常用中药对酪氨酸酶的激活作用

为市 售 。
络合物时，主要是羟基与酶的活性中心上的原子键 合而发 生作用。Ｔ ｒ ｙ 是皮肤 黑素生 物合 成 的关 键 酶口 ］ ，它不仅决定黑素合成 的速率 ，还是黑素细 胞分化成熟的特征性标 志Ｉ 。Ｔ ｒ ５ ｖ 的活性与黑素合 ］
Ｉｉｎ — ｓ ｅ ｔｏ ｈｏ ｏ ｅｒ ｓｙ）是 一 种 含 铜 的 金 ｔｒｓ ｓ，Ｔ ｒ ｎ 属酶 ，每 １ 亚 基含两 个 金属铜 离子 ，两个 铜离 子 个
熟地 ５ ％乙醇提取物对酪氨酸酶作用 ，为其用 途 ０
提供 依据 。
ｌ ｅｏ ｈｎｓ ｅｐｅ Ｓ ｍｅ ｏｉ ｏｃ ，Ｔ ｍ ｌ ０ １２ ｈｎ ） ｅ ｆ ｉｅｅＰｏ ｌ ｇ Ｃ Ａｒ ｄＰ ｌ ｅＦ ｒｅ ￣ ｊ ３ ０ ６ ，Ｃ ｉａ ｃ ｎ
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17味中药对豚鼠皮肤酪氨酸酶mRNA表达水平与致色素作用的影响姜丽莎;张晓东;张国斌;王恩波【摘要】目的:探讨17味中药对豚鼠皮肤中酪氨酸酶mRNA的调节与致色素作用.方法:以棕黄色豚鼠为实验模型,17味中药的75%乙醇提取液为实验组,8-甲氧补骨脂素(8-methoxypsoralan,8-MOP)为阳性对照组、75%乙醇为阴性对照组,均涂于豚鼠皮肤上,40d后取皮肤标本免疫组化染色,测平均灰度值与黑素细胞数目,比较其作用结果.结果:白芷、当归、甘草、枸杞、旱莲草、红花、女贞子、桑椹、沙参、沙苑子、首乌、菟丝子、黑芝麻、栀子等14味中药均可不同程度上调酪氨酸酶mRNA表达水平并促进黑素细胞增殖及黑素生成;合欢与益母草可促进黑素生成增加,但无明显上调酪氨酸酶mRNA表达水平的作用;黄芪则无明显上调酪氨酸酶mRNA表达水平、促进黑素细胞增殖及黑素生成的作用.结论:通过本研究表明部分中药可上调酪氨酸酶基因表达水平并促进黑素生成,为临床治疗白癜风优化组方提供实验依据.%Objective To explore the effects of 17 traditional Chinese medicine (TCM) on the expression of Tyrosinase mRNA gene and melanogenesis from skin of guinea pigs. Methods The brown guinea pigs used as the experimental model,ethanol extracts obtained from 17TCM as the experimental group,8- Methoxypsoralen (8-MOP) as positive control group,75% ethanol as the negative control group,coated on the skin of guinea pigs,40 days later cut of sample skin and process it with immunohistochemical staining,measured the mean gray value and the number of melanocytes, and compared the results. Results The 14 kinds of TCM such as Angelica dahurica,Angelica sinensis, Licorice,Chinesewolfberry, Eclipta, Safflower,Privet fruit,Mulberry,Adenophorastricta,Astragalus complanatus, Polygonum multiflorum, Dodder,Black sesame,Gardenia could upregulate the gene expression of tyrosinase mRNA and enhance the melanogenesis and promote the proliferation of melanocytes in different degrees.Acacia and Motherwort could promote melanogenesis increased,but no significant effect on tyrosinase mRNA expression;There is no effect of Astragalus. Conclusion This study showed that some TCM can increase tyrosinase gene expression and promote melanogenesis,which provide scientific basis for optimal prescriptions in the treatment of vitiligo.【期刊名称】《中国美容医学》【年(卷),期】2017(026)002【总页数】4页(P73-76)【关键词】中药;白癜风;酪氨酸酶mRNA;致色素;豚鼠【作者】姜丽莎;张晓东;张国斌;王恩波【作者单位】章丘市人民医院山东济南 250200;解放军第202医院辽宁沈阳110003;解放军第202医院辽宁沈阳 110003;解放军第202医院辽宁沈阳110003【正文语种】中文【中图分类】Q591.3;R758.4+1白癜风（Vitiligo）是一种原发性的、局限性或泛发性的皮肤黏膜色素脱失症。

