猪瘟抗体

问题 。
猪瘟 抗 体 检 测试 剂 盒 （ 胶体金法 ） ， 系采 用 国 际 最 选进 的胶体 金 免 疫层 析 技 术 检 测样 本 中猪 瘟 抗 体 的方法 。与 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法相 比 ， 监 测 结 果 没有 显 著 差异 ， 而 且 监测 费 用 低 、 工作 环 境 要 求 不 高 ， 技 术水 平 要 求
行了广泛的猪瘟抗体监测 ， 先后监测血清样本 １ ３ ８ ９ ５ 份 ，并根据监测结果对具体猪群制定 了合理 的免疫 程序和防治措施 ， 收到 了很好效果。下面简要谈一下
的母猪进行重复免疫 。 对初生仔猪进行抗体抽检。 仔 猪 出生 后 哺 乳 ４ ８小 时 内 ， 母 源 抗 体 滴 度达 到 最 高水
时 卫 生 防 疫
大 中 型 猪 场 猪 瘟 抗 体 监 测 的 几 点 体 会
车有权 高月林 刘 云 （ 黑龙江 农业职业技术学院 动物科学系 黑龙江佳木斯 １ ５ ４ ０ ０ ７ ）
猪 瘟 是 由猪 瘟 病 毒 引起 猪 和 野猪 的高 度 接触 性 传 染病 ， 未 免疫 猪 群 一旦 发 生 本病 ， 往 往 会 造 成毁 灭 性 的后 果 。 本 病 遍 布 全 世 界 ，世 界 动 物 卫 生 组 织 道 ，只有 得 了猪瘟 才 知 道 接种 的疫 苗 根 本没 有 起 到 免疫 作 用 。对 此 ， 我 们 通过 宣 传 、 培训 结 合 日常服 务
反复讲解 ， 使养殖户逐渐明白了其 中的道理 ， 并很快 接受 了抗 体监 测 的做 法 。
免疫 失 败 的原 因 主要 有 疫 苗 质 量 问题 和 免疫 时 间， 以及 注射 部位 不 正确 。在对 各 场监 测及 服 务 中我
们体会到 ， 疫苗质量没有问题 ， 问题 出在免疫时间和 注射方法上 。免疫 时间不正确 的问题上面已经提到 ，

猪瘟抗体快速检测试剂盒——（胶体金法）使用说明书【名称】通用名称：猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法）英文名称：Rapid Anti-CSFV Test汉语拼音：Zhuwen Kangti Kuaisu Jiance ShijiHe(Jiaoti Jin Fa)【用途】用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)抗体。

【实验原理】猪瘟抗体快速检测试剂盒（胶体金法），系采用胶体金免疫层析技术，检测样品（血清、血浆或全血）中猪瘟抗体的方法。

在玻璃纤维纸上预包被金标记灭活猪瘟抗原（Au-Agl），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被猪瘟抗原(Ag2)和兔抗猪瘟抗体。

当检测样品为阳性时，样品中猪瘟抗体与胶体金标记猪瘟抗原（Au-Ag1）结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的猪瘟抗原(Ag2)形成“Au-Ag1-猪瘟抗体-Ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗原则在对照线处与兔抗猪瘟抗体结合而富集显色。

阴性样品则仅在对照线处显色。

操作简便，快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。

【试剂盒组成】1.猪瘟抗体检测卡50头份2.说明书1份3.一次滴管50根【操作方法】1.用1.5ml样品管，采血0.5-1ml待检测血清自然析出或用离心机离心10分钟左右，使血清析出。

