鱼腥草中黄酮类化合物提取分离方法的研究进展

鱼腥草黄酮类有效成分的提取与精制的开题报告
一、研究背景
鱼腥草（Houttuynia cordata Thunb.）是一种常见的中药材，具有较好的药用价值。

研究表明，鱼腥草中含有多种有效成分，其中黄酮类物质是其主要的生物活性成分之一。

鱼腥草黄酮类物质具有多种药理活性，如抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌等，具有广泛的应用前景。

因此，对鱼腥草黄酮类有效成分的提取与精制技术进行研究，具有重要的理论和实践意义。

二、研究目的
本研究旨在探究鱼腥草黄酮类物质的提取方法及其精制技术，以期提高鱼腥草黄酮类物质的纯度和药效，为其进一步开发和应用提供技术支撑。

三、研究内容
1. 鱼腥草黄酮类物质提取方法的优化：利用单因素和正交实验对鱼腥草黄酮类物质的提取条件进行优化，包括提取时间、提取剂浓度、浸提温度、料液比等因素的影响。

2. 鱼腥草黄酮类物质精制技术的研究：采用纯化柱层析、高速离心等技术对鱼腥草黄酮类物质进行精制，优化精制条件并评估其纯度、色泽、溶解度等指标。

3. 鱼腥草黄酮类物质的理化性质和药效评价：分别采用紫外分光光度法、高效液相色谱法等技术对提取和精制后的鱼腥草黄酮类物质的理化性质和组成进行分析和检测，以及对其抗氧化、抗炎、抗肿瘤等药理作用进行评价。

四、研究意义
本研究将为鱼腥草黄酮类物质的提取和精制技术提供有力的支持，
为进一步挖掘其药用价值、推动相关产品的研发和产业化提供技术基础。

同时，该研究对中药材生物活性成分的开发利用及中药现代化进程具有
重要意义。

黄酮类化合物提取研究进展黄酮类化合物是一类天然产物，具有多种生物活性和药理作用，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。

因此，对黄酮类化合物的提取研究具有重要意义。

本文旨在综述黄酮类化合物提取的研究进展，包括不同植物中黄酮类化合物的分布、提取方法及其优化条件等方面，以期为相关研究提供参考和借鉴。

黄酮类化合物是一类含有多酚结构的天然产物，广泛存在于植物、水果、蔬菜等生物体内。

根据结构不同，黄酮类化合物可分为黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇等不同类型。

这些化合物具有多种生物活性和药理作用，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等，在医药、保健品、食品等领域得到广泛应用。

因此，对黄酮类化合物的提取研究具有重要的理论和实践价值。

黄酮类化合物主要存在于植物中，不同植物中的黄酮类化合物种类和含量差异较大。

目前，对黄酮类化合物提取研究较多的植物主要包括银杏、柑橘、黑枸杞、虎杖等。

其中，银杏中的黄酮类化合物具有多种药理作用，如抗氧化、抗炎等；柑橘类水果中的黄酮类化合物则具有明显的抗氧化和抗炎作用；黑枸杞中的黄酮类化合物具有较好的抗氧化性能；虎杖中的黄酮类化合物则具有抗炎、抗病毒等多种活性。

提取黄酮类化合物的方法可分为传统提取方法和现代提取方法两类。

传统提取方法主要包括溶剂萃取、渗漉、煎煮等，而现代提取方法则包括超声波辅助提取、微波辅助提取、酶辅助提取等。

各种提取方法的特点和适用范围也有所不同。

例如，溶剂萃取法操作简单，但提取效率较低；渗漉法则可以在一定程度上提高提取效率；煎煮法虽然操作简便且提取效率较高，但是不适用于热敏性成分的提取。

相比之下，超声波辅助提取和微波辅助提取具有高效、快速、节能等优点，适用于工业化生产。

传统提取方法主要包括溶剂萃取法、渗漉法、煎煮法等。

这些方法操作简便，提取过程中无需特殊设备，适用于实验室和工业化生产。

在溶剂萃取法中，通常使用有机溶剂将黄酮类化合物从植物原料中萃取出来，然后进行分离纯化。

渗漉法则是在溶剂渗入植物原料的同时，将黄酮类化合物溶出，进而收集渗漉液进行分离纯化。

鱼腥草有效杀菌成份采用酶法工艺提取的分析摘要：目的：探讨鱼腥草有效杀菌成份采用酶法工艺提取的最佳提取条件，优化酶法工艺提取总黄酮的工艺。

方法：采用单一变量因素设计实验，变量分别酶种类、温度、PH值，测定其提取物取得率。

结果：在单一变量实验中，由酶法同PH值、同温度下不同酶种对酶法提取物得率中，纤维素酶联合果胶酶提取率最高，为19.49%；酶法同PH值、同酶不同处理温度提取率中，45oC时提取率最高；酶法同温度、同酶不同PH值处理提取率中，PH值为3.5时提取率最高。