Ｌ ｅ ｓ ｉ ｙ ａ Ｐ ｏ ｗｄ ｅ ｒ ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｏ ｌ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｏ ｎ ｔ ｙ ｒ ｏ ｓ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ ，ｍｅ ｌ ａ ｎ ｉ ｎ ａ ｍｏ ｕ ｎ ｔ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｅ ｄ ｂ ｙ ｄ ｏ ｐ ａ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍｅ ａ ｕ ｔ ｏ ｘ ｉ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｓ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｍａ ｔ ｓ ｕ ｄ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ，ｔ ｈ ｅ ｄ ｙ ｎ ａ ｍｉ ｃ ｓ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｓ ｏ ｆ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ ｔ ｙ ｒ ｏ ｓ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ
ｗ ａ ｓ ｏ ｂ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｄ ．Ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ｑ ｕ ｂ ａ ｉ Ａ ｉ ｌ ｉ Ｌ ｅ ｓ ｉ ｙ ａ Ｐ ｏ ｗ ｄ ｅ ｒ ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ａ ｎ ｄ ｅ ｔ ｈ ａ ｎ ｏ ｌ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄ ｏ ｂ ｖ ｉ ｏ ｕ ｓ ｌ ｙ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｅ ｔ ｙ ｒ ｏ ｓ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ ，
・
２ ６ ２・
中国 中医药科技 ２ ０ １ ５年 ５月第 ２ ２卷第 ３期 Ｍａ ｙ ２ ０ １ ５ Ｖ ｏ １ ． ２ ２ Ｎ ｏ ． ３
・
中药研 究与开发 ・
驱 白艾 力勒 思 亚 散 对 酪 氨 酸 酶 激 活 作 用 的实 验研 究
窦 勤 ， 闰 明 ， 李治 建 ， 斯拉 甫 ・艾 白， 李建梅
ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｅ ｎ ｈ ａ ｎ ｃ ｅ ｄ ａ ｌ ｏ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｉ ｎ ｇ ｏ ｆ ｄ ｏ ｓ ａ ｇ ｅ ，ｔ ｈ ｅ ｕ ｐ—ｒ ｅ ｇ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ ｍｅ ｌ ａ ｎ ｉ ｎ ｍ ｏ ａ ｕ ｎ ｔ ａ ｌ ｓ ｏ ｓ ｈ ｏ ｗｅ ｄ ｔ ｈ ｅ ｄ ｏ ｓ ｅ—ｄ ｅ ｐ ｅ ｎ ｄ ｅ ｎ ｔ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｈ ｉ ｐ；ｔ ｈ ｅ ｄ ｙ ｎ ａ ｍｉ ｃ ｓ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｐ ｒ ｏ ｖ ｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｗ ａ ｓ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｎ ｔ ，ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ

要 】 中医治疗 白癜风积 累了丰富的经验 。 过中药复方水提取 物对酪氨酸酶活性影响的研究 ， 筛选 出对酪氨酸酶激 通 可
活作 用明显的复方进行临床疗效观察 ，这对 白癜风 的治疗与研 究具有 重要 价值 。
【 关键 词 】 白癜 风 ； 临床 疗 效 ； 酪 氨 酸 酶
［ ｓｒ ｃ ］ Ｔ Ｍ ｅ ｔ ｉ ｌ ｏａ ｃ ｍｕａ ｄｒ ｈｅ ｐ ｒ ｎ ｅ ． ｈｏ ｇ ｅ ｅ ｅｒｈｏ ｉ ａ ｔ ｆ ｔ ｘ ａ ｔ ｆ Ｃ ｃ ｍｐ ｕ ｄｏ Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｃ ｔ ａ ｖｔｉ ｃ ｕ ｌｔ ｃ ｅ ｉ ｃ ｓＴ ｒ ｕ ｈｔ ｓａ ｃ ｆｍｐ ｃ ｏ ｗａｅ ｅ ｔ ｃ ｏ Ｔ Ｍ ｏ ｏ ｎ ｎ ｒ ｉｇ ｅ ｉ ｘ ｅ ｈ ｒ ｒ ｒ
中医 治疗 白癜风积 累 了丰 富 的经验 ，本研 究从古今 中医 治 疗 白癜风 中精选 出常用方 剂 ２ ３首 ，对这 些方剂进行 拆方 ８ 并将 其输入计 算机排序 ，筛选 出高频 次的中药 ５ ３味 。首先采 用蘑 菇酪氨酸 酶多 巴速 率氧化 法测定 ５ 味 中药 对蘑菇酪 氨酸 ３ 酶 活性的影 响 ， 结果 发现 ４ ７昧 中药 有上调蘑菇 酪氨酸酶 活性 作用 。然后 ，根 据中医理 论 ，利 用这 ４ ７味 中药 配伍组成 ９个 复方 ，研究这些 复方 的水提取物对 蘑菇酪 氨酸酶活 性的影 响， 为 临床治疗 白癜风提 供重要 依据 。
将 ４ ７味 中药 中具有益气 养血 、活血化瘀、滋 阴补 肾、壮 阳补 肾、祛风作用 的药物筛选 出后 ，选 择上调酪氨酸酶活性强 的药物 ，配伍 组成 ９个复方 （ 包括基础方和配伍方 ） 。即①值
共 分为 ４组，其 中 ａ 组为 ：ｐ ．磷 酸缓冲液 １ ｍｌ Ｈ６８ ． ，蘑菇 ９ 酪氨酸 酶 ０１ ． ｍｌ（ ０ ） ８ ｕ 。ｂ组为：ｐ ． Ｈ６ ８磷酸缓冲液 ２ 。ｃ组 ｍｌ 为：ｐ ６８磷酸 缓冲液 １ ｍｌ Ｈ． ． ，药物 ０１ ８ ． ｍｌ（ 浓度 ０１／ ） ． ｍ１，蘑 ｇ 菇 酪氨 酸酶 ０１ ． ｍｌ（ ０ ） ８ ｕ 。ｄ组为：ｐ ． Ｈ６８磷酸缓冲液 １ ｍｌ ． ， ９ 药物 ０１ ．ｍｌ（ 浓度 ０１／ ） ． ｍ１。 ｇ

