常用中药对酪氨酸酶的激活作用
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17味中药对豚鼠皮肤酪氨酸酶mRNA表达水平与致色素作用的影响姜丽莎;张晓东;张国斌;王恩波【摘要】目的:探讨17味中药对豚鼠皮肤中酪氨酸酶mRNA的调节与致色素作用.方法:以棕黄色豚鼠为实验模型,17味中药的75%乙醇提取液为实验组,8-甲氧补骨脂素(8-methoxypsoralan,8-MOP)为阳性对照组、75%乙醇为阴性对照组,均涂于豚鼠皮肤上,40d后取皮肤标本免疫组化染色,测平均灰度值与黑素细胞数目,比较其作用结果.结果:白芷、当归、甘草、枸杞、旱莲草、红花、女贞子、桑椹、沙参、沙苑子、首乌、菟丝子、黑芝麻、栀子等14味中药均可不同程度上调酪氨酸酶mRNA表达水平并促进黑素细胞增殖及黑素生成;合欢与益母草可促进黑素生成增加,但无明显上调酪氨酸酶mRNA表达水平的作用;黄芪则无明显上调酪氨酸酶mRNA表达水平、促进黑素细胞增殖及黑素生成的作用.结论:通过本研究表明部分中药可上调酪氨酸酶基因表达水平并促进黑素生成,为临床治疗白癜风优化组方提供实验依据.%Objective To explore the effects of 17 traditional Chinese medicine (TCM) on the expression of Tyrosinase mRNA gene and melanogenesis from skin of guinea pigs. Methods The brown guinea pigs used as the experimental model,ethanol extracts obtained from 17TCM as the experimental group,8- Methoxypsoralen (8-MOP) as positive control group,75% ethanol as the negative control group,coated on the skin of guinea pigs,40 days later cut of sample skin and process it with immunohistochemical staining,measured the mean gray value and the number of melanocytes, and compared the results. Results The 14 kinds of TCM such as Angelica dahurica,Angelica sinensis, Licorice,Chinesewolfberry, Eclipta, Safflower,Privet fruit,Mulberry,Adenophorastricta,Astragalus complanatus, Polygonum multiflorum, Dodder,Black sesame,Gardenia could upregulate the gene expression of tyrosinase mRNA and enhance the melanogenesis and promote the proliferation of melanocytes in different degrees.Acacia and Motherwort could promote melanogenesis increased,but no significant effect on tyrosinase mRNA expression;There is no effect of Astragalus. Conclusion This study showed that some TCM can increase tyrosinase gene expression and promote melanogenesis,which provide scientific basis for optimal prescriptions in the treatment of vitiligo.