除缝线。

真菌性角膜溃疡患者术后mo aP K)后植片的成活关键在于角膜内皮细胞密度( C,术后检测E D 变化量是估测角膜内皮功能E D) C状态的敏感指标。

在P术后由于手术创伤和免疫侵K2周内原则上全身和局部不用糖皮质激素，在确定没有复发后才加用激素和C A眼水滴眼，并加用抗真S菌药物治疗。

结果袭，使E D下降，但P术后E D的变化究竟如C K C何，国内尚无报道。

本文对7 3例穿透性角膜移植患术后不同时期受体植片角膜内皮细胞密度变化与者进行术前供体E D和术后受体植片E D的检测来C C评价P 术后E D的变化。

现报道如下：K C材料与方法供体角膜术前比较见表。

表供体及术后受体植片E D变化量( C 又±S=7 )。

n 31病例选择：男4 . 8例，女2 5例，年龄最小9 岁，最大3岁，平均2 .岁，圆锥角膜4例5 13 ( .% ) 5 5;角膜白斑4 3例( 8 9;角膜溃疡穿孑5 .%) L 2 2例( 0 1 ) 3 .%;大泡性角膜炎3例( .% ) 4 1;角膜变性1例( .% ) 14。

组织工程角膜内皮细胞移植的研究与进展赵思婕;刘焰【摘要】Due to the serious shortage of donor cornea materials and the donor limit, clinical popularization of penetrating keratoplasty is severely restricted. lt is a hot spot of current research that applying tissue engineering in vitro to culture corneal endothelial cells ( CEC ) with high density, regular hexagonal shape and healthy endothelial function. ln this article, we reviewed the latest progress in the study of source of CEC seeder cells, selection of cultivating carries, type of CEC transplantation and immune mechanism that summarized the current research problems and made a prospect to the future.%由于角膜供体材料严重短缺以及供体年龄限制，穿透性角膜移植术的临床广泛开展受到严重制约，应用组织工程体外培养高密度、具备常规六角形态和健康内皮功能的角膜内皮细胞是当前研究的热点。

本文就角膜内皮种子细胞的来源、载体的选择及角膜内皮细胞移植方法、免疫机制等方面研究的最新进展进行综述，总结目前研究面临的问题并展望其前景。

【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2015(000)002【总页数】4页(P219-222)【关键词】角膜内皮细胞;种子细胞;载体;移植;组织工程【作者】赵思婕;刘焰【作者单位】200080 中国上海市，上海交通大学附属第一人民医院眼科;200080 中国上海市，上海交通大学附属第一人民医院眼科【正文语种】中文引用:赵思婕,刘焰.组织工程角膜内皮细胞移植的研究与进展.国际眼科杂志2015;15(2):219-222角膜位于眼球壁外层即纤维膜前1/6,它作为眼球的首道屏障,承担着眼球屈光系统70%以上的屈光功能。

角膜内皮细胞检查报告通常包括以下内容：
1.细胞形态：观察内皮细胞的形态，如六边形、多边形等。

正常值范围约为550UM，
周边角膜厚度的正常值约为1000UM。

2.细胞数量：观察分析细胞数量，以及每个细胞的平均大小。

正常人的角膜内皮
细胞一般不低于2000个。

3.细胞密度：观察细胞的密度，密度越大则说明内皮细胞数量较小，属于正常，
如果密度较少则说明角膜内皮细胞单个较大，属于病理状态。

4.细胞面积变异系数（CV）：原始内皮细胞100%为六边形，随着内皮数量减少
细胞发生移行，六边形比例减少，正常值>50%。

5.分析细胞数量（N）：此次角膜内皮镜的取样数量，通常取样数50~200。

6.最大（Max）和最小（Min）细胞面积；平均细胞面积（AVE）；细胞面积标
准差（SD）：统计大、小细胞面积平均差异，越小越好，正常值<140。

7.角膜厚度（CCT）：正常值范围约为550UM。

总的来说，角膜内皮细胞检查报告可以用来评估角膜内皮细胞的形态、数量、密度等指标，以反映角膜的营养状况和健康状况。

如果检查出现异常结果，建议及时咨询眼科医生进行诊断和治疗。

角膜内皮细胞相关的部分研究进展和展望【摘要】目前已知的角膜内皮损伤理论尚未涉及穿透性角膜移植术后准分子激光矫正屈光不正对角膜内皮的影响。

体外培养人角膜内皮细胞已经比较成熟、稳定，但仍需进行探索，特别是一些细胞因子和低分子量透明质酸等因素对其的影响和机制，以更加稳定的体外培养角膜内皮细胞为基础，由数量有限的自体角膜内皮细胞体外培养构建组织工程角膜将更加便捷。