结论：由纤维素酶+果胶酶、温度为45oC、PH值为4.5时，提取物取得率最高。

鱼腥草是中国药典收录的中药，来源为三白草科植物蕺菜（拉丁学名：Houttuynia cordata Thunb.）的干燥地上部分，主要生长在中国西南三省阴冷潮湿的山区，夏季茎叶茂盛花穗多时采割，除去杂质，晒干。

鱼腥草是我国传统中药材，其性微寒，味苦，具有清热解毒、排脓消痈、利尿通淋之功效[1]。

鱼腥草花、叶、果含有槲皮素、槲皮苷、异槲皮苷、瑞诺苷、金丝桃苷、阿夫苷和芸香苷等黄酮类化合物，其中以槲皮素含量最高，且具有抗炎、抗过敏等作用[2]。

鱼腥草味辛，具有抗菌、抗病毒、提高机体免疫力、利尿等作用。

近些年来，在酶技术的高速发展中，科学工作者充分利用其特性开发了酶解法这一新的提取方法。

酶的反应具有专一性高、催化活性强及作用条件温和等特点。

20世纪90年代，国内许多学者开始将酶的特性与生物细胞的结构联系起来，陆续开展了将生物酶用于天然药物及中药的辅助提取，以达到提高有效成分浸出率的目的，取得了一定的效果。

本文采用单一变量因素设计实验，变量分别酶种类、温度、PH值，测定其提取物取得率。

现报道如下。

1 资料与方法1.1基本资料对照组男例，女例；年龄最大岁，最小岁，平均（±）岁；观察组男例，女例，年龄最大岁，最小岁，平均（±）岁，首次入我科进行急诊护理例，两组患者在性别、民族、年龄、文化程度等方面比较无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

中国科技期刊数据库 医药2015年16期 103鱼腥草叶中总黄酮的提取与含量测定楼 颖1 陈 津21.浙江大学医学院附属儿童医院，浙江 杭州 3100002.杭州广州默尼医疗技术有限公司，浙江 杭州310000摘要：目的 探讨鱼腥草总黄酮的提取及含量测定方法。

方法 以乙醇为溶剂，采用索氏回流法提取鱼腥草叶中黄酮类化合物，并采用分光光度法测定其黄酮含量。

结果 以80％的乙醇水溶液为溶剂，固液比为1：40，提取温度80℃、回流提取时间3h ，在此工艺条件下进行试验，黄酮提取率可达90%以上。

测得样品中总黄酮的含量C =6.56%，回收率为93.2%。

结论 用乙醇提取鱼腥草中的黄酮化合物，方法简单、实用，提取率好。

该方法采用全物理过程，提高了黄酮的提取率，是提取鱼腥草黄酮类物质的有效途径。

关键词：鱼腥草叶；总黄酮；提取；测定 中图分类号：S567.239 文献标识码：A 文章编号：1671-5837（2015）16-0103-01鱼腥草为一年生草本植物，系三白草科蕺菜属植物蕺菜的全草，紫赤色，自古以来供食药两用，被国家卫生部正式确定为“既是食品，又是药品”，极具开发潜力。

现代药理研究表明：鱼腥草有抗病毒、抗菌、解热、抗炎镇痛、升白细胞等作用。

鱼腥草含有丰富的黄酮类物质，黄酮类化合物有降脂、抗血栓、抗氧化、抗衰老、抗心率失常、抗肿瘤、抗过敏、预防龋齿等作用。

黄酮类化合物的提取主要采用热水浸提法，由于黄酮类化合物中黄酮甙能溶于水，乙醇，甲醇等极性溶剂，而黄酮体的甙元不溶于水，只溶于乙醇等有机溶剂，所以采用水提法不能将鱼腥草叶中的黄酮全部提取出来。