2.将检测卡平置于桌面上，用吸管吸取被检血清，在检测卡的椭圆形加样孔内加入2滴约80~100ul。

在室温下反应20分钟判定结果。

（检测卡如在4℃保存，必须恢复至室温后方可进行检测）【结果判定】阳性：对照线区（C）和检测线区(T)各出现一条紫红色线。

检测线(T)的颜色越深，表明猪瘟抗体的滴度越高。

阴性：只有对照线区（C）出现一条紫红色线。

无效：未出现紫红色线或只在检测区(T)出现紫红色线，对照线区(C)未出现紫红色线。

【诊断参考】被检样品加样后20分钟可与对照卡的色带滴度进行参考比较。

１ ２ ６
养猪 Ｓ ＷＩ Ｎ Ｅ Ｐ Ｒ Ｏ Ｄ Ｕ Ｃ Ｔ Ｉ Ｏ Ｎ（ ６ ）
２ ０ １ ３
猪 瘟 抗 体 的 几 种 常 用 检 测 方 法 概 述
李 娇 ， 王金 良ｔ ， 一 ， 沈志强 ，
（ １ ． 山东绿都 生物科技有限公司， 山东 滨州
中图分类号 ： ￥ ８ ５ ８ ． ２ ８ ５ ． ３ 文献标志码 ： Ａ
Ｅ — ｍａ ｉ ｈ ｌ ｉ ｊ ｉ ａ ｏ ＿ ｚ ｏ ｎ ｅ ＠１ ６ ３ ． ｔ ｏ ｍ
猪瘟疫苗 的首免 日龄 ， 为免疫程序 的制定提 供 了参 考依据嘲 。付少刚等采用 Ｉ Ｈ Ａ方法调 查 ２ ０ ０ ５ —２ Ｏ １ Ｏ 年银川市猪瘟疫苗 的免疫合格率 ，共采集 ２ ４ ３ ６份 免疫猪血清样品，检测结果显示 ， ２ ０ ０ ５ 年 免疫合格 率为 ４ ２ ％、 ２ ０ ０ ６年 免疫合 格率 为 ５ １ ． ５ ％、 ２ ０ ０ ７年 免 疫合格率 为 ６ ３ ． ４ ％、 ２ ０ ０ ８年 免 疫 合 格 率 为 ８ １ ％、 ２ ０ ０ ９年 免 疫合 格率 为 ８ ７ ％、 ２ ０ １ ０年 免疫 合格 率 为 ９ ０ ％，提 出 Ｉ Ｈ Ａ方法 可 实现对 猪瘟 抗体 水平 的监 测， 明确猪 瘟抗 体合格 率变化 特 点 ， 探 寻猪瘟 的发 生动态和流 行规律 ， 为指导和 制定猪瘟 防控措施提 供参考嘲 。Ｉ Ｈ Ａ方法操 作简单 、 检 测快速 、 无 需仪器 设备 ， 可作为猪瘟抗体检测 的一种方法 。但 Ｉ Ｈ Ａ检 测方法使用全病 毒作为抗原 ， 全 病毒抗 原制备过程 繁琐 、 受病 毒纯 化方 面的 限制 ， 纯化 效果较 差则试 验 的稳 定性和重复性均较差 ； 且检测 的血清样 品需 经过灭活 处理 ，血清 的质量 严重影 响检 测结果 ， 同 时存 在 肉眼判读 、 误 差大等 缺 点， 不适 合需 要准确 检测猪瘟 抗体水平 的流行病 学调查 ， 但 一般养殖场 及广 大养殖 户 可根据对 检测 结果 准确程 度 的实 际 需要选择应用 。 ２ 中和试 验 中和试验是将猪瘟病毒准 确定量 后 ，加 不同稀 释度 的被检血清，通过测定被检血清阻止病毒感染 培养细胞的能力而测定其抗体效价 。因猪瘟病毒在 细胞培养 中不产生细胞病 变， 故 需借助标记抗体 （ 如 荧光标记） 来检测抗原抗 体反应 的信号 （ 荧光抗体染 色检 查有无 荧光斑 的出现） 。李素等应 用 中和试 验 方法对 ６头仔猪猪瘟疫苗 免疫前后 的血清抗体进行 检测表 明， 中和试验方法检 测结果确 实、 特异， 能真 实 反映免疫猪群 的猪瘟抗 体水平 。中和试 验方法 涉及 细胞培养和显微镜观察 ， 故对试验 仪器 、 操作人

血清处理或保存不当（储存或 运输不当），如溶血样品可能会产 生高达20％的假阳性结果。因此， 通过ELISA检测的所有阳性和可疑 样品必须通过其他血清学替代试验 确认。
IB技术是用于蛋白质检测和鉴定 的快速、灵敏的检测技术。IB技术的 原理是抗原抗体的特异性结合。IB技 术中使用了覆盖有病毒抗原的纸条， 首先是抗原溶解、电泳分离以及转移 到薄膜上（通常是硝化纤维素膜）， 之后与特异性一抗反应，再与标记二 抗作用后，产生可直接观察的阳性反 应条带（见图1）。
ELISA是一种常用的检测技术， 广泛用于多种动物疫病的大规模血 清学调查。该方法的显著特点是灵 敏度高、特异性好、速度快、成本 低，结果清晰。借助于自动化设备 的使用，可以实现大量样品的快速 筛选。
ELISA使用标记物检测血清样品 中的ASF抗体。ELISA使用的标记通 常是某种酶。当抗原和抗体彼此结合 时，酶引起底物发生颜色变化，从而 鉴定ASF阳性样品。目前，多种用于 ASF抗体检测的间接或阻断ELISA已 实现商品化供应，或者由实验室“自 主”建立。
阳性样品在感染细胞的细胞质中显示特异性荧光
◎图2 间接荧光抗体（IFA）对ASF抗体的检测
73
非洲猪瘟防控专栏 African swine fever prevention and control column
☆中国畜牧业
进行确认。 二、间接荧光抗体试验(IFA)对
非洲猪瘟抗体的检测 该技术的原理是用具有细胞适
综上所述，目前可用的诊断 技术可通过综合病毒和抗体检测 来确诊ASF。实时荧光PCR是最广
阳性样品在感染细胞的细胞质中显示特异性红色染色结果
◎图3 间接免疫氧化物酶试验（IPT）对ASF抗体的检测
泛应用的病毒学诊断技术，可敏 感、特异、快速地实现ASFV核酸 的检测。

猪瘟病毒IgG抗体检测ELISA试剂盒使用说明书
【产品简介】
猪瘟病毒（CSFV）是目前危害国内养猪业一种高发病率、高死亡率和高度接触传染的病毒。

在猪的免疫预防工作中,最值得关注的就是强化免疫的接种时机问题。

在过高的抗体水平进行免疫,过高的抗体水平还会中和疫苗,影响疫苗的免疫效果,导致免疫失败；在较低的抗体水平进行免疫,又会出现抗体保护真空期,威胁猪的健康。

该试剂盒检测反映抗体水平，利于指导免疫时机。

【使用时间】
①猪瘟病毒疫苗免疫后免疫效果监测
②平时的抗体监测
【检测原理】
包被经纯化的猪瘟病毒，抗猪IgG抗体作为酶标记抗体，利用间接法来检测被检材料中是否含有猪瘟病毒抗体。