将体外培养自体角膜内皮细胞来源的组织工程角膜内皮移植入体内将会较异体角膜内皮移植、异种角膜内皮移植有更多的优势。

异种动物的Descemet膜已被用于动物实验，并且有一定效果。

将异种动物Descemet膜或人工羊膜结合自体角膜内皮细胞来源的组织工程化角膜内皮进行人类角膜内皮移植，将完全摆脱对人类供体角膜的依赖，或有助于修复损伤的库存角膜。

首先进行眼前节器官培养实验，后序可进行动物实验及可能的临床实验。

【关键词】角膜内皮细胞；细胞培养；组织工程Some advances and prospects of the researches related to corneal endothelial cells.ZHOU Hong—wei. Chiping County People's Hospital, 252100 China.[Abstract] To our knownledge,the temporal theory about the damage of human corneal endothelial cells (HCECs) don't cover the effect of application of excimer laser to treat refractive error which occur after penetrating keratoplasty.The culture of HCECs in vitro is already relatively mature and stable,but it is far cry from a formulized one,and thus deserve more intensive researches.Especially,the effects of some cytokines and hyluronan oligosaccharides on the in vitro culture of HCECs need to be explored as well as the mechanisms behind these effects.And it is eagerly and widely expected that a formulized culture of the HCECs can be hammered out.Base on the proved and more advanced culture formulation,to construct engineered HCECs from autologous source which is retricted in cells number should be more convenient.If the clinical application of engineered HCECs from autologous source can be fulfilled,more superiorities could be discovered logically compared to the clinical applications of allogeneic HCECs and heterologous HCECs. Descemet membrane lack cell components,and heterologous animals' decemet membranes are already applied in animal experiments with a certain degree of effectiveness.The combined application of heterologous Decemet membrane or artificial amniotic membrane with engineered HCECs from autologous source in human corneal endothelium transplantation will disengage the restriction generated from donor cornea' number,or facilitate the repair of the damaged reserved cornea.The pertinent experiments in vitro should be set up first with the application of eye anterior segment organ culture,and sequential animal experiments and promising clinical experiments may be carried out.[Keywords] corneal endothelial cell; cell culture; tissue engineering由于角膜移植后的供体角膜与普通角膜有不同之处，并且已有关于角膜移植后白内障手术对角膜内皮损伤的研究，但目前没有关于PKP术后Lasik对角膜内皮细胞影响的报道，有必要对相关领域进行开拓性研究。

穿透性角膜移植术后内皮细胞及角膜厚度的变化目的分析穿透性角膜移植术后内皮细胞及角膜厚度的变化。

方法用日本TOPCONSP-3000P型非接触性角膜内皮镜检测角膜内皮细胞计数，记录每个患者的CEC密度，六角形细胞的百分数以及角膜厚度。

结果20例（眼）PKP术前供体的角膜内皮细胞平均密度为（3390.4±259.5）个/mm2，术后1个月为（3073.7±392.1）个/mm2，术后2个月（2933.7±346.3）个/mm2术后3个月为（2834.0±256.1）个/mm2，术后6个月为（2591.2±326.7）个/mm2，术后内皮细胞丢失率1个月（6.78%），2个月（8.63%），3个月（10.92%），6个月（16.81%），正常六角形细胞百分数术后1个月（68±11%），术后2个月（65±8%），术后3个月（59±6%），术后6个月（55±9%）。

角膜厚度术后1个月为（555±32）μm，2个月（532±43）μm，3个月（480±22）μm，6个月为（468±26）μm。

结论穿透性角膜移植术后内皮细胞丢失随时间延长而增加，正常六角形细胞计数随时间延长而减少，角膜厚度术后2个月稍厚，3个月后厚度稳定。

标签：穿透性角膜移植手术；角膜内皮细胞；角膜厚度穿透性角膜移植术采用切除病变区域角膜，用供体的全层透明角膜置换的方法，以恢复角膜透光特性，挽救和提高角膜病变所致的视力障碍，改善患眼视觉功能[1]。

