《食品生物技术导论》PPT课件
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食品生物技术:是现代生物技术在食品领域中的应用,是指现代生命科学的研究成果为基础,结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果,用全新的方法和手段设计新型的食品和食品原料基因工程:又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品基因工程的理论基础:1、不同基因具有相同的物质基础2、基因是可切割和转移的3、多肽与基因之间存在对应关系4、基因的遗传信息是可以遗传的基因工程的主要内容:1、在供体细胞中用限制性内切酶切割基因,以别离出含有特定的基因片段或人工合成目的基因并制备运载体〔质粒、病毒或噬菌体〕2、把获得的目的基因与制备好的运载体用DNA连接酶连接组成重组体3、把重组体引入宿主细胞4、筛选、鉴定出含有外源目的基因或个体工具酶:限制性内切酶、核酸酶、连接酶、聚合酶Ⅰ型限制性内切酶:不能专门切割DNA的某个特殊位点〔未大量使用〕Ⅱ型限制性内切酶:可在特殊位点切割DNA,产生具有黏性末端或其他形式的DNA分子片段〔广泛应用〕➢同裂酶:来源不同,具有相同的识别序列➢同尾酶:识别序列不同,切割后,具有相同的DNA黏性末端Ⅲ型限制性内切酶:具有独特的识别方式和切割方法,如MboⅡ基因载体:质粒〔能自主复制的双链DNA分子,在细菌中独立于染色体之外存在:①具有复制起点②相对分子质量尽可能小③有单一的限制性内切酶识别位点④有一个或多个选择标记基因〕、植物病毒、噬菌体理想的基因工程载体具备的特征:1、能在宿主细胞内进行独立和稳定的DNA自我复制,在外源DNA插入其DNA复制的非必需区内,仍能保持稳定的复制状态和遗传特性2、易于从宿主细胞中别离,并进行纯化3、有适当的限制性内切酶单一酶切位点4、具有能够直接观察的表型特征质粒载体pBR322:大小为4363bp,含有两个抗生素抗性基因〔抗氨苄青霉素和抗四环素〕,还有单一的Bam HⅠ、HindⅢ和SalⅠ的识别位点,这三个位点都在四环素抗性基因内;另一个单一的PstⅠ识别位点在氨苄青霉素抗性基因内质粒载体pUC19:pBR322带的单一克隆位点较少,筛选程序较费时,pUC19是在其发展的,有一个氨苄青霉素抗性基因和一个大肠杆菌乳糖操纵子半乳糖苷酶基因〔lac Z’〕的调节片段,一个调节lac Z’基因表达的阻遏蛋白的基因lacⅠ,还有多个单克隆位点酵母质粒载体:既可以在大肠杆菌中复制,又可在酵母系统中复制,又称穿梭载体噬菌体载体:细菌病毒聚合酶链式反应法〔PCR〕:PCR模拟DNA聚合酶在生物体内的催化作用,在体外进行特异DNA序列的快速聚合及扩增。