【产品内容】
7. 剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

【保存与有效期】
于2～8℃避光保存，有效期自成品检定合格之日起为12个月。

2. 非瘟抗体
抗体：人和动物的血清中，由于病菌或病毒的侵入而产生的具有免疫功能的蛋白质。抗体只能 跟相应的抗原起作用，如伤寒患者体内所产生的抗体只能对伤寒杆菌起作用。
—— OIE：世界动物卫生组织，国际兽医局
3. 非瘟抗体检测意义
样品编号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39
猪场非洲猪瘟抗体检测
非瘟抗体检测
➢ 野毒和疫苗毒 ➢ 非瘟抗体 ➢ 临床参考：
➢ 大栏单栏或多栏出现呼吸道症状，如咳喘、腹式呼吸异常出现。 ➢ 猪只采食下降，发热，关节肿胀、弱猪增多，死亡等。 ➢ 其它疑似野毒感染症状
野毒及“疫苗毒”有 3 种决策分类：
（1） 野毒： p72 阳性且 CD2V/MGF 阳性； （2） “I 型疫苗毒”： p72 阳性且 CD2V 或者 MGF 之一阴性，则为单基因缺失苗，要 做基因型鉴别，如果为基因 I 型； （3） “低毒力疫苗毒”： p72 阳性，且 CD2V/MGF 均为阴性，则为双基因缺失苗。
结果判定
阳性 阴性 阴性 阴性 阳性 阴性 阴性 阳性 阴性 阳性 阳性 阳性 阳性 阴性 阴性 阳性 阴性 阴性 阳性 阴性 阴性 阴性 阳性 阴性 阴性 阳性 阴性 阳性 阳性 阳性 阳性 阴性 阴性 阴性 阴性 阳性 阳性 阴性 阴性
非洲猪瘟抗体检测试剂盒（磁微粒化学发光法）来自上海鸣捷生物科技有限公司； 判定标准：ASFV抗体滴度≥20判定为阳性，滴度＜20判定为阴性
背景资料
后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪 后备母猪

