实验四、 苯巴比妥钠和放线菌素D对小鼠肝脏细胞色素P-450含量的

药理学实验详解药理学实验详悉⼀、动物实验动物实验是根据研究⽬的，恰当地选⽤标准的符合实验要求的实验动物，在设计的条件下，进⾏各种科学实验、观察、记录动物的反应过程或反应结果，以探讨或检验⽣命科学中未知因素的专门活动。

动物实验是⼈类⽣存和发展的必要⼿段。

动物实验⽅法是进⾏动物实验时的各种实验⼿段、技术、⽅法和标准化操作程序。

也探讨实验动物科学中的减少、替代、优化问题。

实验动物的选择：⾸先应从⽣物医学研究的⽬的和实验要求来选择实验动物，进⽽考虑实验动物是否容易获得、是否经济、是否容易饲养。

⼀切实验动物应具有个体间的均⼀性，遗传的稳定性和容易获得三个基本要求。

标准化原则：根据对实验质量的要求选择标准化的实验动物。

动物实验中选择和使⽤与研究内容相匹配的标准化的实验动物标准化动物：是指遗传背景明确或来源清楚的，对其携带的微⽣物和寄⽣⾍实⾏控制，模型性状显著且稳定的动物。

在精确试验中，鉴于动物体内外的微⽣物和寄⽣⾍会⼲扰试验的结果，最好选择⽆菌动物或悉⽣动物，⾄少也应SPF级动物。

规格化原则：选择与实验要求⼀致的动物规格。

实验动物年龄与体重⼀般呈正相关性，可按体重推算年龄。

⼀般来说，实验动物年龄、体重应尽可能⼀致，相差不得超过10%。

不同性别的动物对同⼀药物的敏感程度是有差异的，如实验⽆特殊要求应选择雌雄各半做实验，以避免因性别差异所造成的结果误差。

特殊的⽣理状态下，如发情、妊娠及哺乳期，机体对实验的反应性发⽣改变。

★实验动物的选择应⽤应注意有关国际规范：GLP、SOP、“3R”（Replacement替代Reduction减少Refinement优化）(⼀)实验动物：系指遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微⽣物、寄⽣⾍实⾏控制，经科学⽅法⼈⼯培育⽤于科学实验的动物。

(⼆)实验动物的分类⽅法1、按遗传学控制分类*近交系：杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖，各条染⾊体上的基因趋于纯合，品系内个体差异趋于零。

