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nk细胞作用NK细胞（Natural Killer cell）是一类重要的免疫细胞，广泛存在于人体的骨髓、外周血、脾脏和淋巴结等组织内。
与其他免疫细胞相比，NK细胞具有独特的作用和特点。
首先，NK细胞具有自然杀伤作用。
NK细胞可以通过依赖抗体及细胞介导的细胞毒性（ADCC）和非特异性直接杀伤作用来识别和消灭异常细胞。
在此过程中，NK细胞通过识别缺乏MHC-I（主要组织相容性复合物-I）分子表达的靶细胞，释放细胞毒性颗粒和细胞因子来攻击并杀死这些异常细胞。
这使得NK细胞可有效清除感染病原体、病毒感染和肿瘤细胞等。
其次，NK细胞具有快速反应的能力。
相对于其他免疫细胞，NK细胞具有更快的响应速度。
在感染和炎症等病理状态下，NK细胞可以在数小时内迅速增加，发挥其抗病毒和抗肿瘤的作用。
这种快速反应能力使得NK细胞在防御疾病时起到了重要的作用。
此外，NK细胞还具有调节免疫应答的功能。
在免疫应答过程中，NK细胞可以分泌多种细胞因子，例如干扰素-γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α），来调节和修复免疫系统。
这些细胞因子不仅可以增强其他免疫细胞的活力和杀伤功能，还可以影响炎症反应、免疫细胞的分化和增殖等。
此外，NK细胞还可以与树突状细胞相互作用，促进其吞噬与抗原递呈的能力，从而进一步激活适应性免疫应答。
除了这些基本功能外，NK细胞还可以参与多种免疫调节和病理过程。
例如，在孕期，NK细胞可以通过杀伤异常胎盘细胞和产生胎盘生长因子来维持胎儿的发育。
同时，在自身免疫疾病中，NK细胞也参与了发病机制和免疫调节的过程。
近年来，研究人员还发现了多种影响NK细胞功能的调控因子和信号通路，包括NKG2D受体、KIR家族受体、HLA-G分子等。
总之，NK细胞作为免疫系统的重要成员，具有多种重要的生物学作用。
其快速的反应能力、自然杀伤的特点以及调控免疫应答的功能，使得NK细胞在抗病毒、抗肿瘤和调节免疫等方面发挥了重要的作用。
自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞，简介自然杀伤细胞( natural killer cell,NK细胞)来源于骨髓淋巴样干细胞，其分化、发育依赖于骨髓及胸腺微环境，主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴结。
NK细胞不同于T、B细胞，是一类无需预先致敏就能非特异性杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞的淋巴细胞。
细胞来源NK细胞确切的来源还不十分清楚，一般认为直接从骨髓中衍生，其发育成熟依赖于骨髓的微环境。
小鼠和人的体外实验表明，胸腺细胞在体外IL-2等细胞因子存在条件下培养也可诱导出NK细胞。
小鼠脾脏在体内IL-3诱导下可促进NK细胞的分化。
NK细胞主要分布于外周血中，占PBMC 5～10%，淋巴结和骨髓中也有NK活性，但水平较外周血低。
由于NK细胞具有部分T细胞分化抗原，如80～90%NK细胞CD2+，20～30%NK细胞CD3+（表达CD3ζ链），30%NK细胞CD8+（α/α）和75～90%NK细胞CD38+，而且NK细胞具有IL-2中亲和性受体，在IL-2刺激下可发生增殖反应，活化NK细胞可产生IFN-γ，因此一般认为NK细胞与T细胞在发育上关系更为密切。
细胞表型与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特异性是相对的。
人NK细胞mIg-，部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2受体β链(P75,CD122），CD11b/CD18阳性。
常用检测NK 细胞的标记有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。
一种稳定表达在NK和LAK细胞表面的LAK-1分子，120kDa，NK细胞在IL-2条件下培养20天LAK-1仍为阳性，而HNK-1(CD57）和CD16部分消失。
LAK的杀伤活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
活化途径通过CD3分子的ζ链NK细胞不表达TCR/CD3复合物，但部分NK细胞表达CD3ζ链，当用CD16抗体刺激NK细胞活化时，ζ链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内Ca2+ 浓度升高，IP3水平增加，促进细胞因子合成和ADCC作用。