００ ｏ／ ．５ｍ ｌ Ｌ磷 酸缓 冲液 （ Ｈ ６ ８ 的测 活体 系 中 ， ｐ ． ） 以
收 稿 日期 ：ｏ８０ 乏８ ２ｏ ＿８
基金项 目： 国家基础科学人才培养基 金项 目（０ ３６ ９ ， １６ ０４ ） 福建省重 点科技 项 目 （ ０７ ０ ５ ）和 厦 门 市 科 技 创 新 项 目 ２０ Ｎ ０ １
丁醇有机溶剂萃取， 各萃取液经旋转蒸发仪减压浓缩 ， 回收溶剂， 冻干样品， 乙醇提Байду номын сангаас物极性递增分离成石油 醚萃取物、 氯仿萃取物 、 乙酸乙酯萃取物、 正丁醇萃取 物和水萃取物 ； 称取适量萃取物． 用双蒸水溶解， 配制 成浓度 为 １ ／ ５ｍｇｍＬ的样 品 ， 备用 ． （ ） 反应及 其 动力 学 的研 究 ： ３酶 参考 文 献 ［ ］ 在 ３，
酸酶 活性 的作用 及酶动力 学进行 了体 外实验 研究 ．
巴（ － Ｏ Ａ 购 自Ａｄ ｃ 公司， ＬＤ Ｐ ） ｌｉ ｒｈ 其他试剂为国产分析
纯， 使用 的蒸馏 水为去离 子重蒸 水．
１２ 方 ．
法
（） １ 植物 乙 醇提 取 物 制备 ： 集 的药用 植 物 除 杂 采
晒干， 经高速粉碎机粉碎后， 分别称取粉末置三角瓶 中， 加入 ８一ｌ 量 的 ７ ％ 乙醇 溶液 ，０℃水 浴 条 件 ０倍 ５ ６ 下浸 提 ２ ， 抽滤获得 乙醇提 取液 ， ４ｈ经 提取 液通过旋转
白癜 风 是 由多 种 原 因引 起 的色 素代 谢 障 碍 性 疾
病， 临床上以皮肤色素脱失斑为特征． 由于酪氨酸酶是 各种生物体内色素形成的关键酶 ， 在多种能决定黑素
生 成的类型 、 量和质量 因素 中 ， 数 黑素细胞 中酪氨 酸酶 的活性是调 节黑素 生成 的关 键 因素 之一 ， 以能 够激 所 活 酪氨酸酶 、 强其 活性 的药物 ， 增 可促 进 色 素 的合 成 ， 有 助于 白癜 风病 损 区色素 的恢复 ¨ 自然 界 中不乏对 训． 白癜 风有治疗作 用 ， 对酪 氨 酸酶 活力 起调 节 作用 的植 物 ， 它们是 否在黑 素生成 中起作 用 还有 待 进一 步 证 但 实． 我们 就采集 厦 门周边 地 区的 １ 药用植 物对 酪氨 ５种

14817 ? 2810
L
川芎( L igus ticum chuanx iong H or t )
伞形科
根茎
H
11711 ? 2819 34912 ? 5210
16214 ? 2012 29711 ? 4014
M
23315 ? 2910
19013 ? 3818
L
13617 ? 5219
20019 ? 4812
本 课题 为 国家 自 然 科学 基 金资 助 项目 ( 基金编号 39570658) ¹ 南京医科大学第一附属医院皮肤
科, 210029 º 南京医科大学基础医学院电镜室 导师
( r epigm ent at ion) 过程 [3 ] 。大多数 能上调酪 氨酸酶活性的 物质在体 外还呈现 出一定的促黑 素细胞分 化增殖能力[4 ] 。中医中药对白癜风 的治疗虽积累不少成功经验, 但对 促进白癜 风复色的确切 机制以及 作用肯定的药物成分仍待探明。本 研究从古 今中医治疗白 癜风方剂 中精选 74 首进行拆方并将组药输 入计算机排序, 筛选出高频次使用 中药 89 味, 观察这些中药乙醇提 取物对蘑 菇酪氨酸酶和 无细胞系 统多巴色 素自动氧化生 成黑素量 的影响, 旨在找出上调酪氨酸酶活 性或活化 黑素细胞作用 确切的中 药。 1 材料和方法 1. 1 药材: 实验用中药生药 89味。
16715 ? 2614
L
13818 ? 3718
14513 ? 2015
菟丝子( C us cu ta chinensis L am . )
旋花科
种子
H
11715 ? 5716
11313 ? 1410
M
14011 ? 4412