6．细菌的转座因子可分为4类：插入序列、转座子、接合型转座子、某些温和性噬菌体(如Mu、D108)。

（√）7．所有质粒都是独立于染色体外、能进行自我复制的遗传因子。

（⨯）8．SD序列存在于核糖体结合位点中，一般为5个核苷酸组成的富含G和A的短小序列。

（√）9．第一个被测序的原核微生物：大肠杆菌；第一个被测序的真核微生物：毕赤酵母。

（⨯）10．终止子位于一个基因或一个操纵子的末端，提供转录停止信号的DNA区段。

终止子不能被转录成mRNA。

（⨯）三、填空题（共20分，每小题0.5分）1．外线具有杀菌和诱变双重效应。

随着紫外线照射时间的增加，杀菌率和突变率随之提高。

但当照射时间延长到某一程度时，继续延长照射时间，其杀菌率增加，突变率下降。

2．利用枯草芽孢杆菌的芽孢具有较强的抗高温能力和枯草芽孢杆菌产生蛋白酶和淀粉酶的特性，设计实验筛选高产酶活的菌株。

根据透明圈直径(H)和菌落直径(C)之比值(H/C) 可以初步确定酶活力，其比值越大，酶活力越高。

3．经UV诱变后获得的营养缺陷型常包括氨基酸、维生素、核酸三大类营养物质。

如果要对缺陷株的具体营养要素化学组成进行确定，通常需采用生长谱法测定。

4．噬菌体的效价测定通常采用双层平板法计数单位体积样品形成的噬菌斑数量。

其中底层是含2%琼脂的底层培养基，上层是向素琼脂中加入浓度较高的受体菌和一定体积的噬菌体裂解液。

5．微生物细胞经紫外线照射后，菌液要在黑暗或者黄光下进行操作，主要目的是防止光复活。

紫外线照射细胞后的存活率计算公式为诱变后活菌数*100/ 诱变前活菌数。

6．在制备营养缺陷型遗传标记的实验中，为了避免表型延迟要进行中间培养，而在二倍氮源基本培养基中加入青霉素，其目的是使青霉素杀死野生型细胞，从而浓缩缺陷型细胞。

7．证明DNA是遗传物质基础的实验是细菌经典转化和噬菌体的感染实验。

证明RNA是遗传物质基础的实验是烟草花叶病毒的拆开和重建实验。

以上这三个实验证明了遗传物质是核酸。

第十章 巴比妥及苯二氮杂卓类镇静催眠药物的分析计算题1.取苯巴比妥（C 12H 12N 2O 3=232.24)对照品用适量溶剂配成10μg/ml 的对照液。

另取50mg 苯巴比妥钠（C 12H 11N 2O 3Na=254.22）供试品溶于水，加酸，用三氯甲烷提取蒸干后，残渣用适当溶剂配成100ml 溶液，取1ml ，稀释至50ml 作为供试品溶液。

在240nm 波长处测定吸光度，对照液为0.431，供试液为0.392，计算苯巴比妥钠的百分含量？解：苯巴比妥钠=（24.23222.254）×10×10-3×（431.0392.0）×（150）×100=99.6%设计题1.已知某药物的结构式﹑分子式与分子量如下：(苯巴比妥)苯乙酸乙酯与碳酸二乙酯在碱作用下缩合生成苯基丙二酸二乙酯，然后与氯乙烷在乙醇钠存在下再次缩合，得到苯基乙基丙二酸二乙酯，再与尿素环合，即生成苯巴比妥。

第十一章 吩噻嗪类抗精神病药物的分析计算题1.盐酸氯丙嗪片的含量测定：取本品（标示量为25mg/片）10片，去糖衣后精密称定，重0.5130g ，研细，称取片粉0.0206g ，置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）70ml ，振摇使盐酸氯丙嗪溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml ，置100ml 量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，于254nm 波长处测定吸光度为0.453，按吸收系数E 1%1cm =915计算每片的含量。

解：标示量%=∑⨯⨯⨯⨯⨯⨯%111001000cm B W W D A ×100%= 0.453×100×100÷5×0.5130÷10×1000915×100×0.0206×25×100% =98.63%设计题1.请采用适当的化学方法将盐酸氯丙嗪（A)﹑奎氟奋乃静（B)和奋乃静（C)三种药物区分开。

