免疫组化辅助转移性肿瘤的病理诊断
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对比分析免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理检查中的效果差异【摘要】目的研究在肿瘤病理检查当中使用免疫组化技术和常规技术的差异。
方法将本院自2019年5月~2020年5月收治的64例肿瘤患者当作研究对象,所有患者均需使用免疫组化技术和常规技术进行病理检查,将手术的病理结果当作金标准,对比两组诊断结果准确率。
结果对比诊断准确率,免疫组化技术的准确率明显高于常规技术(P<0.05)。
患者接受免疫组化技术诊断后的满意度评分更高,对比差异明显(P<0.05)。
结论进行肿瘤病理检查时,免疫组化技术的准确率高于常规技术,能够将误诊率和漏诊率降低,为临床诊断和治疗疾病提供更为有效的参考价值,且患者接受诊断过程中心理和生理的舒适度更好,值得推广和应用。
【关键词】免疫组化技术;常规技术;肿瘤病理检查[Abstract] Objective To study the difference between immunohistochemical technique and conventional technique in tumor pathological examination. Methods 64 tumor patients treated in our hospital from May 2019 to may 2020 were taken as the research object.All patients needed to use immunohistochemical technology and conventional technology for pathological examination. The pathological results of the operation were regarded as the gold standard. The accuracy of the diagnostic results of the two groups were compared. Results compared with the diagnostic accuracy, the accuracy of immunohistochemical technique was significantly higher than that of conventional technique (P < 0.05). The patients' satisfaction scorewas higher after being diagnosed by immunohistochemistry (P < 0.05). Conclusion in tumor pathological examination, the accuracy ofimmunohistochemical technology is higher than that of conventional technology, which can reduce the misdiagnosis rate and misseddiagnosis rate, provide more effective reference value for clinical diagnosis and treatment of diseases, and the patients have better psychological and physiological comfort in the process of diagnosis, which is worthy of popularization and application.[Key words] immunohistochemical technique; Conventional technology; Pathological examination of tumor人们生活方式和饮食习惯的改变,导致患有肿瘤的患者逐渐增多。
免疫组化技术在病理诊断中的应用发布时间:2021-04-02T15:47:53.450Z 来源:《医师在线》2021年5期作者:崔晓雪[导读] 目的:分析病理诊断中免疫组化技术的应用效果。
