小鼠黄体生成素LH酶联免疫分析

小鼠黄体生成素(LH)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中黄体生成素(LH)含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠黄体生成素(LH)水平。

用纯化的小鼠黄体生成素(LH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入黄体生成素(LH)，再与HRP标记的黄体生成素(LH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的黄体生成素(LH)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠黄体生成素(LH)浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

酶联免疫测定（ELISA）标准化的一般原则对酶联免疫测定标准化的目的就是通过这种标准化以改善实验室测定的准确度，从而提高不同的实验室间结果的可比性。

进行标准化的先决条件是，标准品和检测物应该是相同的，否则标准化就无从谈起。

这在目前的许多临床免疫测定项目中标准品往往没有达到这一要求。

涉及到免疫测定标准化的组织有世界卫生组织(WHO)生物学标准化专家委员会(ECBS)，其负责建立生物物质的国际标准及参比材料。

WHO通过国家生物学标准和质控物研究所(NIBSC)提供大多数多肽激素和一些肿瘤标志物的国际标准品。

一些区域和地区性组织也制备标准品，如美国的疾病控制中心(CDC)、美国病理学家协会(CAP)的国家委员会。

国家卫生研究所(NIH)提供尤其是用于研究目的的多肽激素标准品。

IFCC也已组织制备了一种脂蛋白和血清蛋白的标准品，可通过CAP得到。

国际癌发生生物学和医学学会已启动一个肿瘤标志物的决定计划。

在国内中国药品生物制品检定所提供一些多肽激素、肿瘤标志物等标准品。

卫生部临床检验中心则为全国各级医院血站实验室提供室内质控物。

尽管仅仅使用标准品并不能保证免疫测定结果的可比性，但标准品对保证免疫测定的重要性是不言而喻的。

目前在世界上有各种不同的科学协会如IFCC及国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)以及美国和加拿大临床化学协会(AACC和CSCC)等正致力于免疫测定的标准化工作，这些组织也制备一些标准品。

在美国，免疫测定必须有食品和药物管理局(FDA)的批准。

在德国的监督机构是医学实验室标准化和文件化研究所(INSTAND)。

在国内免疫诊断试剂的审批由国家药品监督管理局(SDA)负责。

卫生部临床检验中心也正在着手临床免疫检验标准化方面的工作。

第一代生物学标准品是在70多年前由Henry Dale制备的用于胰岛素(insulin)测定的标准品，该标准品被WHO的前身即国家卫生组织联合会(League Of National Health Organization)所采用。

小鼠红细胞生成素（EPO）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：1.56ng/ml-100ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠EPO，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中EPO 含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗EPO抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗EPO抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的EPO呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。

2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

小鼠促黄体生成素(LH)酶联免疫分析试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠促黄体生成素(LH)。

用纯化的小鼠促黄体生成素(LH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促黄体生成素(LH)，与 HRP 标记的促黄体生成素(LH)抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。

TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的促黄体生成素 (LH)呈正相关。

用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠促黄体生成素(LH)浓度。

标本要1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过（HRP）活性。

计算以标准物的浓度为横坐标， OD值为纵坐标，在坐标纸上，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，小鼠促黄体生成素(LH)酶联免疫分析试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有析出，稀释时可在浴中加温助溶，洗涤时不影响。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。

一次加样时间最好控制在 5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。

如标本中待测物质含量过高（样本 OD值大于标准品孔第一孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉6．底物请避光保存。

大鼠促黄体激素(LH)elisa试剂盒使用说明书检测范围：48T1.5 ng/L - 40 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中促黄体激素(LH)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠促黄体激素(LH)水平。

用纯化的大鼠促黄体激素(LH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促黄体激素(LH)，再与HRP标记的促黄体激素(LH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的促黄体激素(LH)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠促黄体激素(LH)浓度。

试剂盒组成1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

小鼠酶联免疫检测试剂盒,小鼠粒细胞集落刺激因子（G-CSF）酶联分析检测ELISA试剂盒使用说明书国内权威的科研试剂供应商，乔羽生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒，品质保证，技术严格，无效果退款退货。

Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆上海乔羽生物专业供应：使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本组织因子途径抑制物（G-CSF）含量。

试验原理：G-CSF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知G-CSF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将G-CSF和生物素标记的抗体同时温育。

洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。

再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。

产生颜色。

颜色的深浅和样品中G-CSF的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48小鼠份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗G-CSF抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B 1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

促黄体生成素定量检测试剂盒（酶联免疫法）说明书目录●产品名称●包装规格●预期用途●检验原理●主要组成成分●储存条件及有效期●适用仪器●样本要求●检验方法●参考值（参考范围）●检验结果的解释●检验方法的局限性●产品性能指标●注意事项●参考文献●生产企业●医疗器械生产企业许可证编号●医疗器械注册证书编号●产品标准编号●说明书批准及修改日期产品名称通用名：促黄体生成素定量检测试剂盒（酶联免疫法）英文名称：LH ELISA（serum）包装规格96人份/盒预期用途用于定量或定性检测待测样品中促黄体生成素(LH)的浓度。

促黄体生成素(LH)由垂体前叶产生，是一种分子量约30.000道尔顿的糖蛋白。

由α和β亚单位组成。

α链类似人促甲状腺激素(TSH)，卵泡刺激激素(FSH)和人绒膜促性腺激素(hCG)，由于它们的β亚单位组成不同，功能则不同。

男性间歇性分泌LH，男性体内LH还称为间质细胞刺激激素(ICSH)。

其主要功能是刺激间质细胞(Leydig cells)产生睾丸激素。

女性LH浓度则随着月经排卵周期变化而变化，变化取决于下丘脑垂体性腺轴上激素的顺序。

从月经第一天起缓慢爬升，由于直接刺激垂体，GnRF和FSH升高，雌二醇升高导致分泌LH，至第12或13天时加速分泌，LH达到最高后的12到18小时开始排卵，如未受孕LH迅速下降至月经，下一周期开始。

性腺机能减退患者血清中LH增高。

初期睾丸不全和Klinefelter综合症LH增高。

肾功不全，肝硬化，甲亢和严重饥饿时LH浓度也升高。

女性卵巢不成熟，初期卵巢不全，多囊卵巢疾病或更年期期间类固醇激素减少，LH分泌物不规律。

男性存在类似情况。

垂体前叶分泌减少，下丘脑GnRH分泌减少，垂体前叶功能不全，均可导致LH降低。

垂体和下丘脑功能紊乱，应同时做其它试验进行确诊。

诊断下丘脑，垂体或性腺发育不全，检查下丘脑－垂体－性腺轴功能，需结合其他实验，如LH-RH兴奋实验以及检测其他激素的水平进行确诊。

第一章化学发光技术一、免疫学检测发展阶段免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段,由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示，因此常被用于检测蛋白质、激素等微量物质。

我国免疫学的检测基本历经了以下几个过程，如图1.1所示。

20世纪60年代70年代90年代时间图1。

1免疫学检测发展阶段尽管免疫诊断在临床诊断中占据着非常重要的地位，但是从我国临床免疫诊断现状来看，无论是临床应用方面，还是产业化角度，都处于相对比较落后的状态，亟待改进。

下表１。

１就此做一比较：表1.1 中国免疫诊断现状由以上分析不难看出，化学发光免疫检测是大势所趋；而取代进口，发展我国的化学发光检测事业，正是临床检验界着手发展的方向.由此，我公司自1998年立项至今，致利于化学发光检测方案设计，自行开发了具有国内领先水平的化学发光底物,与国外知名检测仪器生产商联合开发了化学发光全自动、半自动检测仪,并自行设计开发了化学发光管理软件，而今形成了仪器、试剂、软件全面配套，为我国的临床检验界提供了一套完善的解决方案.二、化学发光免疫分析技术【概述】本世纪70年代中期Arakawe首次报道用发光信号进行酶免疫分析，利用发光的化学反应分析超微量物质，特别是用于临床免疫分析中检验超微量活性物质。

目前，这一技术已从实验室的稀有技术过渡到临床医学的常规检测手段。

化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。

其检测原理与放射免疫（RIA)和酶免疫(EIA）相似,不同这处是以发光物质代替放射性核素或酶作为标记物,并藉助其自身的发光强度直接进行测定.化学发光免疫分析既具有放射免疫的高灵敏度，又具有酶联免疫的操作简便、快速的特点，易于标准化操作.且测试中不使用有害的试剂，试剂保持期长，应用于生物学、医学研究和临床实验诊断工作，成为非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。