第十章 维生素的测定

实验^一、维生素 C 含量的测定一、 实验目的1、 掌握碘标准溶液的配制方法与标定原理。

2、 掌握直接碘量法测定维生素 C 的原理、方法及其操作。

二、 实验原理用I 2标准溶液可以直接测定维生素 C 等一些还原性的物质。

维生素 C 分子 中含有还原性的二烯醇基，能被 丨2定量氧化成二酮基，反应式如下：--------- O --------C C —C C O OH OH HHIC —CH 2OH + 12IOH由于反应速率较快，可以直接用I 2标准溶液滴定。

通过消耗I 2溶液的体积及其 浓度即可计算试样中维生素 C 的含量。

直接碘量法可测定药片、注射液、蔬菜、 水果中维生素C 的含量。

等物质的量关系：n( Vc)==n( 12)0.17 6(cV)|2 Vc %= m(试样)三、仪器和试剂 (1)仪器分析天平，250ml 锥形瓶，100ml 量筒，10ml 量筒，酸式滴定管，滴定基管架, 25ml 移液管 ⑵试剂医药维生素C 药片，HAc(2 mol/L)，淀粉(0.5%)，NaSO 标准溶液(0.1 mol/L)， 12标准溶液(0.1 mol/L)。

—O ---------C ——c —c II II I OOHCH 2OH + 2HI即:m(试样)V C %176(cV)i 210三、实验步骤1. 0.05 mol •L-1 I 2标准溶液的配制与标定将3.3g I 2与5g KI置于研钵中，在通风柜中加入少量水(切不可多加！) 研磨，待丨2全部溶解后，将溶液转入棕色瓶中，加水稀释至250mL摇匀。

用移液管移取25.00mL Na2SQ标准溶液于250mL锥形瓶中，加50mL水、5mL0.5%淀粉溶液，用丨2标准溶液滴定至稳定的蓝色，30s内不褪色即为终点。

平行标定三次。

2. 维生素C含量的测定准确称取约0.2g维生素C片(研成粉末即用)，置于250mL锥形瓶中，加入新煮沸过并冷却的蒸馏水100mL 10mL 2mol・L-1 HAc和5mL0.5%淀粉指定剂，立即用12标准溶液滴定至溶液显稳定的蓝色，30s内不褪色即为终点。

第十章维生素的分析测定第一节概述一、食品中的维生素及分类维生素亦名维他命，是维持人体生命活动必须的一类微量天然有机化合物。

维生素在体内的含量虽少，但不可或缺。

虽然各种维生素的化学结构以及性质不同，但它们却有着下列共同的特点：维生素或其前体化合物（维生素原）都存在于天然食物中。

一般在体内不能合成，或者合成量太少而不能满足机体的需求，也不能充分贮存在组织里，必须经常通过食物供给。

维生素在体内不提供能量，不参与机体组织的构成，主要参与机体代谢的调节。

它们参与维持机体正常的生理功能，日常需求量极少，通常以毫克（mg）或微克（ug）计算，当机体缺乏时，将会表现出不同的缺乏症。

许多维生素是辅基或辅酶的组成部分。

近年来的研究表明，一些维生素的作用不仅仅限于预防维生素的缺乏病，在预防多种慢性退化性疾病方面也发挥着不可忽视的营养保健作用。

维生素的种类繁多，而且这些有机物的结构也很复杂，理化性质及生理功能各异，有的属于胺类，有的属于醛类，有的属于醇类，还有的属于酚或醌类化合物等。

目前已确认的有30余种，其中被认为对维持人体健康和促进发育至关重要的有20余种。

由于它们的化学结构和生理功能差异很大，无法按照结构或功能分类。

一般按维生素溶解性能将它们分成两大类：一类是能溶于脂肪，叫脂溶性维生素（如A、D、E、K）；另一类是能溶解于水，叫水溶性维生素，目前主要有维生素C和维生素B族（如B1、B2、B6、C、H、B12等）。

有些物质在化学结构上类似于某种维生素，经过简单的代谢反应即可转变成维生素，此类物质称为维生素原。

脂溶性维生素均不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、苯及氯仿等脂溶性有机溶剂和脂肪中，因此命名为脂溶性维生素。

