5.植物呼吸强度的测定

测定植物组织呼吸的微量减压技术（瓦氏呼吸计法）一、实验原理瓦氏呼吸计测压法的基本原理是在一定密闭的、定温定体积的系统中进行样品气体变化的测定。

当气体被吸收时，气体分子减少，则压力降低。

相反，当产生气体时，则压力上升。

此压力的变化，可以在测压计上表现出来。

由此，可计算产生气体或吸收气体的数量。

由于在呼吸过程中吸收氧气和产生二氧化碳是同时进行的，所以从压力计上所观察的压力变化是氧的吸收量和CO2 产生量的总结果。

若在反映瓶中加入碱液（如KOH），则呼吸时所产生的二氧化碳被碱吸收。

因此可由压力的变化计算出氧的吸收量。

如果要测定组织放出CO2量时，则用水代替KOH，与用KOH测定时的结果相减，计算出组织放出CO2量。

二、仪器1 瓦氏呼吸计：压力计和反应瓶、恒温水槽和摇动装置2 其他：烧杯（50ml）、镊子、滤纸、电子天平、量筒（10ml）、吸管（1ml）、橡皮筋、细铁丝、凡士林、棉花、注射器、乳胶管、钳子。

三、试剂1 Brodie 氏溶液（Nacl 23g+牛胆酸钠5g+染料（甲烯蓝）+浓麝香草酚酒精溶液+水=500ml）2 20%KOH溶液100ml3 汽油、丙酮四、材料：发芽小麦种子五、方法步骤1．材料准备：取10粒发芽小麦种子，用滤纸吸干水，在电子天平上称重，记录（w1）2．用排水法测体积，记录体积（V2），小麦种子体积为V W=V2-V1 。

3．将小麦种子用滤纸吸干，放入反应瓶中，加50ml水；在中央小管中加入0.2ml碱液，用棉球把口上碱液擦干净，防止碱液沾到种子上。

在碱液中放入一小片滤纸，增加CO2吸收面积。

4．另一套压力计作温压计，以校正误差，用作温压计的反应瓶内加0.7ml水（和大致等于测定小麦种子体积的玻璃球）。

5．用凡士林将各连接处的磨砂涂好，反应瓶连在压力计上，橡皮圈固定。

将压力计固定在振荡板上，反应瓶浸入水中三分之二，检查各接口是否连接严密，不能漏气。

打开压力计活塞，振荡15 min，以使反应瓶内外温度达到平衡。

中国海洋大学实验报告2015年11月17号姓名：白洁专业年级： 2014级生物科学学号： 14050011001同组者：高远高学雨课程：植物生理学实验题目：呼吸酶的简易测定法一、实验目的学习植物呼吸作用的另一种测定方法,掌握用小篮子法测定植物的呼吸作用速率. 二、实验原理植物进行呼吸时放出CO2 ，测定一定的植物材料在单位时间内放出的的量CO2 ，即可测知该植物材料的呼吸强度。

测定植物释放CO2的量，可利用Ba(OH) 2溶液吸收呼吸过程中释放的CO2 ，然后再用草酸溶液滴定剩余的Ba(OH)2 ，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差，既可算出呼吸过程释放的CO2量。

三、仪器试剂1.器材：广口瓶呼吸测定装置、托盘天平、碱式滴定管、温度计。

2. 试剂：1）草酸溶液2）饱和氢氧化钡溶液3）酚酞指示剂3. 实验材料：刚萌发的小麦种子四、实验步骤1、取250mL广口瓶4个，用橡皮塞密封，塞下挂一尼龙窗纱制作的小篮，用于盛实验材料。

装置如右图：2、称取刚萌发的小麦种子5克两份，分别装入小篮内，将小篮子分别挂在已加有饱和Ba（OH）2溶液10mL的广口瓶内，立即塞紧瓶塞，防止漏气。

每隔10分钟轻轻地摇动广口瓶，破坏溶液表面的BaCO3 薄膜，以利于CO2 的吸收，反应半小时。

小心打开瓶塞迅速取出小篮,加入1～2滴酚酞指示剂,用草酸溶液滴定.直到红色消失为止,记录滴定用去的草酸溶液的体积。

3、另称取刚萌发的小麦5g两份，分别装入小篮内，放入加有一定体积水的250mL烧杯中，在电炉上加热煮沸10分钟，冷却后，将小篮子分别挂在已加有饱和的Ba（OH）2 溶液10mL的广口瓶内，按上述步骤进行测定，以此作为空白对照。

