细胞自主实验
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细胞呼吸(2)细胞呼吸方式的探究实验
2014---2015高三一轮复习课堂复习学案细胞呼吸（2）细胞呼吸方式的探究实验【学习目标】：掌握细胞呼吸方式的探究实验。
【自主复习指导一】：认真阅读教材第91-92页内容，5分钟后独立完成下列检测1．实验原理(1)选择酵母菌为实验材料的原因酵母菌是一种单细胞真菌，在有氧和无氧的条件下都能生存，属于生物。
(2)产物的检测试剂现象(颜色变化)澄清的石灰水CO2酒精【自主复习指导二】：认真思考植物组织呼吸方式的探究材料。
欲确认某生物的呼吸类型，应设置两套呼吸装置，如图所示(以发芽种子为例)：实验现象结论装置一液滴装置二液滴只进行产乳酸的无氧呼吸或种子已死亡只进行产酒精的无氧呼吸进行有氧呼吸和产酒精的无氧呼吸只进行有氧呼吸或进行有氧呼吸和产乳酸的无氧呼吸【特别提醒】为使实验结果精确除减少无关变量的干扰外，还应设置对照装置。
对照装置与装置二相比，不同点是用“煮熟的种子”代替“发芽种子”，其余均相同。
【当堂训练】1．下列有关“探究酵母菌的呼吸方式”实验的叙述，错误的是() A．实验中将葡萄糖溶液煮沸的目的是灭菌和去除溶液中的O2B ．在探究有氧呼吸的实验过程中，泵入的空气应去除CO 2C ．实验中需控制的无关变量有温度、pH 、培养液浓度等D ．可通过观察澄清石灰水是否变混浊来判断酵母菌的呼吸方式2． 在下图3个密闭装置中，分别放入质量相等的三份种子：消毒且刚萌发的小麦种子、未消毒刚萌发的小麦种子及未消毒刚萌发的花生种子。
把三套装置放在隔热且适宜条件下培养，下列有关叙述中错误的是 ()A ．当a 和b 玻璃管中的水珠开始移动时，分别记录其移动速率v a 和v b ，则v a ＜v bB ．如果b 和c 中都消耗了等质量的有机物，记录温度计读数为T b 和T c ，则T c ＞T bC ．如果b 和c 中都消耗了等质量的有机物，记录水珠移动距离L b 和L c ，则L b ＜L cD ．如果a 和c 中都消耗了等质量的有机物，记录温度计读数为T a 和T c ，则T a ＞T c 3．某同学用如图所示实验装置测定果蝇幼虫的呼吸速率。
发育生物学第7章细胞的自主特化
实验研究发现，如将海鞘8-细胞胚胎的卵裂球分成4对(左右两 卵裂球是相等的)，发育过程如卵子命运决定图谱与预期一样， 植物极后面一对卵裂球(B4.1)形成内胚层、间质和肌肉(下右图)。 可见海鞘卵裂球命运在8-细胞期已经决定，分离的卵裂球可 以自我分化.
但神经系统的发育例外，神经细胞是由动物极前面一对卵裂球 (a4.2)和植物极前面一对卵裂球(A4.1)产生。当这两对卵裂球 分离后单独培养均不生产神经组织，当二者配合后可形成脑 和触须(palp)。可见在海鞘这样镶嵌型发育的胚胎中也存在 卵裂球之间相互作用决定发育命运的渐进决定作用.
Boveri第一个对胚胎发育中染色体变化进行了观察，发现副蛔 虫单倍体生殖细胞只有2条染色体，第一次卵裂为纬裂形成 动物极和植物极两个卵裂球；在第二次卵裂前动物极卵裂球 染色体两端裂解成数十个小片段，散布细胞质中，不再加入 新形成的细胞核内，因而失去很多基因，这一现象称为染色 体消减(chromosome diminution)。植物极卵裂球仍保持正常数目 染色体。
Wilson(1904)将帽贝早期卵裂球分离培养发现，其发育命运、分 裂速度和分裂方式都和完整胚胎内的相同卵裂球一样(下图)。 这是由特定的形态发生决定子为基础的。
帽贝成纤毛细胞的分化 A.帽贝正常胚胎中成纤毛细胞的分 化 a.16-细胞期侧面观.预定成纤毛 细胞以深色表示. b.48-细胞期. c. 纤毛幼虫期动物极观.纤毛位于成纤 毛细胞上. B.分离培养的帽贝成纤毛细胞的分 化. a.分离的成纤毛细胞. b,c. 培 养过程中第1和第2次卵裂. d.纤毛 形成. 即使分离后单独培养,成纤毛 细胞同样在正常时间形成纤毛
由于极叶细胞质的进入，D 卵裂球比其它3个卵裂球都大，故称 其为大卵裂球(macromere)。D 分裂产生1d 和1D，1D 分裂产生 2d 和2D，2D 分裂产生3d和3D，3D 分裂产生4d 和4D。当除 去D 或1D 或2D 卵裂球时,发育的胚胎缺少心脏、消化道、面 盘、壳腺、眼和足。除去3D，胚胎只缺少心脏和消化道。可 见原先存在于D 卵裂球中的某些形态发生决定子分配到3d卵 裂球中。只除去4D 对胚胎发育没有质的影响。
但神经系统的发育例外，神经细胞是由动物极前面一对卵裂球 (a4.2)和植物极前面一对卵裂球(A4.1)产生。当这两对卵裂球 分离后单独培养均不生产神经组织，当二者配合后可形成脑 和触须(palp)。可见在海鞘这样镶嵌型发育的胚胎中也存在 卵裂球之间相互作用决定发育命运的渐进决定作用.