猪瘟抗体检测方法猪瘟，即猪繁殖与呼吸综合征，是由猪瘟病毒引起的一种严重的传染病，对猪群健康和养殖业产生了重大影响。

为了及时控制疫情和保护养殖业的发展，猪瘟抗体检测方法非常重要。

猪瘟抗体检测方法主要包括传统血清学法和分子生物学法。

传统血清学法主要是利用抗原-抗体反应原理进行检测，分子生物学法则是通过检测猪瘟病毒核酸进行诊断。

下面我将详细介绍这两种方法。

传统血清学法中最常用的方法是血清病毒中和试验。

该方法通过将待检血清与猪瘟病毒进行反应，观察病毒和抗体的相互作用。

这种方法的优点是简单、经济、可靠，适用于大规模的抗体检测。

但是存在一些局限性，如需要对待测血清和病毒进行配对，病毒株的选择和制备需要一定的经验和技术，且过程较为繁琐。

另一种传统血清学方法是酶联免疫吸附试验（ELISA）。

该方法利用特异性的酶标记抗体来检测待测血清中的猪瘟病毒抗体。

ELISA具有操作简单、灵敏度高、多重样品同时检测等优势。

此外，还可以通过改变试剂盒中抗原的性质，进一步检测不同类型的抗体，如IgM和IgG。

但是，该方法需要进行酶标仪等专门设备的检测，成本较高。

分子生物学法主要是通过检测猪瘟病毒核酸来进行诊断。

常用的方法包括聚合酶链反应（PCR）和实时荧光定量PCR（RT-qPCR）。

PCR是一种高度敏感且特异的检测方法，通过扩增待检样品中的病毒核酸，可以快速检测出病毒的存在。

RT-qPCR则能实时监测PCR反应的过程，具有更高的精确性和灵敏度。

此外，PCR还可以进行基因测序，用于病毒株的分型和溯源研究。

然而，分子生物学法虽然灵敏度高，但仍存在一些局限性。

首先，该方法对设备和技术要求较高，需要专业的实验室和操作人员。

其次，由于病毒基因组的变异性较大，需要选择合适的引物和探针，以确保检测的准确性。

此外，病毒核酸在环境中的稳定性较差，易受到污染和降解的影响，可能导致假阴性结果。

综上所述，猪瘟抗体检测方法在疫情监测、疫苗评估和动物检疫等方面具有重要作用。

毒 脾 淋 苗 ，剂量 分 别 为３ 份 、 头 份 ； 头 ２
选 育 ． 华猪 许 多优 良性 状 将 会 改 变 ． 成
甚 至 有 的 优 良基 因 将会 流失 ３ 成 华 猪 的 保 种 对 策
报 告 的传 染病 ， 养 猪业 危 害 极大 近 对
几 年 来 潼 南 县 通 过 加 大 免 疫 力 度 防 控 猪 瘟 的发 生 ．为 了检 测 猪 瘟免 疫 效果 ．
（ ） 规模 化猪 场 和 和散 养 户 中采 集 街 的
猪 瘟 免 疫 接 种 ２ 后 的 猪 血 清 ８ ６ ． １ｄ ２份
性 传染 传 染病 有 高度 传染 性 和致 死 具
性。 被世 界 动 物卫 生组 织 ｆＩ １ 为必 须 ０Ｅ列
根 据 养 殖 规模 和免 疫 情 况 分 为 ３ 组 ． 个 其 中第 一 组 ： 猪 场 血 清 １２ ， 采 种 ３份 供 集 血 清 的 猪 免 疫 接 种 ２ 猪 瘟 兔 化 弱 次
计 划 提供 依 据 ． ０ １ １月 在潼 南 县 于２ １年 ０ ２个镇 （ ） ２ 街 的规 模 化 猪 场 和 和 散 养 户
采血 进行 猪 瘟免 疫 抗 体进 行 了检 测 ． 现 将检 测结 果 分析 报告 如 下
１ 材 料 与 方 法 １ １ 材 料 ．
作 目前 ． 华 猪 保 种 场 建 于 上世 纪７ 成 ０ 年 代 ， 产 设 施 、 种 设 备 仪 器 、 污 生 育 粪
化 猪 场 和 和 散 养 猪 场 共 采 血 ７ ６ ．采 用 正 向 间接 血 凝 试 验 对 猪 瘟 免 疫 抗 体 进 行 检 ８份 测 。 果 表 明 ， 瘟 免疫 抗 体 合 格 率 平 均 为８ ． ％ ， 模 化 猪 场 猪 瘟 免 疫 效果 较 好 ， 结 猪 ０９ ９ 规 部 分 散 养 猪 场 猪 瘟 免 疫抗 体 水平 较 低 ， 对 免 疫抗 体 水平 较 低 的 原 因进 行 了分 析 。 并 关键 词 猪瘟 免 疫 抗 体 检 测 效 果 分析

２ 结 果
三 个试 验 组 的猪 瘟 免 疫 抗 体 见 表 １和 图 １ 。仔 猪 猪 瘟 母 源抗 体 较 高 ， 相 对 于 Ｂ组 、 Ａ组 Ｃ组 低 些 。 一 免 后 ２周 ， 体 抗 水 平 低 于母 源 抗 体 ， 免 后 ５周 ， 体 水 平 仍 在 下 降 。二 免 一 抗 后 ２ ， 体仍 维持 低 水 平 ， 二 免 后 ３周 有 所 上 升 ， 周 抗 至 至二 免 后 ６ 上升 到 较 高 水平 且 持 续 相 当长 的时 间 。 周
猪瘟 （ ｌ ｓ ａ ｓ ｉｅ ｅ ｅ ） 由 猪 瘟 病 毒 （ ｌ ｉ ｌ ｗｉ Ｃａ ｉ ｌｗｎ ｖｒ是 ｓｃ ｆ Ｃａ ｃ ｎ ｓ ａｓ ｅ ｆ ｅ ｉ ｓ引 起 的 一 种 急性 、 性 高 度 接 触 性 传 染病 ， 世 界 ｅｒ ｒ） ｖ ｖｕ 热 被 动 物 卫 生组 织 （ Ｅ Ｙ 为 Ａ类 法 定 的 传 染 病 之 一 ， 严 重 危 ＯＩ ）０ 是 害 我 国养 猪 业 的 重要 传 染 病 。近 年 来 ， 着 市 场 大 流 通 等 多 随 种 因 素 ， 国猪 瘟 疫 情 又 有 重 新 上 升 趋 势 ， 病 特 点 呈 现 多 我 发 元 化 的状 态 ， 影 响 猪 瘟 疫 苗 免 疫 效 果 的 因 素 是 多 方 面 的 。 而 我 们 上海 地 区 通 过招 标 采 购 猪 瘟 活 疫 苗 （ 淋 源 ） 已 在 全 市 脾 ， 使 用 猪瘟 活 疫 苗 （ 淋 源 ） 为 了更 好 地 了解 上 海 地 区 使 用 的 脾 ，
表 １ 猪 瘟 的 免 疫 抗 体
三 种 猪 瘟 活疫 苗 （ 淋 源 ） 免 疫 效 果 ， 制 定 本 试 验 方 案 ， 脾 的 特
具 体 方 法如 下 ：