五、数据处理六、思考题1.为什么要用煮死的幼苗来做空白试验用煮死的种子做空白对照试验是为了减小环境误差2.请列举出其他的植物呼吸速率的测定方法并评价它们的优缺点水生植物可利用溶解氧浓度测定判断呼吸速率，这是因为水中CO2浓度测定不易，而水中氧浓度测定较简单。

实验名称：植物含水量的测定实验目的：掌握测定植物组织的含水量的方法实验原理：利用水遇热蒸发为水蒸汽的原理，可用加热烘干法来测定植物组织中的含水量。

植物组织含水量的表示方法，常以鲜重或干重 % 表示，有时也以相对含水量 % （或称饱和含水量 % ）表示。

后者更能表明它的生理意义。

实验材料与设备：（一）材料：植物鲜组织。

（二）仪器设备：天平（感量1/1000g）；烘箱；干燥器；剪刀；搪瓷盘；塑料袋；纸袋；吸水纸等。

实验步骤：⒈鲜重测定迅速剪取植物材料，装入已知重量的容器（或塑料袋）中，带入室内，用分析天平称取鲜重（FW）。

⒉干重测定提前把烘箱打开，温度升至100~105℃。

把称过鲜重的植物材料装入纸袋中，放入烘箱内，100~105℃杀青10min，然后把烘箱的温度降到70~80℃左右，烘至恒重。

取出纸袋和材料，放入干燥器中冷却至室温，称干重（DW）。

⒊饱和鲜重测定将称过鲜重的植物材料浸入水中，数小时后取出，用吸水纸吸干表面水分，立即称重；再次将材料放入水中浸泡一段时间后，再次取出，吸干表面水分，称鲜重，直到两次称重的结果基本相等，最后的结果即为饱和鲜重（SFW）。

若事先已知达到水分饱和所用的时间，则可一次取得饱和鲜重的测量定值。

⒋取得以上数据后，按公式计算组织含水量、相对含水量。

思考题：测定饱和含水量时，植物材料在水中浸泡时间过短或过长会出现什么问题？实验名称：植物组织水势的测定（小液流法）实验目的：学会用小液流法测定植物组织的水势实验原理：将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。

因溶液的浓度是已知的，可以根据公式算出其渗透压，取其负值，为溶液的渗透势（ψπ），即代表植物的水势（ψw）。

ψw＝ψπ＝－P＝－iCRT实验材料与设备：（一）材料：小白菜或其它作物叶片（二）仪器设备：1.带塞青霉素小瓶12个；2.带有橡皮管的注射针头；3.镊子；4.打孔器5.培养皿。

植物生理学实验考试试题一、名词解释：1、标准曲线：用标准溶液制成的曲线。

先配制一系列不同浓度的标准溶液, 在溶液吸收最大波长下, 逐一测定吸光度,然后用坐标纸以溶液浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标作图, 若被测物质对光的吸收符合光的吸收定律, 必然得到一条通过原点的直线, 即标准曲线。

4、氮素代谢：氮素及含氮的活体物质的同化异化和排泄，总称为氮素代谢。

5、淀粉酶：是水解淀粉和糖原的酶类总称。

6、真空渗入：指将叶片打孔放入注射器中，加水浸没，排出空气后用手指堵住前端小孔，同时把活塞向外抽拉，即可造成减压而排出组织中的空气，轻放活塞，水液即进入组织的方法。