Boveri第一个对胚胎发育中染色体变化进行了观察，发现副蛔 虫单倍体生殖细胞只有2条染色体，第一次卵裂为纬裂形成 动物极和植物极两个卵裂球；在第二次卵裂前动物极卵裂球 染色体两端裂解成数十个小片段，散布细胞质中，不再加入 新形成的细胞核内，因而失去很多基因，这一现象称为染色 体消减(chromosome diminution)。植物极卵裂球仍保持正常数目 染色体。
Wilson(1904)将帽贝早期卵裂球分离培养发现，其发育命运、分 裂速度和分裂方式都和完整胚胎内的相同卵裂球一样(下图)。 这是由特定的形态发生决定子为基础的。
帽贝成纤毛细胞的分化 A.帽贝正常胚胎中成纤毛细胞的分 化 a.16-细胞期侧面观.预定成纤毛 细胞以深色表示. b.48-细胞期. c. 纤毛幼虫期动物极观.纤毛位于成纤 毛细胞上. B.分离培养的帽贝成纤毛细胞的分 化. a.分离的成纤毛细胞. b,c. 培 养过程中第1和第2次卵裂. d.纤毛 形成. 即使分离后单独培养,成纤毛 细胞同样在正常时间形成纤毛
由于极叶细胞质的进入，D 卵裂球比其它3个卵裂球都大，故称 其为大卵裂球(macromere)。D 分裂产生1d 和1D，1D 分裂产生 2d 和2D，2D 分裂产生3d和3D，3D 分裂产生4d 和4D。当除 去D 或1D 或2D 卵裂球时,发育的胚胎缺少心脏、消化道、面 盘、壳腺、眼和足。除去3D，胚胎只缺少心脏和消化道。可 见原先存在于D 卵裂球中的某些形态发生决定子分配到3d卵 裂球中。只除去4D 对胚胎发育没有质的影响。
细胞生物学自主实验
培养瓶瓶 标号 1（男生） 2（男生） 3（女生） 4（女生） 完全培养基 （ml） 3 3 3 3 0.18 0.18 0.18 0.18 血量（ml） 秋水仙素终浓 度（ug/ml） 16uml 半滴 8uml 半滴 秋水仙素作用 时间（h） 3 3 3 3 60 60 60 60 10mg/mlPHA （微升）
染色
• 1、把滴好的在载玻片放入染缸中，将稀释 后的Giemsa染色滴在染缸里中，室温染色 20分钟；
• 2、自来水轻轻冲洗（冲洗标本片的背面） 3～5秒钟，晾干（或烘干）； • 3、镜下观察染色体分带及染色情况。
五、注意事项
• 1 、细胞培养的环境必须无污染环境，温度保持 恒定，有适宜气体环境，pH适宜。 • 2、 操作及培养条件、培养仪器等无菌避免污染。 • 3、控制好离心速度，过快或过慢都会影响实验 结果。 • 4、低渗处理是实验成败的关键，其目的是使细 胞体积膨大，染色体松散，处理时间过长染色 体丢失会影响观察，处理时间不足，细胞内染 色体会聚集在仪器无法区分。
六、核型分析结果
女性染色体
男性染色体
结果分析讨论
一、在这次试验中我们做了4张片子，但其中一男一 女两张装片没有看到分裂相，分析原因可能有以下 几点： 1、片的高度不够，导致细胞没有摔开。 2、秋水仙素用量分配不均，导致用量不足。
• 二、核型结果分析： • 核型分析数据与正常的核型数据比较吻合。
• 女生组的细胞较好，经过三天的恒温培养 细胞的数目较多，分裂相也较多，但是男 生组的细胞数目就很少，分裂相也很少。 原因可能以下几点有: • 1、男生的细胞不容易被PHA诱导分裂； • 2、男生的细胞在制作装片的时候有损失； • 3、秋水仙处理时的用量太少（只有半滴）。
• • • •
染色
• 1、把滴好的在载玻片放入染缸中，将稀释 后的Giemsa染色滴在染缸里中，室温染色 20分钟；
• 2、自来水轻轻冲洗（冲洗标本片的背面） 3～5秒钟，晾干（或烘干）； • 3、镜下观察染色体分带及染色情况。
五、注意事项
• 1 、细胞培养的环境必须无污染环境，温度保持 恒定，有适宜气体环境，pH适宜。 • 2、 操作及培养条件、培养仪器等无菌避免污染。 • 3、控制好离心速度，过快或过慢都会影响实验 结果。 • 4、低渗处理是实验成败的关键，其目的是使细 胞体积膨大，染色体松散，处理时间过长染色 体丢失会影响观察，处理时间不足，细胞内染 色体会聚集在仪器无法区分。
六、核型分析结果
女性染色体
男性染色体
结果分析讨论
一、在这次试验中我们做了4张片子，但其中一男一 女两张装片没有看到分裂相，分析原因可能有以下 几点： 1、片的高度不够，导致细胞没有摔开。 2、秋水仙素用量分配不均，导致用量不足。
• 二、核型结果分析： • 核型分析数据与正常的核型数据比较吻合。
• 女生组的细胞较好，经过三天的恒温培养 细胞的数目较多，分裂相也较多，但是男 生组的细胞数目就很少，分裂相也很少。 原因可能以下几点有: • 1、男生的细胞不容易被PHA诱导分裂； • 2、男生的细胞在制作装片的时候有损失； • 3、秋水仙处理时的用量太少（只有半滴）。
• • • •
干细胞临床实验原则
干细胞临床实验原则干细胞临床实验是一项具有潜在重大医学突破意义的科学研究，它能够为治疗许多顽疾和慢性疾病提供新的可能性。
然而，由于干细胞具有特殊的生物学性质和伦理道德挑战，对于干细胞临床实验的规范和原则变得尤为重要。
本文将重点探讨干细胞临床实验的原则，以确保其安全性、道德性和科学性。
一、伦理原则干细胞临床实验的进行必须遵循严格的伦理原则。
这包括尊重人的尊严和权利，确保知情同意和隐私保护，以及最大限度地减少风险和伤害。
1. 尊重人的尊严和权利干细胞临床实验必须尊重人的尊严和权利，不得剥夺实验对象的自由意志和自主选择权。