崔晓雪黑龙江省鸡西市人民医院病理科黑龙江省鸡西市158100摘要:目的:分析病理诊断中免疫组化技术的应用效果。
方法:本次选择102例肿瘤患者为对象展开研究,按诊断技术将其分为对照组与观察组。
结果:观察组确诊率高于对照组,差异比较,存在统计学意义。
观察组阳性率92.15%,对照组阳性率72.54%,数据差异存在,存在统计学意义。
结论:在病理诊断中,采取免疫组化技术,可提高检测结果准确性,提高制片的质量水平,为疾病诊断提供依据。
关键词:免疫组化技术;病理诊断;应用;研究近年来我国医疗诊断技术逐渐优化发展,在病理诊断中免疫组化技术得到了广泛应用[1],涉及诸多领域,如,肿瘤原发部位确定、肿瘤组织起源鉴别、未分化恶性肿瘤性质的判定,随着研究的不断深化,免疫组化技术在病理诊断中发挥出一定作用,可提升诊断的准确性[2]。
1.资料与方法1.1一般资料选取2017年1月~2018年1月我院收治的肿瘤患者102例为对象,根据诊断技术随机将全部患者分成51例对照组、51例观察组。
对照组患者平均(43.7±8.2)岁,采取常规技术诊断;观察组患者平均(45.1±9.5)岁,采取免疫组化技术诊断,比较两组基本资料,具有可比性。
1.2方法对照组采取常规技术诊断:根据患者病灶大小、位置及类型进行穿刺活检,将患者肿瘤组织取下,比较标准组织。
观察组采取免疫组化技术诊断:选择试剂包括:蒸馏水、透明液、脱水液、浸蜡液、树胶、甲醛固定液,在石蜡中置入样本,将其切片,厚度控制在2UM,随后进行免组染色,将其置于浓度为3%的过氧化氢液体中,浸泡100min,温度控制在37摄氏度左右,清洗采用蒸馏水,待孵育后DBA显色,采用树胶来封固[3]。
免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(一)作者:联合病理转贴自:本站原创点击数:3833一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记·AE1/AE3最常用胞浆阳性着色,细丝状与低、中分子量角蛋白反应肝细胞为阴性,而胆管细胞阳性用于确定肿瘤为上皮源性·CAM 5.2胞浆阳性着色,细丝状包含CK8 和CK18,主要染色神经内分泌细胞和腺上皮,正常鳞状上皮阴性用于染小细胞癌用于胸腺瘤和梭形细胞癌用于肝细胞癌:AE1/AE3 - CAM5.2 +用于乳腺外的Paget’s病·CK34BE胞浆阳性着色鳞状上皮和鳞状细胞癌阳性用于染前列腺的基底层细胞,鉴别浸润癌用于染涎腺肿瘤的肌上皮用于染Mallory 小体·EMA细胞膜/细胞浆阳性着色上皮标记的替代品浆细胞阳性,很好的内对照用于染滑膜肉瘤 EMA +用于大细胞分化不良性淋巴瘤 EMA +用于L&H 富于淋巴细胞的结节状何杰金用于脑膜瘤 EMA+ AE1/AE3 –用于浆细胞瘤常常 EMA +·CK7 和CK20胞浆阳性着色两者联合应用可鉴别很多种癌的原发部位CK7 常常在胃肠道的癌为阴性CK20 只有胃肠道癌和Merkel 细胞癌阳性间皮细胞标记·Calretinin细胞核和细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需间皮强阳性,Sertoli和肥大细胞阳性用于鉴别间皮瘤(+)和腺癌(-),常加CEA用于鉴别梭形细胞间皮肉瘤(+)和其他的浆膜腔肉瘤(-)用于鉴别胸、腹水中的癌细胞和间皮细胞确定为间皮细胞,如大网膜内陷入的一团细胞或腺瘤样瘤神经元分化标记,如中枢神经细胞瘤帮助确诊心脏粘液瘤,几乎全为(+)白细胞标记·非何杰金淋巴瘤大致分类CD20 (L26),CD3怀疑T 细胞淋巴瘤者加UCHL-1(CD45RO)怀疑浆细胞瘤者LCA(CD45RB),CD79a, CD138小B 细胞淋巴瘤者,CD79a, CD43(MT1)·LCA (CD45RB)几乎所有的白细胞(+ )有些淋巴母细胞淋巴瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、外周T 细胞淋巴瘤(- )经典Hodgkin 的R-S 细胞(-)以往浆细胞瘤(-),现(+)HE 下明确的淋巴瘤不必要染LCAB细胞相关标记·CD20 (L26)胞膜阳性着色,浆阳者不可判为阳性各阶段B 细胞阳性,除了原始的前B 和非常成熟的浆母、浆细胞用于染B 细胞淋巴瘤,除了小细胞、淋巴母细胞(不恒定)和浆细胞瘤(常-)梭形细胞胸腺瘤(+)·CD79a胞浆阳性着色,有/无核周聚集全B 