NK细胞(Natural Killer Cell)又称自然杀伤细胞。
属于大颗粒淋巴细胞，来源于骨髓，占外周血淋巴细胞总数的5％-10％，是机体重要的免疫细胞，具有广谱抗肿瘤细胞作用，其不依赖于抗原刺激作用，就可以非特异直接杀伤肿瘤细胞和病毒感染的靶细胞，对肺癌、肝癌、卵巢癌、食道癌、结肠癌、胃癌、宫颈癌、骨癌等均有效果，以NK细胞为中心的巨噬细胞，24小时加以监视，一旦发现癌细胞，就陆续加以清除。
特别是对造血细胞来源的肿瘤细胞更为敏感。
特别是对淋巴瘤和白血病细胞作用更为明显，因此，在机体免疫监视和早期抗感染免疫过程中起重要作用，是抗瘤免疫的第一线细胞，能迅速溶解某些肿瘤细胞。
人体的健康是由免疫系统来保证的，因此绝大多数的保健品都是为了提高机体免疫力的。
NK细胞作为免疫系统中最重要的效应杀伤细胞，就像免疫系统中的巡警，时刻游弋在人体的血液中，一旦遇到入侵体内的细菌、病毒和体内产生的癌变、病变、衰老细胞，便启动免疫攻击和免疫稳定功能，当自己无法独立完成攻击和清除任务，就会发出信号，调集其他类型的免疫细胞来共同完成清除任务。
·人体的健康是由免疫系统来保证的。
免疫系统被医学专家誉为世界上最好的医生，就像一支不知疲倦的部队，24小时保护着我们的健康。
·NK细胞作为先天免疫系统中最重要的效应细胞，是免疫系统在进化过程中所分化出的广谱性防御机制，对外清除病毒、细菌及其他有害物质，对内清除衰老、病变及癌变细胞,维护着我们机体的相对健康状态，被医学界誉为“人体第一道防线”。
·NK细胞平时像巡警一样游弋在人体的血液中，行使着免疫监视功能，当遇到癌变，疾病及衰老的细胞时，便启动免疫攻击和免疫稳定功能。
·NK细胞与我们的生活息息相关，它可以抑制病毒和细菌的入侵，清除体内癌变、病变及衰老细胞，具有延缓机体衰老的功能。
NK细胞功能在人生不同阶段呈现不同趋势和特征。
科学研究发现，在人的一生中，NK 细胞功能变化大致可分为五个阶段：（1）0-8周左右：出生到2月龄为NK细胞功能成熟期，在此阶段，NK细胞功能提升至与成年接近水平，表现为NK细胞在骨髓中分化成熟并释放入血，成为新生儿自身抵抗力的主要效应细胞。
nk细胞名词解释
NK细胞是一类特殊的淋巴细胞，全称为自然杀伤细胞（Natural Killer Cell）。
它们是身体免疫系统中的重要成分之一，在身体抵御病毒感染和肿瘤细胞方面发挥着关键作用。
NK细胞的名字源自它们的杀伤方式：它们能够直接杀死某些病毒感染细胞和肿瘤细胞，而不需要依赖其他细胞的介入，这种杀伤方式被称为“自然杀伤”。
NK细胞通过识别细胞表面的特殊蛋白（如MHC I和HLA-G）来确定是否需要杀死某些细胞。
在正常情况下，这些蛋白会被正常细胞表达，而被病毒感染或癌细胞表达的蛋白则往往不同，从而成为NK细胞攻击的目标。
此外，NK细胞还能够分泌多种细胞因子，如干扰素和肿瘤坏死因子，来刺激其他免疫细胞的活动，加强身体的免疫反应。
在临床应用方面，NK细胞已经成为细胞免疫治疗的重要对象之一。
目前已经有一些研究利用NK细胞治疗某些类型的癌症和病毒感染等疾病，取得了一定的疗效。
随着技术的不断进步，相信NK细胞将会在未来的医学治疗中发挥更为突出的作用。
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免疫细胞家族：NKT细胞的概述⾃然杀伤T细胞(NKT cell)是指既表达NK细胞表⾯标志CD56（⼩⿏为NK1.1）⼜表达T细胞表⾯标志TCRαβ-CD3复合体的淋巴细胞。
NKT细胞在胸腺或胚胎分化发育，主要分布于⾻髓、肝脏和胸腺，在脾脏、淋巴结和外周⾎中也有少量存在。
NKT细胞的发育在胸腺内，NKT细胞的发育过程与T细胞极为相似，在CD4CD8双阳性(DP)选择阶段中，NKT细胞从T细胞发育的主流过程中分化出来。
在经历胸腺⽪质细胞上CD1d分⼦所提呈的糖脂抗原选择后，向着NKT系(CD4NKT或CD4-CD8-NKT)发育。
多数CD4NKT细胞和CD4-CD8-NKT细胞的发育为CD1d依赖性，⽽CD8NKT细胞则不依赖CD1d。
但仅有CD1d分⼦尚不⾜以完成NKT细胞的阳性选择，还需有内源性糖脂抗原的存在。
TCR基因随机重排产⽣多种不同类型的TCRβ，在糖脂类抗原选择作⽤下，只有与TCRβ亲和⼒较⾼的CD1d-糖脂类抗原复合物才决定NKT细胞的进⼀步分化（图1）。
图1 ⼩⿏I型NKT细胞的发育过程NKT细胞的分型根据NKT细胞表达的TCR类型及发育是否依赖CD1d分⼦，可将其分为三类[1]：I型NKT细胞：或称iNKT(invariant NKT)细胞，具有恒定TCRα受体。
⼩⿏iNKT细胞的TCRα为Vα14-Jα18，⼈iNKT细胞的TCRα为Vα24-Jα18。