而采用乙醇提取，选择性好，渗透性强，浸出率高，能较为彻底地将黄酮提取出来，且有食用安全性高，易回收等优点。

笔者在该研究中以乙醇为溶剂，采用索氏回流法对鱼腥草中的黄酮进行提取，旨在获得最佳提取条件，为鱼腥草的综合利用提供理论依据。

1721紫外分光光度计（上海第三分析仪器厂），FC104电子天平（上海精科天平公司），市售新鲜鱼腥草，芦丁对照品（中国药品生物制品鉴定所），DF 一101S 集热恒温磁力搅拌器（郑州长城科工贸有限公司），索式提取器，亚硝酸钠溶液，氢氧化钠溶液22.1 鱼腥草中总黄酮的萃取工艺流程为鱼腥草→粉碎→称重→水浸泡→微波处理→过滤→稀2.2 鱼腥草的前处理将鱼腥草茎叶分开，均先用自来水洗净，再用纯化水冲洗后晾干，于602.3鱼腥草中黄酮提取条件的优化取鱼腥草叶子，切碎，放人去离子水中浸泡0.5h ，沸水中煮沸5min ，用清水漂洗数次，洗至沥液接近无色为止，沥干，置烘箱（70%左右）中烘干，碾碎成粉末状。

鱼腥草总黄酮提取工艺研究进展田洋【摘要】在查阅收集国内鱼腥草总黄酮提取工艺文献的基础上,综述溶济提取法、超声波辅助法、微波辅助提取法、双水相萃取法等鱼腥草总黄酮提取工艺的研究进展,旨在为进一步开展鱼腥草相关研究提供参考.【期刊名称】《农业科技与装备》【年(卷),期】2018(000)003【总页数】3页(P68-69,71)【关键词】总黄酮;鱼腥草;提取工艺;溶济;超声【作者】田洋【作者单位】本溪化学工业学校,辽宁本溪 117004【正文语种】中文【中图分类】R284.2鱼腥草（Houttuynia Cordata）是三白草科多年生草本植物，其味辛、性微寒，具有清热解毒、利尿消肿等功效，是传统的药食兼用天然植物。

现代研究表明，黄酮类化合物是鱼腥草的主要活性成分之一，具有降血压、降血脂、利尿通便、抗菌消炎、抗氧化等功效。

国内对鱼腥草总黄酮提取工艺进行了大量研究。

综述近几年鱼腥草总黄酮的提取工艺研究进展，旨在为鱼腥草黄酮提取提供技术参考。

1 鱼腥草总黄酮提取方法1.1 溶剂提取法采用溶剂提取鱼腥草总黄酮是较为传统的方法，常用的溶剂是乙醇，常用的方法有常温提取、加热提取和索氏回流提取等。

阎红等以鱼腥草为原料进行总黄酮提取，筛选优化最佳工艺条件，并对其进行抑菌作用研究，确定最佳条件为：提取温度80℃，料液比1∶10，乙醇体积分数60%，提取时间90 min，提取率1.868%。

伍晓春利用响应面分析法对鱼腥草中黄酮的提取工艺进行优化，在单因素试验的基础上选取试验因素与水平，根据中心组合试验设计原理分析各个因素的显著性和交互作用。

确定鱼腥草黄酮提取的最佳工艺条件为：乙醇浓度70%，提取时间52 min，料液比1∶26，鱼腥草黄酮含量15.58 μg/mg。

张素林等在单因素试验的基础上，以总黄酮含量提取率为指标，筛选最佳提取条件，再以验证试验确定最佳条件。

结果表明，鱼腥草总黄酮的最佳提取条件为：料液比1∶35，以50%乙醇溶液为提取剂、80℃的水浴中萃取 2.0 h，总黄酮得率为0.369 mg/g。

“鱼腥草中提取黄酮”实验的教学改革探讨钱鹏程【摘要】以鱼腥草为原料提取黄酮类化合物,结果表明鱼腥草茎叶和根的黄酮含量分别约为1.8％、0.3％～0.4％.黄酮类化合物具有清热、利尿、通便的作用,为进一步研究和利用鱼腥草提供了科学依据.从基础的分离实验出发,将核磁共振波谱仪、高效液相色谱仪等先进仪器引入实验,进行定性定量分析,使学生在学习分离技术的同时,掌握仪器的操作方法.【期刊名称】《实验科学与技术》【年(卷),期】2013(011)003【总页数】2页(P99-100)【关键词】微波法;综合性实验;鱼腥草;黄酮;芦丁【作者】钱鹏程【作者单位】温州大学化学与材料工程学院,浙江温州 325039【正文语种】中文【中图分类】O624.42;O657.7鱼腥草为三白草科一年生草本植物，自古以来供食药两用。