2014年11月～2015年11月我院用该手术治疗了20 例（眼）角膜盲的患者，达到了较好的治疗效果。

术后分析角膜内皮细胞计数、形态及角膜厚度的变化。

以了解角膜植片的生长愈合情况。

1 资料与方法1.1一般资料20 例患者中男13例，女7例，均为单眼。

年龄12～50岁12例，50～75岁8例，病程3个月～40余年。

Journal of Kunming Medical University CN53-1221R昆明医科大学学报2017，38（9）：109耀112DCD角膜移植术后角膜内皮细胞的变化曹倩，李兰，李云川，李勇，梁毓琳，董洁（昆明市第一人民医院眼科，云南昆明650224）［摘要］目的探讨心脏死亡供体器官捐献（donation after cardiac death，DCD）来源角膜植片行穿透性角膜移植后角膜内皮细胞变异情况．方法用角膜内皮显微镜对心脏死亡供体来源角膜植片行穿透性角膜移植191例眼术后角膜植片分别于术后1～4周；5～12周；4～6月；7～12月行角膜内皮镜检查．结果（1）191例患者中有48例患者角膜内皮镜检出，143例患者角膜内皮镜无法检出，检出率占25%；（2）48例患者术后1～4周、2～3月、4～6月及7～12月的内皮细胞细胞密度（2271.15±321.47）个/mm2、（1971.33±358.18）个/mm2、（1826.59±303.92）个/mm2、及（1753.14±306.31）个/mm2．平均细胞面积由术前的（388.45±95.26）μm增加到术后7～12月的（638.63±124.73），细胞大小变异系数（cv值）由30.15％增加到65.04％，六角形细胞比例由（52.59±7.26）％下降到（40.01±11.35）％．结论（1）角膜内皮镜检查对于早期角膜移植术后患者内皮细胞识别率较低，敏感度差，角膜移植术后早期内皮镜无法测出结果时可选择共焦显微镜评价观察角膜内皮细胞的变化；（2）穿透性角膜移植术后供眼角膜内皮细胞密度逐渐减少，六角形细胞比例渐变小平均细胞面积和cv 值均渐增大．（3）DCD角膜移植术后1a，尤其是术后3月应加强术后随访，当发现有早期排斥反应的征象时，及时进行抗排斥治疗对于减少早期排斥反应尤为重要．［关键词］心脏死亡供体器官捐献（DCD）；穿透性角膜移植；角膜内皮细胞［中图分类号］R77［文献标志码］A［文章编号］2095－610X（2017）09－0109－04Changes of Corneal Endothelial Cells after DCD CornealTransplantationCAO Qian，LI Lan，LI Yun-chuan，LI Yong，LIANG Yu-lin，DONG Jie （Dept.f Ophthalmology，The1stPeople’s Hosipitalof Kunming，Kunming Yunnan650224，China）［Abstract］Objective To study the variation of corneal endothelial cellsafterpenetrating keratoplasty from donation after cardiac death(DCD)．Methods191cases of corneal graftwere textedafter penetrating keratoplasty 1-4weeks；5-12weeks；4-6months；7-12months later from donation after cardiac death with corneal endothelial microscope．Results 1.48patients in191cases of patients with corneal endothelial microscopeweredetected，143cases of patients could not be detected，the detection rate was25%；2.48cases after 1-4weeks，5-12weeks，4-6monthsand7-12months the density of endothelial cells were（2271.15±321.47）mm2，（1971.33±358.18）mm2，（1826.59±303.92）mm2，（1753.14±306.31）mm2，and the average cell area increased from（388.45±95.26）μm to（638.63±124.73）μm7-12months after operation，cell size variation coefficient（CV value）increased from30.15%to65.04%，the proportion of hexagonal cells decreased from52.59±7.26％to40.01±11.35％．