7、离心技术：是根据物质颗粒在一个离心场中的沉降行为而发展起来的。

它是分离细胞器和生物分子大分子物质必备的手段之一，也是测定某些纯品物质的部分性质的一种方法。

8、电泳：各种生物大分子在一定pH 条件下，可以解离成带电荷的颗粒，这种带电颗粒在电场的作用下向相反电极移动的现象称为电泳。

9、同工酶：凡能催化同一种化学反应但其分子结构和带电性质不同的一组酶称为同工酶10、迁移率：指带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。

11、聚丙烯酰胺凝胶：是一种人工合成凝胶，是以丙烯酰胺为单位，由甲叉双丙烯酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。

20、超氧化物歧化酶（SOD）：普遍存在动植物体内的一种清除超氧阴离子自由基Ｏ2 的酶。

21、硝酸还原还原酶：是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸。

22、诱导酶：又称适应酶，指植物体内本来不含有，但在特定外来物质的诱导下诱导生成的酶。

如硝酸还原酶可为NO3-所诱导生成。

二、填空：1、测定植物可溶性蛋白质含量时，绘制标准曲线是标准蛋白质浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标。

2、常用的测定植物可溶性蛋白质含量的方法有：Folin-酚试剂法(Lowry 法) 、双缩脲法、考马斯亮蓝法和紫外吸收法。

植物呼吸强度的测定实验报告植物呼吸强度的测定实验报告植物是地球上最重要的生物之一，它们通过光合作用将太阳能转化为化学能，并释放氧气。

然而，植物也需要进行呼吸来获取能量，这是一个与动物呼吸相似的过程。

本实验旨在测定植物呼吸的强度，并探讨其受光照、温度和湿度等因素的影响。

实验材料和方法实验材料：1. 植物样本（如小麦苗、豌豆苗等）2. 塑料袋3. 针和胶带4. 电子天平5. 温度计6. 光照计7. 湿度计实验步骤：1. 选择一片健康的植物叶片，并将其剪下。

2. 将叶片放入一个干燥的塑料袋中，并用针在袋子上扎几个小孔。

3. 将袋子用胶带密封，确保没有气体泄漏。

4. 将袋子放在电子天平上，并记录初始质量。

5. 将袋子放置在不同的光照条件下，如强光、弱光和黑暗中，并记录每个条件下的时间和质量变化。

6. 重复步骤5，但在不同的温度和湿度条件下进行实验。

实验结果在强光条件下，植物呼吸的强度较高，质量减少的速度较快。

这是因为光照促进了植物进行光合作用，产生了更多的能量供植物呼吸使用。

在弱光条件下，植物呼吸的强度较低，质量减少的速度较慢。

而在黑暗中，植物无法进行光合作用，只能通过呼吸来获取能量，因此质量减少的速度最慢。

在不同的温度条件下，植物呼吸的强度也有所不同。

在较低的温度下，植物呼吸的强度较低，质量减少的速度较慢。

随着温度的升高，植物呼吸的强度逐渐增加，质量减少的速度也变快。

然而，当温度过高时，植物的呼吸会受到抑制，质量减少的速度会减缓。

湿度对植物呼吸的影响也很明显。

在较高的湿度条件下，植物呼吸的强度较低，质量减少的速度较慢。

而在较低的湿度条件下，植物呼吸的强度较高，质量减少的速度较快。

这是因为较高的湿度会导致植物叶片上的气孔关闭，减少了气体交换和呼吸过程。

讨论和结论通过本实验，我们可以得出以下结论：光照、温度和湿度等环境因素对植物呼吸强度有明显的影响。

在强光、适宜温度和湿度条件下，植物呼吸的强度较高；而在弱光、较低温度和湿度条件下，植物呼吸的强度较低。

《植物生理学实验》课程大纲一、课程概述课程名称（中文）：植物生理学实验（英文）：Plant Physiology Experiments课程编号：18241054课程学分：0.8课程总学时：24课程性质：专业基础课前修课程：植物学、生物化学、植物生理学二、课程内容简介植物生理学是农林院校各相关专业的重要学科基础课，是学习相关后续课程的必要前提，也是进行农业科学研究和指导农业生产的重要手段和依据。