细胞标记,包括浆母和浆细胞标记滤泡中心比mantle和滤泡间B要弱比CD20 贵得多用于鉴别淋巴母细胞淋巴瘤/白血病弥漫性小B 细胞淋巴瘤/白血病浆细胞瘤(常CD20–而CD79a >50% +T细胞相关标记·CD3 (polyclonal)胞浆阳性着色,核周凝聚,有时高尔基体也阳性极好的T 细胞标记,与CD43 不同,髓系细胞和组织细胞不着色极好的T 细胞和NK 淋巴瘤标记,虽然有些大细胞型T 细胞淋巴瘤阴性·CD43 (MT1)只有膜阳性才能判为阳性T 细胞、T 细胞淋巴瘤、真性组织细胞肿瘤、粒细胞肉瘤阳性一部分浆细胞瘤阳性小B 细胞淋巴瘤阳性,这一特点可辅助表明增生的小淋巴细胞为肿瘤性!EBV 感染的B 细胞阳性·UCHL-1(CD45RO)细胞膜阳性着色,有时Golgi 阳性,弥漫性胞浆阳性者非真阳性阳性:正常/ 反应性的T 细胞,组织细胞、粒细胞肉瘤和T 细胞淋巴瘤罕见情况下B 细胞淋巴瘤阳性·CD5细胞膜阳性着色T 细胞阳性,但极少B 细胞也阳性尤其用于慢性淋巴细胞性白血病和Mantle 淋巴瘤,而MALToma 和Marginal Zone 淋巴瘤阴性用于鉴别胸腺癌(CD5+)和其他癌瘤与激活相关的标记·CD30 (Ki-I,Ber-H2)只有膜染色和Golgi体染色才是真阳性正常淋巴滤泡周单个的大细胞为阳性激活的淋巴细胞阳性:如传单、弓浆虫感染、Kikuchi淋巴结炎等、浆细胞也阳性用于大细胞分化不良性淋巴瘤用于一些传统的大细胞淋巴瘤外周T和B细胞淋巴瘤中的一些单个大细胞经典何杰金病中的R-S细胞,但非L&H细胞淋巴瘤样丘疹病等皮下CD30+的淋巴增生疾病一些浆细胞瘤胚胎性癌组织细胞标记·CD68(PGM1)胞浆内颗粒状阳性着色较好的组织细胞和单核细胞(包括浆样单核细胞)及其肿瘤的标记有些非组织细胞也可阳性,包括:肾小管、粒细胞肉瘤、恶黑、血管瘤样恶纤组等髓系细胞标记·Myeloperoxidase胞浆阳性着色,常呈颗粒状髓系细胞及其肿瘤的高度特异且敏感的标记奇怪的是在Kikuchi 淋巴结炎和狼疮性坏死性淋巴结炎中,其中的组织细胞myeloperoxidase 也为阳性与淋巴瘤相关的标记·ALK-1(Anaplastic lymphoma kinase-1)胞核+ 胞浆阳性着色用于大细胞分化不良性淋巴瘤,不能证实ALK1+ 与良好预后有关用于一种罕见的大B 细胞细胞瘤,ALK1 阳性而CD20 阴性,但IgA 阳性·Bcl-2在核周围区阳性着色在正常淋巴结,生发中心阴性,但mantle 和滤泡间细胞强阳性在滤泡性淋巴瘤,(>80% 病例)生发中心强阳性,阴性不能排除滤泡性淋巴瘤也用于鉴别单核样B 细胞增生(- )和单核样B 细胞淋巴瘤(+ )有人用于诊断孤立性纤维性肿瘤·Cyclin-D1核阳性着色主要用于Mantle 区淋巴瘤,几乎所有病例均为阳性,有些可能为弱阳性与分化阶段相关的标记·Tdt细胞核阳性着色不成熟的T 或B 淋巴细胞标记,前T/ 前B 细胞用于诊断淋巴母细胞淋巴瘤/ 白血病诊断胸腺瘤(富于不成熟的T 细胞)肌原性标记·Desmin胞浆阳性着色平滑肌/ 骨骼肌及其肿瘤的良好标记,肌纤维母细胞有时也阳性,但肌上皮阴性一些间皮瘤阳性desmoplastic small cell tumor·MSA(Muscle-specific actin)胞浆阳性着色极好的肌源性标记用于·平滑肌、骨骼肌及其肿瘤·肌纤维母细胞及相关肿瘤(恶纤组、结节性筋膜炎等)·肌上皮及其肿瘤·血管周细胞肿瘤·一些间皮瘤血管原性标记·CD31细胞膜阳性着色内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性有时浆细胞/ 浆细胞瘤阳性主要用于诊断血管性肿瘤:特异且敏感用于识别骨髓中不正常的巨核细胞用于巨核细胞系白血病·CD34细胞膜+/-细胞浆阳性着色血管内皮/巨核细胞/血小板 +很好的血管标记,但特异性差多种肿瘤CD34阳性,包括:CD34阳性的肿瘤·a) Some myeloid leukemias (especially the primitive ones). ·b) Vascular tumors·c) Solitary fibrous tumor; angiomyofibroblastoma·d) Hemangiopericytoma·e) Dermatofibrosarcoma protuberans·f) Gastrointestinal