2. 知情同意和隐私保护在进行干细胞临床实验之前，实验对象必须全面了解实验的目的、方法、风险和利益，并在知情同意的基础上参与。
同时，必须保护实验对象的隐私和个人信息安全。
3. 最大限度减少风险和伤害干细胞临床实验在设计和实施过程中必须最大限度地减少风险和伤害，确保实验对象的身体和心理安全。
二、安全原则干细胞临床实验的安全性是第一位的。
为了保证实验的安全性，必须遵循严格的安全原则和监管机制。
1. 实验设计和前期研究在进行干细胞临床实验前，必须进行充分的实验设计和前期研究，确保实验的可行性和安全性。
2. 如实披露实验材料必须如实披露实验材料的来源、种类、特性以及实验操作的细节，以便其他科研人员进行验证和评估。
3. 监测和审核干细胞临床实验过程中，必须建立严格的监测和审核机制，及时掌握实验的进展和可能出现的问题，并采取相应措施进行纠正。
三、科学原则干细胞临床实验必须以科学性为基础，充分发挥科学研究的价值和意义。
1. 结果验证和重复性进行干细胞临床实验的结果必须经过验证和重复，确保实验结果的可靠性和可复制性。
2. 严谨的实验操作和数据分析干细胞临床实验必须进行严谨的实验操作和数据分析，确保实验结果的准确性和可信度。
3. 公正和透明进行干细胞临床实验的过程必须公正和透明，不得有偏见和不当干预，以确保实验结果的客观性。
第6章 细胞的自主特化：形态发生决定子
第六章 细胞的自主特化： 形态发生决定子
动物有机体是由分化细胞组成的。分化细 胞不仅形态多样，而且功能各异
第一节 细胞定型和分化
细胞分化:
从单个全能的受精卵产生各种类型细胞 的发育过程叫做细胞分化。 已分化细胞不但具有一定形态和合成特 异性产物，而且能行使特定的功能。
细胞定型： 细胞在分化之前，将发生一些隐蔽的变 化，使细胞朝特定方向发展，这一过程 称为定型 已定型细胞和未定型的细胞从表型上看 不出任何不同，但是前者发育已经受到 了严格的限制
乙酰胆碱酯酶使幼虫肌肉能对来自神经 的刺激发生反应，其可以作为海鞘肌细 胞分化的特异性标记。
肌质形态发生决定子是如何发生作用的？
据推测，肌质等形态发生决定子可能
选择性地激活（或抑制）裂球中某些特定
基因的表达，从而决定裂球的发育命运。
2、内胚层、表皮和前后轴的决定
海鞘内胚层、表皮和前后轴的决定也与胞 质定域有关。 海鞘胚胎发育中，只有预定形成消化管的 细胞能产生碱性磷酸酶，因此，碱性磷酸 酶是内胚层特异性酶，可以作为内胚层细 胞分化的生化指标。 一系列实验表明，表皮决定子在受精过程 中迁移到卵子动物极顶部，卵裂时进入动 物极卵裂球中，也就是8细胞期的a4.2和 b4.2两对裂球中；而内胚层决定子在受精 过程中迁移到卵子植物极半球，卵裂时进 入植物极裂球中。
Whitman证明
成神经细胞
水蛭早期 胚胎一个 中胚层干 细胞 成中胚细胞 中胚层胚带
神经胚带
腹神经索
肌肉
Whitman的结果表明：肌肉和腹神经索等高度分
化的结构是由特定的裂球发育而成的；特定的裂 球由受精卵根据精确的卵裂方式分裂产生，含有 卵子一定区域的细胞质。
动物有机体是由分化细胞组成的。分化细 胞不仅形态多样，而且功能各异
第一节 细胞定型和分化
细胞分化:
从单个全能的受精卵产生各种类型细胞 的发育过程叫做细胞分化。 已分化细胞不但具有一定形态和合成特 异性产物，而且能行使特定的功能。
细胞定型： 细胞在分化之前，将发生一些隐蔽的变 化，使细胞朝特定方向发展，这一过程 称为定型 已定型细胞和未定型的细胞从表型上看 不出任何不同，但是前者发育已经受到 了严格的限制
乙酰胆碱酯酶使幼虫肌肉能对来自神经 的刺激发生反应，其可以作为海鞘肌细 胞分化的特异性标记。
肌质形态发生决定子是如何发生作用的？
据推测，肌质等形态发生决定子可能
选择性地激活（或抑制）裂球中某些特定
基因的表达，从而决定裂球的发育命运。
2、内胚层、表皮和前后轴的决定
海鞘内胚层、表皮和前后轴的决定也与胞 质定域有关。 海鞘胚胎发育中，只有预定形成消化管的 细胞能产生碱性磷酸酶，因此，碱性磷酸 酶是内胚层特异性酶，可以作为内胚层细 胞分化的生化指标。 一系列实验表明，表皮决定子在受精过程 中迁移到卵子动物极顶部，卵裂时进入动 物极卵裂球中，也就是8细胞期的a4.2和 b4.2两对裂球中；而内胚层决定子在受精 过程中迁移到卵子植物极半球，卵裂时进 入植物极裂球中。
Whitman证明
成神经细胞
水蛭早期 胚胎一个 中胚层干 细胞 成中胚细胞 中胚层胚带
神经胚带
腹神经索
肌肉
Whitman的结果表明：肌肉和腹神经索等高度分
化的结构是由特定的裂球发育而成的；特定的裂 球由受精卵根据精确的卵裂方式分裂产生，含有 卵子一定区域的细胞质。
医学细胞生物学探索性实验教学设计与应用
基金项目： 海军军医大学教学模式方法改革课题面上项目（ＪＹＰ２０２０Ｂ０４）作者简介： 汪超，男，１９８７－０８生，博士，讲师，Ｅ ｍａｉｌ：ｗａｎｇｃｈａｏｓｍｍｕ＠１２６．ｃｏｍ收稿日期： ２０２０－１２－２８医学细胞生物学探索性实验教学设计与应用汪 超，张竞予，李嘉言，张红霞，李文林，朱海英△ （海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室， 上海 ２００４３３；△通迅作者）摘要： 在医学细胞生物学实验课教学实践中，以个性化、高效率学习为教学目标，结合授课对象实际，采用学生自主设计为主、教师指导为辅的探索性实验教学方法。