iNKT 细胞能特异性识别α-GalCer，因此可以⽤CD1d/α-GalCer四聚体来标记iNKT细胞。
II型NKT细胞：Vα14(⼈Vα24)-Jα18-CD1d依赖性NKT细胞。
缺乏恒定型TCR，可识别CD1d提呈的异于α-GalCer的配体。
常存在于⼈体⾻髓和肝脏部位，⼩⿏体内这型细胞不能被CD1d/α-GalCer四聚体识别，在MHCⅡ类分⼦缺陷⼩⿏体内可检测到CD4Vα14-Jα18-CD1d依赖性NKT细胞存在。
nk细胞标准
NK细胞标准是7%-40%，NK细胞是人体免疫细胞，属于淋巴细胞，是与特异免疫反应无关的自然杀伤细胞，它可调节体内多种细胞，是维持妊娠所必需的。
NK细胞过高，体内免疫功能异常，会影响胚胎着床以及正常发育，容易导致胚胎停止发育，NK细胞偏高可以多吃谷物和新鲜蔬菜水果等高蛋白，形成有规律的生活，避免过度劳累与激动，保持精神的愉快，以免不良情绪影响到内分泌失调。
对于失调的问题，当然是调节内分泌，使之重新达至平衡，针对不同的病因症状及体质严重程度，会有不同的应对方法，需要在医生指导下给予药物治疗，比如黄体酮等。
NK细胞过低，说明出现了抵抗力低下的情况，容易导致病毒感染和各种肿瘤发生，可以去医院进行详细的检查，找出引起NK细胞低的原因，可以在医生的指导下，服用一些增强身体免疫力的药物进行肿瘤抑制，如转移因子口服液、人参皂苷等等。
如果病人单纯的NK细胞比例下降，没有其他不适的症状，这问题不是很大，但是饮酒有损健康，所以不要喝酒。
可以到相关的部门血液科进行复查。
自然杀伤细胞(natural killer cell，NK)是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。
NK细胞是自然杀伤细胞的缩写。
它不同于T细胞和K细胞。
它不需要特异性抗体来杀死靶细胞，也不需要抗原预敏化。
它主要存在于外周血，脾脏和骨髓中，在淋巴结中含量很少，而在胸腺中则没有。
通常认为，NK细胞来源于骨髓。
它的免疫活性远小于K细胞和T细胞的免疫活性，但要使T细胞致敏才能获得杀伤能力大约需要10天。
K细胞的杀伤作用必须涉及IgG的特异性抗体的参与，而NK细胞则可以立即起靶细胞非特异性杀伤的作用，尤其是对各种肿瘤细胞的快速杀伤和溶解。
因此，NK细胞对癌症的监测功能越来越受到重视。
NK细胞的确切来源尚不清楚。
通常认为它们直接来自骨髓衍生出来的它的发育和成熟取决于骨髓的微环境。
在小鼠和人类中进行的体外实验表明，当在IL-2和其他细胞因子存在下体外培养时，胸腺细胞也可以诱导NK细胞。
在体内IL-3的诱导下，小鼠脾脏可促进NK细胞的分化。
NK细胞主要分布在外周血中，占PBMC的5-10％。
NK活性也存在于淋巴结和骨髓中，但水平低于外周血。
由于NK细胞具有一些T细胞分化抗原，例如80〜90％NK细胞CD2 +，20〜30％NK细胞CD3 +（表达CD3ζ链），30％NK细胞CD8 +（α/α）和75〜90％NK细胞CD38 +此外，NK细胞具有IL-2亲和受体，在IL-2刺激下可发生增殖，活化的NK细胞可产生
IFN-γ。
因此，通常认为NK细胞和T细胞在发育中更紧密相关。
原代 nk 细胞培养体系English Answer:Primary human natural killer (NK) cells are a type of cytotoxic lymphocyte that plays a critical role in theinnate immune system. They are characterized by theirability to kill target cells without prior sensitizationand their expression of a variety of cell surface receptors, including CD56, CD16, and CD335. NK cells are found in a variety of tissues, including peripheral blood, bone marrow, and spleen.The culture of primary human NK cells is a complex process that requires specialized media, growth factors,and culture conditions. The most common method forculturing primary human NK cells is to isolate them from peripheral blood using a density gradient centrifugation. Once