stromal tumor·g) Mammary myofibroblastoma·h) Epithelioid sarcoma·i) Spindle cell lipoma·j) Scattered cells in peripheral nerve sheath tumors·k) Megakaryoblastic leukemia血管原性标记·Factor VIII related antigen (F-VIII)胞浆阳性着色,常为颗粒状内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性主要用于血管原性肿瘤特异性好,敏感性差神经、神经内分泌及神经外胚层细胞浆阳性着色是神经和神经内分泌细胞很好的标记特异性和敏感性均好·Paraganglioma ·Pheochromocytoma ·Neuroblastoma·Olfactory neuroblastoma ·Ganglioneuroma ·Ganglioneuroblastoma·PNET·Parathyroid tumor·Medullary thyroid carcinoma ·Islet cell tumor·Pituitary tumor·Carcinoid tumor·Small cell carcinoma·Merkel cell carcinoma ·Thyroid follicular cell tumor ·Adrenocortical tumor·CgA胞浆内颗粒状着色染神经内分泌细胞的分泌小泡,因此神经元和神经节细胞阴性神经内分泌非常特异性指标,敏感性较差,阳性信号取决于瘤细胞内神经内分泌颗粒的多少小细胞癌:信号少类癌、Merkel细胞癌、甲状旁腺腺瘤等强阳性神经性肿瘤可阳可阴·GFAP (Glial fibrillary acidic protein )胞浆阳性着色星形细胞、室管膜细胞阳性,一些肌上皮阳性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤阳性,少突胶质细胞瘤常阴性;一些外周神经鞘瘤可阳性涎腺多形性腺瘤常可阳性乳腺的肌上皮有时也可阳性·S-100细胞核+/-细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需用处非常多:·glial cells, Schwann cells (astrocytoma, schwannoma, neurofibroma, malignant peripheral nerve sheath tumor). In benign nerve sheath tumors, almost all the tumor cells are positive; while in malignant peripheral nerve sheath tumor, usually only a fraction of the neoplasticcells are S100 positive. Note that S-100 protein antibody can also highlight the sustentacular cells that envelope the islands of tumor cells in paraganglioma and olfactory neuroblastoma.S-100·Melanocytes and nevus cells (Melanocytic nevus, malignant melanoma, malignant melanoma of soft parts/clear cell sarcoma of tendons and aponeurosis)·Myoepithelial cells·Fat cells (Lipoma, liposarcoma)· Cartilage cells (Chondroma, chondroblastoma, chondrosarcoma·Histiocytes of sinus histiocytosis with massive lymphadenopathy (Rosai-Dorfman disease)·Interdigitating dendritic cells and Langerhans cells (Langerhans cell