教学手段上通过使用智慧树学习平台、数码互动显微成像系统等设备实现学生在实验过程中的自主性。
教学过程中增加实验条件的可选择性进而增强学生探索性体验。
该实验教学设计的主要目的是在达到实验课双基训练要求的同时，发挥实验课在培养学生科研思维、学习科研设计和形成科研规范中的作用。
文章以小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察实验为例介绍海军军医大学基础医学院细胞生物学教研室的具体做法。
关键词： 医学细胞生物学； 实验教学； 教学改革； 探索性实验中图分类号： Ｑ２ 文献标志码： Ａ 文章编号： ２０９５－１４５０（２０２１）０２－００９８－０３ ＤＯＩ：１０．１３７５４／ｊ．ｉｓｓｎ２０９５－１４５０．２０２１．０２．０９ 实验课教学是高校教学体系的重要组成部分，实验课教学改革也是经常被讨论的话题。
大家普遍认同的观点是实验课对学生动手能力以及科研基本素质的培养有着不可替代的作用［１，２］。
从顶层设计层面，国家级的虚拟仿真实验项目的设立以及各高校教学实验中心的建设，目的都是从实验条件方面为学生的能力培养搭建更好的平台。
而建立在这些实验条件基础上的更加有效的授课设计是帮助学生逐步建立科研思维、学习科研设计和形成科研规范的重要环节。
目前，ＰＢＬ教学法、发现教学法、对分课堂、翻转课堂、自主性实验等多种教学方式在医学细胞生物学理论及实验教学中得以开展，其目的都是为了实现教学从重教授、重结果、重模式化向重学习、重过程、重个性化的转变［１－３］。
心肌细胞自动节律调控的作用研究
心肌细胞自动节律调控的作用研究心肌细胞是心脏最基本的功能单位，它们通过不断收缩和放松来推动血液循环。
而心脏的自动节律调控，正是通过调控心肌细胞的收缩和放松，来保障正常的心脏功能。
近年来，关于心肌细胞自动节律调控的作用研究已经取得了一些重要的进展。
本文将介绍一些相关研究进展及其意义。
一、心肌细胞的自动性心肌细胞拥有自主的持续活动能力，即自动性。
这是心肌细胞特有的生理特征，可以在一定范围内自主产生收缩活动。
细胞内的自主节律产生器起重要作用。
自主节律产生器包括自由跳动的钙离子释放单元，这些释放单元能在细胞内自主产生钙离子波，触发细胞的收缩活动。
此外，一些离子通道也能够通过自主开放闭合，导致细胞内部的电位变化，进而产生收缩活动。
二、自主节律产生器的调节自主节律产生器的活性受到多种因素的影响。
其中包括自身的内在特征，如离子通道的数量和类型，以及外部的生理刺激，如神经递质、荷尔蒙等。
实验研究表明，自主节律产生器的活性受到Parasympathetic(nervous system)神经系统的抑制作用，而受到交感神经系统的兴奋作用。
这些调节作用会对自主节律产生器的激活和失活产生影响，进而影响心肌细胞的自动性。
三、心肌细胞自动节律调控的作用心肌细胞的自动节律性是心脏自主性的基础，正常的心脏功能需要精确的自动节律调控。
一些研究已经表明，心脏自主神经系统和内源性心脏节律调控机制能够调节心肌细胞的自动节律，维持心脏的正常自主性。
而失调的节律调控可能导致心率过快或过慢等疾病。
因此，对心肌细胞自动节律调控的研究有望为研发治疗心脏疾病的新药提供新的思路。
四、研究进展与展望近年来，心肌细胞自动节律调控的作用研究已经取得了一些进展。
一些研究表明，心肌细胞的自动节律性与其电生理性质、胞内钙离子的变化、离子通道的开放和闭合等方面密切相关，这为心肌细胞自动节律调控机制的研究提供了新的思路。
此外，也有一些新的技术手段的出现，如钙成像技术、膜电位记录技术等，这些技术可以更准确地观察心肌细胞内部的生理变化，从而更深入地研究心肌细胞自动节律调控机制。
细胞凋亡实验报告
一、实验背景细胞凋亡，又称程序性细胞死亡，是一种由基因调控的细胞自主性死亡过程。
细胞凋亡在生物体的发育、免疫、代谢等生理过程中具有重要作用。
近年来，细胞凋亡与多种疾病的发生、发展及治疗密切相关，因此，研究细胞凋亡的机制具有重要意义。
本实验旨在通过检测细胞凋亡相关指标，探讨细胞凋亡在特定细胞类型中的作用。
二、实验材料与试剂1. 细胞：实验用细胞为正常细胞系A和肿瘤细胞系B。
2. 试剂：Annexin V-FITC/PI双染试剂盒、RNA提取试剂盒、PCR试剂盒、DNA提取试剂盒、Trizol试剂、DEPC水、无血清培养基、胎牛血清、胰蛋白酶等。
三、实验方法1. 细胞培养：将正常细胞系A和肿瘤细胞系B分别接种于培养瓶中，置于37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
2. 细胞凋亡检测：将正常细胞系A和肿瘤细胞系B分别分为实验组和对照组。
实验组加入凋亡诱导剂，对照组加入等量无血清培养基。
培养一定时间后，按照Annexin V-FITC/PI双染试剂盒说明书进行细胞凋亡检测。
3. RNA提取：将实验组和对照组细胞收集于离心管中，按照RNA提取试剂盒说明书提取细胞总RNA。
4. PCR检测：将提取的RNA进行逆转录，得到cDNA。
以cDNA为模板，进行凋亡相关基因的PCR扩增。
5. DNA提取：将实验组和对照组细胞收集于离心管中，按照DNA提取试剂盒说明书提取细胞DNA。