盒 ” 和最 近 由厦 门进 出境检 验 检 疫 局 与厦 门大 学抗 癌 研 究 中心 台作 研 制 的猪 瘟抗 体 免 疫 金标 试 纸 条 三 种方 法 最 近 ， 我们 分 男 应 用上 述 方 法对 采 自长 泰 、 Ⅱ 龙海 地 区猪 场 的 １ ０头 份 猪血 清进 行 检测 ， ２ 现报 告如 下 ： １ 材料 与 方法 １ １ 被 检猪 血 清 采 自福建 省 龙海 ． 苗 圃猪 场 、长 泰联 盛 猪场 、龙 海 白水猪 场 猪血 清共 １０ ２ 头 份 中母 猪 ３ 其 ３傍 ， 乳仔 猪 ５ 哺 Ｏ份 、 子 猪 ３ 架 ７份 。 １ ２ 检 测 试 剂 １ ２ １ 液 体猪 瘟 正 向问 接 血 凝 抗 ． ． 原 试剂 盒 ， 中国农 科 院兰州 兽 医研 究 所提 供 由 １ ． ２ ２ 猪瘟 Ｄ Ｔ—Ｅ Ｉ Ａ试 剂 盒 、由中 国农科 院 哈 尔 Ｏ ＩＳ
Ｈｕ ｎ 鲫 ＿ ｗ ｕ ｗ蛆 曲 叩 Ｆ 叼 ’ ａｇＹ ０ ８ ． ｎ
Ｃｈ ｎ ｎ ｈｏ Ｙ ａ Ｊａｎ ｉｍ．ＮｉＺｉ ｉｎ ｅ Ｘｉ ｚ ｎｇ ． ｈ ｉ 曲 ｉ ｍ ａ
Ｅ １Ａ和金标 试 纸 测得 猪 瘟抗 体 阳性 ３ ＬＳ ４份 ， ３ 该 ４份血
维普资讯
《 建 畜 牧 兽 医 》 ０ ２年 第 ３期 Ｖｏ ２ ０ ３ 福 ２０ ｌ ４ Ｎ
３
１ ７口 成 鲍 和 鲍 苗 池 发 病 ． 过 隔 离 ， 灭 发 病 鲍 鱼 ． 经 扑 加
强消毒 。药物 浸泡 等措 施 把疫 情 扑灭 至 试验 结束 ． 成 活率 达 ７ ％ 。以此 说 明 ， 防治 措施 适 用 ， 效 ０ 本 有
８ 讨论 ８１ １９ ９ ９年 ２月 ，东 山 县 人 工 养 殖 九 亍 Ｌ

如何确定猪瘟抗体是疫苗产生还是野毒感染？如何鉴别检测出的抗体是由于注射疫苗产生的保护性抗体，还是由于感染猪瘟病毒产生的抗体?福州大北农生物技术有限公司曾亮明张渊魁鉴于我国制备猪瘟疫苗所用种毒是C株，所以靠抗体检测无法鉴别猪瘟疫苗毒和猪瘟野毒。

在疫苗接种剂量正常的情况下，可以根据抗体水平高低和整齐度粗略判断是否是猪瘟野毒刺激产生的抗体。

当抗体水平异常升高且抗体整齐度很差时可初步认为有猪瘟野毒存在。

此外，由于疫苗毒在猪体内的存留时间不超过3周，因此，如要判断猪群是否感染猪瘟野毒，可在猪瘟弱毒疫苗免疫3周后进行猪瘟抗原检测。

瑞普保定生物药业有限公司技术总监尤永君目前，国内还没有适合各种猪瘟疫苗的标准方法。

现在国内存在的所谓基因缺失苗，该疫苗就是对猪瘟兔化弱毒进行改造，使其缺失某一段基因(如E0)或某一段特殊片段(如E2)，但其免疫原性不改变，以缺失的基因所表达的蛋白作为诊断抗原，能够区别疫苗接种猪和自然感染猪产生的抗体。

中牧实业股份有限公司生物制品商务部经理苏晓齐通过观察群体抗体水平的离散度来初步区分判断疫苗抗体和野毒抗体是一种简单适用的方法。

牡丹江金源种猪繁育有限责任公司技术总监李国友距离做猪瘟疫苗比较近的时间所出现的抗体(据秦玉明2003年报道，利用RT-PCR检测，接种猪瘟兔化弱毒自接种后2天一直到接种后16天，在接种猪的血液中均检测到病毒RNA存在，而接种后20天血液中未检测到病毒RNA分子)，很难鉴别是疫苗抗体还是感染猪瘟病毒产生的抗体。

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会万遂如当前使用中监所提供的猪瘟单抗ELISA试剂盒就可有效的区别猪瘟疫苗与野毒感染所产生的抗体。

华中农业大学动物医学院教授何启盖由于猪瘟疫苗毒株致弱机理没有完全了解，疫苗毒株和野毒之间没有明显的大段基因缺失导致抗原组成的差异;虽然，已经有实验室获得了区分猪瘟野毒和弱毒的单克隆抗体，有望用于区分石门野毒株和兔化弱毒株，说明这两种毒株之间还是由一定的抗原差异，但是目前临床上无法区分疫苗免疫和猪瘟野毒感染的抗体。