Conclusion（1）corneal endothelial endoscopy for early corneal endothelial cells of patients with recognition rate is low,poor sensitivity,confocal microscopy evaluation could be used instead of corneal endothelial microsco when the cornea was edema；（2）Corneal endothelial cell density decreased［基金项目］昆明市科技局计划重点基金资助项目（2014-04-A-S-02-2091）［作者简介］曹倩（1983～），女，云南昭通市人，医学硕士，主治医师，主要从事眼表疾病及角膜移植、青光眼临床工作.［通信作者］李兰．E-mail:641106144@第38卷110昆明医科大学学报gradually and the percentage of hexagonal cells was descend and CV value were increased after penetratingkeratoplasty；（3）Follow-up should be strengthened after penetrating keratoplasty from donation after cardiac death（DCD）1a later especially three months later,when there were signs of early rejection，timely anti rejection treatment was very important for reducing early rejection.［Key words］Donation after cardiac death(DCD)；Penetrating keratoplasty；Corneal endothelial cell我国是世界上盲人最多的国家之一（双眼盲人达600～900万），约400万角膜盲患者亟待手术[1-2]，而且每年以10%比率增加．目前角膜移植手术是角膜盲患者复明的唯一方式[2]，但每年角膜移植手术却不足万例[3]．角膜植片严重缺乏是阻碍角膜移植手术发展的瓶颈．我国自2015年1月1日起全面停止使用死刑犯作为移植器官来源，公民逝世后自愿捐献器官将成为尸供器官的唯一来源，心脏死亡器官捐献（donation after cardiac death，DCD）供体角膜成为角膜植片的主要来源．角膜内皮细胞对于角膜植片的透明及正常功能的维持起着决定性作用，是评估供体质量的重要指标．研究术后移植片内皮细胞变化，对判断手术预后及细胞功能是否会失代偿有重要的临床意义．对移植片内皮细胞密度、细胞大小和形态的研究结果已早有报道，但对DCD供眼角膜内皮细胞术后的连续性变化尚未见有报道．昆明市第一人民医院是云南省开展角膜移植例数最多的医院，自昆明市第一人民医院开展DCD角膜移植术后，很大程度上缓解了我省角膜移植材料短缺的问题，也提高了我省角膜盲的角膜移植手术率．现将191例DCD穿透性角膜移植术后角膜内皮细胞的变异情况报道如下.1资料与方法1.1病例选择选择2014年1月1日至2017年6月在昆明市第一人民医院接受DCD供体来源角膜移植的患者191例，男133例，女58例，年龄14～75岁，平均年龄42岁．原发病中角膜白斑67例，角膜穿孔44例，圆锥角膜35例；角膜变性25例；碱烧伤20例.1.2检查项目术前常规测视视力、眼压、角膜地形图、泪膜破裂时间、角膜内皮镜、眼前段照相、眼部AB 超、前节OCT、黄斑区OCT、VEP、术后定期测视力、眼压．裂隙灯下查移植片透明度、厚度及眼前段，查眼底排除眼底病对视力影响．用日本尼德克珠式会社CEM-530型角膜内皮显微镜检查角膜内皮形态、数量变化及角膜厚度．1.3手术方法所有供体角膜来源于DCD供体．从供眼球切取角膜巩膜片后放至角膜保存液，按常规操作把其内皮面向上在角膜钻台上压切出植片，植床大小6.25～8.25mm，制作植片比植床大0.25～0.5 mm，把植片内皮面朝向前房置于植床，创口用10～0缝线间断或连续缝合至水密状态．用BSS置换前房内粘弹剂并形成前房．1.4术后处理根据《我国角膜移植手术用药专家共识》2016版[4]常规角膜移植手术后1～3d全身使用糖皮质激素．局部给药：术后早期通常使用中高浓度糖皮质激素，如1％醋酸泼尼松龙或地塞米松制剂，4～6次/d，睡前给予地塞米松眼膏．每月减量1次，减至每天2次，术后6个月改为0．1％氟米龙眼液，或醋酸泼尼松眼液1～2次/d．