6.琼脂糖凝胶电泳：将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，观察条带。
四、实验结果1. 细胞凋亡检测：实验组细胞凋亡率显著高于对照组（P<0.05），说明凋亡诱导剂成功诱导细胞凋亡。
2. RNA提取：成功提取实验组和对照组细胞总RNA。
3. PCR检测：实验组凋亡相关基因表达水平显著高于对照组（P<0.05），说明凋亡诱导剂上调凋亡相关基因表达。
4. 琼脂糖凝胶电泳：实验组凋亡相关基因PCR产物条带较对照组明显，说明凋亡相关基因在实验组中表达上调。
《植物细胞》教案
《植物细胞》教案《植物细胞》教案1知识目标：1、尝试制作洋葱表皮临时玻片标本。
2、使用显微镜观察洋葱表皮细胞的结构。
3、识别植物细胞的基本结构及功能。
科学素养目标：1、通过让学生尝试制作临时玻片标本，提高学生自己动手探究问题的能力。
2、重点：说出植物的细胞各部分基本结构的主要功能。
课前准备：1、分组实验材料及用具：洋葱鳞片叶、显微镜、载玻片、盖玻片、吸水纸、刀片、镊子、滴管、碘液、干净的纱布等。
2、植物细胞结构挂图。
教学过程：一、引入我们所生活的环境是由众多的生物体组成如动物、植物等等，这些生物体究竟是由什么构成的呢？1665年英国学者胡克用他自己设计的显微镜观察了软木（栎树皮）的薄片，发现有许多类似蜂巢的封闭状小室，就把它称作细胞。
后来，人们就逐渐认识到，所有的动植物体都是由细胞构成的。
那么，今年我们通过实验来探究植物细胞的结构。
板书：植物细胞的结构。
二、实验制作四人一组，指导制作临时装片1、制作玻片标本用纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净，在载玻片滴一滴清水，将洋葱叶向外折断，用刀划成长宽各0。
5cm左右小格，用镊子从小格的一角撕起，尽量不带叶肉，放在载玻片清水中，用解剖针使其展平，盖上盖玻片（由清水一边开始慢慢压下，尽量减少气泡的产生）。
2、染色从一盖玻片一侧滴一滴碘液，用吸水纸从另一侧吸引重复2—3次。
3、观察（先用低倍镜观察，找到目标后，再用高倍镜观察）。
三、新授1、请学生自己讲述所观察到的细胞形态和结构。
2、置疑。
同学们互相讨论一下，你们观察到的细胞有无共同之处？出示挂图讲述植物细胞具有的一般结构。
细胞壁细胞膜细胞质细胞核（板书）。
3、置疑细胞的这些结构有什么样的功能？细胞壁：位于植物细胞的外层，质地坚韧，保护细胞内部结构和维持细胞形态的作用。
（板书）细胞膜：控制细胞内外物质进出（板书）细胞质：生命活动的重要场所（板书）如叶绿体与光合作用有关线粒体与呼吸作用有关，除此以外，成熟的植物细胞还具有大的.液泡，液泡内充满细胞液，其主要成分是水，人们切西瓜或其他水果时流出的汁液就是液泡中的细胞液。
植物细胞实验教案
情感态度与价值观：1、体验制作临时装片的过程，交流制作心得。
2、根据自己的观察，客观真实地绘制植物细胞结构简图。
教学分析
教材分析：本节课以训练学生制作临时装片的基本技能为主要内容。
学情分析：这节是学生第一次亲自动手制作临时装片，他们会很兴奋（所以课堂纪律要课前强调好），但同时他们又缺少实验操作能力，因此本节课教师应做好示范作用。
三、合作探究
1、制作洋葱内表皮细胞临时装片的七个基本步骤，你能用七个字概括七个基本步骤吗？
①_____→②_____→③______→④_____→⑤_____→⑥_____→⑦_____
2、把撕下的内表皮浸入载玻片上的清水中，为什么用镊子把它展平？
3、画生物图应注意哪些事项？
个
案
补
改
板书设计
Ⅱ—观察植物细胞
教学反思
教学重难点：
重点：制作临时装片，归纳植物细胞结构。
难点：1、以胆大心细的心理素质，成功地制作临时装片
2、以实事求是的科学态度，练习绘制植物细胞结构简图。
教师准备
实验器材，课件。培训“小老师”
学生准、复习导入
进入实验室先填好记录本，回实验实验过程。
（取镜与安放，对光，观察）。
二、自主学习
阅读教材，完成下列问题：
1、常见的玻片类型有、_______、____。玻片根据保存的时间分为_______和______。在制作玻片标本时，托载标本的玻璃片叫，覆盖标本的叫。
2、制作洋葱鳞片叶内表皮临时装片基本步骤
（1）用洁净的纱布把载玻片和盖玻片____________。
（2）把载玻片放在实验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴_____________。
（3）用镊子从洋葱鳞片叶_____________撕取一小块透明薄膜──内表皮。
2、根据自己的观察，客观真实地绘制植物细胞结构简图。
教学分析
教材分析：本节课以训练学生制作临时装片的基本技能为主要内容。
学情分析：这节是学生第一次亲自动手制作临时装片，他们会很兴奋（所以课堂纪律要课前强调好），但同时他们又缺少实验操作能力，因此本节课教师应做好示范作用。
三、合作探究
1、制作洋葱内表皮细胞临时装片的七个基本步骤，你能用七个字概括七个基本步骤吗？
①_____→②_____→③______→④_____→⑤_____→⑥_____→⑦_____
2、把撕下的内表皮浸入载玻片上的清水中，为什么用镊子把它展平？
3、画生物图应注意哪些事项？
个
案
补
改
板书设计
Ⅱ—观察植物细胞
教学反思
教学重难点：
重点：制作临时装片，归纳植物细胞结构。