histiocytosis, interdigitating dendritic cell sarcoma). Juvenile CML is often S-100 positive·HMB45胞浆内颗粒状着色恶性黑色素瘤和交界痣,而正常的痣细胞常为阴性肾和肝的血管平滑肌脂肪瘤、肾被膜瘤肺的淋巴管肌瘤病、糖瘤·Melan-A胞浆内颗粒状着色阳性表达的细胞包括:黑色素细胞、肾上腺皮质、性索(Leydig, granulosa)用于:·黑色素瘤·支持- 间质细胞瘤和颗粒细胞瘤·血管周细胞瘤·肾上腺皮质肿瘤与乳腺癌相关的抗体·ER细胞核阳性着色·PR细胞核阳性着色·Ki-67细胞核阳性着色G1, S, G2 and M phases of the cell cycle 阳性Ki-67 index: 阳性细胞所占比例·P53细胞核阳性着色正常细胞因P53蛋白很快降解故阴性,而恶性肿瘤中因突变或存在使P53稳定的因素,故可阳性·C-erBb2细胞膜阳性着色分级Herceptine 治疗还用于鉴别乳腺内/外的Paget’s病和恶黑用于乳腺内/外Paget’s病和表皮的一些透明细胞(Toker cell)用于显示Paget’s病切缘是否干净激素类抗体·Thyroglobulin胞浆阳性着色极好的甲状腺滤泡上皮及肿瘤的标记,分化极差的甲状腺癌可阴性·Calcitonin胞浆阳性着色极好的C细胞及髓样癌的标记,如CgA+则更支持髓样癌个别喉的类癌+·PTH (parathyroid hormone)胞浆阳性着色甲状旁腺细胞及其肿瘤的标记·垂体腺瘤类激素胞浆阳性着色GH,PRL,TSH,FSH,ACTH,LH·HCG胞浆阳性着色极好的滋养叶细胞及肿瘤的标记:绒癌、胚胎性癌等一些胃和膀胱的癌也可阳性·PSA胞浆阳性极好的前列腺癌标记有时膀胱和尿道周的癌也可阳性·TTF-1(thyroid transcription factor-1)单纯的核阳性着色正常情况下只有甲状腺和肺泡上皮细胞阳性,大的支气管上皮阴性在肿瘤中:主要用于确定肿瘤来源于肺或甲状腺·AFP胞浆+/- 核阳性成熟组织中阴性,而胚胎性肝、胃肠道、神经上皮成分中+用于诊断肝细胞癌和肝母细胞瘤用于诊断胚胎性癌和卵黄囊瘤用于显示不成熟畸胎瘤中的神经上皮成分其他抗体·CD99细胞膜阳性着色正常存在于不成熟T细胞(胸腺细胞)和胰岛细胞用于T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病胸腺瘤(淋巴组织成分+)尤文氏肉瘤和PNET间叶性软骨肉瘤颗粒细胞瘤和支持细胞(Sertoli)瘤孤立性纤维性肿瘤其他:滑膜肉瘤、血管周细胞瘤、脑膜瘤等·CD117 (c-Kit)胞膜阳性着色+/- 胞浆阳性,胞膜为必需正常时胃肠道的Cajal 细胞、黑色素细胞、肥大细胞阳性用于诊断GIST用于诊断mastocytosis用于诊断精原细胞瘤/ 无性细胞瘤·Inhibin胞浆内,常呈颗粒状着色用于诊断性索间质肿瘤:颗粒细胞瘤、Sertoli-Leydig细胞瘤用于诊断肾上腺皮质肿瘤·BRST-2(Gross cystic disease fluid protein-15, GCDFP-15)用于确定肿瘤来源于乳腺少部分汗腺、涎腺或其他肿瘤也可+·CEA细胞膜+/- 细胞浆阳性着色几乎所有的腺癌为阳性用于诊断乳腺/ 乳腺外的Paget’s 病,+ 而恶黑-显示涎腺或汗腺肿瘤中的腺体成分用于鉴别腺癌和间皮瘤用于诊断甲状腺髓样癌,尤其是小细胞型用于诊断肝细胞癌前列腺癌的免疫组化表型·AE1/AE3 +·PSA +·P504S +·CK34BE -·P63 –免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(二)作者:联合病理整理转贴自:中杉生物公司交流资料点击数:4071二、免疫组化在病理诊断中的应用(一)免疫组织化学在外科病理诊断中的重要性免疫组织化学染色技术发展到今天,已经成为外科病理诊断中必不可少的手段,如同组织化学染色一PAS、网染等一样,同时也是提高诊断水平、为临床提供诊疗依据,预测治疗效果和预后,减少医疗纠纷的重要手段。
病理报告提示做“免疫组化”,这是怎么回事病理报告是判断患者肿瘤性质的关键依据,采取什么样的治疗方法、应用哪些治疗药物等都需要按照病理报告的结果来进行。
而在有些患者的病理报告中常常会提示到做“免疫组化”,“免疫组化”是什么?为什么要做“免疫组化”呢?下面就让我们一起来探讨探讨。