【期刊名称】《中国美容医学》【年(卷),期】2017(026)002【总页数】4页(P73-76)【关键词】中药;白癜风;酪氨酸酶mRNA;致色素;豚鼠【作者】姜丽莎;张晓东;张国斌;王恩波【作者单位】章丘市人民医院山东济南 250200;解放军第202医院辽宁沈阳110003;解放军第202医院辽宁沈阳 110003;解放军第202医院辽宁沈阳110003【正文语种】中文【中图分类】Q591.3;R758.4+1白癜风(Vitiligo)是一种原发性的、局限性或泛发性的皮肤黏膜色素脱失症。
生成量明显增加。
本研究观察到四毒清能显著降低L PS 攻击小鼠肝脏组织中M DA水平,说明清除自由基是四毒清减轻内毒素性肝损伤的重要机制。
有研究表明肝细胞线粒体的损伤在其发病机制中的重要作用[6]。
本研究发现四毒清能减轻L PS引起的线粒体损伤,提示保护线粒体功能,可能是该中药减少自由基生成的原因之一。
此外,本实验四毒清防治组肝脏组织中SOD活性明显高于内毒素组,表明四毒清可以通过提高SOD的活性清除自由基。
一些中药有抗菌、拮抗和灭活内毒素的作用,可用于治疗内毒素血症[7]。
正如四毒清由七味中药组成,此方具有清热解毒、理气活血的功效。
本实验证实四毒清可以有效的减轻L PS性肝脏损伤,对肝脏具有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制肿瘤坏死因子-Α的释放、减少氧自由基的产生、增加氧自由基的清除、保护线粒体功能有关,为内毒素性肝损伤及脓毒血症的治疗提供了有价值的实验资料。
参考文献1 王华东,杨静,陆大祥,等.四毒清对脂多糖攻击小鼠多器官功能障碍和生存率的影响[J].中国病理生理杂志,2004;20(2)∶219~2232 马羽萍,彭杰,赵铃,等.中西医结合治疗重症型肝炎和肝炎肝硬变合并内毒素血症40例.陕西中医, 2002;23(7)∶579~5803 A dam son G M,B illings R E.T umo r necro sis facto r induced ox idative stress in iso lated mou se hepatic cyto s[J].A rch B i ochem B i ophys,1992,294~223 4 王宇明,丁健,顾长海,等.内毒素 肿瘤坏死因子所致肝细胞损害机制的体外研究[J].中华传染病杂志, 1996;14(1)∶1~55 毕铭华,张淑文,王宝恩,等.内毒素血症对大鼠肝细胞线粒体的损伤及其机制[J].中国应用生理学杂志, 2004;20(1)∶90~976 毕铭华,刘树森,等.大鼠内毒素血症早期肝细胞线粒体的氧化损伤及中药912液的干预作用[J].中华急诊医学杂志,2001;10(2)∶79~817 郭峰坤.中西医结合治疗慢性肝病内毒素血症78例.陕西中医,2002;23(1)∶15~16(收稿2004212210;修回2005201216) 白蒺藜血清对酪氨酸酶活性的双向调节作用3杨 柳 赖梅生 蔡红兵 南方医科大学中医系中医外科教研室(510515) 摘 要 目的:观察白蒺藜高、中、低三种给药剂量大鼠不灭活血清对酪氨酸酶(T YE)活性的影响,以期指导临床用药。
ysis us ing d iffer ent antigen s ources.J In vest Dermatol,1990,94∶327-331.
5Hash imoto T,Kon ohan a A,Nish ikawa T.Immunob lot ass ay as an aid to th e diagnosis of
unclassified cases of pemph igus.Arch Derma-
tol,1991,127∶843-847.
(收稿:1997-01-16 修回:1997-05-03)
常用中药对酪氨酸酶的激活作用许爱娥 王遂泉 周渭珩
白癜风是一种色素代谢障碍性皮肤病,目前尚无十分有效的治疗方法。
在黑素的生物合成过程中酪氨酸酶起了关键性的作用,提高酪氨酸酶活性,就能提高黑素的合成量[1]。