2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)模拟试卷(答案在后面)一、多项选择题（本大题有30小题，每小题1分，共30分）1、以下哪些属于微生物检验技术的基本步骤？（）A. 样品采集与处理B. 微生物分离纯化C. 微生物鉴定D. 药物敏感试验E. 报告撰写2、在微生物分离纯化的过程中，以下哪种方法常用于分离革兰氏阳性菌？（）A. 霍夫曼平板法B. 沙氏平板法C. 肉汤培养法D. 培养基稀释法E. 稀释涂布平板法3、下列关于细菌培养基的选择与配制的说法正确的是：A. 所有细菌的培养都使用相同的培养基B. 选择培养基时需要考虑目标菌株的营养需求和生长条件C. 培养基配制完成后无需灭菌即可使用D. 鉴定肠道致病菌常用SS琼脂作为选择性培养基E. 血平板常用于初次分离培养细菌4、关于抗生素敏感性试验，以下叙述正确的是：A. 抗生素敏感性试验仅对革兰氏阳性菌有意义B. MIC（最小抑菌浓度）法可以定量测定细菌对抗生素的敏感度C. 纸片扩散法适用于所有临床分离菌株的药敏测试D. 抗生素敏感性试验的结果可以直接指导临床用药E. 在进行药敏试验前，必须确保菌悬液浓度符合标准5、下列关于细菌形态学的描述中，正确的是（）A. 革兰氏染色法可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌B. 细菌的形态学观察主要用于细菌的鉴定C. 细菌的形态学观察包括细菌的大小、形状、排列等D. 细菌的形态学观察可以用于判断细菌的致病性6、以下关于细菌生理学的描述中，错误的是（）A. 细菌的生长繁殖需要营养物质、水分、适宜的温度和pH值B. 细菌的新陈代谢包括同化作用和异化作用C. 细菌的同化作用包括自养和异养D. 细菌的异化作用包括光合作用和化能作用7、关于细菌L型的描述，下列哪些是正确的？A. 细菌L型是指在某些条件下细菌细胞壁缺陷而形成的形态B. L型细菌可以通过常规培养基生长C. 它们通常在高渗透压培养基上生长D. L型细菌对青霉素类抗生素敏感E. 由于细胞壁的缺失，L型细菌可以在不利环境下存活8、关于真菌的基本特征，以下哪几项说法是准确的？A. 真菌属于原核生物界B. 大多数真菌通过产生孢子的方式繁殖C. 酵母菌是一种单细胞形式的真菌D. 所有真菌都是多细胞有机体E. 真菌能够进行光合作用9、以下哪些微生物属于革兰氏阴性菌？A. 肠杆菌属（如大肠杆菌）B. 铜绿假单胞菌C. 链球菌属（如肺炎链球菌）D. 霍乱弧菌 10、以下哪些指标可以用来判断细菌的耐药性？A. 最小抑菌浓度（MIC）B. 敏感性试验结果C. 药物敏感度指数D. 耐药基因检测11、下列关于细菌的细胞壁成分及其功能的说法，哪几项是正确的？A. 肽聚糖是所有细菌细胞壁的主要成分。

实验题目：小鼠腹腔注射筒箭毒碱ED50的测定Determination of Cl-Tubocurarine's Median Effective Dose （ED50）【实验目的】了解ED50的测定方法、原理、计算过程与意义。

【相关理论】1．关于量反应，质反应：量反应是指个体上反应的强度并以数量的分级来表示；例如：血压、尿量等。

质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现；如：生死、有效或无效。

以阳性反应的出现频率或百分数来表示（全或无，阳性率）。

2．关于ED50，LD50，以及治疗指数:能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则为半数有效量ED50，ED50是质反应的参数。

若此效应为死亡时，则为半数致死量LD50。

治疗指数= LD50/ ED50=TI，该值越大越好，说明药物越安全.可用机率单位正规法或点斜法求出LD1 ，ED99 ；LD5 ，ED95。

3．肌松药分为去极化型和非去极化型两种。

去极化型肌松药的代表为琥珀酰胆碱，其肌松作用不能被抗胆碱酯酶药新斯的明拮抗，反而会加重。

非去极化型肌松药的代表为筒箭毒碱，其肌松作用能被新斯的明解救。

4．测定ED50，LD50的意义可计算治疗指数TI（LD50/ ED50），为临床安全用药提供指导。

【实验动物】小鼠（昆明种KM），雌雄各半。

【实验器材】铁丝网，铁架台，天平，注射器等。

【实验方法】应用点斜法测定ED50。

应用该方法测定ED50时，实验设计必须符合以下5点要求：1）动物以5~8组为宜；2）每组动物数须一致；3）各组给药剂量应呈现等比数列；4）各组给药剂量的公比r = 1.1~1.6；5）最大剂量（Dmax）组的阳性反应率须≥80%，最小剂量（Dmin）组的阳性反应率须≤20%【实验方法】1．预实验：目的是为了找出符合上述点斜法要求5）的Dmax和Dmin。

阳性反应判定标准：20min内小鼠落下3次（注意排除因互相拥挤而落下所造成的假阳性）。

实验设计与分析(建议用时：45分钟)1．(2015·云南昆明质检)试判断下列实验分别是属于什么对照类型？实验组和对照组分别是什么？(1)在“探究影响酶活性的因素”实验中：1号试管加1 mL 蒸馏水；2号试管加1 mL 盐酸；3号试管加1 mL NaOH 溶液。