术后1周左右观察上皮完整时加用免疫抑制剂环孢素眼液或他克莫司眼液2次/d，半年后逐渐减量为1次/ d，长期维持使用．1.5统计学方法采用统计软件包SPSS进行或χ2检验进行比较分析．2结果供体角膜内皮细胞密度术前为2459.61个/mm2，术后7～12月降低至1753.14个/mm2，（＝2.423，＜0.05），差异有统计学意义；供体角膜内皮细胞密度术后呈逐渐下降趋势，术后1～3月下降明显，术后3月至1a，角膜内皮细胞下降较平稳．角膜内皮细胞平均面积术前为388.45μm，术后逐渐增大，术后7～12月增大至638.63μm，见表1.供体角膜六角形细胞所占比例，术前为52.59%，术后六角形细胞所占比例逐渐下降，术后1～3月为快速下降期，术后4～12月下降缓慢，趋于稳定；与六角形细胞形状相似的五、七角形细胞变化趋势与六角形细胞变化趋势相近；术前为37.37%，术后7～12月为33.35%，（χ2＝表1DCD 供体角膜术后角膜内皮细胞密度Tab.1Corneal endothelial cell density after penetrating keratoplasty from DCD donor项目供体角膜术前术后1～4周2～3月4～6月7～12月细胞密度[（x ±s ），个/mm 2]2459.61±253.262271.15±321.471971.33±358.181826.59±303.921753.14±306.31内皮细胞丢失率（%）7.6519.8625.7428.72平均面积（滋m ）388.45±95.26436.29±103.94516.37±108.65607.81±113.28638.63±124.73项目供体角膜术前术后1～4周2～3月六角形细胞（%）52.59±7.2650.13±7.2645.64±8.93五、七角形细胞（%）37.37±7.6835.06±8.0333.67±8.76三、四八、九、十角形细胞（%）10.04±5.0314.81±5.8420.69±6.594～6月42.97±10.5133.49±9.2523.54±6.017～12月40.01±11.3533.35±10.8126.64±8.92表2DCD 供体角膜术后内皮细胞形态所占比例（%）Tab.2Ratio of different corneal endothelial cell morphology after penetrating keratoplasty from DCD donor（%）项目供体角膜术前1～4周2～3月变异系数30.1538.2349.56术后4～6月57.187～12月65.04表3DCD 供体角膜术后内皮细胞变异系数（%）Tab.3Coefficient of variation （corneal endothelial cell )after penetrating keratoplasty from DCD donor （%）111第9期曹倩，等．DCD 角膜移植术后角膜内皮细胞的变化1.92，＞0.05），差异无统计学意义；与六角形细胞形态差异较大的三、四、八、九、十角形细胞术前占10.04%，术后所占比例逐渐增大，术后7～12月增大至26.64%（χ2＝7.38，＜0.05），差异有统计学意义，见表2．供体角膜角膜内皮细胞变异系数术前为30.15%，术后逐渐增大，（χ2＝11.34，＜0.05），差异有统计学意义，见表3.3讨论角膜内皮细胞层是由位于角膜最后面的单层六边形细胞镶嵌而成，主要靠缝隙连接，其屏障功能和生物泵功能对角膜的透明性有着关键的作用．低氧、外伤、疾病或眼内手术等物理和化学因素极易损害角膜内皮细胞，导致角膜内皮细胞气泡形成、细胞大小、形态不一致、细胞内和细胞间异常结构出现以及数量缺失．因此角膜移植术后角膜内皮细胞的功能对角膜植片的透明程度影响重大．3.1DCD 角膜移植术后早期角膜内皮细胞的监测本研究纳入DCD 捐献角膜病例共191例，术后行角膜内皮镜检查，有48例患者经角膜内皮镜检查可检查出数值，检出率为25%，检出率较低，有部分患者角膜内皮镜检查无法测出内皮细胞数值.75%的DCD 角膜移植术后患者因术后角膜水肿，角膜内皮镜无法识别测量角膜内皮细胞，这给DCD 角膜内皮细胞的术后检测及随访带来困难，敏感性低，影响术后角膜内皮细胞的评估．激光共焦显微镜可对角膜进行无创伤、实时活体检查，具有高清晰度、确切的深度定位、时间动态观察、纵向断层扫描等优势，即使在角膜水肿的情况下仍能获得有关内皮的各种资料[5-7]．王素娟等[8]用激光扫描共焦显微镜对15例行生物工程角膜移植术的患者进行角膜活体动态观察，对角膜上皮、基质层、角膜内皮细胞及角膜上皮下神经纤维密度进行分析，得到的分析数据准确、可靠．但激光扫描共焦显微镜需在表面麻醉下进行，显微镜探头表面涂抹眼用凝胶，在探头前套上一次性角膜接触帽，用开睑器撑开受检者眼睑进行检查，这对于术后早期检查有增加感染的风险．