难点：1、以胆大心细的心理素质，成功地制作临时装片
2、以实事求是的科学态度，练习绘制植物细胞结构简图。
教师准备
实验器材，课件。培训“小老师”
学生准、复习导入
进入实验室先填好记录本，回实验实验过程。
（取镜与安放，对光，观察）。
二、自主学习
阅读教材，完成下列问题：
1、常见的玻片类型有、_______、____。玻片根据保存的时间分为_______和______。在制作玻片标本时，托载标本的玻璃片叫，覆盖标本的叫。
2、制作洋葱鳞片叶内表皮临时装片基本步骤
（1）用洁净的纱布把载玻片和盖玻片____________。
（2）把载玻片放在实验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴_____________。
（3）用镊子从洋葱鳞片叶_____________撕取一小块透明薄膜──内表皮。
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一、实验目的：通过实验掌握人体外周血淋巴细胞培养方法与人类体细胞染色体组型分析的方法。
二、实验背景：外周血的培养方法，大多是以1960年Moorheard等建立的人外周血淋巴细胞培养技术为基础，优点是方法完善，缺点是取血量多，且操作麻烦。
目前国内常用的微量全血培养技术，不但采血量少，而且省去一些离心、分离血浆等操作。
本实验即采用的是此微量全血培养技术。
人类染色体组型分析是将人的一个体细胞有丝分裂中期的染色体，在一定技术的基础上，按照染色体的大小和形态特征（主要根据着丝点位置），对染色体进行分组、排队和配对。
这对于探索人类遗传病的发病机理，探讨动物和植物的起源，以及物种间的亲缘关系等都具有重要意义。
三、实验原理1. 人体的1ml外周血约含有1x106~3x106个小淋巴细胞，它们几乎都处于G0期或G1期，一般情况下细胞不分裂。
采用人工离体培养的方法，在培养基中加入植物血球凝集素（PHA）能刺激小淋巴细胞转化为淋巴母细胞而进行有丝分裂。
经过短期的培养，秋水仙素处理、低渗、固定，就可获得大量中期有丝分裂的细胞。
最后经空气干燥法制片，便可获得质量较好的染色体标本。
2.实验中涉及到的相关概念：①细胞培养：是在体外模拟体内的生理环境，培养从机体中取出的细胞，并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。
要使细胞能在体外长期生长，必须满足两个基本要求：一是供给细胞存活所必需的条件，如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖及其有关的生长因子、氧气、适宜的温度，注意外环境酸碱度和渗透压的调节。
二是严格控制无菌条件。
②核型：又称染色体组型，是指将动物、植物、真菌等的某一个体或某一分类群（亚种、种、属等）的体细胞内的整套染色体，按它们相对恒定的特征排列起来的图像。
核型模式图，是指将一个染色体组的全部染色体逐个按其特征绘制下来，再按长短、形态等特征排列起来的图像。
③染色体特征以有丝分裂中期较显著，所以一般分析中期分裂相。
根据染色体着丝粒位置的不同，可将其分为中部着丝粒染色体（m）、亚中部着丝粒染色体（sm）、亚端部着丝粒染色体（st）、端部着丝粒染色体（t）。
对任何一个染色体的基本形态特征来说，有三个重要参数：（1）相对长度=单条染色体的长度/(单倍体常染色体+X或Y染色体)的总长度×100%（2）臂指数=长臂/短臂（反映着丝粒位置的指数）（3）着丝粒指数=短臂/整个染色体长度×100%（反映着丝粒位置的指数）人类体细胞的正常核型是含有23对染色体，共46条。
其中22对是男女共有的染色体，一对为男女所不同的性染色体，男XY,女XX。
表-1 人类染色体组型群组号染色体号形态大小着丝粒位置随体次缢痕鉴别程度A 1~3 最大M 无常见1号可鉴定B 4~5 次大Sm 无不易C 6~12+X 中等Sm 无常见9号难鉴定D 13~15 中等St 有偶见13号难鉴定E 16~18 较小16m,17m和18m 无常见16号可鉴定F 19~20 小M 无不易G 21~22+Y 最小st 有、Y无难鉴定人类体细胞的正常核型是含有46条染色体，相互构成23对。
其中有22对染色体是男女共有的，剩下一对是不同的性染色体，男XY，女XX。
按照染色体的长度一次减小和着丝粒位置及其他特征，可把人类体细胞染色体分为7个组群，每个组群有其相应的特征。
四、实验仪器试剂及材料：1、材料人的静脉外周血. （组内选取男女各一名，取血样各1ML）2、试剂完全RPMI-1640培养基（含有双抗和小牛血清）、肝素（作为抗凝剂）、秋水仙素、PHA（植物血球凝集素）、磷酸缓冲液PH6.8、Giemsa原液、低渗溶液。
Giemsa染液配制所需试剂：Giemsa原液、PBS缓冲液PBS缓冲液配制所需试剂：NaCL粉末、KCL粉末、NA2HPO4粉末、KH2PO4粉末、蒸馏水,生理盐水，Giemsa粉末，KCl，NaHCO3，PHA，甲醇，甘油。
肝素溶液，磷酸缓冲液PH6.8，纯酒精和冰乙酸（配置Carnoy氏固定液）等。
3、器材恒温培养箱,电冰箱,高压灭菌锅,离心机,真空泵,分析天平,显微镜,超净工作台,注射器,离心管,培养瓶,试管架及试管,量桶,烧杯,酒精灯,抽滤瓶,G6型号细菌过滤漏斗，染缸，滴管等。