猪瘟 是 由猪瘟 痫 毒 引起猪 的一 猪瘟 正 向间接血凝试 验 ， 格按 免 疫抗体 水平 较 高； 严 散养户 、 规模 小 种急性 、 热性 、 触性传染病 ； 基本 照诊断试剂说 明书的要求进行操作。 场 的防疫 意识较淡薄 ， 接 其 免疫工作不到 特 为发病 急， 高热稽 留， 腹泻 ， 粪便 １ ３ 判 断 标 准 ． 位， 因而 抗体 水平 较低 ， 在 一定 的 存 恶臭 ， 广泛 的 出血 、 梗塞 和坏 死等 病 在 阴性、 阳性血清稀 释液对 照孔 隐 患 。 变 ； 目前 危 害养 猪 业 的 主 要 传 染 病 合 格 的 前 提 下 ，观 察 待 检 血 清 各 孔 ， ３ ２ 针对散 养户 、小规 模场 的猪瘟 是 ． 之一 。 以呈现“ ＋ 凝 集 的最 大稀 释 倍数 为 免 疫抗体水平较低 的现 状 ， 十” 要求 畜主 为 了 进 一 步 了解 和 掌 握 当 前 我 该 份血清 的抗体 效价 ， 受检血清抗 体 及 时进行 猪瘟疫 苗补 免， 并制定 免疫 市养猪业 的猪瘟 免疫效价 ， 定合理 效价 ≥３ 判 为合格 ， 制 ２ 存栏 生猪免疫抗 程序供养猪户参考 。 ３ ３ 在 流 行 病 学 调 查 中 ， 临床 检 查 ． 的免疫程序。为当地 的动物 防疫部 门 体合格率 ≥７ ％ ０ 判为合格 。 ５ 询 和 养猪场 制 定防控 措施 提供 科 学 的 ２ 结 果 对 ３０份血清 的猪瘟 免疫 发现 有疑似猪瘟病 猪， 问场主 得知 依 据 ，我 所 于 ２ ０ ０ ９年 ８月对 全 市 范 抗 体 的 检 测 结 果进 行 了统 计 ， 计 结 每 年都 按要 求 做过猪 瘟 疫苗 接种 工 统 围内 的各 类 型猪场 进行 了猪瘟 免疫 果 见表 ｌ 作， 是否存在 带毒的母猪则须进 行猪 抗体 的检测。 现将此 次猪瘟 免疫抗体 表１ 鹤 山市２０ 年８ ］ 瘟 强 毒 的监 测 和 净 化 。 ０ ９ ７猪场猪瘟免疫抗 检 测 结 果 报 告如 下 。 ３ ４ 进 行猪瘟 的免疫接种 ，采 取定 ． 体 检 测 结 果 １ 材料与方法 根据监测 的结果 猪 场 场 样 品 合 格 不 舍 舍格 率 期对猪群免疫 监测 ， １１ 材料 ． 并严 格贯 规 模 数 数 数 格 数 （ ） ％ 制 定适合本场 的免疫程序 ， １ １１ 血 样 来 自全 市 １ 镇 ３ ． ． １个 ３ 彻 执行。 个 养 猪 场 的血 清 ３ ０份 。 ５ ３ ５ 做好 猪 瘟免 疫 工作 的 同时 ， ． 应 １ １２ 试 剂 猪 瘟 间接 血 凝 诊 断 ．． 注 意其它 免疫抑制性疾病 的影 响 ， 如 蓝耳病、 狂犬病、 伪 圆环 病 毒 感 染 等 。 液、 猪瘟 标准 阴性 血清 、 瘟标 准 阳 猪 性血清 、 释液 ， 稀 均在有 效期 内使用 ， 购 于 中 国农 业 科 学 院 兰 州 兽 医 研 究 ３ ６ 防制猪瘟 的发生 ，应 采取综合 ． 性 的防制措施 。加强饲养 管理 ， 不喂 所。 发霉变质 的饲料 ；坚持 自繁 白养 、 全 １ １３ 器 械 移 液 器 （０ ０ ） ３ 讨论 ．． ５ ｌ ２ １ ， ｕ ｕ 进 全 出的饲养 方式 ；严格 实施防疫 、 取液塑 料嘴 ， Ｖ型 ｌ０ ９ ｌ℃ ６孔 微 量 血 ３ １ 从表 １ 知 ，我市管辖 范 围内 消毒制度 ； 用优质 的疫 苗并正确使 ． 可 选 凝 板， 量振荡器 。 微 的猪场猪瘟 免疫效果较好 ， 合格率达 用 ， 制定 合理 的 免疫程 序 ； 理使用 合 １２ 。 ． 方法 ９ ．１。规模场 的免疫工作较 落实 ， 药物； 汰带毒的母猪。 ３ ７％ 淘

三分钟帮您看懂抗体检测报告——猪瘟篇各位猪友在看完前几期中牧生物平台推送的内容后,是否对猪场防疫与疫苗使用有了更全面的认识呢?小编我是获益匪浅。

那么各位猪友在因地制宜地采用综合性的管控措施之后，又是否对即将获得的收益多了一份期待？等等……先别着急。

在无限的期许当中，由提升生产管理所带来的滚滚财源，是否真的能化虚为实？进一步的说，如何检验我们在猪场防疫方面所取得的成果呢？科学准确的抗体检测报告给您答案！最近几年，一些有条件的养殖场已经定期开展抗体检测工作。

那么在投入大量人力、物力后拿到手的抗体检测报告，您是否真的读的懂呢？本期中牧生物的专题，小编就与您一起来探究抗体检测报告里的门道。

目前，市场上最为常见的抗体检测报告主要有：猪瘟，蓝耳病，伪狂犬，口蹄疫，乙脑，细小,圆环等。

本次我们就选取公认的猪瘟阻断Elisa检测方式，以猪瘟抗体检测的金标准IDEXX检测试剂盒为例。

首先，从原理出发，通过一张图来看看猪瘟抗体检测。

上图所示的阻断法检测猪瘟疫苗抗体的原理，可以简单的概括为：第3步中加入的酶标记物（抗猪瘟病毒的单克隆抗体），与被检血清中的抗猪瘟病毒抗体，两者竞争与包被抗原结合。