一般在夏季，茎叶繁茂，晾干入药［1－2］。

根据现代研究，鱼腥草含有多种有效成分。

其中挥发油约为0.03～0.05，主要的药用成分为鱼腥草素，它为鱼腥草腥气的主要来源，因此而得名。

鱼腥草中富含黄酮类成分，如槲皮素、槲皮甙、芦丁等。

我国在近几年开始研究从鱼腥草中单独提取黄酮或水溶性多糖，但产率较低［3－4］。

与常规技术相比，运用微波技术辅助水提法从鱼腥草中复合提取黄酮，原料利用率和有效成分的提取量均有明显增加，这将对今后鱼腥草的开发具有重要的现实意义。

1 微波法复合提取鱼腥草黄酮实验简介1.1 鱼腥草提取与分离实验的目的1)以鱼腥草为例学习黄酮类化合物的提取、纯化方法;2)掌握黄酮类成分的主要性质及HPLC定量分析方法;3)掌握NMR法测定黄酮类化合物定性的方法。

1.2 实验材料鱼腥草干粉:选择无褐变、无病虫害、成熟度适当的新鲜鱼腥草根茎，先用流动水漂洗干净，然后将鱼腥草茎切成2 cm左右的小段，置于不锈钢容器中，按1∶3的料液比加入0.10的柠檬酸溶液护色25 min。

取出后在75℃下干燥7 h，高速粉碎，装瓶备用。

鱼腥草中黄酮类化合物提取分离方法的研究进展赵国文;张丽萍;龚靖;白利涛;冯朋【摘要】黄酮类化合物是具有广泛应用前景的天然药物.鱼腥草资源丰富,可作为黄酮类化合物的主要来源之一.阐述了鱼腥草黄酮类化合物的提取、分离方法,并对各提取分离方法的利弊进行了分析；提出了鱼腥草黄酮类化合物提取分离技术的发展前景.【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2011(038)006【总页数】3页(P158-159,167)【关键词】鱼腥草;黄酮类化合物;提取;分离【作者】赵国文;张丽萍;龚靖;白利涛;冯朋【作者单位】四川理工学院材料与化学工程学院,四川自贡643000;四川理工学院材料与化学工程学院,四川自贡643000;成都龙泉高科天然药业有限公司,四川成都610100;四川理工学院材料与化学工程学院,四川自贡643000;四川理工学院材料与化学工程学院,四川自贡643000【正文语种】中文【中图分类】R931.71鱼腥草是一种常见的药食两用植物，现已被国家卫生部正式确定为“既是食品，又是药品”的极具开发潜力的资源之一[1]。

鱼腥草含有大量的黄酮类化合物，主要是槲皮素和以槲皮素为甙元的黄酮类化合物，如芦丁、槲皮甙、金丝桃甙等。

现代研究证明黄酮类化合物具有抗病毒、抗氧化和抗衰老等作用，被广泛应用于食品、医药及保健等行业。

黄酮类化合物在人体内不能直接合成,只能从植物中获得，所以近年来科研工作者都积极关注从植物中提取纯度高、活性强的黄酮类化合物成分。

鱼腥草广泛分布于我国中部、东南及西南各省区，尤以四川、湖南、湖北、江苏居多[2]，而且易于大量栽培且栽培技术成熟，资源极其丰富，可作为黄酮类化合物来源的主要资源之一。

因此，利用鱼腥草提取分离制备黄酮类化合物具有很好的经济效益与社会效益。

为了能合理地利用鱼腥草资源，更好地提取分离鱼腥草中黄酮类化合物，现针对鱼腥草黄酮类化合物的提取分离方法进行综述。

1 鱼腥草黄酮类化合物的提取方法1.1 水提法水提法适于鱼腥草黄酮甙类物质提取。

•74 •中药与临床Phannacy and Clinics of C hinese Materia Medica 2Q2\.，\2(T)•综遽政展•鱼腥草中黄酮类化合物的研究进展陈安利，马卓[摘要]鱼腥草为药食同源中药材，其自然资源丰富，含有许多的活性成分，其中黄酮类化合物含量多达三十多种。

国内外有关鱼腥草黄酮类化合物的提取、纯化及生理活性和作用机制的总结报道文献较少，因此对提取、纯化及生理活性和其作用机制进行了总结，希望为今后的研究和应用提供参考。