1什么是“免疫组化”“免疫组化”的全称是“免疫组织化学”,其最早于20世纪70年代就被运用在病理诊断当中了,具体指的是根据免疫学中抗原与抗体的特异性结合原理,采用一定的检测技术与方式对患者的组织细胞进行综合性的研究。
这个过程中所采用的技术方式为利用显色剂如荧光素、同位素等对细胞抗体进行显色标记,然后根据一定的标准确定细胞内多肽与蛋白质等抗原的性质,主要研究内容包括定位、定性和相对定量三个方面。
在病理报告中提示患者做“免疫组化”,主要是为了更进一步诊断与明确患者的病情,并为患者的疾病治疗、预后等环节提供参考,这一诊断技术的广泛运用充分体现了人们在肿瘤疾病研究中取得的进步成就,也代表了病理诊断水平的提升。
2“免疫组化”在病理诊断中的具体应用(1)诊断与鉴别诊断恶性肿瘤“免疫组化”可以帮助医生和患者诊断与鉴别诊断恶性肿瘤,患者检查出患得肿瘤后要想弄清楚它究竟是恶性的还是良性的,就需借助“免疫组化”技术进行诊断,在过去只依靠病理切片的观察来做判断,存在一定的不准确性,且对复杂性肿瘤无法做出准确诊断,而通过“免疫组化”不仅可以实现良性与恶性的诊断,而且还可以鉴别诊断出是淋巴癌、恶性黑色素瘤、小细胞癌等具体情况。
(2)病理分型“免疫组化”可以帮助医生和患者对肿瘤进行病理分型,由于临床上一些肿瘤的组织形态较为相似,如果仅用病理切片进行鉴别诊断容易出现判断失误,而通过免疫组化技术能够精准区分肿瘤类型,如对淋巴瘤和软组织肿瘤的区分等,从而为后续治疗方案以及预后措施的选择提供参考。
(3)明确恶性肿瘤组织来源“免疫组化”可以帮助医生和患者明确恶性肿瘤组织的真正来源,找到转移癌的病灶位置。
术中快速免疫组化在病理诊断中的应用价值摘要:术中冷冻切片HE染色已广泛应用于临床手术中快速诊断,然而,由于某些肿瘤细胞在HE染色组织形态学上的相似性,该方法易漏诊、误诊,甚至造成患者二次手术或医疗事故。
石蜡切片免疫组化染色是病理工作中重要的检测手段之一,但其染色时间长,无法在术中及时提供诊断结果。
而术中冷冻切片HE 染色结合快速免疫组化染色可大幅提高术中快速病理诊断的准确性。
本文从术中快速免疫组化技术的发展史、应用场景、技术要点和优缺点等多方面阐述了此技术在病理诊断中的应用价值。
关键词:术中快速免疫组化、冷冻切片、病理诊断冷冻切片HE染色技术早已普遍用于解决手术中的快速诊断问题,该染色技术一般在30min左右即可对送检组织做出快速的病理诊断,而HE染色主要是在光学显微镜下观察病变细胞的形态学变化及特点来判断病变的性质及具体类型。
因此,对于一些形态学表现不太典型的病例,术中病理诊断难度就很大。
随着医学科学的高速发展,各种新的肿瘤诊断方法不断涌现,特别是在肿瘤的诊断、鉴别诊断中起很大作用的免疫组化技术的应用,解决了病理诊断中的许多难题,使诊断病理学水平明显提高。
在临床病理诊断中,免疫组化技术是一种重要的技术和手段,从20世纪70年代开始,该技术就应用于病理诊断。
它是根据抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应,使标记了抗体的显色剂显色,从分子水平上检测细胞中的抗原,对抗原进行定位、定性和定量的检测[1]。
该技术可用于恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断,确定转移性肿瘤的原发部位或者对肿瘤进行进一步的病理分型,以及发现微小的转移灶等。
但由于常规免疫组化步骤繁琐、耗时长,一般需要24-48小时,不能用于术中快速病理诊断。
后来,丹麦DAKO公司推出的EPOS(Enhanced polymer one-step staining)法,原理是采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和HRP(辣根过氧化物酶)结合在一起,形成HRP—多聚化合物—特异性抗体巨大复合物,该聚合物分子量大,与一抗结合位点多,使一抗直接与组织中的特异性抗原结合增加,最后有充足的HRP与DAB发生显色反应,反应迅速,这为免疫组化染色精简了步骤,缩短了时间[2]。
免疫组化在临床诊断中的应用在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHe)是一种很重要的技术和手段,从20世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。