因此对于DCD 角膜移植术后早期角膜功能的检查可结合角第38卷112昆明医科大学学报膜内皮镜及共聚焦显微镜检查，当患者角膜水肿，角膜内皮镜测不出结果时可考虑用共聚焦显微镜检查．3.2DCD角膜移植术后角膜内皮细胞的变化本研究发现供体角膜内皮细胞密度术后呈逐渐下降趋势，术后1～3月下降明显，术后3月至1a角膜内皮细胞下降较平稳．角膜内皮细胞丢失率在术后7～12月达高峰，为28.72%，角膜内皮细胞平均面积术前为388.45μm，术后逐渐增大，术后7～12月增大至638.63μm．健康人的角膜内皮细胞随年龄增加的生理损失率约为0.6%，角膜移植术后即使没有发生排斥反应，术后1～3a角膜植片内皮细胞损失率约每年20%，角膜移植手术是导致角膜内皮细胞超生理下降的主要原因；角膜内皮细胞受损后不可以再生，而是通过临近细胞的移行、扩大，进行修复；本研究发现随着角膜内皮细胞密度的下降，角膜内皮细胞平均面积在增加，也证实了在角膜移植术后的1a内，角膜内皮细胞在不断进行修复来抑制角膜排斥反应．3.3供体角膜六角形细胞所占比例术前为52.59%，术后六角形细胞所占比例逐渐下降，术后1～3月为快速下降期，术后4～12月下降缓慢，趋于稳定；与六角形细胞形状相似的五、七角形细胞变化趋势与六角形细胞变化趋势相近；与六角形细胞形态差异较大的三、四、八、九、十角形细胞术前占10.04%，术后所占比例逐渐增大．六边形细胞为角膜内皮细胞的主要功能性细胞，临床应用供体角膜的标准为：内皮细胞数＜1200个/mm2；出现大量的非六角形细胞，非六角型细胞数40%慎用，50%禁用[7]．本研究发现角膜内皮细胞密度下降的同时，六角形细胞所占比例也随之下降，说明DCD供体来源的角膜内皮细胞在角膜移植术后，角膜内皮细胞的慢性失功能速度较正常生理性下降增快．角膜内皮细胞受损伤后，不仅细胞数量减少，而且形态变异、面积增大的现象也增多，致使正常六边形内皮细胞所占百分比下降，角膜正常六边形内皮细胞数目减少意味着角膜内皮细胞的功能减退．供体角膜内皮细胞变异系数术前为30.15%，术后逐渐增大，至术后7～12月，角膜内皮细胞变异系数增加至65.04%．角膜内皮细胞变异系数（平均内皮细胞面积的标准差／平均内皮细胞面积）直接反映内皮细胞大小不均的程度，预示角膜功能储备状况，是表示角膜内皮细胞稳定与否的敏感指标，正常情况下此值应<0.3，平均约为0.25[9]．当角膜上皮或内皮受到化学、物理或各种辐射损伤时，角膜基质随之发生水肿，当上皮完全修复时，水肿很快消失，内皮损伤后果严重，内皮细胞广泛性的破坏可以引起明显的，有时是永久性的水肿．综上所述，本研究发现DCD供体来源角膜植片行穿透性角膜移植术后仅约25%病例可以用角膜内皮镜测出角膜内皮细胞数量，当角膜水肿时，角膜内皮镜无法识别检测出角膜内皮细胞，而角膜内皮细胞数量及面积的增大可导致角膜水肿．DCD 供体来源角膜植片术后内皮细胞数量、六角形细胞比例逐渐降低，内皮细胞平均面积、变异系数、非六角形细胞面积逐渐增大，尤其在术后3月内变化更明显，说明DCD角膜移植术后1a供体角膜仍存在内皮功能下降，尤其是术后3月内皮功能变化明显．因此DCD角膜移植术后1a，尤其是术后3月加强术后随访尤为重要，当发现有早期排斥反应的征象时，及时进行抗排斥治疗对于减少早期排斥反应有重要意义．但DCD角膜移植早期排斥反应的具体发生机制还有待研究．［参考文献］［1］PASCOLINI D，MARIOTTI S P.Global estimates of visual impairment.2010［J］．Br J Ophthalmol，2012，96（5）:614－618.［2］潘志强，梁庆丰．重视角膜移植手术的供体材料问题［J］．中华眼科杂志，2016，9（9）：641－643［3］牟彦，赵敏.世界眼库发展及角膜捐献现状［J］．中国实用眼科杂志，2011，29（4）:304－307.［4］中华医学会眼科学分会角膜病学组，我国角膜移植手术用药专家共识（2016年）［J］．中华眼科杂志，2016，52（10）:733－737.［5］CAVANAGH H D，JESTER J V，ESSEPIAN J，et al．Confocal microscopy of the living eye［J］．CLAO，1990，16（1）：65-73.［6］汪玲，吴洁，朱秀萍，等.角膜共焦显微镜早期诊断兔高危角膜移植排斥反应的价值［J］．国际眼科杂志，2008，8（7）:1334－1336.［7］李凤鸣．中华眼科学［M］．第2版．北京:人民卫生出版社，2006：1177-1178．［8］王素娟，张月琴，李金，等.生物角膜用于人角膜板层移植术后的临床疗效及激光扫描共焦显微镜动态观察［J］．中华实验眼科杂志，2016，34（2）:144-149.［9］刘家琦，李凤明，吴静安，等．实用眼科学［M］．第2版．北京：人民卫生出版社，2005：250－251.（2017－06－12收稿）。