Ｐｏ ９ ５ ５ （ｊ ３ ｒ ｄ １ ９ ， ８ ５ ：７ ９
２ 朱 铁君 ． 见 色素 性皮 肤病 的中西 医 结合 治 疗． 常 中国 医
刊 ．９ ９ ３ ６ ：６ １ ９ ，４（）
３ Ｓ ｈ ｌ ｒ ｕ ｅ ｕ Ｌ ｍ ｅＲ Ｂ ａ ｄ ， ｔａ ． ｔ １ ｇ ｎ ｃ ａ ｉ ｅ ｔ ｒｋ ， ｅ ｋ ， ｒ ｎ ｔ０ ｅ １ ｖｉ ｉ ｉ ｏ ａ ｄ
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ｏ ｙ ｏ ｉ ｓ ｃ ｉ ｉ ｙ ａ ｄ ｍ ｌ ｎ ｎ ｂｉ ｓ ｎ ｈ ｓ ｓ ｆ ｏ ｆ ｔ ｒ ｓ ｎ ｅａ ｔ ｖ ｔ ｎ ｅ ａ ｉ ０ ｖ ｔ ｅ ｉ ｒ ｍ
Ｒ ｅｍ ｏ ｆ ｃ ｎ ｌ． ｌｎ ａＭ ｄ １ ９ ， １ ５ ： ４ ５ ｈ ｕ ｆ ｉ ｉａ ｅ ｐ ａ ｔ ｅ， ９ ５ ６ （） ２
ｌ 刘之力． １ 徐跃 飞， 涂彩霞， ５ 等 ６味中药 乙醇提取 物对 酪氨 酸酶活 性影响的研究 大连医科大 学学报， ０ ０ ２ （） ２ ０ ， ２ Ｉ ：７ ｌ 李洪武， ２ 朱文元． 治疗 白癜风 复方 中药体外对蘑菇 酪氨酸
白癜 风 、黄褐斑 易诊 而难 治， 拉于头面 部及手 部的 白癜
风因影 响美观而给 患者造 成较大 的心理压 力 。 目前， 中医、
西医及 中西医结台 治疗疗 效报道不 一． 同点 为治愈率低 。 相 在 此情况下， 欧阳恒教授提 出了独特 的 “ 以色治色法 ”， 即在 辨证的基础上结台 采用 以药物 之外观 、色泽 反其皮 损颜 色的 治疗方法 并提 出了 “ 色素药材 ”的概念 。以在此 思维

ｓ ｉｎ ｉ ｃ ｂ ｓｓｉ ｅｔ ａｍｅ ｔ ｆ ｉ ｌ ｏ Ｍ ｅ ｈ ｄ Ｔ ｅ ｅｆ ｃｓｏ ｔａ ｏ ｘ ｒｃ ｒｍ ａ ｈ ｏ ｃ ｐ ｕ ｅｗａ ・ ｃｅ ｔ ｉ ａ ｉ ｎ ｔ ｅ ｔ ｎ ｔ ｉ ． ｔ ｏ ｓ ｆ ｈ ｒ ｏ ｖ ｉｇ ｈ ｆ ｔ ｆｅｈ ｎ ｌｅ ｔａ ｔ ｏ Ｘｉｎ ｕ ａ ｓ ｌ ｓｅ ｅ ｆ ｖ ｌ ａｅ ｎ ｔ ｅ ａ ｔ ｉ ｆｔｒ ｓｎ ｓ ｎ ｈ ｌ ｎ ｇ ｎ ｓｓｂ ａ ｕ ｉ ｇ ｔ ｅ ｏ ｉａ ｉｎ ｒ ｔ ｆＤ — ｏ ａｔ ａ ｈ ａ ｕ ｔｄ ｏ ｃｉ ｔ ｏ ｏ ｉ ａ ｅ ａ ｄ ｔｅ ｍｅａ ｏ ｅ ｅ ｉ ｙ ｍｅ ｓ ｒ ｘｄ ｔ ａｅ ｏ Ｌ ｄ ｐ ｏ ｅ ｃ ｈ ｖｙ ｙ ｎ ｈ ｏ ｎ ｔｒ ｈ ｍ ｃ ｌ ｎ ｔ ｅ ｉ ｉ ｏ ｓ ｄｅ Ｒｅ ｕ ｔ Ｔ ｅ ｒ ｓ ｌ ｈ ｗ ｄ ｔ ａ ｉ ｎ ｕ ａ ｓ ｌ ｏ ｌ ｂ ｉ ｕ ｌ ｐ ａｕ ａ ｃ ｅ ｉ ａ ｈ ｖｔ ｔ ｉ ． ｓ ｓ ｌ ｉ ｎ ｒ ｕ ｌ ｈ ｅ ｕｔ Ｓ ｏ ｅ ｈ ｔＸ ａ ｈ ｏ ｃ ｐ ｕ ｅ ｃ ｕ ｄ ｏ ｖ ｏ ｓｙ ｕ － ｓ
－
１ ・ ６
中 国现 代 药 物 应 用 ２ ０ ０ ９年 ４月第 ３卷 第 ７期
Ｃ ｉ ｈｎＪＭｏ ｒｇＡ ｐ， ｐ ２ ｏ ， ０． ， ｏ７ ｄＤｕ ｐ ｌＡ ｒ ０ ９ Ｖ １ Ｎ ． ３
・
短篇论著 ・
仙 藿胶 囊对 酪 氨 酸 酶活 性 作 用 的 实验 研 究
赵 永旗 程 Ｐｅｐｌ ｓＨｏｐｉａ ， ｎ ５７ ０ ， ｉ ａ Ｓ ｉｒ ｉ Ｐｕ ｎ ｏ ｅ’ ｓ ｔ ｌ Ｈｅ ａｎ ４ ０ ０ Ｃｈ ｎ
一 ｉ Ｃ ＮＧ ｑ ， ＨＥ
【 ｂｔ ｃ】 ０ｂｅｆ ｅ Ｔ ｘｌｒ ｔｅｐｓ ｂｅａｔ ｎｍ ｃａｉ ｆ ｉ ｈ ｏｃｐｕｅ ｗ ｉ ｒｖ ｅ Ａ ｓｒ ｔ ａ ｊｃ ｖ ｏｅｐｏｅ ｈ ｏｓ ｌ ｃ ｏ ｅｈｎｓ ｏ Ｘａ ｕ ａｓｌ， ｈｃ ｐｏｉ ｉ ｉ ｉ ｍ ｎ ｈ ｄ

