基质辅助激光解析电离飞行时间质谱

一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程一. 开机1. 开主机总电源至ON。

2. 开主机正面有钥匙的开关至ON（顺时针）。

3. 开计算机及显示器，启动FlexControl软件。

4. 等待源高真空达到3×10-6mbar，如达不到该数值，检查是否有漏气发生。

5. 进入日常操作。

二. 关机1．将靶退出。

2．在FlexControl界面的Spectrometer关掉高压（按“OFF”）。

3．关闭所使用的软件，关闭计算机。

4．关主机正面有钥匙的开关至OFF（逆时针）。

5．关主机总电源至OFF。

三．日常操作1．打开FlexControl进入仪器控制界面。

2．确认真空度为10-7mbar或稍低。

3．通过界面Carrier▲或主机正面的Load EJECT开关，将样品靶放入仪器，等待约2分钟，调整好靶位。

在此过程中不应操作软件或硬件，以确保仪器通讯畅通。

4．根据测量目的选择测量方法⑴分子量测定：根据分子量大小选择相应的线性测量方法和仪器校正方法。

(2) 肽质量指纹谱测量：根据所需测量的肽谱范围选择相应的反射测量方法和仪器校正方法。

⑶根据需要选择正离子或负离子测量方法和仪器校正方法。

⑷如果进行串联质谱分析,则选择LIFT方法。

5．选择适当的仪器参数6．测量⑴．手动测量a．选择好待测样品的靶位及相应参数后，按 Start开始测量。

b．根据图谱的质量按Add添加或按Clear Sum删除图谱。

c．按Save As保存图谱。

注：在测量过程中可随时调整激光能量和靶位置以获得最佳信噪比和分辨率。

⑵．自动测量a．按菜单AutoXecute，再按Select选择一个Sequence文件名。

b．按Edit编辑待测样品，用Sample position 的Sample依次选定靶位后按Add 添加到Edit AutoXecute Sequence中。

c．按AutoXecute Method选择Calibration或样品测量方法。

jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱是一种先进的质谱技术，它结合了基质辅助激光解吸电离（MALDI）和飞行时间质谱（TOF-MS）两种技术的优势，能够在分析生物大分子和其他复杂样品时提供高灵敏度和高分辨率的数据。

在MALDI-TOF-MS中，样品与基质混合后通过激光辅助电离，产生一系列的离子，这些离子在一个电场中被加速到一定能量后，根据其质荷比分别飞行到检测器，通常基于TOF-MS的仪器会有高质量的检测结果。

针对这一主题，我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理、应用及优势，并探讨其在生物医学研究、生物技术领域的重要意义。

我们将对该技术的未来发展和趋势进行分析和展望，以帮助您更全面地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱。

理解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的原理对于深入探讨这一主题至关重要。

这种技术利用了MALDI和TOF-MS两种技术的优势，MALDI能够提高大分子的离子化率，TOF-MS能够提供高分辨率和高灵敏度的分析结果。

jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱可以在保证数据质量的提高分析的速度和效率。

我们将深入探讨jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在生物医学研究和生物技术领域的应用。

这种技术在生物医学研究中可以用于蛋白质组学和代谢组学的分析，能够帮助科学家更好地理解疾病的发病机制、开发新的药物或者诊断方法。

在生物技术领域，jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱也能够用于生物药物的质量控制和分析，可以提高生物药品的质量和安全性。

我们还将重点分析jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的优势，比如高分辨率、高灵敏度、高通量等特点，以及与其他质谱技术的比较。

这可以帮助您更好地了解jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱在分析复杂样品时的优势和局限性。

通过对jeol基质辅助激光解吸电离离子源飞行时间质谱的未来发展和趋势进行分析和展望，我们可以帮助您更好地把握这一技术的发展方向和未来的应用前景，为您在相关领域的研究和应用提供更多的启发和帮助。

基质辅助激光解吸电离质谱技术
基质辅助激光解吸电离质谱技术（MALDI-TOF）是一种分析生物
分子的强大工具。

它已经在蛋白质、核酸和其他生物分子分析方面得
到广泛应用。

下面将从以下四个方面介绍MALDI-TOF技术的原理、
优点和应用。

一、原理
MALDI-TOF技术基于激光的原理，将样品与基质的混合物直接离子化，负离子和正离子由离子源加速器加速并分离，形成离子束，然后质量
分析器通过测量离子的飞行时间确定其质量。