isolated, the cells are resuspended in a culture medium that contains interleukin-2 (IL-2), which is agrowth factor that promotes the survival and proliferationof NK cells. The cells are then cultured in a humidified incubator at 37°C and 5% CO2.Primary human NK cells can be cultured for extended periods of time, although their viability and function will decline over time. The cells can be used for a variety of research purposes, including studies of their cytotoxicity, cytokine production, and gene expression.中文回答：原代人自然杀伤 (NK) 细胞是一种细胞毒性淋巴细胞，在先天免疫系统中发挥关键作用。
nk细胞提取及培养方法以nk细胞提取及培养方法为标题，本文将介绍NK细胞的提取和培养方法。
NK细胞（Natural Killer cell）是一种重要的免疫细胞，具有杀伤肿瘤细胞和感染病原体的能力。
NK细胞的提取和培养是进行相关研究和应用的前提，下面将详细介绍相关步骤。
一、NK细胞的提取方法1. 从外周血中提取：外周血中富含NK细胞，因此是提取NK细胞的常用来源。
首先，收集供体的外周血样本，并进行离心，分离出白细胞。
然后，使用比重梯度离心法，将白细胞层分离出来。
最后，使用磁珠或流式细胞术等方法，选择性地富集NK细胞。
2. 从脐带血中提取：脐带血中的NK细胞数量相对较多，因此也是提取NK细胞的常用来源。
提取方法与外周血类似，首先收集脐带血样本，并进行离心，分离出白细胞。
然后，使用比重梯度离心法，将白细胞层分离出来。
最后，使用磁珠或流式细胞术等方法，选择性地富集NK细胞。
二、NK细胞的培养方法1. 培养基的准备：选择适合NK细胞生长的培养基，如RPMI 1640培养基。
将培养基加热至37摄氏度，并加入适量的胎牛血清、抗生素和生长因子等。
2. 细胞的接种和培养：将提取到的NK细胞接种在含有培养基的培养皿中。
细胞密度一般为1-2×10^6个/ml。
将培养皿放入培养箱中，保持37摄氏度和5%二氧化碳的恒定环境。
每2-3天更换新的培养基，以保持细胞的正常生长。
3. 细胞的扩增：为了获得足够数量的NK细胞，可以进行细胞的扩增培养。
在细胞密度达到80%左右时，将细胞进行传代，即将细胞从原来的培养皿中移至新的培养皿中，继续进行培养。
每次传代时，可根据需要调整细胞的密度和培养时间。
4. 细胞的活化：为了增强NK细胞的杀伤能力，可以进行细胞的活化处理。
常用的活化方法包括使用细胞因子（如IL-2、IL-15等）刺激细胞，或使用特定的抗体与细胞表面的激活受体结合。
活化后的NK细胞可以更好地发挥其免疫功能。
三、NK细胞的质量控制1. 细胞形态观察：在培养过程中，定期观察NK细胞的形态变化，如细胞的形状、大小、颜色等。
关于NK细胞的研究
NK细胞，或称自然杀伤细胞，是由未分化的前体淋巴细胞及其衍生
细胞完成的一类非特异性免疫细胞。
它们可以在体内发现，主要分布在淋
巴结及骨髓中，由前体淋巴细胞（T细胞旁）首先发育而来，不依赖于外
源抗原，它们能够识别和杀死病毒感染的细胞及癌症细胞，是天然免疫系
统的重要组成部分。
NK细胞具有抗病毒性、抗肿瘤性、抗肝细胞性、抗生物复合性等多
种功能，其杀伤力极强。
它们是一类比较特殊的天然杀伤细胞,有着独特
的分子标志。
一般来说，在体外系统中被研究比较多的NK细胞标志分子
有CD56、CD16和NKG2D。
在体内，NK细胞能够被目标细胞在特定表位上
表达的抗原刺激并有效的识别，从而发挥其杀伤细胞的功能。
NK细胞得到激发后，通过一系列功能的发挥，形成一个强大的抗肿
瘤体系。
此体系中除了细胞因子的发放和拮抗剂参与外，还有溶解氧化物
介质、细胞氧化应激反应产物和炎症介质，共同起到对肿瘤细胞的破坏作用。
NK细胞的抗肿瘤作用主要表现在几方面：一是参与免疫反应，当NK
细胞通过识别一些特定表位的抗原（如HLA-E）来识别癌症患者的细胞时，它们会产生一种叫做周期性碱蛋白（CBP）的物质。
nk细胞的培养方法一、NK细胞概述。
1.1 NK细胞是自然杀伤细胞（Natural Killer cell）的简称，这可是咱们身体免疫系统里非常厉害的“战士”呢。