2.2 酪氨酸酶抑制活性 IC50 的确定 采用 L-DOPA 作为反应底物。整个反应体系包括药物 60 μl，
左旋多巴（5 mM）50 μl，140 μl PBS 于 96 孔板 37 ℃孵育 10 min， 加入酶 50 U 之后 10 min 于 475 nm 处测定吸光度。每一药物重 复 3 次。取麦冬大孔树脂提取物及 Vc 分别配制成不同浓度进行 测试，阳性对照为 Vc。
在早期使用的脱色剂中，氢醌、曲酸、含汞制剂、过氧化氢等， 都是毒性较大的物质，这促使人们转向从植物或微生物中寻找天 然、安全、高效的酪氨酸酶抑制剂，并应用于临床 。 [4，5]
本研究选取 15 种中药活性成分作为筛选对象测定其酪氨酸 酶抑制活性，旨在为新型高效酪氨酸酶抑制剂的发现和资源新用 途的开发提供参考。
麦冬皂苷 D、熊果苷、熊果酸、白藜芦醇、染料木苷、山奈酚、 黄 芩 苷 、异 鼠 李 素 、槲 皮 素 、毛 蕊 异 黄 酮 、白 杨 素 、黄 芩 素 、金 丝 桃 苷、豆蔻明、龙胆苦苷。以上为上海中药标准化研究中心提供的抑制率 将药物用 pH 6.8 磷酸缓冲液溶解稀释后与 0.1%L- 多巴反应
0 引言
酪 氨 酸 酶 (Tyrosinase) 是 一 种 含 铜 的 金 属 酶，广 泛 存 在 于 人 体、动植物及微生物中，是生物体内黑色素合成的关键酶，参与决 定哺乳动物皮肤、毛发的颜色，与人的衰老、昆虫的伤口愈合与发 育、果蔬的褐变有密切关系。酪氨酸酶异常过量表达可导致人体 的色素沉着性疾病如黑色素瘤、色斑等常见多发病，因此开发酪氨 酸酶抑制剂具有巨大的商业价值 。 [1-3]
液 0.5 mL 混合 ,37 ℃孵育 10 min 后，加入酪氨酸酶 50 U，37 ℃继 续孵育 10 min，取出冰浴，并立即于分光光度计 475 nm 处测吸光 度。每一药物浓度平行两份，计算均值及 SD。阳性对照采用不同 浓度的 Vc 溶液，以作为批内及批次之间的质量控制。

生成量明显增加。

本研究观察到四毒清能显著降低L PS 攻击小鼠肝脏组织中M DA水平,说明清除自由基是四毒清减轻内毒素性肝损伤的重要机制。

有研究表明肝细胞线粒体的损伤在其发病机制中的重要作用[6]。

本研究发现四毒清能减轻L PS引起的线粒体损伤,提示保护线粒体功能,可能是该中药减少自由基生成的原因之一。

此外,本实验四毒清防治组肝脏组织中SOD活性明显高于内毒素组,表明四毒清可以通过提高SOD的活性清除自由基。

一些中药有抗菌、拮抗和灭活内毒素的作用,可用于治疗内毒素血症[7]。

正如四毒清由七味中药组成,此方具有清热解毒、理气活血的功效。

本实验证实四毒清可以有效的减轻L PS性肝脏损伤,对肝脏具有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制肿瘤坏死因子-Α的释放、减少氧自由基的产生、增加氧自由基的清除、保护线粒体功能有关,为内毒素性肝损伤及脓毒血症的治疗提供了有价值的实验资料。