而第2步加入的被检血清中如果大量含有抗猪瘟病毒抗体，就会阻断酶标物抗体与包被抗原的结合。

最后加入底物显色。

被检血清中猪瘟病毒抗体越多，阻断率越高，颜色越浅。

猪瘟疫苗的免疫评估一般关注两点：1.阳性率：猪瘟抗体（阻断率（Blocking）≥40%，判为阳性结果；30%＜Blocking＜40%，判为可疑结果；Blocking≤30%，判为阴性结果）。

免疫合格率：阻断率（Blocking）≥50%的，即为免疫合格（断奶仔猪猪瘟第一次免疫受母源抗体干扰，≥30%可视为合格）。

免疫合格的比例即为免疫合格率。

2.变异系数：Coefficient of Variation(CV)变异系数计算的是平均个体的变化，以平均滴度背离的百分数来表示公式如下：变异系数 CV = 标准偏差（STDEV）/平均阻断率×100%CV≤40%,显示了群内猪只有一个均衡的、相似反应。

３ 其他各阶段猪包括后备 猪、 、 肥育 猪、 种公猪等 。 ４ 仔猪在刚断奶后接种 １ 、 次口蹄疫和蓝耳病疫苗 ， 全场所有猪还在 ３ 月下旬和 ９ 月下旬对 口蹄疫 、０ １ 月份 和 ４月份对蓝耳病进行 强制免 疫 １ 。 次 疫苗均为政府采购疫苗 。
２１新 程 序 免 疫 效 果 两 ．
口 卫 生 防 疫
猪 场 猪 瘟 抗 体 的 测 定 与 免 疫 程 序 调 整
王 亚玲 沈文 正 白 宝明 ３ 王 小 东 ３
（． １陕西省 泾 阳县动物 卫 生监 督 所 ７ ３ ０ ，． 职 业技 术 学 院动物 工程 系 ７ ２ ０ ， １ ７ ０ ２杨凌 １ １ ０ ３陕 西黄 河牧 业有 限公 司大秦种 猪 场 ７ ５ ０ ． １３ ０） 摘要 ： 为评价 和 改进 某猪 场 实施 １ 以上 的猪 瘟 免 疫程 序 ， 用 间接 血凝 试验 检 测 哺 乳母 猪 、 年 采 哺 乳仔猪 、 育猪 、 备猪 、 育猪 、 公猪 等各 阶段 猪群 猪 瘟免疫 抗体 。 结果发 现 除其他 阶段 抗 体合 格 保 后 肥 种 率 高于 ７％Ｐ ， ０ ￣ ３周龄 哺乳仔 猪 和 ８周龄 保 育猪 抗 体合格 率 均低 于 ３ ％。 ０ 为调 整起 见 ， 免疫程 序 中妊 原 娠 母猪 分娩 前 ６星期增加 １次猪 瘟免 疫 ， 消产后 ３星期 的猪 瘟接 种 。 同时 ， 原 程序 断奶仔 猪二 免 取 将
从 出生后 ８星期提 前 到 ６星期 ， 其他 阶段 猪 群 ， 包括 断奶 后 到 配种 前母 猪 ， 按 原程 序 每 年 ３月和 ９ 均
月各 防疫 １ 。１年后 ， 次 同法测得各 阶段 猪 瘟抗 体合格 率均 超过 ８ ％， 明新 免疫 程序 合理 可行 。 ８ 证 关 键词 ： 瘟 ； 猪 抗体检 测 ； 疫程 序 ； 整 免 调

３ 结 论 与 分 析
２ ０ １ ０年 我 区 提 出 了 将 生 猪 重 大 动 物 疫 病 免 疫 由 “ 春、 秋
猪 瘟免疫抗体 监测 ， 这 为 常 年 免 疫 保 质 保 量 提 供 依 据 。现
将 监测结果 报告如下 ：
集 中 免疫 模 式 ” 改 为“ 常年 按需 免疫模 式” 。将被 动、 应 激 式 免 疫 转 变 为 自愿 、 主 动 免 疫 的管 理 模 式 。该 模 式 下 免 疫 抗 体 合格率有 了显著 提高 ， 猪 瘟 总体 免 疫 抗 体 合 格 率 从 ２ ０ ０ ９年 的７ ３ 提高到 ２ ０ １ ２ 年的８ ６ ． ７ １ 。这 一 模 式 较 好 地 解 决 了
・ ５ ８ ・
《 上 海畜牧 兽 医通讯 》 ２ ０ １ ３年 第 ４期
猪 瘟 常年 免疫 抗体 检 测及 效 果分 析
贾惠琚 。 罗时 霞 吴亨进 浦 同灿 周 莉
（１贵 州 大 学 ５ ５ ０ ０ ２ ５ ２花 溪 区动 物 疫 病 预 防控 制 中心 贵州 花 溪 ５ ５ ０ ０ ２ ５）
确 保 了生 猪 养 殖 向 “ 优质 、 安全 、 高效、 可持续 ” 方 向发展 ， 为 实现健康养殖 、 农业增 产增 效、 发 展 现 代 畜 牧 业 奠 定 了 坚 实
基础 ， 具有广阔的应用前景 。
改 变 传 统 的春 、 秋 两防 防疫 ， 实 行 生 猪 强 制 常 年 免 疫 模 式， 通过“ 以监 促 免 、 以检促 防、 检免结 合” 的技 术 措 施 ， 提 高
１ ． ３ 其 它 器 械
移液器 （ ５ ０ 、 ３ ０ １ ） ， 取 液滴 头 ， 微量振荡器 ， 水浴锅 。
了农 户 防疫 意 识 ， 村级 防疫 员主动 实施 常年免 疫 ， 使 我 区 动