[关键词]鱼腥草；黄酮类化合物；提取；纯化；生理活性[中图分类号]R 282 [文献标识码]A [文章编号]1674-926X(2021)02-017-05Research progress of flavonoid in Yuxin^csio/CHEN An-li, MA Zhuo//(Department o f Pharmaceutical Engineering, Hubei University o f Technology, Wuhan 430068, Hubei)[Abstract] Yuxingcao, an edible and medicinal herb, is rich in natural resources and contains many active ingredients, of which up to more than 30 species are flavonoid. There are few reports about the flavonoid extraction, purification, biological activity and action mechanism of Yuxingcao. In this paper, the extraction, purification, biological activity and action mechanism of Yuxingcao are summarized to provide a reference for future research and application.| Key words] Yuxingcao; flavonoid; extraction; purification; physiological activity鱼腫草（//m^w y w/flcwttoaThunb.)为三白草科蕺菜属植物。

0前言鱼腥草，原名蕺菜，又名折耳根、菹菜、紫背鱼腥草，在分类学上属双子叶植物三白操科草本植物。

茎呈扁圆柱形，扭曲，长20~30cm，直径0.2~0.3cm;表面呈棕黄色，具有纵棱数条，质脆，易折断。

叶互生，叶片卷折，皱缩展开后呈心形，下表面呈灰绿色或灰棕色；叶柄细长，搓碎有腥臭味，味微涩、辛，微寒，是一种很好的天然保健食品原料具有清热解毒，利尿消肿等功效。

鱼腥草中的有效成分[1]是其挥发性物质，主要成分是黄酮,大部分是以糖苷形式存在的苷类,主要是芦丁、槲皮甙、异槲皮苷、瑞诺苷、金丝桃甙等槲皮素和以槲皮素为甙元的黄酮类化合物。

药理研究表明黄酮类化合物具有抗肿瘤[2]，抗氧化[3]，抗抑郁[4]，抑制细菌[5]等药理作用，在食品、药品、保健品等领域有着广泛的应用。

随着近年来人们生活水平的不断提高，对食品、药品、保健品等的需求随之增加，对黄酮类化合物的研究受到越来越多的关注。

本文综述了鱼腥草中总黄酮提取工艺的研究进展，旨在为鱼腥草中总黄酮的开发提供理论依据。

1提取方法1.1溶剂提取法溶剂提取法是比较传统的提取法，在国内的鱼腥草中总黄酮提取过程中用的采用最多的为溶剂提取法。

由于渗透作用，溶剂又不断进入药王文权，张雨佳，刘毅，刘军海(陕西理工大学化学与环境科学学院，汉中723000)摘要：鱼腥草在我国分布广泛，总黄酮是其主要的活性成分。

综述了鱼腥草中总黄酮提取工艺的研究进展，讨论了各种提取工艺的优缺点以及目前的研究热点，重点探讨了各种提取工艺的今后的发展趋势。

通过比较一些提取方法的优缺点，目的在于为以后相关研究提供便利。

同时，简述了黄酮类化合物在饲料中的一些应用。

关键词：鱼腥草；总黄酮；提取方法；饲料添加剂中图分类号：S816.7文献标识码：A文章编号：1008-6137（2019）06-0005-04材组织细胞中，多次往返，直到细胞内外溶液浓度达到动态平衡时，将此饱和溶液滤出，再加入新溶剂，可把有效成分溶出。