它不需要抗原预先致敏就能直接杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞，就像一个勇往直前、主动出击的“勇士”，在咱们身体的防御战中起着至关重要的作用。
二、NK细胞培养的前期准备。
2.1 细胞来源。
首先得有合适的细胞来源。
可以从外周血单个核细胞（PBMC）中获取NK细胞。
这就好比从一个大的“细胞宝库”里挑选咱们需要的“宝贝”。
一般通过密度梯度离心法把PBMC分离出来，这个过程就像是从一堆混合的东西里把有用的挑出来，得小心细致。
2.2 培养环境。
要给NK细胞创造一个舒适的“家”。
需要合适的培养箱，温度得保持在37℃左右，这就像咱们人感觉最舒服的温度一样。
二氧化碳浓度也要控制好，一般在5%左右，这个环境就像一个温室，让NK细胞能茁壮成长。
而且培养容器也很重要，像细胞培养瓶或者培养板之类的，得保证干净无菌，要是有细菌或者其他污染物，那可就像在NK细胞的“家”里放了害虫一样，会严重影响它们的生长。
三、NK细胞培养的具体方法。
3.1 细胞因子诱导法。
这是一种常用的方法。
通过添加特定的细胞因子，如白细胞介素 - 2（IL - 2）、白细胞介素 - 15（IL - 15）等，来诱导NK细胞的增殖和活化。
这就像是给NK 细胞吃“营养剂”，让它们有足够的能量和动力去生长繁殖。
不过添加细胞因子的时候得注意剂量，就像咱们吃饭一样，吃多了吃少了都不好。
剂量合适了，NK细胞就会像被注入了强心剂一样，活力满满地不断增殖。
3.2 饲养细胞共培养法。
有时候还会用到饲养细胞共培养的方法。
比如用照射后的肿瘤细胞或者其他细胞作为饲养细胞，和NK细胞一起培养。
这就好比给NK细胞找了个“陪练”，在和这些饲养细胞的相互作用中，NK细胞能够更好地被激活和增殖。
但是这个过程也得小心谨慎，要确保饲养细胞不会对NK细胞产生不良影响，就像找陪练得找靠谱的，不能找个会捣乱的。
免疫细胞分型常见标志物大串烧（二）——NK细胞分型标志物自然杀伤细胞(Natural killer，NK)是细胞毒性淋巴细胞的一种类型，是天然免疫系统的主要组成部分。
NK细胞在肿瘤和病毒感染细胞的宿主排斥反应中起重要作用。
它们之所以被命名为“Natural killer”，是因为最初认为它们不需要激活就能杀死“缺失自我识别”的细胞(“缺失自我识别”是用来描述MHC-I类细胞表面标记表达水平较低的细胞，这种情况可能是由病毒感染引起的，或者是在杀伤T细胞的强选择压力下发生的）。
NK细胞与ILC1s（1型天然淋巴细胞）具有许多相似特征，包括转录因子T-bet的表达、活化诱导的IFNγ和TNFα的产生，但NK细胞还表达转录因子Eomes以及granzyme B 和performin，而ILC1s不表达。
因此，NK细胞更被认为是CD8+T细胞在天然免疫系统里的对应细胞。
NK细胞的功能由多种细胞表面受体控制，这些受体要么具有激活的细胞毒性功能，要么具有免疫调节作用1，这些受体分类见下表1a和1b。
NK细胞的细胞毒性受激活和抑制信号相互作用的调节，抑制性受体通过识别自身MHC-I类分子来阻止NK细胞的激活。
CD66CD66CD94(NKG2E)HLA-ECD96(TACTILE)CD155(PVR)CD100CD72CD160HLA-CCD226(DNAM-1)CD112(Nectin-2),CD155(PVR) CD314(NKG2D)ULBP(RAET),MICA/MICBCD319(CRACC)CD319(CRACC)CD335(NKp46)Viral hemagglutinins,?CD336(NKp44)Viral hemagglutinins,?CD337(NKp30)pp65,BAT-3,?CD352(NTB-A)CD352(NTB-A)CD355(CRTAM)Necl2KIR-S HLA-C,?NKp80AICLPEN-5CD62LCD226(DNAM-1)CD112,CD155(PVR)CD314(NKG2D)H60,Rae1,MULT-1CD319CD319CD335(NKp46)Viral hemagglutinins,?CD355(CRTAM)Necl2NKR-P1C(CD161c/NK1.1)NKR-P1A?NKR-P1F Clr-gPILR-βCD99人NK细胞常用的分型标志物CD56CD56，又被称作神经细胞相关粘附分子（NCAM），在人NK细胞上的表达强度被视为一种功能指标。
自然杀伤细胞( natural killer cell,NK细胞)来源于骨髓淋巴样干细胞，其分化、发育依赖于骨髓及胸腺微环境，主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴结。