参考文献1　王华东,杨静,陆大祥,等.四毒清对脂多糖攻击小鼠多器官功能障碍和生存率的影响[J].中国病理生理杂志,2004;20(2)∶219～2232　马羽萍,彭杰,赵铃,等.中西医结合治疗重症型肝炎和肝炎肝硬变合并内毒素血症40例.陕西中医, 2002;23(7)∶579～5803　A dam son G M,B illings R E.T umo r necro sis facto r induced ox idative stress in iso lated mou se hepatic cyto s[J].A rch B i ochem B i ophys,1992,294～223 4　王宇明,丁健,顾长海,等.内毒素 肿瘤坏死因子所致肝细胞损害机制的体外研究[J].中华传染病杂志, 1996;14(1)∶1～55　毕铭华,张淑文,王宝恩,等.内毒素血症对大鼠肝细胞线粒体的损伤及其机制[J].中国应用生理学杂志, 2004;20(1)∶90～976　毕铭华,刘树森,等.大鼠内毒素血症早期肝细胞线粒体的氧化损伤及中药912液的干预作用[J].中华急诊医学杂志,2001;10(2)∶79～817　郭峰坤.中西医结合治疗慢性肝病内毒素血症78例.陕西中医,2002;23(1)∶15～16(收稿2004212210;修回2005201216) 白蒺藜血清对酪氨酸酶活性的双向调节作用3杨　柳　赖梅生　蔡红兵　南方医科大学中医系中医外科教研室(510515) 摘　要　目的:观察白蒺藜高、中、低三种给药剂量大鼠不灭活血清对酪氨酸酶(T YE)活性的影响,以期指导临床用药。

成 ,最大反应速度不变 ,而表观 Km 值变小 。山慈姑 、 白鲜皮 、薄荷 、桃仁 、夏枯草和黄芩的乙醇提取物对酪 氨酸酶具有非竞争性激活作用 ,说明这些中药能提高 酶的活性 ,表现出表观 Km 值不变 ,反应的最大速度 增加 。独活 、潼蒺藜 、紫荆皮 、申姜 、女贞子 、鸡血藤和 刺蒺藜的乙醇提取物对酪氨酸酶具有混合性激活作 用 ,说明这些中药既能促进底物与酶的活性中心的结 合 ,促进黑素产生 ,又能提高酶的活性 ,表观 Km 值减 小 ,同时反应的最大速度增加 。19 种中药乙醇提取物 对酪氨酸酶的激活类型见表 2 。
= A475 + 药 - 酶 。此外 ,另取 5 mgΠmL 的补骨脂素为 药物组阳性参比对照 。 1. 2. 3 中药影响酪氨酸酶活性的动力学观察 见参 考文献[ 5 ] ,将中药提取物溶解在 0. 5 mL 磷酸缓冲液 (1Π15 molΠL ,pH6. 8) 中 ,再与蘑菇酪氨酸酶 100μL (60 u) 混合 ,25 ℃孵育 10 min ,分别加入不同剂量的左旋 多巴溶液 ,继续孵育 2 min ,立即于分光光度计 475 nm 处测光吸收值 A475 ,利用多巴色素在 475 nm 处的消光 系数为 3. 7 ×103 ,计算酶的活力单位 ,采用 Lineweaver - Burk 双倒数法制得酶动力学曲线 ,用米氏公式计算 Km 。 1. 3 数据处理和统计方法 采用配对计量资料 t 检 验分析 。 2 结果 2. 1 中药乙醇提取物对酪氨酸酶有激活作用 47 种 中药中 ,有 19 种的乙醇提取物对酪氨酸酶有激活作 用 ,按作用强弱依次为鸡血藤 、夏枯草 、女贞子 、薄荷 、 潼蒺藜 、申姜 、旱莲草 、黄芩 、泽兰 、甘草 、山慈姑 、白鲜 皮 、独活 、刺蒺藜 、紫荆皮 、桃仁 、菟丝子 、苏梗 、补骨 脂 。见表 1 。 2. 2 中药对酪氨酸酶动力学的影响 酶动力学分析 结果显示 :苏梗 、菟丝子 、旱莲草 、甘草 、补骨脂 、泽兰 和补骨脂素对酪氨酸酶具有竞争性激活作用 ,说明这 些中药能促进底物与酶活性中心的结酪氨酸酶的激活率 ( x ±s) %