该技术的核心基质辅助
激光解吸（MALDI）利用吸收激光能量的基质辅助离子化样品，以便
于其在质谱仪中分析。

二、优点
1.高灵敏度和快速分析速度
2.允许复杂混合物的分析
3.适合大分子分析
4.样品制备简单，并且适合高通量分析
三、应用
1.蛋白质质量分析
MALDI-TOF技术被广泛用于蛋白质质量分析，如蛋白质组学研究、酶学、蛋白质结构与功能研究等领域。

2.核酸分析
MALDI-TOF技术已用于分析DNA序列，RNA序列、突变筛查等应用。

3.药物筛选
MALDI-TOF技术可以被用于药物筛选研究，例如药物的质量控制和药
物代谢动力学等。

4.食品安全
MALDI-TOF技术可以基于蛋白质和碳水化合物分析技术来鉴定、检测
和鉴别食品中的致病菌和其他食品中的杂质。

四、结论
MALDI-TOF是一种革命性分析技术，已被广泛应用于多个领域，包括
蛋白质质量分析、核酸分析、药物筛选和食品安全等。

由于它的快速、高灵敏度和不依赖于基础知识的可靠性，它被证明是高通量分析的方
法选择之一。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 技术的主要特点是，先通过PCR扩增目标序列，然后加入snp序列特异延伸引物，在SNP 位点上，延伸1个碱基。

将制备的样品分析物与芯片基质共结晶，将该晶体放入质谱仪的真空管, 而后用瞬时纳秒(10-9s) 强激光激发，由于基质分子经辐射所吸收的能量，导致能量蓄积并迅速产热，从而使基质晶体升华，核酸分子就会解吸附并转变为亚稳态离子，产生的离子多为单电荷离子，这些单电荷离子在加速电场中获得相同的动能，进而在一非电场漂移区内按照其质荷比率加以分离，在真空小管中飞行到达检测器。

MALDI产生的离子常用飞行时间（Time-of-Flight,TOF）检测器来检测，离子质量越小，就越快到达。

理论上讲，只要飞行管的长度足够，TOF检测器可检测分子的质量数是没有上限的。

MassARRAY SNP 检测的质谱范围为5000 to 8500 Da。

主要用途： 1.对生物大分子物质分子量的测定； 2.对蛋白质进行高通量的鉴定； 3.对有机小分子化合物分子量的测定； 4.对寡核苷酸的分析； 5.对基因的单核苷酸多态性的分析仪器类别：0303071402 /仪器仪表/成份分析仪器/质谱仪指标信息： 1.质量数测定范围最高可达40万Da以上； 2.检测灵敏度范围：10-15～10-18摩尔； 3.质量准确度可达5ppm； 4.分辨率右达2万。

附件信息：配有源后衰变装置，可对多肽、蛋白质的序列进行分析机组简介：基质辅助激光角吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS Reflex Ⅲ）：具有操作简单、快速、谱图直观、能耐受一定浓度的盐和去垢剂等特点，特别适合于混合多肽、蛋白、寡核苷酸的精确质量数测定，其测定质量数范围最高可达40万Da以上，灵敏度可达10-15～10-18摩尔，质量准确度5ppm。

配有源后衰变（post-sourc e decay, PSD)装置，计算机自动联机检索系统。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱微生物鉴定系统性能验证方案的建立徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【摘要】目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)在常规临床微生物鉴定中的性能验证方法,指导临床实验室规范微生物鉴定程序.方法选取标准菌株、质控菌株和临床菌株共115株,包含革兰阳/阴性球菌30株、革兰阳/阴性杆菌31株、真菌30株,厌氧菌、苛养菌各12株,所有菌株均经Vitek Compact鉴定和/或细菌16S rDNA、真菌ITS DNA测序分析验证.任意选择3种MALDI-TOF MS微生物鉴定系统厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱,采用检测系统推荐方法进行菌株鉴定,进行准确度验证试验.精密度验证:选取标准菌株和临床菌株10株,1位操作者使用3个检测系统对10株菌株分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d;3位操作者使用3个检测系统对10株菌株每d分别进行质谱鉴定3次,连续鉴定3 d,从而验证鉴定结果的重复性.结果厦门质谱、布鲁克质谱、安图质谱对标准/质控菌株(除外厌氧菌)的鉴定符合率为100％;对临床菌株的属水平鉴定符合率为100％;对革兰阴/阳性杆菌的种水平鉴定符合率分别为100％、100％、96.77％;对革兰阳性球菌的种水平鉴定符合率分别为96.67％、96.67％、100％;对真菌的种水平鉴定符合率均为90％一致;对苛养菌的种水平鉴定符合率均为100％;对厌氧菌鉴定符合率为91.67％种水平一致.精密度验证试验结果重复性100％.结论 3种MALDI-TOF MS系统在革兰阳/阴性球菌、革兰阳/阴性杆菌、真菌、苛养菌鉴定的准确度和精密度符合要求,验证通过.本文建立的微生物鉴定质谱仪性能验证方案可满足综合性医院临床微生物实验室常规鉴定基本要求.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2018(036)010【总页数】5页(P783-787)【关键词】基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱;性能验证;微生物鉴定【作者】徐蓉;慎慧;黄媛媛;何丽华;倪丽君;郭建;吴文娟【作者单位】上海市临床检验中心临床微生物室,上海200126;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123;同济大学附属东方医院南院检验科,上海 200123【正文语种】中文【中图分类】R446.520世纪90年代末，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS)成功应用于微生物菌种鉴定并得到迅猛发展。