包被板孔中， 待检样品做 １ 孔， 阴性对照和阳性对照
根据农业部免疫计划判定猪瘟抗体效价不小于 １：
３ ２ 判 定合 格 。
２ 检测结果
全 市抽检猪瘟 血清检测结 果显示 ， １ ０ ０份样 品
各设 ２ 孑 Ｌ ，每孔 １ ０ ０微升。轻轻振匀孔 中样 品 ， 置 ３ ７ ￣ Ｃ 温育 ３ ０ 分钟。 ④洗板。 甩掉板孔 中的溶液 ， 每孔 加入稀释好 的洗涤液 ２ ０ ０ 微升 ， 静置 ３分钟倒掉 ， 再 在 吸水纸上拍干 ， 共计洗涤 ５ 次。⑤加酶 。每孔加羊 抗猪酶标二抗 １ ０ ０ 微升 ， 置３ ７ ￣ （ ２ 温育 ３ Ｏ 分钟 。⑥洗 板 。甩掉板孔 中的溶液 ， 液 ２ ０ ０ 微升 ， 静置 ３ 分钟倒ｊ 洗涤 ５ 次。⑦显色。每孑
对 照孔合格 的情 况下 ，观察 １ — ８ 孔 ，以红血球 呈 （ ＋ ＋ ） 凝集的待检血清的最大稀释度为其抗体效价 。
１ ． ２酶联免疫吸 附试验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 检 测
按试剂盒附带 的使用说明书严格操作 ，具体操 作如下。①洗涤液配制。使用前 ， 浓缩的洗涤液应恢 复 至室温 （ ２ ５ ｃ Ｉ ＝ 左右 ） ， 并摇动使沉淀的盐溶解 ， 然 后用蒸馏水或去离子水作 ２ ０ 倍稀释。②样品和对照 稀释 。按照 １： ４ ０ 的体积分别稀释待检血清样 品和 阳性血清对照和阴性血清对照。 ③加样孵育。 取抗原 包被板 （ 根据样 品多少 ， 可拆开分次使用 ） ， 分别将 稀释好的待检血清和对 照各取 １ ０ ０ 微升加入到抗原
排 的第 ｌ ～ ８ 孔加各稀释度待检血清 ５ ０微升 ，第 ｌ ０ 孔加 １： １ ６ 微升的阴性对照血清 ，每孔 ５ ０微升 ， 第 ｌ １ 孔加猪瘟阳性对照 （ １： ５ １ ２ ） ５ ０ 微升 ， 第 ｌ ２ 孔各 加稀释液 ５ ０ 微升 （ 空 白对照孑 Ｌ ） 。每排 ｌ ～ ８ 孔和 １ ０ — １ ２ 孑 Ｌ 加猪瘟诊断液 ， 每孔 ２ ５ 微程式。振荡混匀 ，

≥８ ％ ） 猪 瘟 免 疫 抗 体 水 平 合 格 的 乡 镇 有 ４个 ０ ，
１ ３ 待 检 血清 ．
长 育肥 猪 。
来 自全 市 生 猪 随 机 抽 样 采血 分 离
的血 清 ， 括种 公 猪 、 猪 、 包 母 哺乳 仔 猪 、 断奶 仔 猪 、 生
（０ ＞ 瘟 抗 体合 格 率 Ｉ７ ％ ） 猪瘟 免疫 抗 体水 ８％ 猪 ＞０ ，
７８． ５％ ３
猪 瘟免 疫抗 体 水平 。现 将监 测情 况报 道 如下 。
表 １ ２ ０－ ２ １ ０ ９－ ０ 赤水 市猪 瘟 抗体 抽 检 结 果 － １年
１ 材 料 和 方 法
１ １ 试 验器 材 ．
微量 振荡 仪 。
微量 反 应 板 、 液 器 （ 有滴 头 ） 移 配 、
１０ ， ０ ％ 最低 的为 ６ ％ 。按 照 《 疫 计 划 》 ０ 免 中存 栏 猪 群 猪 瘟 抗 体 合 格 率 ≥７ ％ 为合 格 的标 准 ， 水 市 ０ 赤 ２ １ 年 抽检 猪瘟 免疫抗 体 合格 的养 猪场 有 ８个 ， ０１ 猪 瘟 免疫抗 体水 平不 合 格 的养猪 场 有 ２个 ， 然 赤水 显
１２ 检 测试 剂 ．
医研究 所 生产 。
猪瘟 正 向血凝 诊断 液 、 标准 阳性 血
２ ２ 由表 ２可 见 ，０ １年 检 测 赤 水 市 散 养 户 ２ ９ ． ２１ ０
清 、 准 阴性 血清 、 释液 ， 为 中 国农 科 院 兰 州 兽 标 稀 均
份 血清 ， 中 １８份 猪 瘟 抗 体 合 格 ，１份 猪 瘟 抗 体 其 ５ ５ 不 合格 ， 猪瘟 整体 抗体 合格 率 为 ７ ．０ ， 中猪 瘟 ５６％ 其 免疫 抗体 水平 较 高 的 乡镇有 ９个 （ 瘟抗 体 合 格 率 猪