通常在食物中与脂类共存，进入消化道后，一定要有脂肪作为载体存在，并经胆汁乳化，人体才能吸收，吸收进血液以后，也要和某种蛋白质结合，才能运转到全身。

可见脂溶性维生素在机体内的吸收与机体对脂肪的吸收密切相关，且被吸收后大部分积存在体内，若脂溶性维生素摄入过多，可引起中毒。

维生素C含量的测定一．实验结果（1）2，6-二氯酚靛酚溶液的标定：1mL标准抗坏血酸溶液和9mL2%草酸溶液的滴定读数/mL 10mL2%草酸溶液(空白)的滴定读数/mL相差量(抗坏血酸消耗的量)/mL1mL染料氧化维生素C的量（K）/mg6.80 0.30 6.50 0.0308 （2）果汁溶液的滴定(水溶C)：次数 1 2取得的样液（果汁含量）/ml 0.25 0.25滴定读数/ml 5.40 5.35空白滴定读数/ml 0.30 0.30果汁所消耗的滴定液量/ml 5.10 5.05测定时样品中的维生素C含量/mg0.157 0.156样品中1mL的维生素C含量/mg 0.628 0.624样品中平均维生素C含量：0.626mg/mL。

（3）提取的果实的滴定：称取质量：4.9g橘子配成100mL溶液次数 1 2所取的液体量/mL 10 10滴定读数/mL 2.92 2.92空白滴定读数/mL 0.30 0.30样品所消耗的滴定液量/mL 2.62 2.62测定的样品中维生素C含量/mg 0.0807 0.0807样品中维生素C含量平均值：0.00807mg/mL样品名称样品质量（W）/g提取液总体积（V）/m滴定时所取滤液（V3）/mL滴定样液所用染料体积（V1）/mL滴定空白所用染料体积（V2）/mL1mL染料氧化维生素C的量（K）/mg维生素C含量（mg/100g）橘子 4.9 100 10 2.92 0.30 0.0308 16.5 二．实验思考2，6－二氯酚靛酚溶液滴定法是测定维生素C的经典方法，此法优点是简便，快速，准确地测量出维生素C的含量，但同样其存在很多缺点：1、生物组织中的脱氢抗坏血酸及结合抗坏血酸同样有维生素C的生理作用，用此法测不出来；2、生物材料提取液中含有其他还原性物质，也可使2，6－二氯酚靛酚溶液还原脱色而而引起误差；3、提取液中常存在的色素类物质干扰滴定终点观察，所以在选材时应选用无色，绿色或浅黄色等，当取材为紫色等时，可用活性炭，白陶土脱色处理。

维生素的定量测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握常见维生素的定量测定方法，了解维生素在人体健康中的重要作用，并通过实验操作提高实验技能和数据处理能力。

二、实验原理不同的维生素具有不同的化学性质和检测方法。

本次实验以维生素C 为例，采用碘量法进行定量测定。

维生素 C 具有还原性，能与碘发生氧化还原反应。

在酸性条件下，维生素 C 与碘反应生成脱氢抗坏血酸和碘化氢。

通过用已知浓度的碘溶液滴定样品中的维生素 C，根据碘溶液的消耗量，可以计算出样品中维生素 C 的含量。

三、实验材料与仪器1、材料新鲜水果（如橙子、柠檬等）、2%草酸溶液、标准碘溶液（005 mol/L）、淀粉指示剂。

2、仪器电子天平、容量瓶（100 mL、250 mL）、移液管（5 mL、10 mL、20 mL）、酸式滴定管、锥形瓶、玻璃棒、烧杯、研钵。

四、实验步骤1、样品处理选取新鲜水果，洗净、擦干，去皮后称取200 g，置于研钵中研碎，加入 2%草酸溶液 20 mL，搅拌均匀后转移至 100 mL 容量瓶中，用少量 2%草酸溶液多次冲洗研钵，洗液一并转入容量瓶中，定容至刻度，摇匀。

2、滴定用移液管准确吸取 100 mL 样品溶液于 250 mL 锥形瓶中，加入 20 mL 2%草酸溶液，1 mL 淀粉指示剂，立即用标准碘溶液滴定至溶液呈蓝色，且在 30 秒内不褪色，即为终点。

记录碘溶液的用量。

3、空白实验另取 30 mL 2%草酸溶液于 250 mL 锥形瓶中，加入 1 mL 淀粉指示剂，用标准碘溶液滴定至终点，记录碘溶液的用量（V0）。

五、实验数据记录与处理1、数据记录｜实验次数｜样品消耗碘溶液体积（mL）｜空白消耗碘溶液体积（mL）｜｜：：｜：：｜：：｜｜ 1 ｜ V1 ｜ V0 ｜｜ 2 ｜ V2 ｜ V0 ｜｜ 3 ｜ V3 ｜ V0 ｜2、计算维生素 C 的含量（mg/100 g）＝（V V0) × C × 0088 × 100 ／（m× 10)其中，V 为样品消耗碘溶液的平均体积（mL），V0 为空白消耗碘溶液的体积（mL），C 为碘溶液的浓度（mol/L），0088 为 1 mL 碘溶液（005 mol/L）相当于维生素 C 的质量（mg），m 为样品的质量（g）。