基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱MALDI-TOF-MS MALDI-TOF-MS（基质辅助激光解析电离飞⾏时间质谱）是近年来发展起来的⼀种新型的简单⾼效软电离⽣物质谱仪。

质谱分析法主要是通过对样品的离⼦的质荷⽐的分析⽽实现对样品进⾏定性和定量的⼀种⽅法。

因此，质谱仪都必须有电离装置把样品电离为离⼦，有质量分析装置把不同质荷⽐的离⼦分开,经检测器检测之后可以得到样品的质谱图，由于有机样品,⽆机样品和同位素样品等具有不同形态、性质和不同的分析要求,所以，所⽤的电离装置、质量分析装置和检测装置有所不同。

但是，不管是哪种类型的质谱仪，其基本组成是相同的。

都包括离⼦源、质量分析器、检测器和真空系统。

以某种⽅式使⼀个有机分⼦电离、裂解，然后按质荷⽐（m/z）⼤⼩把⽣成的各种离⼦分离，检测它们的强度，并将离⼦按其质荷⽐⼤⼩排列成谱，这种分析研究的⽅法叫做质谱图，质谱的最⼤⽤途之⼀是可以测定未知物的分⼦量（质谱能通过检测分⼦离⼦的质荷⽐获得分⼦量），并可以确定化合物的分⼦式（可通过碎⽚离⼦的质荷⽐的强度推测有机物的结构。

这相当于⼀个精巧的花瓶被打碎了，如果我们仔细地收集和归属这些碎⽚，然后将碎⽚拼构起来，就可以使花瓶复原。

花瓶好⽐有机物的分⼦，打碎花瓶犹如使分⼦电离、裂解。

收集和归属碎⽚就像是按质荷⽐分离、记录离⼦。

⽽将碎⽚重拼花瓶的过程，相当于通过解析谱图得到有机物结构的过程。

由于各种有机物都有其特定的、可以重复的质谱图，⽽且⼈们对质谱裂解过程的研究中已经发现了⼀些普遍适⽤的裂解规律，这为质谱⽤于有机物结构分析提供了可靠的基础）。

飞⾏时间质谱仪Time of Flight Mass Spectrometer (TOF) 是⼀种很常⽤的质谱仪。

这种质谱仪的质量分析器是⼀个离⼦漂移管。

由离⼦源产⽣的离⼦加速后进⼊⽆场漂移管，并以恒定速度飞向离⼦接收器。

离⼦质量越⼤，到达接收器所⽤时间越长，离⼦质量越⼩，到达接收器所⽤时间越短，根据这⼀原理，可以把不同质量的离⼦按m/z值⼤⼩进⾏分离。

【MALDI-TOF MS】（基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱）培训预习提纲一仪器概况仪器名称：基质辅助激光解析电离－飞行时间质谱仪Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass SpectrometerMALDI-TOF公司：美国应用生物系统Applied Biosystem型号：Voyager DE－STR特点：DE Delayed Extraction 延迟引出PSD：Post Source Decay 源后裂解技术指标：Mass AccuracyLinear Mode, External Calibration:≤±0.05% for angiotensin[1,296.6853] and myoglobin [16,952.5].∙Reflector Mode, External Calibration:≤±0.008% for ACTH 18-39 [m/z 2,565.1989].≤±0.005% for E.coli thioredoxin [m/z 1,1674.4] ±0.005% for ACTH 18-39Mass Resolution:∙Reflector Resolution:≥20,000 for insulin (m/z 5,734).≥12,000 for ACTH clips.∙Linear Resolution:≥3,000 angiotensin.≥3,500 for ACTH 18-39 [m/z2,465.1989].≥1,000 for myoglobin (m/z 16,952).≥100 for BSA (m/z 66,431).Sensitivity:∙Routine detection of 5 fmol of neurotensin with a signal to noise ration (S/N) ＞80:1.Post-Source Decay Mass Accuracy:∙≤0.2 with default calibration.应用：MALDI-TOF仪器作为一种可以确定大分子精确分子量的工具，可以对纳米材料、生物材料，高分子聚合物等的分子量及聚合度进行测定及碎片结构定性，有机合成反应的质量评价，蛋白质、多肽、核酸、寡糖等生物分子的分子质量测定, 蛋白质、多肽酶解产物肽图谱测定, 蛋白质、多肽的氨基酸顺序分析。