鱼腥草全草中黄酮的提取和含量测定摘要:以乙醇为溶剂,采用索氏回流法提取鱼腥草全草中的黄酮｡优化了索氏回流法的提取温度､乙醇体积分数､提取时间､固液比等提取条件;索氏回流法的最佳提取条件为提取温度100℃､乙醇体积分数80%､提取时间 4 h､固液比1∶30(m/V,g∶mL,下同),在此条件下,黄酮提取率为12.59%｡采用硝酸铝比色法测定鱼腥草全草中的黄酮含量,结果表明,芦丁浓度在48.75~377.31μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 4);相对标准差RSD为0.21%,加样平均回收率为99.10%,表明该方法重复性良好,结果稳定可靠｡关键词:鱼腥草全草;黄酮;索氏提取法;紫外分光Content Determination of Flavonoid in Whole Plants of Houttuynia cordata Abstract:Taking the whole plant of Houttuynia cordata Thunb. as the raw material, ethanol as solvent extraction, Soxhlet extraction method was used to extract flavonoid. The elements such as extraction temperature, ethanol concentration, extraction time, solid-liquid ratio which affected the yield of flavonoid from whole plants of H. cordata were investigated by orthogonal experiment. Content of flavonoid was determined by Al(NO3)3 colorimetry.The results showed that absorption had good linear relationship with rutin concentration at the range of 48.75~377.31μg/mL(R2=0.999 4). RSD was 0.21%, indicating good repetitiveness. The average recovery rate was 99.10%, it showed that the method was stable and reliable. The optimal conditions were as follows: extraction temperature at 100℃,ethanol concentration of 80%, extraction time 3 h, solid-liquid ratio 1∶30. The yield was 12.59% under these conditions.Key words: Houttuynia cordata Thunb whole plant; flavonoids; soxhlet extraction method; spectrophotometry鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)为三白草科一年生草本植物,始载于《名医别录》,自古以来供食药两用[1],现被国家卫生部正式确定为“既是食品,又是药品”,极具开发价值[2-4]｡紫赤色,易于种植,肥地能蔓生,多生长在湿地山谷阴处｡黄酮类化合物(Flavonoids)是经植物光合作用产生的一大类化合物[5,6],它广泛存在于药用植物､水果和蔬菜中,特别是高等植物的花､叶､根中较多[7]｡黄酮具有广泛的生理活性,如抗氧化､抗癌､防治心脑血管疾病､防治糖尿病､抗菌､抗病毒､抗过敏､祛痰､平喘､抑制消化道疾病､保肝等作用｡植物体内的黄酮的提取主要采用溶剂法､微波法､超声波提取法和超临界流体萃取法等｡科研工作者对黄酮的提取做了大量的工作[8-14]｡黄酮类化合物的提取主要采用热水浸提法,由于黄酮类化p1材料与方法1.1材料与试剂供试材料:鱼腥草全草(于2010年4月中旬采于湖南省永州市零陵区),自然风干备用｡供试试剂:芦丁标准品(中国药品生物制品检定所);无水乙醇､硝酸铝､亚硝酸钠､氢氧化钠等均为国产分析纯｡1.2仪器UV-752紫外分光光度计(上海光谱仪器有限公司),AL104电子天平(Mettler Toledo仪器公司),DF-101S集热恒温磁力搅拌器(郑州长城科工贸有限公司),索式提取器｡1.3鱼腥草中黄酮提取条件的优化取风干后的鱼腥草全草,切碎,放入去离子水中浸泡0.5 h,沸水中煮沸5 min,用清水漂洗数次,洗至沥液接近无色为止,沥干,置烘箱(70℃左右)中烘干,碾碎成粉末状｡准确称取4.0 g经预处理的鱼腥草全草,置于索式提取器的回流管中｡在磁力搅拌器下,以乙醇为溶剂,选择不同提取温度､提取时间､乙醇浓度和固液比为参试因子,以总黄酮的提取量为衡量指标,采用L9(34)正交试验设计表布置试验,以确定鱼腥草中黄酮最佳提取工艺,各因素水平如表1｡所得提取液经过滤,即得到黄酮浸提液｡抽滤,得到黄酮滤液及滤渣｡将滤渣注入到相同体积的､已预冷的甲醇溶液中,静置,得到甲醇-黄酮混合物｡将所得黄酮滤液和甲醇-黄酮混合物进行抽滤,打散滤饼,用95%乙醇溶液洗涤,再抽滤,再打散滤饼,最后用无水乙醇洗涤脱水,得到黄酮提取液｡1.4鱼腥草中黄酮含量的测定1.4.1溶液的制备标准品溶液:取120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品约50 mg,精密称定,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇适量,水浴上微热,使溶解,放冷后用60%乙醇稀释至刻度,摇匀｡样品溶液:准确称取干燥鱼腥草叶粉末4 g,加入120 mL 80%的乙醇溶液,在100℃下回流提取3 h,冷却､过滤,共提取3次,合并滤液并定容至200 mL,得测定用样液｡1 mol/L NaOH溶液:准确称取4.000 0 g NaOH固体,用去离子水溶解定容于100 mL的容量瓶中｡NaNO2溶液(1∶20):准确称取5.000 0 g NaNO2,用去离子水溶解定容于100 mL的容量瓶中｡Al(NO3)3溶液(1∶10):准确称取10.000 0 g Al(NO3)3,用去离子水溶解定容于100 mL的容量瓶中｡