NK细胞不同于T、B细胞，是一类无需预先致敏就能非特异性杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞的淋巴细胞。
NK细胞，即自然杀伤细胞，是一种具有细胞毒性的淋巴细胞，属于天然免疫系统。
NK细胞与获得性免疫系统中的细胞毒性T细胞，扮演着相近的角色。
NK细胞对病毒感染的细胞，或者肿瘤形成，有着极快的响应速率。
通常情况下，免疫细胞检测到感染细胞表面的MHC，引起细胞因子的释放，进而导致靶细胞裂解或凋亡。
但NK细胞有所不同，它们可以在没有抗体或MHC的情况下，识别这些细胞并进行快速的免疫响应。
对于那些失去自身标记的MHC-I型的细胞，NK 细胞不经过激活就可以进行杀伤。
而这些细胞通常是有害的，不能被其他免疫细胞发现并消灭，比如细胞毒性T细胞。
尽管NK细胞并不需要肿瘤相关抗原识别，来调整抗肿瘤的响应，但NK细胞同样存在免疫检查点的激活或抑制机制。
虽然目前在细胞因子治疗方法，以及NK细胞过继转移等方面有所进步，但是，肿瘤细胞表达的针对NK细胞免疫检查点的配体，仍然能够抑制NK细胞介导的肿瘤细胞裂解。
于是NK细胞功能缺失，肿瘤逃逸，病情加剧。
因此目前有一些新的药物被研发出来，针对肿瘤-NK细胞的抑制型免疫检查点，以限制这种抑制作用。
当细胞在病毒感染向肿瘤转化期间，产生了应激压力或DNA损伤，就会产生胚系编码配体（germ-line ligand），这些配体可以被NK细胞表达的胚系编码受体（germ-line receptor）识别。
而当细胞出现低表达MHC-I的情况时，就会触发“丢失自我”杀伤机制。
因此为了最大程度地减少对正常细胞或组织的杀伤，必须微妙的平衡这种激活或抑制的信号，以调节NK细胞的活性。
nk细胞在培养过程中的细胞直径变化规律
【原创实用版】
目录
1.引言：介绍 NK 细胞的背景知识
2.NK 细胞在培养过程中的细胞直径变化规律
3.影响 NK 细胞直径变化的因素
4.结论：总结 NK 细胞在培养过程中的细胞直径变化规律及其意义
正文
【引言】
K 细胞，即自然杀伤细胞，是一种重要的免疫细胞，具有识别和杀伤病毒感染细胞和肿瘤细胞的能力。
在免疫学研究和临床应用中，NK 细胞的培养和扩增至关重要。
因此，研究 NK 细胞在培养过程中的细胞直径变化规律，有助于我们更好地了解 NK 细胞的生长状态和扩增能力。
【NK 细胞在培养过程中的细胞直径变化规律】
K 细胞在培养过程中，其细胞直径会随着时间的推移发生变化。
一般而言，NK 细胞在培养初期，细胞直径较小；随着培养时间的延长，细胞直径逐渐增大；当培养达到一定时间后，细胞直径增长速度减缓，细胞数量达到平衡。
【影响 NK 细胞直径变化的因素】
K 细胞在培养过程中的细胞直径变化受到多种因素的影响，主要包括：
1.培养条件：培养液中细胞因子的浓度、培养温度、气体环境等因素会影响NK 细胞的生长速度和细胞直径。
2.细胞种子：NK 细胞的初始状态、细胞密度和细胞活力等会影响细胞在培养过程中的直径变化。
3.细胞周期：NK 细胞在培养过程中会经历不同的细胞周期，细胞周期的不同阶段，细胞直径也会发生变化。
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NK cell 的发育，活化及功能机制研究摘要：NK cell是人体免疫系统中及其重要的组成部分，一般认为直接从骨髓中衍生，其发育成熟依赖于骨髓的微环境。
其中γc家族细胞因子，RAG-1等起着比较重要的作用。
NK cell的免疫激活则受一些免疫因子的作用，其中CD2，CD3，及细胞毒素识别系统起着十分重要的作用。
NK细胞一般通过其自然的杀伤活性，ADCC及分泌细胞因子来发挥其功能。
关键词：NK cell 细胞因子细胞受体发育活化功能一，NK cellNK cell是机体重要的免疫细胞，不仅与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关，而且在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。
它不表达典型的抗原识别受体(如TCR和BCR)，在通常状况下只存在于外周血、脾脏和骨髓中，但在趋化因子的作用下可游走到炎症部位发挥作用。
NK细胞通过其细胞毒活性和产生的细胞因子或表达TNF超家族配体，在机体抗感染、抗肿瘤、免疫调节和造血调控等方面发挥重要的功能，是先天免疫中的一类十分重要的淋巴细胞。
此外，NK细胞还是一种重要的免疫调节细胞，可以通过分泌多种细胞因子如GM-CSF、IFN-γ、TNF-α等调节天然和获得性免疫应答，也可以通过细胞间的接触来活化或抑制其他免疫细胞。