(2)“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验。

(3)“肺炎双球菌转化实验”中以下两组实验：①S 型细菌DNA ＋R 型细菌――→混合培养S 型菌落＋R 型菌落；②S 型细菌DNA ＋DNA 水解酶＋R 型细菌――→混合培养R 型菌落。

(4)在“植物向重力性生长的向性”实验中，将玉米种子放置在不同的方向。

(5)在“动物激素饲喂小动物”的实验中，甲组饲喂甲状腺激素，乙组饲喂甲状腺激素抑制剂，丙组不饲喂药剂。

答案：(1)属于空白对照。

对照组为1号试管，实验组为2号和3号试管。

(2)属于自身对照。

实验处理前的对象状况为对照组，实验处理后的对象变化为实验组。

(3)属于条件对照。

①为实验组，②为对照组。

(4)属于相互对照。

没有单独的对照组，而是几个实验组相互对照。

(5)属于条件对照同时具备空白对照。

甲组为实验组，乙组为条件对照，丙组为空白对照。

2．(2015·广西桂林调研)研究人员用同种小鼠进行了某中药制剂、四环素(一种抗生素)对肝脏脂肪含量影响的实验。

实验设计和结果如下表所示(中药制剂和四环素都用生理盐水________色。

(2)现有健康的体重相近、发育状况相同的雌雄小鼠各100只，按上表的实验设计应如何对这些小鼠进行分组？________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

表中所示的实验自变量有________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

《生物制药技术》实验指导-实验一第一篇：《生物制药技术》实验指导-实验一《生物制药技术》实验指导实验一金霉素链霉菌培养基的制备（验证型）实验目的：1、学会培养基的配制2、掌握灭菌方法。

实验原理：金霉素链霉菌（Streptomyces aureofaciens）亦称“金色链霉菌”，放线菌门(Actinobacteria)，放线菌纲(Actinobacteria)，放线菌目(Actinomycetales)，链霉菌科(Streptomycetaceae)，链霉菌属(Streptomyces)。

在固体培养基上产生金色色素，故名。

其菌落为草帽型, 菌落直径一般为3～5毫米, 表面较平坦, 中间有隆起。

菌落开始为白色，长孢子后变青色。

在显微镜下可以看到短杆状的菌丝。

抗菌素工业上用以生产金霉素。

放线菌是一类介于细菌与真菌之间的单细胞微生物。

放线菌在土壤中分布最多，大多数生活在含水量较低、有机质丰富和微碱性的土壤中。

多数情况下，泥土中散发出的“泥腥味”就是由放线菌中链霉菌产生的土腥素造成的。

放线菌大都好氧，属于化能异养，菌丝纤细，分枝，常从一个中心向周围辐射生长。

因其生长具辐射状，故名放线菌。

放线菌能像真菌那样形成分枝菌丝，并在菌丝末端产生外生的分生孢子，有些种类甚至形成孢子囊，因而曾被误认是真菌。

但其菌落较小而致密，不易挑取。

不少菌种在医药、农业和工业上广泛应用，可产生抗菌素，现已发现和分离出的由放线菌产生的抗生素多达4 000多种，其中，有50多种抗生素已经广泛地得到应用，如链霉素、红霉素、土霉素、四环素、金霉素、卡那霉素、氯霉素等用于临床治疗人的多种疾病；有些可生产蛋白酶、葡萄糖异构酶；有的用于农业生产，如灭瘟素、井冈霉素、庆丰霉素等。

四环素类抗生素是由链霉菌生产或经半合成制取的一类广谱抗生素。

抗菌谱极广，包括革兰氏阳性和阴性菌、立克次体、衣原体、支原体和螺旋体。

品种主要包括金霉素、四环素和土霉素。

四环素早在1948年即开始用于临床，至今已有50余年历史。