角膜移植术后发生内皮型排斥与病毒性角膜内皮炎临床特征分析摘要目的分析角膜移植术后发生内皮型排斥与病毒性角膜内皮炎的临床特征。

方法30例角膜移植术后发生内皮型排斥患者作为甲组，30例角膜移植术后发生病毒性角膜内皮炎患者作为乙组。

回顾性分析两组患者的临床资料，总结角膜移植术后发生内皮型排斥与病毒性角膜内皮炎的临床特征。

结果乙组患者的术前原发病病毒性角膜炎发生率（56.7%）高于甲组（16.7%），差异具有统计学意义（P＜0.05）；两组患者的角膜内皮代谢失调率、角膜营养不良率及外伤性角膜白斑率比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。

治疗后，60例患者的眼部症状均好转，角膜移植片恢复透明。

结论内皮型排斥与病毒性角膜内皮炎为角膜移植术后常见并发症，术前原发病病毒性角膜炎为病毒性角膜内皮炎的主要诱发原因，临床应加强术前原发病的诊断及治疗，预防术后并发症发生。

关键词角膜移植；内皮型排斥；病毒性角膜内皮炎角膜移植术后需要长期应用糖皮质激素和免疫抑制剂，降低局部组织抵抗力，增加感染风险。

临床研究证明，角膜移植术后会出现其他类型的炎症，和病毒感染存在一定的联系。

病毒性角膜内皮炎可能会出现排斥性反应，存在比较相似的症状，但是在治疗阶段需要提前对患者病情进行了解，做好基础诊断工作，避免出现其他炎症。

为了分析角膜移植术后发生内皮型排斥与病毒性角膜内皮炎的临床特征，本文选取30例角膜移植术后发生内皮型排斥患者作为甲组，30例角膜移植术后发生病毒性角膜内皮炎患者作为乙组，回顾性分析两组患者的临床资料，报告如下。

1 资料与方法1. 1 一般资料选取本院2014年3月～2016年4月30例角膜移植术后发生内皮型排斥患者作为甲组，30例角膜移植术后发生病毒性角膜内皮炎患者作为乙组。

甲组男20例、女10例，年龄20～75岁，平均年龄（55.7±2.5）岁；乙组男16例、女14例，年龄21～76岁，平均年龄（54.7±2.4）岁。

角膜内皮炎的角膜内皮细胞形态改变赵林;孙洪臣【期刊名称】《眼科新进展》【年(卷),期】2007(27)2【摘要】目的探讨角膜内皮炎对患者中央角膜内皮细胞形态的影响.方法用EM-1000型接触式角膜内皮镜对10例单眼角膜内皮炎愈后4～12周的患者的双眼分别摄取中央角膜内皮像并对其图像进行电脑分析.患眼作为实验组,健眼作为对照组.观察其角膜内皮细胞密度,六角形细胞的百分比及异形性的变化.用计量资料配对设计的2样本均数的t检验进行统计分析(双侧检验,P＜0.01为统计学有差异).结果在10例临床诊断角膜内皮炎愈后的患者中,中央角膜内皮细胞密度实验组平均为(1 981±181)mm2,对照组平均为(2 284±315)/ mm2.六角形细胞比例实验组平均为34%,对照组平均为43%.变异系数实验组平均为53%,对照组平均为45%.以上各项观察指标实验组与对照组之间在统计学上都存在显著性差异(P＜0.01).结论角膜内皮炎对角膜内皮细胞造成损伤,导致严重的形态改变,在临床工作中应给予充分重视.【总页数】2页(P138-139)【作者】赵林;孙洪臣【作者单位】116031,辽宁省大连市第三人民医院眼科;116031,辽宁省大连市第三人民医院眼科【正文语种】中文【中图分类】R772.21【相关文献】1.模拟人角膜内皮细胞微环境诱导人胚胎干细胞分化为角膜内皮细胞的研究进展[J], 孙琳2.模拟人角膜内皮细胞微环境诱导人胚胎干细胞分化为角膜内皮细胞的研究进展[J], 孙琳;吴欣怡;3.兔眼前房注射利多卡因后角膜内皮细胞的形态改变 [J], 王晓晖;何敏;王万辉;秦向阳4.不同类型角膜塑形镜对近视儿童角膜厚度及角膜内皮细胞的影响 [J], 刘惠东; 张先楠; 柯建林; 黄准5.青光眼患者角膜内皮细胞的形态改变 [J], 蒋华;谢萍;王焕旭;张康兰;林庆华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Ahmed青光眼阀植入后角膜内皮细胞的变化李克研;徐韶琳;刘丹;王英【摘要】背景:青光眼阀通常植入到眼球颞上方位置,由于角膜内皮细胞不能再生,颞上方内皮细胞的创伤修复主要靠其他区域健康内皮细胞的扩展和延伸来补偿,因此会出现内皮细胞密度的下降和形态改变.目的:观察Ahmed青光眼阀植入前后角膜内皮细胞密度及形态学的变化规律.方法:在34例(34眼)疑难青光眼患者眼球颞上象限行Ahmed青光眼阀植入,移植前及移植后3,6个月对角膜中央、颞上、颞下、鼻上及鼻下区内皮摄像后测定分析,得出角膜内皮细胞密度,并取全角膜平均值,同时观察角膜内皮细胞形态变化,统计六角形细胞所占比例.结果与结论:Ahmed青光眼阀植入后全角膜内皮细胞的平均密度有所下降,并在一段时间内呈渐进性趋势(P<0.05),其中角膜颞上区较中央区下降明显,角膜中央区内皮细胞密度移植前后无明显变化.移植后角膜内皮细胞在形态学方面也发生了变化,六角形细胞比例下降,多边形细胞比例增加(P<0.05).结果显示,Ahmed青光眼阀植入后6个月内角膜内皮细胞密度呈渐近性下降趁势,形态学特征亦有所改变.提示植入过程中应注意眼内操作的轻柔性,从而降低对角膜内皮细胞的损害,并延长对移植后患者角膜内皮的监测时间.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2010(014)003【总页数】4页(P492-495)【关键词】青光眼阀;角膜内皮;角膜内皮计;细胞密度;细胞形态【作者】李克研;徐韶琳;刘丹;王英【作者单位】辽宁医学院附属第一医院眼科,辽宁省,锦州市,121001;吉林大学第二医院眼科中心,吉林省长春市,130000;辽宁医学院附属第一医院眼科,辽宁省,锦州市,121001;辽宁医学院附属第一医院眼科,辽宁省,锦州市,121001【正文语种】中文【中图分类】R3180 引言新生血管性青光眼、葡萄膜炎继发性青光眼、无晶体眼或人工晶体眼青光眼、外伤后继发性青光眼等统称“难治性青光眼”[1]，治疗上十分棘手，常规抗青光眼手术易失败。