维生素的测定17.2 维生素的测定17.2.1 概述[2,3]维生素广泛存在于各种生物体中，其种类繁多，化学结构与生理功能各异。

因此无法按照结构或功能分类，按其溶解性可分为脂溶性(V A、V D、V E、V K)和水溶性(V B1、V B2、V B6、V B12、V P、V PP 、V C)两大类。

维生素是人体生命活动不可缺少的营养物质，它们一般在动物和人体内不能合成或合成数量少，满足不了动物和人体的需要，必须依靠从食物中摄取。

在食物中缺乏了任何一种维生素，人和动物都会发生特有的缺乏症状，如缺乏维生素A、B和C 时，可分别引起夜盲症、脚气和坏血病等，严重时足以致命。

某些维生素含量的高低，是评价农产品品质的重要指标之一。

维生素的分析是一项比较复杂的工作。

其样品分析的一般程序是：①用酸、碱或酶分解样品，使其中的维生素游离出来；②用溶剂进行提取；③分离干扰物质，对样液进行分离提纯；④用适当的方法进行定量等。

维生素的测定方法，有微生物学测定法、生物学测定法等。

仪器分析的方法有分光光度法、荧光分析法、薄层层析法、高效液相色谱法等。

维生素的分析方法很多，选用方法时应根据样品的品种、类型、待测维生素的性质、含量以及干扰物质多少等因素来决定。

下面重点介绍维生素C、维生素B1和B2以及作为维生素A原的b-胡萝卜素的测定。

维生素C又称抗坏血酸，其纯品为白色无臭结晶，熔点为190~192℃，溶于水或乙醇中，不溶于油剂，在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件下较稳定。

还原型(L-抗坏血酸)可被氧化为氧化型(L-脱氢抗坏血酸)，还有一定的生理作用，如果进一步水解则生成2,3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。

总抗坏血酸包括还原型、氧化型抗坏血酸和2,3-二酮古乐糖酸。

根据它具有的还原性质可以测定V C的含量。

常用的测定方法有2,6-二氯靛酚法、2,4-二硝基苯肼法、铅-硫化氢法、碘酸法以及荧光分光光度法。

2,6-二氯靛酚法用于测定还原型V C，其它方法多用于测定总V C的含量。

维生素测定维生素A有两种。

一种为维生素A醇；另一种是β-胡萝卜素，在人体的小肠和肝脏中可以转变为具有活性的维生素A。

[检测方法]高效液相色谱法。

[参考值]0.5～2.1μmol/L。

[临床意义]①维生素A能促进生长发育，维持上皮组织的正常结构与功能，参与视觉作用，增强皮肤黏膜屏障作用，从而抵御表皮的角化等生理作用，以眼、消化道、呼吸道等上皮组织尤为明显。

②增高见于婴儿自发性高钙血症、维生素A中毒症、慢性肾小球。

肾炎、肾病综合征、糖尿病、黏液性水肿等。

③降低见于夜盲症、干眼病、肝炎、肝硬化、胰腺功能低下、吸收不良综合征等。

二、维生素B1(Vit B1)测定[检测方法]速率法。

[参考值]94～271μmol/L。

[临床意义]①维生素B1在肝脏与焦磷酸反应生成硫酸焦磷酸酯(TPP)，TPP是α-酮酸氧化脱羧酶系的辅酶，参与α-酮酸氧化脱羧作用，对维持正常糖代谢和神经、肌肉功能具有重要意义。

②维生素Bl缺乏时糖代谢中间产物丙酮酸因氧化受阻而聚集，从而产生机体神经组织的能量来源障碍，发生脚气病，表现为肢端麻木、肌肉萎缩、下肢水肿等。

此外，可发生胆碱酯酶的活性增高，影响神经传导，引起胃肠道蠕动减慢、消化液分泌降低，出现食欲不振、消化不良等症状。

③维生素B1缺乏症患者主要发生在以精米为主食的地区。

维生素B1降低常见于脚气病、多发性神经炎、心力衰竭、甲状腺功能亢进症、腹泻等。

三、维生素B2(Vit B2)测定[检测方法]荧光法。

[参考值]70～100μmol/L。

[临床意义]①维生素B2在体内的活性形式有两种，即黄素单核苷酸和黄素腺嘌呤二核苷酸。

均为体内氧化一还原酶的辅酶，在生物氧化过程中起着递氢体的作用。

能促进蛋白质、糖、脂肪的代谢，也能降低心脑血管的发病率，尚有利尿消肿，预防癌症的作用。

②维生素B2降低常见于角膜血管化、脂溢性皮炎、阴囊炎、口角炎、舌炎、唇炎、口腔黏膜溃疡等。

四、泛酸(Vit B3)测定[检测方法]比色法。