本实验旨在通过研究常用中药对酪氨酸酶的作用,筛选出其中具有激活作用的药物,用于临床治疗,以期能提高中药对白癜风的治疗效果。
一、材料和方法
(一)材料:实验用中药48种,包括北柴胡、炒白蒺藜、制首乌、炒僵蚕、炒乌梢蛇、炒白术、炒白芍、炒青皮、熟地黄、补骨脂、丹参、潼蒺藜、蛇床子、马齿苋、北沙参、独活、川芎、当归、桃仁、红花、三七片、菟丝子、虎杖、麦冬、旱莲草、甘草、佛手、前胡、白藓皮、紫草、乌梅、赤芍、无花果、丹皮、茯苓、党参、黄芪、枸杞、肉桂、荆芥、桂枝、地肤子、莶草、核桃、苦参、浮萍、决明子、防风。
以上中药采购自杭州中药材公司,除注明炮制方法外,其余中药均为生品。
(二)方法:
1.试剂:DL-多巴、酪氨酸酶购自Sig-ma公司,其它试剂均为分析纯。
2.中药提取物的制取和酪氨酸酶活性测定按文献[2,3]的方法进行:中药粉碎后用50%甲醇水溶液浸泡,3小时后回流、过滤,再将残渣提取2次,合并提取液,水浴上挥去溶媒后将提取物溶于0.05mo l/L、pH6.5磷酸缓冲液中,制成每毫升相当于1g原
作者单位:310009杭州市第三人民医院皮肤科生药的溶液;反应混和物2ml(pH6.5、
0.05m ol/L磷酸缓冲液,70L l酪氨酸酶,中
药提取物)在37℃保温10分钟,加入1ml
0.15%DL-多巴,2分钟后立即于475nm
处测定吸光度A475。
以磷酸缓冲液为空白,
以不加中药提取物的反应组为对照。
此外,
将硫酸铜配成浓度为10-4、10-5、10-6mo l/
L的溶液,分别测定其对酪氨酸酶活性的
影响。
3.酶激活率的计算方法是以加中药组
测得的A475为A2,对照组的A475为A1,酶
激活率%=(A2-A1)÷A1×100%。
同一
种中药取不同的浓度进行反应,以找出对
酪氨酸酶能达到的最大激活率。
二、结果
48种常用中药中,仅有13种对酪氨酸
酶具激活作用,其余35种无激活作用或呈
抑制作用。
13种具激活酪氨酸酶作用的中
药以每种中药所能达到的最大激活率相
比,按从大到小顺序排列依次为旱莲草
49%、无花果38%、丹皮34%、潼蒺藜
34%、蛇床子33%、补骨脂31%、地肤子
25%、桃仁24%、白藓皮23%、白术22%、
紫草22%、肉桂21%、白芍20%。
Cu6在浓
度为10-5mo l/L时对酪氨酸酶激活作用最
强,激活率为25%。
选取酶激活率较高的旱莲草、无花果、
潼蒺藜三种中药提取物先加入活性炭,沸
水浴30分钟,然后离心去沉淀,用上清液
重复酶活性测定。
结果显示脱色后三种中
药均不能再激活酪氨酸酶。
三、讨论
我们选取白癜风治疗中使用概率较高
的48种中药,测定其对酪氨酸酶的作用,
结果显示仅13种对酪氨酸酶有激活作用,
按作用强弱依次为旱莲草、无花果、丹皮、
潼蒺藜、蛇床子、补骨脂、地肤子、桃红、白
藓皮、白术、紫草、肉桂、白芍。
其中作用较
强的前6种是治疗白癜风的常用药。
莶
草、乌梅、三七等中药对酪氨酸酶无激活作
用。
13味具激活作用的中药,仅补骨脂、无
花果属呋喃香豆素类药,是传统的光化学
疗法的光敏剂,能激活酪氨酸酶活性,其余
11种中药,作用最强的旱莲草是补阴药,丹
皮、紫草清热凉血,潼蒺藜补阳,蛇床子燥
湿杀虫,地肤子清湿热,桃仁活血,白藓皮
清热解毒,白术补气,肉桂温里祛寒,白芍
补血。
结果提示除传统的呋喃香豆素中药
外,其它性能的中药亦有激活酪氨酸酶的
作用。
因此在治疗白癜风组方时,可优先考
虑选用上述有激活作用的中药。
参 考 文 献
1Iw ata M,Corn T,Iw ata S,et al.T he rela-
tions hip betw een tyrosinase activity and skin
color in h uman for esk ins.J Inves t Dermatol,
1990,95∶9-15.
2徐建国,尚靖.补骨脂对酪氨酸酶的激活作
用.中草药,1991,22∶168-169.
3Yukimits u M.中药生药对酪氨酸酶的抑制作
用.国外医学中医中药分册,1982,1∶42-44.
(收稿:1997-01-09 修回:1997-10-24)
48Chin J Dermatol,Feb1998,Vol31,No.1。