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《植物种苗脱毒技术》学历案一、学习主题植物种苗脱毒技术二、学习目标1、了解植物病毒的危害及传播方式。
2、掌握植物种苗脱毒的基本原理和常见方法。
3、学会运用植物种苗脱毒技术解决实际问题。
三、学习资源1、教材：《植物病理学》、《植物生物技术》。
2、网络资源：相关的科普文章、视频资料。
四、学习过程（一）植物病毒的危害及传播1、植物病毒的危害植物病毒是一类能够引起植物病害的病原微生物。
它们会导致植物生长发育异常，如叶片变色、畸形、植株矮化、果实品质下降等，严重时甚至会造成植株死亡，给农业生产带来巨大的损失。
例如，烟草花叶病毒会使烟草叶片出现黄绿相间的斑驳，降低烟叶的产量和质量；马铃薯 Y 病毒会导致马铃薯块茎变小、畸形，影响马铃薯的产量和商品价值。
2、植物病毒的传播方式植物病毒的传播方式多种多样，主要包括以下几种：（1）介体传播：昆虫、螨类、线虫等生物介体可以携带病毒在植物之间传播。
例如，蚜虫可以传播多种植物病毒，如黄瓜花叶病毒、桃蚜传花叶病毒等。
（2）汁液接触传播：在农事操作过程中，如修剪、嫁接、移栽等，植物的汁液相互接触，容易导致病毒传播。
（3）种子和花粉传播：有些病毒可以通过种子或花粉进行传播。
例如，大麦条纹花叶病毒可以通过种子传播，玉米矮花叶病毒可以通过花粉传播。
（4）土壤传播：某些病毒可以在土壤中的病残体上存活，并通过土壤中的线虫、真菌等传播给健康植株。
（二）植物种苗脱毒的原理植物种苗脱毒的基本原理是利用植物细胞的全能性，即植物的每个细胞都具有发育成完整植株的潜能。
通过一定的技术手段，去除植物体内的病毒，培养出无病毒的种苗。
由于病毒在植物体内的分布不均匀，在根尖和茎尖等分生组织区域，病毒的浓度相对较低或不存在。
这是因为分生组织细胞分裂速度快，病毒在细胞内的繁殖速度跟不上细胞分裂的速度，而且分生组织区域缺乏维管组织，病毒难以传播。
因此，通过切取植物的茎尖或根尖进行培养，可以获得无病毒的种苗。
（三）植物种苗脱毒的方法1、热处理脱毒热处理脱毒是利用病毒和寄主植物对高温忍耐性的差异，将感染病毒的植物材料在高于正常温度的环境中处理一定时间，使病毒失去活性或钝化，而植物材料仍然保持活力，从而达到脱毒的目的。
浅谈组培苗的脱毒及应用植物在生长过程中几乎都会受到病毒的侵染，尤其是无性繁殖的植物，病毒严重影响果树、蔬菜、花卉和树木等植物的生长发育，造成产量降低、品质下降，严重时甚至造成植物的死亡，给农业生产造成巨大的经济损失，全世界每年因病毒造成的经济损失中，粮食作物达200 亿美元，经济作物达600 亿美元[1]。
第九次国际病毒委员会公布的病毒数量达到了2000 多种，归属于6 个目87 个科19 个亚科349 个属。
1 植物病毒的传播方式及为害病毒的传播途径多种多种，如昆虫传播、土壤传播、机械传播、无性繁殖材料传播，甚至有些病毒可以通过种子传播。
植物感染病毒之后主要表现为内部症状和外部症状2 个方面：内部症状主要有组织病变坏死、茎部微管组织和叶部坏死、产生激素、引起组织增生或产生各种类型的内含体，植物正常的生理代谢受到干扰，叶绿素、花青素及激素等的产生受到改变；外部症状主要有变色、坏死、畸形等相应的异常症状。
植物感染病毒造成的经济损失是比较大的，如葡萄的扇叶病毒可使葡萄每年减产10%～15%，非洲可可树的肿枝病可使产量减少50%以上，马铃薯的退化病毒可使产量减少50%～70%。
对于观赏性的植物，病毒导致花朵变少变小，甚至畸形、变色，从而失去观赏价值。
2 植物脱毒的方式2.1 茎尖分生组织培养脱毒1952 年Morel 等从感染花叶病毒和斑萎病毒的大丽花植株上切取茎尖分生组织进行培养，并获得脱毒苗。
茎尖分生组织培养脱毒苗是利用了病毒在植物体内分布不均匀的特点，病毒主要通过微管组织进行转移，而茎尖不含有微管系统，茎尖中的叶原基能分泌生长素抑制病毒的增殖，所以茎尖几乎不含有病毒或病毒的浓度很低，通过剥离茎尖或根尖进行培养，可获得脱毒苗。
剥去茎尖的大小是脱毒的关键，一般剥取0.1～1mm 茎尖进行培养，茎尖太小难于成活，茎尖太大脱毒效果差。
何新民等[2]对“红姑娘2 号”甘薯进行培养和脱毒研究，结果表明，剥去茎尖0.3～0.5mm 时，脱毒率为100%，当剥去茎尖0.6～0.8mm 时，脱毒率为93.3%。
现在许多科研单位和花木生产企业都已配置了组织培养室。
组培技术已成为重要的生物技术之一。
然而有的组培室组培苗的数量和质量却一直没有质的飞跃，究其原因，最主要的因素就是污染所造成的。
被污染后首先是生产成本的提高；其二，对植株造成伤害；其三，增加接种源受污染的机率。
一、常见污染源组织培养过程中的污染源主要有以下几种：（1）户外风大，菌类进屋机会多。
有风就有沙，有沙就有尘，有尘就有菌，菌尘共存，这是菌类进屋的主要原因之一。
（2）屋内太潮，菌类繁衍多。
需保持室内空气干燥，如使用空调“除湿”功能，也可减少真菌生长繁殖。
（3）人员带菌多。
在整个操作室内，人员可说是最大的带菌者，不管在毛发或是衣服等地方，都隐藏着数不清的菌类。
在进入操作室前，最好能对作业人员进行清洁处理，比如换上干净的白大褂，换上实验室的鞋，衣服鞋每星期洗一次，上超净台前手要用肥皂清洗两遍，接种前手再用酒精擦拭一遍。
（4）屋内不干净。
紫外线能杀灭或抑制真菌生长，因此应在每次接种前进行20分钟的紫外灯消毒。
（5）清理屋内带菌组培苗。
在植物病害中，真菌所引起的病害尤其严重，且因会产生孢子，随着空气飘散。
一旦落入适当的环境下，一粒小小的孢子便会扩大成一个菌落，污染整个组织培养瓶。
因此一旦有真菌污染的组培苗，就要用高压灭菌器彻底消灭，以防扩散。
（6）接种不正确。
不正确操作也会增加污染机率，如开盖太快，灭菌不够，操作过慢等。
接种过程应该轻开盖，快操作。
二、污染原因及污染苗抢救若污染菌类是零星分散在培养基中，则可确定是人为引起的污染，比如培养基灭菌不彻底；超净工作台长时间不换滤网，致使净化能力降低；接种用具灭菌不彻底；操作不正确，动作生硬缓慢，开瓶时间太久，接种台摆放物品杂乱，操作中心在人体范围之内；接种室长期不灭菌，菌类太多等。
若污染菌类是从材料周围长起，则可证明是植物材料带菌引起。
可能是接种用具灭菌不彻底，接种时材料被污染；或者是未及时发现污染苗，接种过程交叉感染等。