二，NK cell的发育机制NK cell目前认为NK细胞的发育和成熟主要依赖于骨髓微环境，是一个极其复杂的生理过程，受到一系列细胞因子的调控，其中IL-2和IL-15是最重要的两个细胞因子。
lL-2和IL-15共用IL-2受体βγ亚单位，激活相同的信号通路，都能诱导CD34~+造血干细胞分化为CD56~+NK细胞。
CD56~+NK细胞分为两种：1，CD56~(bright)细胞，分裂能力较强相当于调节性的细胞，用于控制细胞数量。
2，CD56~(dim)NK细胞，用来发挥作用，可能是由上一细胞发育而来，相当于效应细胞。
近年来研究发现：。
IL-15可以促进CD56~(bright)和CD56~(dim)NK细胞的增殖，并维持其长期存活。
IL-2对脐血NK细胞只在早期表现促增殖作用，且对CD56~(bright)NK细胞的作用强于CD56~(dim)NK细胞。
而且无论是IL-2还是IL-15培养，抗凋亡分子Bcl-2和Bcl-xL 在CD56~(bright)NK上的表达都高于CD56~(dim)NK细胞。
此外，最近研究表明，在个体发生学对NK cell的研究发现RAG-1可能对NK cell 的发育起着一定的作用。
新生的ＮＫcells以不成熟的CD27+/CD11Blo cells在骨髓，脾和肺中存在，而成熟的CD27lo/CD11B+ cells第一次出现是在３周后，而完全成熟是在８周后。
然而，事实上，肝脏的ＮＫcells只需２周就可以完全成熟。
骨髓和脾中由于缺少新生的RAG-1-/-而积累前导ＮＫcells小集团，而肝脏中的RAG-1-/-处于正常的水平。
由此可见，肝脏是骨髓之外的小血库，RAG-1则有可能对ＮＫcells 的发育起着十分重要的作用。
三，ＮＫcells的活化机制NK细胞的活化受到活化性与抑制性受体的共同调控,由于识别机制的多样化,近年来,NK细胞表面活化性受体得到了人们的广泛关注。
NK细胞表面有许多受体感应器，这些受体分为“激活”和“抑制”两种。
当它在人体内捕获一个可疑细胞后，两种受体将传回不同的信号，如果是病变细胞，“激活”信号大大增强，免疫细胞的“杀手本能”将被激活，从而杀死病变细胞；反之，如果捕获的是一个健康细胞，“抑制”信号将占主导地位，该细胞将会被释放。
最终生物学效应取决于抑制型和活化型受体群的相互竞争、相互拮抗的“净”作用，对靶细胞的靶向杀伤作用依赖于其表面的活化型受体与靶细胞上相应的配体间的相互结合。
对于Nk 细胞的具体活法机制，受那些受体的影响，目前还不是完全清楚，已经知道的大约有数十种。
一般认为膜表面的CD2、CD3分子和多种细胞因子在此过程中起着极其重要的作用。
这里就简单介绍几种。
１．活化因子：1）通过CD2分子CD2与CD58相互作用或用CD2 McAb刺激可活化NK细胞，CD3δ链发生酪氨酸磷酸化如：CD226分子CD226分子是NK细胞表面活化性受体，在NK细胞的活化并杀伤肿瘤细胞等生物学过程中发挥了重要作用,并与多种疾病的发生密切相关。
,CD226胞外结构域可以识别并结合肿瘤细胞表面配体,单独的ECD1蛋白即可有效与靶细胞结合。
CD226胞外结构域重组蛋白的加入可以有效阻断NK细胞对肿瘤细胞的杀伤。
重组蛋白对杀伤的阻断主要是通过阻断NK细胞与靶细胞的结合实现的,提示CD226在NK细胞对靶细胞的识别中可能发挥了粘附分子的作用。
除粘附作用外,CD226传递的活化信号对NK细胞的活化有着重要的影响。
抗体刺激CD226分子活化后可以引起NK细胞表面活化分子CD69的表达升高,细胞因子(IFNγ)与杀伤颗粒(CD107a,Granzyme B)的表达都明显升高。
2）通过CD3分子的ζ链NK细胞不表达TCR/CD3复合物，但部分NK细胞表达CD3δ链，当用CD16抗体刺激NK细胞活化时，δ链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内Ca2+浓度升高，IP3水平增加，促进细胞因子合成和ADCC作用。
3）γ干扰素γ干扰素(IFN-γ)对人NK细胞识别功能的负调节作用。
NK细胞系(NK92、NKL)对MICA表达阳性的肿瘤细胞杀伤活性明显高于对MICA表达阴性者；IFN-γ 1000U ／ml以上可明显抑制NK细胞对MICA表达阳性肿瘤细胞的细胞毒活性，并轻度抑制NK细胞的增殖，而对MICA表达阴性肿瘤细胞的杀伤活性无明显抑制作用；IFN-γ可抑制NK细胞系活化受体NKG2D的表达，增强抑制性受体NKG2A／B和KIR2DLI 的表达。
结论IFN-γ可能通过下调NK细胞活化受体的表达，上调抑制性受体的表达，使NK识别的信号平衡向抑制性方向倾斜，从而对NK细胞功能发挥负调节作用，这种作用可能是NK细胞自我调节功能的表现。
4）通过细胞因子目前发现部分趋化性细胞因子可增强NK细胞的细胞活性。
CCL3和CXCL4使纯化的人类NK细胞对K562细胞的杀伤活性增强。