1.4.2标准曲线的绘制吸取标准品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0及5.0 mL,分别置于50 mL容量瓶中,各加60%乙醇使其成为5.0 mL｡加入NaNO2溶液(1∶20)0.5 mL,摇匀,放置6 min后;加Al(NO3)3溶液(1∶10)1.5 mL,摇匀,放置6 min;加1.0 mol/L NaOH试液4.0 mL,去离子水稀释至刻度,摇匀,放置15 min｡在510 nm波长下测定各溶液的吸光度｡以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线｡1.4.3样品稳定性试验制备样品溶液,吸取2.0 mL显色剂,比色溶液显色后,每隔5 min测定其吸光度,共测定2 h｡1.4.4重复性试验分别量取5.0 mL样品溶液5份,测定其吸光度,计算平均值,标准差及相对标准差｡1.4.5加样回收率试验准确吸取芦丁标准溶液0.10､0.15､0.20 mL各两份分别于6个25 mL容量瓶中,各加入1.00 mL稀释至一定浓度的测定用样品样液,测定其吸光度,通过标准曲线计算样品中黄酮含量,测定回收率｡1.4.6黄酮提取率的计算1)黄酮提取率计算公式为:黄酮提取率(%)=[C×V×10×10-6/m]×100式中,C——从标准曲线查得的黄酮浓度(μg/mL);V——提取的浓缩液体积(mL);m——样品质量(g);10-6——将μg/mL换算的系数｡2)黄酮含量计算公式为:黄酮含量=C×V×10×10-6式中,C——从标准曲线查得的黄酮浓度(μg/mL);V——提取的浓缩液体积(mL);10-6——将μg/mL换算的系数｡2结果与分析2.1正交试验结果由L9(34)正交试验结果(表2)可知,各单因素对于鱼腥草全草中黄酮提取率的影响次序为A>B>D>C,即提取温度>乙醇体积分数>固液比>提取时间｡因此在该试验条件下,以乙醇为溶剂采用索式回流的方法提取黄酮的最佳条件是:提取温度100℃,乙醇体积分数80%,提取时间4 h,固液比1∶30｡按此条件进行6次验证试验,黄酮的平均提取率为12.59%｡2.2黄酮含量测定方法的确定2.1.1标准曲线的绘制测定溶液的吸光度,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线｡结果表明,芦丁浓度在48.75~377.31 μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为A=0.972 4C+0.011 1,R2=0.999 4(图1)｡2.1.2稳定性试验样品溶液在显色后15~45 min内,吸光度变化小于5%｡此后随着时间的延长,吸光度下降明显,说明该试验显色是稳定的,样品测定应在显色后15~45 min内完成｡2.1.3重复性试验重复性试验结果表明,该测定方法的相对标准差是0.21%,说明该方法的重复性良好｡2.1.4加样回收率试验准确吸取芦丁标准溶液0.10､0.15､0.20 mL各两份分别于6个25 mL容量瓶中, 各加入1.00 mL稀释至一定浓度的测定用样液,测定回收率｡结果见表3｡从结果中得出加样平均回收率为99.10%｡表明该试验方法测定结果稳定可靠｡3小结与讨论同传统提取方法相比,索式回流方法是利用溶剂的回流和虹吸原理｡随着提取温度升高,回流不断的发生,这样大大地缩短了提取时间｡以乙醇为溶剂采用索式回流对液固物质中所需成分进行连续提取,溶剂能反复利用,这样就节约了大量的溶剂｡随着提取时间的缩短,溶剂也相应地减少,萃取出来的样品也相应地提高｡正交试验结果表明,以乙醇为溶剂采用索式回流提取黄酮的最佳工艺条件为:提取温度为100℃,乙醇体积分数为80%,提取时间为4 h,固液比为1∶30｡上述条件下所得黄酮平均提取率为12.59%｡药用植物中黄酮的定量检测常用高效液相色谱法和分光光度法｡对于黄酮单体的定量检测常采用前者,而对于总黄酮的测定,考虑到方法的快速､简便和可行性等,多采用硝酸铝分光光度法｡该试验中,笔者参照相关文献[18]芦丁提取条件,采用硝酸铝比色法[19]在波长510 nm处测定样品溶液的吸光度｡结果表明,芦丁浓度在48.75~377.31 μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(R2=0.999 4);其相对标准差为0.21%,重复性良好;加样平均回收率为99.10%,表明该方法测定结果稳定可靠｡因此,该试验设定的技术参数和方法适用于鱼腥草全草中黄酮的定量分析｡黄酮含量的测定结果表明,鱼腥草全草中含有丰富的黄酮类化合物,且其资源丰富,药理作用广泛,有着良好的开发应用前景｡通过黄酮的提取率和黄酮含量的测定可知,改进的工艺优于常规工艺｡参考文献:[1] 廖德胜,王敬勉.鱼腥草黄酮的制备及其应用研究[J].中国食品添加剂,2002(2):81-83.[2] 吴佩颖,徐莲英,陶建生.鱼腥草的研究进展[J].上海中医药杂志,2006,40(3):62-64.[3] 魏秀俭,郭彦,时明芝,等.绿色食药明球——鱼腥草[J].中国食物与营养,2006(1):56-57.[4] 胡凤莲,倪细炉,刘文哲. 鱼腥草中总黄酮和槲皮素含量的动态变化[J]. 安徽农业科学,2008,36(10):4128-4130.[5] 陈业高.植物化学成分[M].北京:化学工业出版社,2004.[6] 张睿,徐雅琴,时阳.黄酮类化合物提取工艺研究[J].食品与机械,2003(1):21-28.[7] 刘玉芬,夏海涛,杨树平.紫外分光光度法测定剑麻花中总黄酮含量[J].食品科学,2005,26(9):418-422.[8] 胡敏,张艳红,胡艳.银杏黄酮甙的水浸提方法研究[J].食品与发酵工业,1997,24(4):31-34.[9] 丁利君,吴振辉,蔡创海,等. 菊花中黄酮类物质提取方法的研究[J].食品工业科技,2002,23(2):20-22.[10] 王兰珍,马希汉,王妹清,等.元宝枫叶总黄酮提取方法研究[J].西北林学院学报,1997,12(4):64-67.[11] 范志刚,麦军利,杨莉斌,等.微波技术对雪莲中黄酮浸出量影响的研究[J].中国民族医药杂志,2000,6(1):43-44.[12] 何熹,韩宁. 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鱼腥草药理作用研究进展作者：阎红雒江菡于瑞洪等来源：《农业开发与装备》 2017年第6期摘要：鱼腥草为三白草科蕺菜属植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的全草，分布于长江流域以南各省。