纳米材料辅助负离子激光解吸电离-飞行时间质谱分析小分子研究进展张晓娜;牛家华;卢明华;蔡宗苇【摘要】基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种软电离质谱技术,目前已被广泛用于蛋白质、多肽、核酸、聚合物等大分子分析.由于传统有机化合物基质在低相对分子质量(小于700 Da)区域的干扰,该技术在小分子物质分析方面受到很大限制.为克服传统有机化合物基质在低相对分子质量区域的干扰,近年来以纳米材料为代表的无机基质材料备受关注.相对传统有机化合物基质或纳米材料正离子模式,基于纳米材料的负离子激光解吸电离(LDI)有效避免了正离子模式下一种化合物会产生多种加合物的问题,具有图谱简单易于解析、灵敏度高、重现性好等优点.该文综述了近5年来纳米材料负离子LDI-TOF MS技术在小分子分析方面的研究进展,以期拓展该技术在小分子分析方面的应用.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2016(034)011【总页数】5页(P1017-1021)【关键词】纳米材料;激光解吸电离;飞行时间质谱;小分子;综述【作者】张晓娜;牛家华;卢明华;蔡宗苇【作者单位】河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;河南大学化学化工学院,河南开封475004;环境与生物分析国家重点实验室,香港浸会大学化学系,香港999077【正文语种】中文【中图分类】O658基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种软电离质谱技术,目前已被广泛用于蛋白质、多肽、核酸、聚合物等大分子分析。

由于具有分析速度快、灵敏度高、样品需求量少、样品制备简单和对样品纯度要求不高等优点,该技术已成为现代分析特别是生物分析领域不可或缺的研究工具。

传统MALDI-TOF MS中常用的基质是有机小分子化合物(例如2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、芥子酸(SA)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)等),基质与被分析物形成共结晶,通过在分析过程中吸收激光能量再传递给被分析物的形式激发被分析物。

一、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪操作规程一. 开机 1. 开主机总电源至ON。

2. 开主机正面有钥匙的开关至ON顺时针。

3. 开计算机及显示器启动FlexControl软件。

4. 等待源高真空达到3×10-6mbar如达不到该数值检查是否有漏气发生。

5. 进入日常操作。

二. 关机1将靶退出。

2在FlexControl界面的Spectrometer关掉高压按“OFF”。

3关闭所使用的软件关闭计算机。

4关主机正面有钥匙的开关至OFF逆时针。

5关主机总电源至OFF。

三日常操作1 打开FlexControl 进入仪器控制界面。

2 确认真空度为10-7mbar或稍低。

3 通过界面Carrier▲或主机正面的Load EJECT开关将样品靶放入仪器等待约2分钟调整好靶位。

在此过程中不应操作软件或硬件以确保仪器通讯畅通。

4 根据测量目的选择测量方法⑴分子量测定根据分子量大小选择相应的线性测量方法和仪器校正方法。

2 肽质量指纹谱测量根据所需测量的肽谱范围选择相应的反射测量方法和仪器校正方法。

⑶根据需要选择正离子或负离子测量方法和仪器校正方法。

⑷如果进行串联质谱分析则选择LIFT方法。

5 选择适当的仪器参数6 测量⑴手动测量a 选择好待测样品的靶位及相应参数后按Start开始测量。

b 根据图谱的质量按Add添加或按Clear Sum删除图谱。

c 按Save As保存图谱。

注在测量过程中可随时调整激光能量和靶位置以获得最佳信噪比和分辨率。

⑵自动测量a 按菜单AutoXecute再按Select选择一个Sequence文件名。

b 按Edit编辑待测样品用Sample position 的Sample依次选定靶位?蟀碅dd添加到Edit AutoXecute Sequence中。

c 按AutoXecute Method选择Calibration 或样品测量方法。

d 按Edit设定激光能量、靶位移动、累加方法等参数并保存该参数。