五、实验方法：（一）各种试剂及培养基配制（1）低渗液溶液的配制：称取5.59gKCl溶于1,000mL双蒸馏水中,配制成溶液浓度为0.075mol/L的低渗溶液。
（全班共配共用）（2）Carnoy固定液的配制：9ml纯酒精+3ml冰乙酸（全班共配共用）（3）Giemsa（吉姆斯）染液Giemsa原液配制：称Giemsa粉末0.5g，加几滴甘油研磨，再加入甘油（使加入的甘油总量为33ml）。
56℃中保温90～120min。
加入33ml甲醇，置棕色瓶中保存。
使用时按要求用PBS稀释，一般稀释10倍。
注:PBS含0.05%吐温－20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS－T)配制方法为：PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L，KH2PO4 1.4mmol/LPBS缓冲液一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用，具体试剂一般也有不同的比例配方，在针对性上就有了更好的效果。
（二）实验操作方法1、此实验部分步骤在无菌操作室内完成，实验所用药品及器皿的无菌处理。
(1) 实验用的所有器皿,器具都必须按规定洗净,高压灭菌处理备用.(2) 实验用全部药品都要经高压灭菌或过滤除菌处理.具有生物活性的药品要经G6型号细菌过滤漏斗抽滤除菌,其它药品可经过高压灭菌。
2.采取血样：用2ml灭菌注射器吸取肝素湿润管壁，然后用碘酒和乙醇消毒皮肤，从肘静脉采血1～2ml(在医院进行)。
在无菌条件下，向含有3mlRPMI-1640培养液的培养瓶中接种0.3ml全血，（实验室提供每管6ml共两管的培养液）再加入约60ulPHA，用移液枪轻轻吹打，使其混匀。
男女血样各两份。
（此处实验室只提供一管250ul的PHA, 注意在各管分配合适量，以防不够用）3.血细胞培养：将四瓶装有血细胞的培养瓶置于37℃培养箱中培养72h，在培养期间每天轻轻摇晃培养瓶2次(每次一个人)，终止培养前3.5h加入秋水仙素，使最终浓度为0.4—0.8ug/ml。
4.收集细胞：将培养瓶从温箱取出，用吸管将贴壁细胞冲散均匀，移到离心管中，以1000rpm/min离心8min，弃上清液。
5.低渗处理：先加入1ml 0.075mol/L KCl溶液，轻轻吹打，使细胞重悬，然后补加6ml KCl溶液，37℃低渗20min。
6.预固定：用冰乙酸与纯酒精按1:3的比例新配carnoy氏固定液，沿离心管管壁慢慢加入1ml新配的carnoy氏固定液，轻轻吹打混匀，1000rpm/min离心8min，去上清液。
7.固定：沿管壁慢慢加入6ml固定液，用吸管轻轻地吹打，使细胞分散，固定20min，离心去上清夜。
9.滴片：沉淀物中加入0.2—0.5ml固定液，用吸管吹打使其成为细胞悬液；用镊子取预先冰冻的干净载玻片，迅速滴上2～3滴细胞悬液，（垂直高度大于0.5米）立即用嘴向同一方向吹气，使细胞分散均匀，然后置酒精灯上微微加热干燥（或空气干燥）。
10.染色：滴有细胞悬液的载片放于装片架上，烘干后放于装有Giemsa染液染缸染色20min（或放于）；自来水冲洗，烘干。
11.镜检：在低倍镜找到处于中期分裂相的细胞，然后在转至高倍镜下观察.观察时要使用推进器座标尺记录分散良好的细胞位置，便于重新查找，选择染色体分散好、长度适中、姐妹染色单体清楚的中期分裂相进行显微观察。
人类每个体细胞有46条染色体，根据染色体的长度和着丝粒位置的不同，可以分成22对常染色体和一对性染色体，男子是46，XY；女子是46，XX。
12.染色体组型分析：1)在显微镜下找出染色体分散良好、长度适中、姐妹染色单体清楚的中期分裂相进行显微拍摄。
2)将显微拍摄放大的照片上的一个细胞的全部染色体分别一条一条剪下。
3)根据染色体的长短和形态特征进行同源染色体的目测配对。
4)测量出每条染色体短壁和长臂长度，计算出各条染色体的相对长度、着丝粒指数、臂指数，记录原始数据。
（ps技术）5)根据测量数据校正目测配对排列结果，进行调整排列。
6)把染色体按一定顺序一对一对的排列，排列时注意短臂向上，长臂向下，性染色体单独排列，最后把染色体贴成一完整的染色体核型图。
7)翻拍。
六、实验结果1、根据实验结果完成下表： 女性染色体相关数据测定表男性染色体相关数据测定表染色体序号 绝对长度(‰)um 相对长度% 长臂(‰)um 短臂(‰)um 臂指数（长/短）着丝粒指数（%）染色体类型1 0.2926 7.1385 0.1340 0.1247 1.0749 42.62 中部着丝粒染色体 2 0.2811 6.8581 0.1518 0.1343 1.1305 47.79 中部着丝粒染色体 3 0.2279 5.5591 0.1540 0.0912 1.6887 40.03 中部着丝粒染色体 40.2228 5.4359 0.1409 0.0819 1.7194 36.77亚中部着丝粒染色体染色体序号 绝对长度(‰)um 相对长度（%） 长臂(‰)um 短臂(‰)um 臂指数（长/短）着丝粒指数（%）染色体类型1 0.8217 7.9488 0.4412 0.3805 1.1594 46.31 中部着丝粒染色体 2 0.8026 7.7644 0.4894 0.3132 1.5629 