梁 一彪 ， 李锦 灵 ， 王晖
（ 广东 药科大学 中药学院 ， 广东 广州 ５ １ ０ ０ ０ ６ ）
摘要 ： 酪氨酸酶 的活性降低和黑素 细胞 的含 量减 少是引起毛发早 白的主要原 因。本文就几种 中药对酪
氨酸酶 的激 活作用及对黑 素细胞的调节作用进行综述 ， 并简要介绍其作用原理 ， 为其 用于研究天然植物 染发剂提供理论依据 。
ｍｅ ｌ ａ ｎ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｓ ． Ｉ ｎ ｔ ｈ ｉ ｓ ｐ ａ ｐ ｅ ｒ ， ｓ ｅ ｖ ｅ ｒ ａ ｌ ｋ ｉ ｎ ｄ ｓ ｏ ｆ ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ（ Ｔ Ｃ Ｍ） ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ
关 键 词 ：酪 氨 酸 酶 ； 黑 素 细 胞 ；中药 ： 染 发 剂 中 图分 类 号 ：Ｒ ２ ８ ５ ． １ 文 献 标 志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ６ — ８ ７ ８ ３ （ ２ ０ １ ６ ） ０ ６ — ０ ８ １ １ － ０ ６
Ｄ Ｏ Ｉ ： １ ０ ． １ ６ ８ ０ ９ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． １ ０ ０ ６ — ８ ７ ８ ３ ． ２ ０ １ ６ ０ ６ １ ９ ０ １
Ｐｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ ｅ ｎ ｈ ａ ｎ ｃ ｉ ｎ ｇ ｐ ｉ ｇ ｍｅ ｎ ｔ ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ｏ ｆ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｙ ｒ ｏ ｓ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ
（ ｔ ｙ ｒ ｏ ｓ ｉ ｎ ａ ｓ ｅ — ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ． ２ ， Ｔ Ｒ Ｐ ． ２ ） 。这 ３ 种 酶 的基 因

名 肿毒 、脓疱 疮 、疥 癣 。地瓜 藤 广 范 分 布 于 我 国 的四 川 、广 西 、贵 州 、湖 南 等 地 ，多 野 生 ，在 川 、 桂 、黔等地 作 为 民 间习 用药 材 ，常 用 鲜 品捣 敷 外 用 ， 治无名肿 毒 、汤火 伤 。 目前关 于 地 瓜 藤 的研 究 极 少 ， 仅 关永霞等 对其 化学成 分进行 了研 究 ，已知地 瓜藤 的提取物 中含有 呋喃香 豆素 类 物质 ，而祖 国传 统 医学
Ｐｏａｅ ｏ ｌｏａＬ ，药 用 部 位 为果 实 ；酪 氨 酸 酶 ｓｒｌ ｃｒ ｉｌ ． ａ ｙｆ ｉ （ 号 Ｔ ８４） 和 Ｌ多 巴 （ 号 Ｄ ６ ８ 购 自美 国 货 ３２ 一 货 ９２ ） Ｓｇ ａ公 司 ；其他 试剂 均为 国产分 析 纯 。 ｉｍ
２ 方 法
的临床实践证 明含 呋喃香 豆素 类药 物对 白癜 风 的治疗 效 果 明显 Ｈ 。但 尚未见地 瓜藤治疗 白癜风 的报 道 。 Ｊ 白癜 风是 一种 临床 较常见 的色 素脱 失 性 皮肤 病 ， 发 病 率 为 ０５ 一２ ．％ ％ 。 研 究 发 现 ， 酪 氨 酸 酶
用 含呋喃香 豆素类药 物治疗 白癜 风 的历史 悠久 ，长期
四川 大学 张 浩 教 授 鉴 定 为 地 瓜 藤 ＦｃｓｔｏａＢ ｒ， ｉ ｉ ｕ ｕ． ｕ ｋ 药用 部位 为茎 、叶 ；补 骨 脂 购 自四川新 荷 花 中药 饮
片有 限 公 司 ，经 四 川 大 学 张 浩 教 授 鉴 定 为 补 骨 脂 Ｉ
慢 性支气管 炎 、痢疾 、小儿 消化 不 良、风 湿疼 痛 、无
有 限公 司 ） ；分 光 光 度 计 （ 海 美 谱 达 仪 器 有 限公 上 司） Ｎ － ２ ；Ｄ Ｐ９ ５型 电热 恒温 培养 箱 （ 海精 宏 实验设 ０ 上

白芷外用对酪氨酸酶有什么作用？
白芷，俗名泽芬，伞形科植物，分为兴安白芷（祈白芷）、库而白芷（川白芷）及杭白芷（香白芷），以根入药，味辛，性温，归肺、胃、大肠经，芳香升散，有祛病除湿、排脓生肌、活血止痛等功效。

白芷味香色白，外用治疗黄褐斑、白癜风、痤疮等多种皮肤病。

国内研究初步确认白芷提取物可显著抑制黑色素的生成，加速黑色素在皮肤中的代谢，对皮肤无刺激。

酪氨酸酶是黑色素合成的关键酶，酪氨酸酶抑制剂能有效减少黑色素生成。

白芷为白芷香肤保健液的主要成份，其性辛、温，能够祛风燥湿，入肺经，并对肺肾进行滋养，达到益气养阴的效果。

现代研究认为白芷具有镇痛、抗氧化、保肝、抗癌和光敏等作用，使皮肤降低对紫外线的敏感性，纯中药无任何副作用。

白芷在黄褐斑的治疗中发挥了对酪氨酸酶的活性、黑素瘤细胞的增值以及黑素含量都具有抑制作用使用白芷香肤保健液2个月后，黄褐斑的情况得到明显的淡化和减轻。

·中药房之窗·14味中药对酪氨酸酶抑制作用的探讨闫军1,李昌生1,陈声利1,张君仁2,赵天恩3(1.济南市皮肤病防治院,济南市250001;2.山东大学药学院,济南市250012;3.山东省皮肤病性病研究所,济南市250022)中图分类号R28;R96文献标识码A文章编号1001-0408(2003)07-0442-02摘要目的:研究14味中药对酪氨酸酶的抑制作用。