CCL2，CCL3，CCL4，CCL5，CCL6，CCL7，CCL8，CCL10和CX3CL1能促使静止的多克隆NK细胞释放细胞独行颗粒。
此外，CX3CL1除了能促使NK细胞释放细胞毒性颗粒，直接增强其杀伤力外，还能以旁分泌的方式使NK细胞分泌的水平显著升高。
此外，IL-2、IL-12、IFN-α、TNF-α以及白细胞调节素（liukoregulin,LR）对NK细胞的活化和分化有正调节作用，体外培养时加入上述细胞因子可明显提高NK的杀伤活性。
前列腺素（PG）E1、E2、D2和肾上腺皮质激素等对NK细胞的活性有抑制作用。
２．细胞受体1）受体。
此受体作用于细胞，其配体干细胞因子（SCF）本身对于细胞的杀伤活性的发挥和增殖无明显的影响，但可以协同诱导细胞增值效应。
受体与其配体相互作用，还可上调分子的表达，维持细胞的存活。
2）NKG2D受体ＮＫＧ２Ｄ为ＮＫ细胞活化性受体，表达于所有的ＮＫ细胞表面，是介导ＮＫ细胞识别和溶解肿瘤细胞的主要活化性受体。
ＮＫＧ２Ｄ配体为ＭＨＣ－Ｉ类相关蛋白Ａ或Ｂ（ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ）及ＵＬ１６结合蛋白（包括ULBP1，ULBP2，ＵＬＢＰ３），ＮＫＧ２Ｄ的配体在多种肿瘤细胞中表达。
3）NKP46受体NKP46受体也被认为是人体NK细胞的主要受体之一，最新研究发现NKP46——免疫球蛋白融合物不仅可以和流行性病毒的血细胞凝集素还可以和副流行性感冒病毒的血细胞凝集素-神经氨酸苷酶相结合。
在大量NK细胞的小团体中，NKP46的识别需要裂解细胞表达一致的病毒糖蛋白。
这种结合需要NKP46寡糖的唾液酸化作用，这和病毒糖蛋白的富铝结合能力是一致的。
这些发现暗示铝了表达了NKp46的NK细胞可以不用减少MHC C1蛋白就可以发现病毒的侵染。
四，N K细胞的功能1，自然杀伤活性1）识别靶细胞NK细胞识别靶细胞是非特异性的，确切的机理尚未明了。
现已知淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）与靶细胞表面的细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的作用参与NK细胞的识别过程，抗LFA-1或抗ICAM-1McAb可抑制NK细胞的杀活性。
此外CD2与LFA-3（CD58）结合以及CD56也可能介导NK细胞与靶细胞的结合。
2）杀伤介质主要有穿孔素、NK细胞毒因子和TNF等。
（1）穿孔素：穿孔素是一种由NK、CTL、LAK等杀伤细胞胞浆颗粒释放的杀伤靶细胞的介质，有关穿孔素的结构和功能参见本章第二节。
从胞浆颗粒中纯化的穿孔素在体外能溶解多种肿瘤细胞，抗穿孔素抗体可抑制杀伤活性。
IL-2可提高穿孔素基因的转录。
IL-6可以促进IL-2对穿孔素基因转录的诱导作用。
丝氨酸酯酶可能有活化穿孔素的作用。
（2）NK细胞毒因子：NK细胞可释放可溶性NK细胞毒因子（Nk cytotoxic factor,NKCF），靶细胞表面有NKCF受体，NKCF与靶细胞结合后可选择性杀伤和裂解靶细胞。
（3）TNF：活化的NK细胞可释放TNF-α和TNF-β（LT），TNF通过①改变靶细胞溶酶体的稳定性，导致多种水解酶外漏；②影响细胞膜磷脂代谢；③改变靶细胞糖代谢使组织中pH降低；④以及活化靶细胞核酸内切酶，降解基因组DNA从而引起程序性细胞死亡等机理杀伤靶细胞。
TNF引起细胞死亡过程要明显慢于穿孔素溶解细胞的作用过程。
2, ADCC（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity）NK细胞表面具有FcγRⅢA，主要结合人IgG1和IgG3和Fc段（Cγ2、Cγ3功能区），在针对靶细胞特异性IgG抗体的介导下可杀伤相应靶细胞。
IL-2和IFN-γ明显增强NK细胞介导的ADCC作用。
以前认为在淋巴细胞中由K细胞介导ADCC，但至今仍未发现K细胞特异的表面标记，也不能证实K细胞是否属于一个独立的细胞群，很可能NK是介导ADCC 的一个主要淋巴细胞群。
3，分泌细胞因子活化的NK细胞可合成和分泌多种细胞因子，发挥调节免疫和造血作用以及直接杀伤靶细胞的作用。
此外，NK细胞可抑制PWM体外诱导B细胞的分化及抗体应答，其机理可能通过直接抑制B细胞或抑制辅佐细胞的抗原提呈作用。
五，结语NK细胞作为不需要抗原呈递就可以直接发挥免疫效应和引起其它免疫细胞发挥免疫效应的人体重要免疫细胞，在人体免疫中起着举足轻重的作用，也越来越被人们所重视。
NK 细胞通过细胞毒作用，分泌细胞因子等多种机制在抗感染，抗肿瘤，免疫调节和造血调控方面发挥这重要的免疫功能。
然而，NK细胞的许多机制仍然不太清楚，等待着我们的进一步研究。