但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一些局限性。
深入研究免疫组化原理和技术,必须熟悉各种抗体真阳性反应部位,实现实验室间免疫组化标准化,使免疫组化在病理诊断中发挥最大的辅助作用。
在病理诊断中,随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现,免疫组化在肿瘤诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。
由于免疫组化技术也存在一些局限性,因此,深入研究免疫组化原理和技术,并努力实现规范化的操作,才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床治疗中的作用。
1.免疫组化技术观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况,对抗原进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学,由于抗原与抗体特异性结合,因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂(酶、荧光素、同位素、金属离子等等)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)。
IHC所用标本主要为两大类:组织标本和细胞标本,其中制作组织标本最常用、最基本的方法是石蜡切片。
石蜡切片对于组织形态保存好,有利于各种染色对照观察,而且能长期保存;石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
2.免疫组化技术在临床诊断中的作用目前免疫组化技术应用于临床主要有以下几个方面:2.1肿瘤良恶性的判断对于反应性增生还是肿瘤性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的轻链抗体检测B淋巴细胞增生的单克隆或多克隆性来区别。
在滤泡反应性增生时,滤泡反应中心的细胞不表达细胞凋亡蛋白(bc1-2),be1-2阴性;而在滤泡性淋巴瘤中,由于90%以上肿瘤性滤泡细胞有bc1-2的高表达,bc1-2阳性。
免疫组化与病理诊断免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是临床病理诊断中常用的技术和手段。
从20世纪70年代开始,免疫组化技术就已经应用于病理诊断,对诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。
本文重点讨论了免疫组化技术在临床上的应用与常见的免疫组化指标在临床上的意义。
1. 什么是免疫组化?2. 什么是病理诊断?3. 免疫组化技术在临床上的应用4. 病理诊断中免疫组化的局限性5. 临床上常用指标的意义1、什么是免疫组化?在了解免疫组化在临床上的应用之前,我们先来了解下什么是免疫组化。
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原。
然后通过免疫动物后获得特异性的抗体,再用此抗体去探测组织或细胞中的同类抗原物质。
由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法(荧光素、酶、金属离子、同位素)将抗原抗体结合的部位显示出来,以其达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性,定位或定量的研究(Figure 1)。
Figure 1. The theoretical diagram of IHC免疫组化针对的样本主要是组织。
组织是来自患者或动物,经过冷冻或石蜡包埋。
将这些组织制成约4μm厚的切片,封片后再处理。
若样本是细胞,通常被称为免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)。
对于ICC,大部分细胞外基质及其他基质组分被去除,只剩下整个细胞来染色。
ICC 的来源可以是细胞悬液,来自患者或动物(如血涂片、拭子等),或在实验室中进行的组织培养细胞系。
2、什么是病理诊断?病理诊断是研究疾病发生发展和疾病过程中患病机体形态结构、功能代谢改变与疾病转归,从而为疾病的诊断、治疗与预防提供必要的理论基础和实践依据。