方法:用50%乙醇提取中药有效成分,利用紫外分光光度法测定酶促反应的速度,以衡量其对酪氨酸酶的抑制作用。

结果:测得14条酶促反应时间曲线。

结论:13味中药对酪氨酸酶活性呈较好的抑制作用(P<0.01),除芦荟以外,其余中药不影响酶促反应的平衡。

桃仁、僵蚕、芦荟抑制作用最好。

关键词中药;酪氨酸酶;紫外分光光度法;抑制Stud y on the Inhibitin g Effects of14Kinds of Chinese Materia Medica on T y rosinaseYAN J un,L I Chan g shen g,CHEN Shen g li(J inan Cit y Hos p ital for Skin Diseases Prevention,J inan250001) ZHAN G J unren(School of Pharmac y,Shandon g U niversit y,J inan250012)ZHAO Tianen(Shandon g Provincial Instit ute of Dermatolo gy and Venereolo gy,J inan250022)ABSTRACT OBJ EC T IV E:To inversti g ate t he inhibitor y effect s of14kinds of t raditional Chinese medicines on t y rosinase activit y1M E THODS:The effective com p onent s of t raditional Chinese medicines were ext racted b y50%et hanol1The s p eed of enz y mic catal y sis of t y rosinase was determined b y ult raviolet s p ect ro p hotomet r y to evaluate t he inhibitor y effect s of ext ract s of t raditional Chinese medicines1R ESUL TS:14reactive time curves of enz y mic catal y sis of t y rosinase were obtained1CONCL U S-ION:13kinds of t raditional Chinese medicines in vit ro showed a better inhibitive effect on t y rosinase activit y(P<0101), wit hout influence on t he e q uilibrium of enz y mic catal y sis exce p t Aloe barbadensis Miller1Prunus p ersica Bat sch,Bomb y x mori Linnaeus and Aloe barbadensis Miller showed t he best inhibitor y effect on t y rosinase activit y1KEY WO RDS t raditional Chinese medicines;t y rosinase;ult raviolet s p ect ro p hotomet r y;inhibition中药治疗色素障碍性皮肤病取得了良好的疗效,且人们积累了大量宝贵经验。

10种中药对酪氨酸酶激活作用的研究
王建华;雷帆;胡波;崔景荣
【期刊名称】《中国中医药信息杂志》
【年(卷),期】2000(007)004
【摘要】应用多巴色素法测定了中药对酪氨酸酶活性的影响,发现10种中药对酪氨酸酶具有激活作用,其中丹参、何首乌、黄芩激活作用较强.
【总页数】1页(P40)
【作者】王建华;雷帆;胡波;崔景荣
【作者单位】北京医科大学药学院北京 100083;北京医科大学药学院北京 100083;北京医科大学药学院北京 100083;北京医科大学药学院北京 100083
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.激活酪氨酸酶的增色素中药对黑素细胞作用的研究进展 [J], 梁一彪;李锦灵;王晖
2.中药降香对酪氨酸酶激活作用的动力学研究 [J], 吴可克;王舫
3.45味中药乙醇提取物中对酪氨酸酶的激活作用 [J], 吴立峰;蔡字杰;廖祥儒;吴会广;张大兵
4.山柰素等7种中药单体对酪氨酸酶的激活作用 [J], 谭城;朱文元;鲁严
5.六种中药复方乙醇提取物对酪氨酸酶激活作用及动物致色素作用的研究 [J], 刘之力;李雅莉;刘俐;史月君;涂彩霞
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复方首乌蒺藜汤对蘑菇酪氨酸酶激活作用的研究宋业强;白鹏【摘要】Objective: To determine the effects of water extract of compound radix Shouwu Jili Soup on mushroom tyrosinase activity. Methods: Mushroom tyrosinase activity was measured by mushroom tyrosinase oxidation method. Reagents, 2 mL, 37℃ were incubated for 10 minutes, and then, 0.15% DL-dopa 1mL was added, and was incubated for another 2 minutes. absorbent values was measured with a spectrophotome-ter at 475nm (A475). Results: The activation rate was 78.01% in the experimental group and was 10.49%in the control group, with a significant difference (P<0.01). Conclusion: Compound Radix Shouwu Jili Soup can activate mushroom tyrosinase and the activation was superior to Bai Ling tablet (P<0.01).%目的：确定复方首乌蒺藜汤水提取物对蘑菇酪氨酸酶活性的影响。

方法：采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定蘑菇酪氨酸酶活性。

反应物2 mL,37℃孵育10 min 后,加0.15％ DL-多巴1 mL,再孵育2 min,用分光光度计于475 nm 处测定吸光度 A 值(A475)。