鱼腥草主要含有挥发油、黄酮、生物碱、多糖、有机酸类等活性成分，具有抗菌、抗病毒、增强机体免疫力、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、平喘等功效，为鱼腥草药理作用的进一步研究开发奠定基础。

关键词：鱼腥草；药理作用；抗炎1 抗菌作用体外抑菌试验利用溶剂提取法从鱼腥草中提取鱼腥草素，用NCCLS肉汤稀释法测定MIC值；建立小鼠金葡球菌感染模型，观察体内抗菌活性。

结果表明鱼腥草素对大肠杆菌、金葡球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、假丝酵母等均有一定的抑菌效果，其中对金葡菌和白色念珠菌作用最为明显；体内抗菌实验表明对金葡菌有明显抑制作用。

另外，鱼腥草和TMP联合应用对大肠杆菌和沙门氏菌作用明显增强，但其作用机理、产生增强作用的原因、对其它细菌的作用以及在临床上实际情况等，都需进一步验证。

用固体法和液体法对筑产鱼腥草挥发油抑菌作用进行观察，结果表明对金黄色葡萄球菌、八叠球菌有较强抑菌作用，对肺炎球菌、乙型溶血性链球菌有一定抑菌作用，对其他革兰氏阴性菌作用不显著。

近年来，于哲等人通过采用单因素实验和正交实验对鱼腥草内生放线菌培养基的碳源、氮源和发酵条件进行优化并对发酵液抑菌活性物质进行初步研究，得到结果表明发酵液中对金黄色葡萄球菌具有抑菌活性的物质为水溶性抗生素。

2 抗病毒作用1）用鸡胚培养法和微量血凝试验测定了鱼腥草挥发油对流感病毒增殖的抑制作用。

结果表明鱼腥草挥发油对流感病毒有抑制作用，药物质量浓度在31.25mg/ml时即能达到抑制病毒的增殖，浓度在250mg/ml时对鸡胚内流感病毒有4倍的抑制作用。

采用鸡细胞凝血试验方法，测定鱼腥草挥发油乳剂抗流感病毒的作用，采用组织细胞半数感染量法测定鱼腥草挥发油对呼吸道合胞病毒抑制作用。