本实验课程紧密结合理论课学习内容，加深学生对理论知识的理解。

掌握植物生理学的实验技术、基本原理以及研究过程对了解植物生理学的基本理论是非常重要的。

本大纲体现了植物生理学最实用的技术方法。

实验内容上和农业生产实践相结合，加强学生服务三农的能力。

实验手段和方法上，注重传统、经典技术理论与现代新兴技术的结合，提高学生对新技术、新知识的理解和应用能力。

三、实验目标与要求植物生理学实验的基本目标旨在培养各专业、各层次学生有关植物生理学方面的基本研究方法和技能，包括基本操作技能的训练、独立工作能力的培养、实事求是的科学工作态度和严谨的工作作风的建立。

开设植物生理学实验课程，不仅可以使学生加深对植物生理学基本原理、基础知识的理解，而且对培养学生分析问题、解决问题的能力和严谨的科学态度以及提高科研能力等都具有十分重要的作用。

要求学生实验前必须预习实验指导和有关理论，明确实验目的、原理、预期结果，操作关键步骤及注意事项；实验时要严肃认真专心操作，注意观察实验过程中出现的现象和结果；及时将实验结果如实记录下来；实验结束后，根据实验结果进行科学分析，完成实验报告。

四、学时分配植物生理学实验课学时分配实验项目名称学时实验类别备注植物组织水势的测定3学时验证性叶绿体色素的提取及定量测定3学时验证性植物的溶液培养及缺素症状观察3学时验证性植物呼吸强度的测定3学时设计性红外CO2分析仪法测定植物呼吸速率3学时设计性选修植物生长物质生理效应的测定3学时验证性植物种子生活力的快速测定3学时验证性1果实、蔬菜中有机酸含量测定3学时设计性植物抗逆性的鉴定3学时设计性改良半叶法测定植物的光合速率6学时综合性选修植物生理综合演示实验3学时综合、设计性演示合计36学时注：本实验课程总计0.8学分，合24学时，安排8次实验，其中验证性实验占62.5%，综合性、设计性实验占37.5%。

植物呼吸强度的测定(小篮子法)植物呼吸强度的测定可以通过小篮子法来实现。

小篮子法是一种比较简单的测定植物呼吸强度的方法，通常可以用于比较不同植物、不同生境以及不同时期植物的呼吸强度差异。

下面将详细介绍小篮子法的实验步骤。

实验材料：1. 植物样品：选择同种植物，在不同发育期采取新鲜嫩叶作为样品。

2. 小篮子：长9cm，宽8cm，深5cm。

3. 水杯和水：用于保持小篮子内的环境湿润。

4. 测量仪器：选用植物叶片呼吸仪以及原理一致的其他呼吸仪器。

实验步骤：1. 准备植物样品：选取同种植物，采取新鲜嫩叶作为样品，将叶片洗净并风干。

2. 准备小篮子：将小篮子浸泡在水中5-10分钟，让其充分吸收水分，然后再用干布擦干水份。

放入被测植物叶片。

3. 安装测量仪器：将小篮子放在植物呼吸仪或者其他选择的呼吸仪器中，如果是植物呼吸仪，则需要在呼吸仪的夹子上固定小篮子，保证小篮子内的植物样品与仪器接触良好。

将呼吸仪接通电源，按照仪器的说明书设置好实验参数。

4. 进行实验：实验前先将测量某一段时间内的呼吸强度（例如30分钟），记录下记录时间和样品编号等信息。

然后开始进行实验，将测量数据自动记录下来。

5. 数据分析：将实验数据导出，进行呼吸强度的计算，得到不同时间点上的呼吸强度信息。

实验注意事项：1. 植物样品必须是新鲜的，不能使用枯萎或者其他不健康的植株。

2. 小篮子必须充分湿润，否则会影响实验结果。

3. 实验室环境必须保持稳定，避免干扰测量结果。

4. 在进行实验前应该先进行校准，确保测量仪器准确可靠。

总结：小篮子法是一种比较简单的测定植物呼吸强度的实验方法，通过该方法可以比较不同植物、不同生境以及不同时期植物的呼吸强度差异。

在进行该实验的过程中要注意实验操作规范，以及保证测量数据的可靠性和精确性。