39.02 中部着丝粒染色体3 0.6097 5.8979 0.3784 0.2313 1.6364 37.93 中部着丝粒染色体 4 0.58965.70360.3720 0.21761.7097 36.90亚中部着丝粒染色体 5 0.5832 5.6421 0.3586 0.2246 1.5968 38.51 中部着丝粒染色体 6 0.5545 5.3642 0.3571 0.1973 1.8098 35.59 亚中部着丝粒染色体 7 0.5075 4.9097 0.3412 0.1663 2.0509 32.78 亚中部着丝粒染色体 8 0.4670 4.5175 0.3189 0.1481 2.1530 31.72 亚中部着丝粒染色体 9 0.4657 4.5057 0.3280 0.1378 2.3803 29.58 亚中部着丝粒染色体 10 0.4620 4.4690 0.3298 0.1322 2.4951 28.61 亚中部着丝粒染色体 11 0.4488 4.3419 0.3166 0.1322 2.3956 29.45 亚中部着丝粒染色体 12 0.4274 4.1345 0.3193 0.1081 2.9546 25.29 亚中部着丝粒染色体 13 0.4169 4.0335 0.3183 0.0986 3.2283 23.65 亚端部着丝粒染色体 14 0.4016 3.8852 0.3279 0.0737 4.4465 18.36 亚端部着丝粒染色体 15 0.3839 3.7139 0.3269 0.0570 5.7365 14.84 亚端部着丝粒染色体 16 0.3319 3.2111 0.1758 0.1562 1.1254 47.05 中部着丝粒染色体 17 0.3146 3.0438 0.1916 0.1230 1.5583 39.09 中部着丝粒染色体 18 0.2742 2.6528 0.2014 0.0728 2.7676 26.54 亚中部着丝粒染色体 19 0.2597 2.5126 0.1520 0.1078 1.4102 41.49 中部着丝粒染色体 20 0.2553 2.4695 0.1449 0.1103 1.3134 43.23 中部着丝粒染色体 21 0.2118 2.0493 0.1710 0.0409 4.1844 19.29 亚端部着丝粒染色体 22 0.2062 1.9946 0.1795 0.0266 6.7417 12.92 亚端部着丝粒染色体 X0.5411 5.2344 0.3508 0.1903 1.8438 35.16亚中部着丝粒染色体5 0.2127 5.1899 0.1524 0.0603 2.5263 28.36 亚中部着丝粒染色体6 0.2085 5.0861 0.1386 0.0698 1.9854 33.50 亚中部着丝粒染色体7 0.1957 4.7757 0.1381 0.0576 2.3970 29.44 亚中部着丝粒染色体8 0.1860 4.5374 0.1322 0.0538 2.4578 28.92 亚中部着丝粒染色体9 0.1828 4.4592 0.1349 0.0479 2.8158 26.21 亚中部着丝粒染色体10 0.1714 4.1827 0.1095 0.0620 1.7671 36.14 亚中部着丝粒染色体11 0.1668 4.0702 0.1033 0.0635 1.6281 38.05 亚中部着丝粒染色体12 0.1644 4.0108 0.1242 0.0402 3.089824.45 亚端部着丝粒染色体13 0.1629 3.9747 0.1263 0.0367 3.4437 22.50 亚端部着丝粒染色体14 0.1533 3.7411 0.1275 0.0259 4.9275 16.87 亚端部着丝粒染色体15 0.1397 3.4084 0.1203 0.0194 6.1946 13.90 亚端部着丝粒染色体16 0.1379 3.3643 0.0706 0.0673 1.0499 48.78 中部着丝粒染色体17 0.1363 3.3260 0.0721 0.0642 1.1223 47.12 中部着丝粒染色体18 0.1304 3.1817 0.0874 0.0430 2.0330 32.97 亚中部着丝粒染色体19 0.1234 3.0112 0.0682 0.0552 1.2361 44.72 中部着丝粒染色体20 0.1181 2.8809 0.0723 0.0458 1.5800 38.76 中部着丝粒染色体21 0.1024 2.4981 0.0776 0.0247 3.1380 24.17 亚端部着丝粒染色体22 0.0929 2.2675 0.0778 0.0151 5.1502 16.26 亚端部着丝粒染色体X 0.2043 4.9844 0.1413 0.0630 2.2444 30.82 亚中部着丝粒染色体Y 0.0843 2.0579 0.0735 0.0108 6.8063 12.81 亚端部着丝粒染色体2、核型分析图展示图1—1男性淋巴细胞染色体组型图图1—2女性淋巴细胞染色体组型图分析方法：根据原图，利用photoshop技术在原图上仔细在原图上映绘出染色体的模拟图，再测量其染色体的长短臂的长度（见下表）。