人工晶体植入术后角膜内皮变化
苏小波;马振举;汤润祺;梁都雅
【期刊名称】《广州医学院学报》
【年(卷),期】1996(000)002
【摘要】观察18只眼白内障囊外摘除联合后房型人工晶体植入术后角膜内皮的变化。

发现术后一个月、二个月和三个月内皮细胞下降率分别为27．6％、20．3％和16．8％。

结果还显示术中使用羟丙基甲基纤维素或透明质酸钠，术后三个月两者内皮细胞密度变化差异无显著性。

本文从保护内皮细胞的角度论述了有关开展人工晶体植入术所注意的问题。

【总页数】4页(P17-20)
【作者】苏小波;马振举;汤润祺;梁都雅
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】R779.66
【相关文献】
1.ICL／TICL人工晶体植入术后前房深度、角膜内皮细胞、角膜厚度的临床观察[J], 张家琦;袁丽;李海祥;张哲浩;李大卫
2.白内障超声乳化摘除及人工晶体植入术后角膜内皮变化 [J], 唐维强;陆豪
3.人工晶体植入术后角膜内皮变化的临床观察 [J], 王峰;孙乃学
4.人工晶体植入术后角膜内皮变化 [J], 苏小波;马振举
5.带虹膜隔人工晶体植入术后10年角膜内皮失代偿1例 [J], 苗壮; 鲁静
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白内障手术对角膜内皮的影响
邹文青;哈文静;杨巧玲
【期刊名称】《宁夏医学杂志》
【年(卷),期】2002(024)002
【摘要】目的评价老年性白内障囊外摘除人工晶体植入术后角膜内皮的损伤情况.方法使用Topcon非接触型角膜内皮分析仪观察100眼白内障摘除及人工晶体植入前后角膜中央区内皮细胞变化.结果 100眼术后1周内皮细胞损失14.17%,其中47眼术后3个月角膜内皮细胞损失3.18%,经统计学处理P＜0.01.结论术前术后角膜内皮细胞的测定,对掌握手术适应症和评判手术预后有一定的临床意义.
【总页数】1页(P113-113)
【作者】邹文青;哈文静;杨巧玲
【作者单位】宁夏自治区人民医院,宁夏,银川,750021;宁夏自治区人民医院,宁夏,银川,750021;宁夏自治区人民医院,宁夏,银川,750021
【正文语种】中文
【中图分类】R776.1
【相关文献】
1.两种白内障手术方式对角膜内皮细胞的影响分析和比较 [J], 赖文娟
2.飞秒激光辅助白内障手术后角膜内皮细胞变化及其影响因素的临床分析 [J], 陈炳衡;柯妍;汤秀娟;贺婷婷;郭琼天;司马晶
3.飞秒激光辅助的白内障手术与传统超声乳化手术对角膜内皮细胞形态及功能的影响比较 [J], 高青松;邸新;何伟
4.小切口超声乳化白内障手术对白内障患者的治疗效果及对角膜内皮丢失率的影响[J], 谢明星;李清;赖瑶瑶
5.高度近视合并白内障患者白内障手术后角膜内皮损伤影响因素分析 [J], 周慧兰;周灵;段娜;张碧玉;戴丹
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